不同价态无机砷染毒大鼠尿液砷形态代谢产物构成比分析研究

目的 通过不同价态染砷大鼠尿液中砷形态含量及比例的分析,寻找不同价态砷代谢和转轨间的差异,为进一步探讨砷代谢产物与砷中毒作用机制间的关系提供基础数据.方法 70只大鼠被随机分为7组,即对照组;亚砷酸钠高、中、低剂量组;砷酸钠高、中、低剂量组,70只大鼠分别经口摄入去离子水、亚砷酸钠和砷酸钠1个月后,采集各组大鼠尿样.采用高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱法测定各组染砷大鼠尿液中砷形态的含量,并比较不同价态染砷组的构成比.结果 中剂量组,亚砷酸钠染毒大鼠尿液中iAs3+∶iAs5+∶DMA为36.1%∶3.0%∶60.8%;而砷酸钠染毒大鼠尿液中iAs3+∶iAs5+∶DMA为55.9%∶0.8%∶43.4%;两者差异有统计学意义(χ2=8.463,P<0.05).高、低剂量组比较差异无统计学意义.结论 不同价态无机砷的体内代谢和转轨不完全相同.     

亚砷酸钠染毒大鼠肝脏组织砷形态分析前处理方法的研究

目的 探讨亚砷酸钠染毒大鼠脏器组织砷形态代谢产物分析的前处理方法,并建立肝脏砷形态代谢产物的定量分析方法,从而为阐明体内砷代谢和砷毒作用机制间的关系奠定基础.方法 采用快速溶剂萃取(ASE)、超声溶剂提取(SON)和盐酸浸提(HCl)3种不同的前处理方法在亚砷酸钠高、中、低剂量组大鼠肝脏中,提取组织中的砷形态,并分别采用氢化物发生原子荧光光谱法(HGAFS)测定肝脏组织中的砷总量及采用高效液相色谱(HPLC)与氢化物发生原子荧光光谱法(HGAFS)联用技术分析砷形态.结果 快速溶剂萃取法提取大鼠肝脏砷形态提取效率最高,超声溶剂提取效率次之,盐酸浸提法提取效果最差.初步建立了iAs3+、二甲基砷酸(DMA) 2种砷形态的萃取方法及分离分析方法.亚砷酸钠各剂量组DMA的平均加标回收率为98.9%～102.9%.结论 快速溶剂萃取法对于提取染砷大鼠肝脏组织中的砷形态代谢产物效果较好,同时发现脏器组织中的砷主要以DMA形式存在.     

湿法消解氢化物发生-原子荧光光谱法测定尿中砷

目的建立原子荧光光谱法测定尿砷浓度的方法。方法尿样品经混合酸消化后,加入硫脲和抗坏血酸使五价砷预还原为三价砷,再加入硼氢化钠或硼氢化钾还原生成砷化氢,由氩气载入石英原子化器中分解为原子态砷,在砷空心阴极灯发射的光的激发下产生原子荧光,荧光强度可与标准系列比较定量。分析样品的消化、预还原剂浓度、还原剂浓度、酸度等因素对测定的影响。结果砷的浓度在0.0～50.0μg/L内线性关系较好,相关系数为0.999 0～0.999 9;最低检出限为0.068μg/L;相对标准偏差为2.1%～3.1%;加标回收率为92.5%～102.0%。结论湿法消解氢化物发生-原子荧光光谱法测定尿砷具有操作简单、实用、快速、准确、灵敏度高、基体干扰少,便于推广运用,特别适用于大批量人尿砷的测定。     

原子荧光光谱法分析灯盏花中汞和砷的形态

用超声连续浸提法研究灯盏花中汞和砷的形态分布情况,原子荧光光谱法（AFS法）测定元素的总量及相关形态的浓度,并且考查了灯盏花中汞和砷在5种浸提液中溶出率。结果显示：两元素的溶出率变化趋势及形态分布情况相似,石屏产样品的As形态例外（HAc提取态〉HCl提取态）。因此样品中汞及砷最主要的形态仍是不活泼的残渣态（约占60％）;可溶态中以HAc、HCl提取态为主,毒性较大的水溶态及醇溶态含量之和不超过该元素总量10％,结论：该方法准确可靠,可用于汞和砷的形态分析。     

顺序注射氢化物发生-原子荧光光谱法同时测定牛奶砷硒含量

目的 建立顺序注射氢化物发生-原子荧光光谱法测定牛奶中砷和硒含量的方法.方法 利用硝酸-高氯酸(4+1)混合酸消解样品,对仪器工作参数进行了优化,考察了载流酸度、硼氢化钾浓度对荧光强度的影响.在优化条件下,用顺序注射氢化物发生-原子荧光法测定牛奶中砷和硒的含量.结果 砷浓度在0.20～100 mg/L、硒在0.30～1...     

顺序注射HG-AFS法测定乳制品中砷含量

目的建立了一种顺序注射氢化物发生-原子荧光法测定乳制品中砷含量的方法。方法采用混酸消化法处理样品,并对仪器工作参数及氢化物发生条件进行了优化,在优化条件下,用氢化物发生-原子荧光法测定乳制品中痕量砷。结果砷的检出限为0.025μg/L,相对标准偏差（RSD%,n=11）为0.64%,加标回收率为96.5%～104.0%。结论方法具有快速、准确、灵敏度高等优点。用该法测定乳制品中的砷,结果令人满意。     

玻璃输液瓶中砷浸出量的原子荧光光谱法测定

目的：建立氢化物发生-原子荧光光谱法HG-AFS测定药包材中玻璃输液瓶的砷浸出量方法。方法：样品液直接用原子荧光光谱法测定,并对HG-AFS工作参数及条件进行优化和选择。结果：标准曲线线性良好,相关系数r=0.999 4,检出限0.064μg/L,回收率为97.80%,RSD为2.04%。结论：原子荧光光谱法简便、快速准确、灵敏度高。     

氢化物原子荧光光谱法对茶叶中砷含量的不确定度分析

目的进行原子荧光光谱法测定茶叶中砷含量的不确定度评定。方法分析测定茶叶中砷含量的不确定度的来源以及分析方法和实验步骤对测定结果的影响。结果茶叶中砷含量为(0.289±0.0 050)mg/Kg,P=95%,其相对不确定度为0.86%。结论在实际工作中对原子荧光光谱法进行不确定度评定可定量评估测定结果的可信度。     

大鼠尿液中挥发性成分的测定方法

目的建立测定正常大鼠尿液中小分子挥发性物质的分析方法。方法收集正常大鼠24h尿液,采用顶空-气相色谱-离子阱质谱和飞行时间质谱法进行检测,利用质谱谱库检索和准确质量测定鉴定化合物。结果从正常大鼠尿液中鉴定出16个化合物,大多数是酮类物质,其中含量最高的3个化合物为2-庚酮、4-庚酮和2-戊酮。结论所建立的分析方法取材方便、操作简单、重复性好,可用于大鼠尿中挥发性化学成分的分析检测。     

氢化物发生-原子荧光光谱法测定水中砷的研究

<正>氢化物发生-原子荧光光谱法(HG-AFS)以其灵敏度高、选择性好、操作简便快速等优势而被广泛应用于水中砷、汞、硒、铅、镉、锑等可形成挥发性氢化物元素的单独或联合测定[1-5],但多在盐酸介质中进行,而水样中通常加入硝酸作为金属离子的保存剂,二者的介质不一致,因此在硝酸介质中用HG-AFS同时测定水中砷等金属元素是一项有意义的工作。本研究在硝酸介质中用HG-AFS测定水中砷的最佳仪器条件、氢化物发生条件、方法的线性范围及检出限等,并对Ca2+、     

比格犬经口给予雄黄和牛黄解毒片后血浆中砷化学态的研究

建立了比格犬血浆中4种砷化学态[三价无机砷As(Ⅲ)、五价无机砷As(Ⅴ)、一甲基砷(MMA)和二甲基砷(DMA)\]的液相色谱 氢化物发生 原子荧光(HPLC-HG-AFS)测定法,并用于比格犬灌胃给予牛黄解毒片和雄黄后血浆中砷化学态的比较研究。血浆样品经甲醇沉淀蛋白、上清液减压挥干浓缩、残渣以流动相复溶离心后,取上清液,采用Hamilton PRP-X 100阴离子交换色谱柱(250 mm×4.1 mm,10 μm),以15 mmol/L磷酸二氢钾(氢氧化钾溶液调至pH 5.9)为流动相,进行HPLC-HG-AFS分析,4种砷化学态在15 min内得到良好分离。6只比格犬随机双交叉单次经口给予雄黄(以砷元素计,相当于11 mg/kg)和牛黄解毒片(以砷元素计,相当于28 mg/kg),测得血浆中的主要砷化学态均为DMA,并有少量As(Ⅴ),未测得As(Ⅲ)或MMA。比格犬单次给药雄黄和牛黄解毒片后DMA的主要药代动力学参数：c_max分别为(14.7±4.2)和(57.0±32.0)ng/mL,t_max分别为(2.4±0.5)和(2.5±0.5)h,AUC_0-36 h分别为(151±13)和(636±418)ng·h/mL,t_1/2分别为(16.2±7.9)和(9.4±2.2)h。与雄黄相比,给药牛黄解毒片后DMA的c_max和AUC明显增加,而t _1/2显著减小,表明经牛黄解毒片配伍后,DMA的转化增加,而消除加快,说明牛黄解毒片复方配伍对砷的药代动力学行为有影响。     

高效液相法测定加替沙星尿药浓度

目的　建立反相高效液相色谱法以测定大鼠尿液中加替沙星浓度。方法　尿液样品用二氯甲烷提取 ,以环丙沙星为内标 ,色谱柱 :LichrosorbC1 8,流动相 :甲醇 - 0 .0 1mol/L ,磷酸二氢钾缓冲液 - 0 .5mol/L ,四丁基氢氧化铵溶液 (1 5∶75∶1 .4) ,磷酸调 pH至 2 .6 ;流速为 1 .0ml/min ;检测波长 2 98nm。 结果　本法在 3 .1 0～ 1 55 .2 μg/ml范围内线性良好 ,r=0 .9995 ,日内RSD为 5 .1 %～ 9.7% ,日间RSD为 5 .7%～ 1 0 .2 % (n =5) ;尿液最低检测浓度为 50ng/ml。 结论　本法测试快速、准确、重现性好     

大鼠肝胞液糖皮质激素受体的高效液相分析

目的：应用高效液相疏水作用层析法（HPHIC）分离并纯化大鼠肝胞液高、低亲和力糖皮质激素受体（GRH和GRL），为临床大剂量糖皮质激素（GC）冲击治疗提供实验依据。方法：超速离心大鼠肝组织，取上清，核素^3H-地塞米松（Dex）标记后，分别行Pseudoscatchard分析及HPHIC分析，SDS-PAGE及Western印迹法鉴定HPHIC分析后所收集的峰值管蛋白的性质。结果：在标准大气压，0～4℃条件下，只出现一个洗脱峰，峰值位置在9～11min。而在标准大气压，25℃且^3H-Dex≥50nmol/L时出现两个洗脱峰，峰值位置在3～7min及9～11min。SDS-PAGE及Western印迹法显示5～7min和9～11min时出现相对分子质量约60000、可与GC单克隆抗体结合的蛋白质分子。结论：提示有两种不同大小的GR分子存在，但是否存在GRH和GRL尚需进一步的实验证实。     

高效液相色谱法定量检测大肠癌组织中核黄素实验研究

目的 定量测定大肠癌组织和正常组织中核黄素.方法 采集40例大肠癌手术切除的大肠组织,对其中的癌组织和边缘正常组织采用高效液相色谱仪定量检测核黄素含量.结果 正常组织和癌组织中核黄素含量分别为(786±91)ng/g和(609±57)ng/g,癌组织中核黄素含量均低于边缘正常组织含量,P<0.001,差异有显著性.结论 本方法 简便,取样少、灵敏度高、精密度好、结果 准确可靠,可以用于癌组织内核黄素含量的测定,对肿瘤自体荧光机制研究有重要意义.     

活细胞实时成像技术研究抗坏血酸（AA）协同砷剂抗人骨肉瘤MG-63的体外疗效

 目的 研究抗坏血酸(ascorbic acid,AA)和三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)抗人骨肉瘤细胞MG 63的体外疗效。方法 以MG-63细胞为体外模型,用62.5 μmol/L AA与1 μmol/L As2O3单独或联合处理细胞,利用新型连续活细胞图像采集和分析平台(continuous live cell imaging and analysis platform,Cell IQ)实时观察细胞的生长情况和形态学的变化。结果 1 μmol/L As2O3和62.5 μmol/L AA单独处理都可抑制MG-63细胞的生长并诱导细胞死亡。1 μmol/L As2O3和62.5 μmol/L AA联合处理细胞较单独处理组细胞抑制效果更明显。结论 AA和AS2O3抗人骨肉瘤细胞Mg 63可起到协同作用,这一结果为临床治疗骨肉瘤提供了新的思路和实验依据。     

新型荧光试剂柱前衍生高效液相色谱定量分析小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质

目的 采用新合成的荧光试剂柱前衍生氨基酸类神经递质,建立其测定方法,并测定小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质的含量。方法 以1,3,5,7-四甲基-8-苯基-（4′-O-（N-琥珀酰亚胺乙酸酯））-二氟化硼-二吡咯甲烷（TMPAB-OSu）作为柱前荧光衍生试剂,在pH 8.8的硼酸-硼砂缓冲溶液中,30℃衍生反应5 min后获得稳定的荧光衍生产物,在反相色谱柱上,采用梯度洗脱进行5种氨基酸类神经递质标准品衍生物的分离检测,荧光激发波长为497 nm,检测波长为509 nm。结果 5种氨基酸类神经递质的线性范围为0.01~1.2 μmol/L,线性回归系数均大于0.998 1,检出限为1 nmol/L（S/N=3∶1）。小鼠脑脊液中天门冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、γ-氨基丁酸和丙氨酸的含量分别为0.06、0.20、0.26、0.03和0.07 μmol/L,标准加入回收率为96%~104%,RSD为0.7%~2.9%。结论 该方法的灵敏度高、重现性好,为小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质的分析检测提供了一种新方法。     

粘附式细胞仪快速分析细胞膜脂质流动的方法

用荧光探针ＮＢＤ－Ｃ６－ＨＰＣ标记体外培养４８ｈ的小鼠肝细胞，细胞膜磷脂用５７０型粘附式细胞仪激光漂白局部细胞膜，然后测定荧光的重新分布。结果显示，荧光恢复牢为７６／，膜流动性为（１．４９±０．０５７）×１０￣（－9）ｃｍ￣２／ｓ。