CD34抗原表达和P-gp高表达与急性白血病预后的关系

目的探讨急性白血病(AL)CD34抗原表达和P-gp高表达与预后的关系. 方法对30例AL患者的单个核细胞用抗CD34和抗P-gp单克隆抗体标记后,通过流式细胞仪进行检测,其结果与临床的实际疗效作分析. 结果 CD34和P-gp同时高表达的临床疗效差;两者之间比较,P-gp高表达者疗效较差. 结论 CD34和P-gp同时高表达可作为AL预后不良的指标.     

同时检测HIV抗体及p24抗原快速诊断试剂的研制

目的：研制可同时检测HIV－1、HIV－2抗体及p24抗原的胶体金快速诊断试剂。方法：利用重组杆状病毒－昆虫细胞系统进行HIV－1 gp41及HIV－2 gp36抗原的高效表达，以免疫亲和层析法纯化抗原。抗－HIV p24单克隆抗体杂交瘤细胞株，并制备抗－HIV p24单克隆抗体。以硝酸基纤维膜为载体，以纯化的HIV－1 gp41、HIV－2 gp36抗原及抗p24抗体点膜，20nm胶体金颗粒／抗人IgG和抗－HIV p24单克隆抗体进行标记，对33份已知HIV感染者阳性血清及6份阴性血清进行检测。结果：通过重组杆状病毒－昆虫细胞系统进行HIV－1 gp41及HIV－2 gp36抗原的表达，可获取浓度为2．0mg/L的纯化抗原。从抗p24单克隆抗体杂交瘤细胞株中培养上清液，通过葡萄球菌蛋白A免疫亲和层析柱可得到1．5mg/L的纯化抗体。利用纯化的抗原抗体进行标记，对39份已知血清进行检测，与荷兰Organon公司HIV1＋2抗体、p24抗原、ELISA诊断试剂同时检测结果进行比较，证实有较强的特异性及敏感性。结论：同时检测HIV－1、HIV－2抗体及p24抗原快速诊断试剂的问世，可为HIV感染的诊断提供一个简便、可靠、敏感的方法。     

胃癌P-糖蛋白和p53蛋白协同表达的意义

目的：探讨P糖蛋白和p53蛋白在胃癌中的协同表达意义。方法：应用免疫组化方法检测259例术前未进行化疗的胃癌组织中多药耐药基因产物P 糖蛋白的表达。结果：P－gp和p53在胃癌中的表达分别为26．25％（68／259）和37．01％（96／259）。P－gp表达与胃癌的组织学类型、浸润深度和淋巴结转移状况无关（P＞0．05）;p53除与淋巴结转移状况有关外（P＜0．001）,与组织学类型和浸润深度无关（P＞0．05）。P-gp在p53阳性的病例中的表达明显高于p53阴性的病例,即75％P－gp阳性的病人同时伴有p53阳性。结论：P-gp和p53常协同表达于胃癌组织中,并可作为胃癌病人预后判断和临床耐药的一个可靠指标。     

34例急性白血病免疫表型与疗效关系

为提高急性白血病 (AL )疗效和生存期 ,探讨AL免疫表型与疗效关系 ,对 34例AL进行了免疫表型检测 ;采用单克隆抗体 (McAb )和流式细胞仪 (FCM )检测 ;在急性非淋巴细胞白血病中所检测的各种抗原的阳性表达率依次为CD33>CD13>CD11b >CD14,干 /祖细胞分化抗原CD34的表达率为 2 8% ,M3 不表达CD34和HLA DR。CD34+的完全缓解 (CR )率明显低于阴性组 ;免疫表型的检测和研究将有助于指导临床治疗及判断预后。     

胃肠道间质瘤病理及CD117和CD34表达与意义

目的：对本院病案资料中GIST重新分类，加 强对胃肠道间质瘤的认识。方法：用CD117、CD34、α-SMA、S-100等抗 体对56例GIST进行标记、分类，根据GIST的临床病理及形态学特点，正确诊断，并探讨 GIST的临床特点。结果:56例GIST CD117、CD34弥漫强表达，抗体 阳性率分别为CD117（50/56，89.3%）、CD34（37/56，66.1%），部分病例局灶表达α-SM A、S-100，阳性率分别为（17/56，30.4%）、（4/56，7.1%），结蛋白desmin均阴性。其 中良性及交界性29例，恶性27例。本组病例中胃及小肠GIST共达91.1％，其它部位少见。 结论：CD117、CD34在GIST表达显著，可作为GIST诊断的一个辅助指标。 胃和小肠GIST最常见，胃镜等影像学无特异性，诊断主要依靠病理诊断。组织病理不仅有助 于诊断，而且有助于预后的判断。     

急性早幼粒细胞白血病中CD117和CD34共表达的临床意义

目的：研究CD117和CD34在成人急性非淋巴细胞自血病（Acute nonlymphoblastic leukemia，ANLL）M1～M2型和急性早幼粒细胞白血病（Acute promyelocytic leukemia，arE）M3患者中的表达，重点探讨M3患者CD117和CD34共表达（CD117／CD34共表达）的临床意义。方法：将研究病例分为M1～M2和M3二组，采用流式细胞术（Flow cytometery，FCM）随机检测54例M3和63例M1～M2二组初诊患者骨髓单个核细胞（BMMNC）髓系抗原CD117和干（祖）细胞抗原CD34的表达；比较M1～M2和M3二组ANLL患者中CD117、CD34表达的阳性率的差异，以及CD13、CD33和CD117分别与CD34共表达的阳性率差异。结果：CD117在M1～M2组患者中表达的阳性率是71．4／％（45／63），在M3组表达的阳性率为66．7％（36／54），差异无统计学意义（P=0．58）；CD34在M1～M2和M3二组中表达的阳性率分别为66．7％（42／63）和11．1％（6／54），差异有统计学意义（P=0．000）；二组ANLL的CD117／CD34共表达阳性率分别为71．1％（45／63）和7．4％（4／54），其差异有统计学意义（P=0．000）。结论：CD117可作为AL的髓系免疫学标志，但其在ANLL中的表达缺乏系列内阶段特异性。M3患者的CD34表达和CD117／CD34共表达的阳性率低于M1～M2者；CD117／CD34共表达可作为M1～M2和M3鉴别诊断的免疫学分型参考指标。     

鼻咽癌细胞人白细胞DR抗原表达及其与临床病理和预后的关系

为探讨鼻咽癌细胞人白细胞DR（HLA－DR）抗原表达与临床和预后的关系，采用免疫组化ABC方法检测77例鼻咽癌组织中HLA－DR抗原表达情况，并分析了该抗原表达与鼻咽癌临床病理及预后的关系。结果显示44．2％（34例／77例）的鼻咽癌细胞表达HLA－DR抗原，而癌旁非肿瘤上皮细胞中该抗原阴性。HLA－DR抗原表达与鼻咽癌临床分期关系密切。随肿瘤进展，其阳性率呈阶梯状下降，不同临床分期肿瘤间该抗原阳性率差异存在显著性（Pw＜0．05）。随访8年以上的资料分析表明HLA－DR抗原阳性鼻咽癌的预后非常显著地优于该抗原阴性的鼻咽癌（P＜0．01）。以上结果提示HLA－DR检测对于评估鼻咽癌预后有所帮助，支持肿瘤细胞可能产生免疫调节作用的观点。     

DNAM-1在系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞的表达研究

目的：研究DNAM－1在SLE患者外周血T淋巴细胞亚群上的表达，以阐明DNAM－1抗原在SLE患者体内活化作用以及与SLE发病的关系。方法：31例SLE患者和30例健康志愿者外周血单个核细胞，在PHA刺激培养72小时后，三色荧光标记的单克隆抗体染色，利用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群膜表面DNAM－1抗原的表达。同时检测SLE患者抗dsDNA抗体、C3和C4补体，疾病活动性用SLEDAI记分。结果：SLE患者CD4^＋、CD8^＋淋巴细胞上DNAM－1表达率均高于正常对照组（P＜0．01）；活动期SLE组CD4^＋、CD8^＋细胞上DNAM－1表达高于正常对照组和静止期SLE组（P＜0．01），而静止期SLE组与正常对照组无明显性差异（P＞0．05）；SLE患者CD8^＋细胞DNAM－1表达与SLEDAI、抗dsDNA抗体之间呈显著正相关（P＜0．001），与C3和C4补体水平呈明显负相关（P＜0．05），CD4^＋细胞DNAM－1表达与SLEDAI、抗dsDNA抗体、C3和C4补体之间无明显相关性（P＞0．05）。结论：SLE患者内存在T细胞亚群异常活化；活动期SLE患者T淋巴细胞亚群DNA－1表达增高；SLE患者CD8^＋细胞DNAM－1表达异常与SLEDAI、抗dsDNA抗体、C3和C4补体之间有明显相关，CD8^＋细胞活化程度可能与SLE疾病严重程度有关，故DNAM－1可能参与了SLE的免疫发病机理。     

树突状细胞表型抗原在人卵巢癌组织中的表达

目的：观察人卵巢癌中CD1c、S－100阳性细胞数和表达强度的变化，探讨其与卵巢癌发生发展及预后的关系。为卵巢癌的生物治疗提供实验依据。方法：应用ABC免疫组化技术和图像分析法对31例卵巢癌标本进行检测。结果：在卵巢癌中CD1c S－100阳性细胞数与正常卵巢组织比较明显减少（P＜0．01），且其表达强与正常卵巢组织比较明显减弱（P＜0．01）。结论：树突状细胞表型抗原在人卵巢癌组织中的表达总量下降，树突状细胞在抗卵巢癌的免疫反应中起重要作用。     

HIV-2 DNA疫苗免疫小鼠的免疫反应观察

目的：用构建的HIV－2外膜蛋白gp105和核心蛋白gag基因的DNA疫苗免疫小鼠，评价其免疫效果。方法：将HIV－2型gp 105和gag基因克隆到表达载体pIRES1neo中，构建重组DNA疫苗质粒。间接免疫荧光试验证明，构建的DNA疫苗在真核细胞中表达了gp105或／和gag.构建的疫苗免疫小鼠后，用流式细胞仪测定CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞亚类数，并用HIV－2抗体ELISA检测试剂盒检测免疫鼠血清中抗HIV－2抗体水平。结果：构建了3种HIV－2 DNA疫苗pIRES1gag、pIRSE1gp105和pIRES1gag-gp105，转染BHK细胞后均能表达抗原蛋白，免疫小鼠后可有效地刺激淋巴细胞增殖并诱导产生抗HIV－2特异性抗体，其中pIRES1gag-gp105免疫鼠中，淋巴细胞增殖最显著，而pIRES1gp105免疫鼠中HIV－2特异性抗体水平最高。结论：构建的DNA疫苗均能诱导机体产生免疫反应，其中pIRES1gp105诱导的体液免疫应答最显著，而pIRES1gag-gp105 诱导的细胞免疫响应最显著。     

CD117在急性白血病中的表达及临床意义

目的探讨CD117在急性白血病中的表达及其临床意义。方法应用CD45/SSC设门,直接荧光标记法,经流式细胞术对73例急性髓系白血病（AML）和47例急性淋巴细胞白血病（ALL）进行CD117的检测。结果对照组、ALL及AML3组CD117的表达阳性率差异有统计学意义（χ2=41.681,P﹤0.01）。AML组CD117的表达阳性率（58.9%）明显高于对照组（0）及ALL组（8.5%）。CD117/CD34的共表达率ALL组明显低于AML组（4.3%vs45.2%,P﹤0.05）。AML组CD117＋患者的CR率为60.5%,CD117-患者为76.7%,两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）;而CD117＋/CD34＋患者的CR率为54.5%,明显低于CD117-/CD34-患者的CR率（88.2%,P﹤0.05）。结论 CD117可作为辅助诊断AML的髓系标志抗原,CD34＋/CD117＋可作为进一步排除ALL的指标。CD117＋/CD34＋可能是AML中一类预后不良的特殊亚型,可以作为AML预后判断的指标之一。     

急性白血病患者骨髓细胞形态和免疫表型同步检测的比较分析

目的 探讨骨髓细胞免疫表型在急性双表型白血病中的诊断价值以及与骨髓细胞形态学的比对研究.方法 利用流式细胞仪四色免疫荧光直接标记技术对230例急性白血病患者进行细胞免疫表型、骨髓细胞形态学分型检测及分析.采用流式细胞术四色免疫荧光直接标记技术与CD45/SSC设门分析技术检测13例双表型急性白血病患者,根据欧洲白血病免疫分类组(EGIL)积分标准进行免疫学分型.结果 230例急性白血病患者免疫分型诊断结果与骨髓细胞形态学和组织化学诊断具有高符合率,其中免疫分型诊断为急性双表型白血病的13例(5.7％).此外,急性双表型白血病患者高表达CD34胞膜抗原(84.6％),提示预后不良.结论 急性双表型白血病发病率较低,骨髓细胞免疫表型对诊断及鉴别双表型急性白血病极为特异,以髓系和B淋巴系抗原共表达为主.应用骨髓细胞形态学和流式细胞术联合检测急性双表型白血病可以提高诊断的准确性,有效地指导临床制定治疗方案和预后判断.     

P-gp和细胞表面分化抗原在ALL中表达的关系和临床意义

目的探讨初治急性淋巴细胞白血病（ALL）中P-糖蛋白（P-gp）与细胞表面分化抗原表达的关系及意义。方法应用流式细胞术对64例初治ALL患者进行P-gp及免疫表型的检测。结果 P-gp的阳性表达率为45.3%,CD34为59.4%,My＋ALL为31.3%,其中CD13阳性率最高,为20.3%。P-gp与预后呈负相关（P〈0.05）,CD34＋、My＋ALL与CD34-、My-ALL的CR率差异均无统计学意义（P〉0.05）。P-gp＋组中CD34的表达显著高于P-gp-组（P〈0.05）,其他中晚期抗原表达差异无统计学意义。P-gp与CD34协同表达则CR率更低（52.2%vs90.0%）。结论 P-gp的表达在初治ALL患者中具有重要的预后意义。P-gp的过度表达与CD34有关,P-gp＋/CD34＋的ALL属于一种预后不良的临床亚型。     

急性髓系白血病细胞血管细胞黏附分子1、CD34和CD117的表达

背景：血管细胞黏附分子1与白血病浸润密切相关,白血病细胞本身是否表达血管细胞黏附分子1,以及与疾病难治是否相关尚无定论。 目的：分析血管细胞黏附分子1、CD34、CD117在急性髓系白血病细胞表面的表达,3者之间的相互关系及与难治性急性髓系白血病的相关性。 方法：采用流式细胞技术检测16例急性髓系白血病细胞中血管细胞黏附分子1、CD34、CD117的表达,其中难治组6例,非难治组10例;同时以正常骨髓单个核细胞标本作对照。 结果与结论：急性髓系白血病细胞CD34、CD117表达高于对照组(P < 0.05)。难治组急性髓系白血病细胞CD34表达明显高于非难治组(P < 0.05)。难治组与非难治组CD117表达差异无显著性意义(P > 0.05)。急性髓系白血病细胞血管细胞黏附分子1表达与对照组比较差异无显著性意义(P > 0.05)。难治组与非难治组血管细胞黏附分子1表达差异无显著性意义(P > 0.05)。表明急性髓系白血病细胞伴CD34表达,为不良预后指标之一,CD117、血管细胞黏附分子1表达与其是否难治无明显相关性。     

Aberrant phenotypes in childhood and adult acute leukemia and its association with adverse prognostic factors and clinical outcome

Occurrence of aberrant phenotypes in childhood and adult acute leukemia (AL) differs considerably in independent studies and their association with prognostic factors is still controversial. In the present study, 214 patients with AL (106 children and 108 adults) were evaluated for the aberrant expression of CD33 in ALL (B cell and T cell) and CD3, CD5, CD7, and CD19 in AML. In B-ALL, aberrant expression of CD33 was found in 39 and 23% cases of adult and children, respectively. In T-ALL, CD33 was seen in 33% cases of adults while in children CD33 was not observed. In AML, aberrant expression of CD19 was expressed in 52 and 32% while CD7 was expressed in 14 and 15% cases of childhood and adult AML, respectively. Among FAB subtypes, aberrant expression of CD19 and CD7 was more commonly seen in M5 subtype. One adult patient (AML-M5) showed expression of CD3, CD5, and CD19. In summary, aberrant phenotype was commonly seen in adults than childhood B-ALL while in AML, aberrant phenotype was more common in children than adults. CD19 was most commonly expressed antigen followed by CD7 in both childhood and adult AML. Interestingly, aberrant phenotype was not found in childhood T-ALL; however, it was seen in 33% cases of adults. We did not find any association of aberrant phenotype with adverse prognosis factors, CD34 marker, and clinical outcome except the absence of auer rod which was found to be significantly associated with aberrant phenotype of childhood AML (P = 0.01).     

Expression of genes related to multiple drug resistance and apoptosis in acute leukemia: response to induction chemotherapy

Resistance to chemotherapy is a major impediment to the successful treatment of acute leukemia (AL). Expression of genes involved in drug resistance and apoptosis may be responsible for this. This study aimed to investigate the expression of drug resistance (MDR1, MRP1, LRP, BCRP, GSTP1, DHFR) and apoptotic genes (p53, BCL-2, Survivin) in adult acute leukemias and compare them with clinical and hematological findings and response to induction chemotherapy. Eighty-five patients with AL [45 with acute myeloid leukemia (AML) and 40 with acute lymphoblastic leukemia (ALL)] were used as a study group. Real-time PCR results showed that expression level of MDR1 was significantly higher in AML whereas expression of DHFR, BCRP and Survivin was significantly higher in ALL patients. In AML, significant correlation was observed between LRP and MRP1 (r(s)=0.44, p=0.016), LRP and DHFR (r(s)=0.41, p=0.02), MDR1 and BCL-2 (r(s)=0.38, p=0.03). Expression of GSTP1 and LRP correlated with high white blood count (p=0.03 and p=0.03) and BCL-2 with high peripheral blast count (p=0.009). MDR1 expression was significantly associated with the expression of immature stem cell marker CD34 (p=0.002). In ALL, significant association was found between LRP gene and female sex (p<0.0001), LRP and B-ALL patients (p=0.04) and LRP and BCR/ABL positive patients (p=0.004). High expression of MDR1 and BCL-2 in AML and MRP1 gene in ALL was associated with response to induction chemotherapy (p=0.001, p=0.02 and p=0.007 respectively). These results showed the potential clinical relevance of MDR1, MRP1 and BCL-2 in adult patients with acute leukemia in the context of induction chemotherapy.     

CD16+56在急性髓系白血病中的表达及其意义

为探讨CD16 56抗原在急性髓系白血病(AML)中的表达及其临床意义,本文用流式细胞仪检测42例AML患者的骨髓细胞,分析其细胞形态学(FAB)分型、免疫表型和临床特点。结果显示:42例AML患者中CD16 56阳性7例(16.6%),1例部分表达(2.4%),34例没有表达(80.9%)。CD16 56阳性的AML患者中,FAB分型、免疫表型和临床表现各有特点,多见于M2、M5,髓外浸润常见,大多数预后不良。     

成人急性髓性白血病细胞CD表型与预后的关系

分析成人急性髓细胞性白血病(AML)初诊免疫表型与完全缓解(CR)率及缓解期的关系。采用直接免疫荧光标记单克隆抗体(McAb)及流式细胞仪(FCM)检测骨髓白血病细胞免疫表型。显示在AML中各髓系抗原的表达率依次为CD13>CD33>CD45>CD38>CD11b>CD117>CD14;干/祖细胞分化抗原CD34表达率为46%,以M2和M4为最高(63%和66%);M3几乎不表达CD34和HLA-DR;淋系抗原在部分AML中表达阳性;CD117+病例较阴性组具有明显低CR率和短CR期。提示免疫表型的相关研究将提高AML诊断准确性,并将有助于指导AML治疗和判断其预后。