血凝或血凝抑制试验用红血球新固定法

<正> 作者发现使用低浓度戌二醛处理红血球,使之固定后,行冷冻真空干燥,置4℃处保存8个月对血凝素的凝集性和颜色几乎不发生变化,很稳定。对血凝抗原有凝集作用的鸡红血球或贵重的绿猴红血球固定后保存。在病毒的血清学诊断方面甚为有用。方法:取鸡或绿猴红血球用0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)PH7.5反复洗涤3次。配成2%血球PBS 悬液。加入等量0.03%戎二醛溶液,置25℃边搅拌边反应60分钟使之固定。然后用3%蔗糖水溶液洗涤5次,完全去除戊二醛,用10%蔗糖水溶液配成20%悬液。分装小瓶,每瓶0.5ml。冷冻干燥,     

协同凝集反应在细菌性痢疾快速诊断上的应用

本文利用SPA—COA反应,采用增菌基增菌、离心集菌、弃除粪便悬液,对临床怀疑为“菌痢”的病人粪便标本进行快速病源检测,结果与常规细菌培养法基本一致。并对解决反应中细菌量的问题和排除粪便悬液中非特异性凝集的问题进行讨论。     

用免疫测定直接检测粪便标本中大肠杆菌O 157的评价

作者评价了一种快速ELISA直接检测粪便标本中大肠杆菌(E.coli)O 157的效用,并与标准培养法作了比较。 本法用LMD实验室提供的E.coliO157抗原检测试剂盒,按厂家说明进行ELISA。向每份粪便标本加微量稀释洗涤缓冲液,振荡混合制成悬液并使颗粒沉降。取2滴(100μ1)粪便上清液及阳性和阴性对照标本置于微孔中,并将板于室温下(15～25℃)孵育20分钟。将板手工洗涤3次后,加2滴过氧     

用Vero-E6细胞从疫区褐家鼠分离流行性出血热病毒的研究

1981年以来,山西部分农村及城市相继出现流行性出血热(EHF)的流行,褐家鼠是主要传染源。我们用Vero-E6(简称E6)细胞直接从疫区褐家鼠肺组织中分离出可传代的EHF病毒。现将初步鉴定结果报告如下。材料和方法一、褐家鼠肺组织标本:选EHF病毒抗原强阳性鼠肺组织,用10%小牛血清Eagle氏液制成10%肺组织悬液,2000rpm20分钟离心,取上清液为分离病毒材料。     

感染日本血吸虫兔粪便中的抗原物质

花村·阿久沢把感染日本血吸虫兔的粪便抽出液作检材,与抗日本血吸虫兔血清进行凝胶内沉淀反应,证实了抗原物质的存在(久留米医会志,34,886～888,1971)。这次把抗原物质通过凝胶过滤层析,用 Ouchterlony 法研究了各层与抗日本血吸虫兔血清反应,进行了免疫活性分层的探讨。其方法如下:取粪便50克,加入三倍量的磷酸缓冲液(pH7.2)一起将其搅碎,纱布过滤,把滤液以12,000转/分的转速离心30分钟,取上清液作为粪便抽出液。凝胶过滤是用葡聚糖 G—50和 G—200,在1/50M 磷酸缓冲液及水中进     

郑州市医院1990年婴幼儿轮状病毒腹泻分子流行病学分析

<正> 1990年9月—12月、郑州市婴幼儿急性腹泻流行,我们用聚丙烯酰胺电泳(PAGE)法进行了软状病毒分子流行病学调查,现报告如下。材料与方法 1、标本来源:1990年9月—12月30日,从本市儿童医院、四院、河南医学院第一附属医院收集0—4岁婴幼儿急性腹泻粪便标本117份,放-20℃保存备用。 2、标本处理:取粪便0.1g或粪液0.1ml于小塑料管中,加0.4ml醋酸钠(含1％SDS)和酚、氯仿提取,充分混匀后,1000转/分离心5分钟,取上清液再用酚、氯仿提取一次,含双链RNA的上层液     

嵊县流行性出血热血清学分型

流行性出血热病毒包膜上存在一种能引起鹅血球凝集的血凝素,可使鹅血球发生凝集,但若在病毒悬液中加入特异性免疫血清后,则血凝被抑制,且凝集受抑制程度与加入的免疫血清量成正比关系。我们采用提纯的黑线姬鼠血凝素(A)和褐家鼠病毒血凝索(R)(血凝素由浙江省卫生防疫站提供),对我县流行性出血热病人间接免疫荧光试验阳性(1:20以上)的148份血清作血     

人轮状病毒感染的诊断:电泳法、改良的补结试验与电镜法检出轮状病毒的比较

用补体结合试验和醋酸纤维膜对流免疫电泳检查了95份临床标本,并与电镜法相比较。其中,75份为急性胃肠炎病人粪标本,20份为非急性病毒感染儿童的粪标本。以PBS将粪便标本制成10%(w/v)悬液,先以3,000转/分在4℃下离心15分钟除去大颗粒,其上清液再以9,000转/分离心60分钟除去颗粒和细菌,最后以55,000转/分离心60分钟。将沉淀小团悬浮于0.2毫升水中,在显微载玻片上进行单纯补结试验。再将以     

评价化学物质毒性的细菌脱水酶活性试验

本文作者提出用大肠杆菌脱水酶活性试验,衡量化学物质的毒性,并用以对敌百虫进行初步评价。[方法] 试验菌悬液的制备:自培养24小时试验菌的肉汤-蛋白胨琼脂斜面,刮取菌落制成浓生理悬液,于4,000转/分,离心20分钟沉淀菌体,弃上清液,再加自来水或生理溶液离心(4,000转/分)20分钟,反复沈菌体3～4次,最后用生理液配成一定浓度(绿色滤光片,5mm比色皿,光电比色计光密度值应为0.32～0.34)的菌悬液。反应:取清洁干试管,依次加1/15 M Na_2HPO_41.2ml,0.1 M 葡萄糖(水解基质)0.5ml,0.1 MMgSO_40.1ml,0.5%T. T. C 0.2ml,1ml菌悬液,受试毒物加     

甲型肝炎病毒在干燥和保存一个月的粪便中存活情况

为确定甲型肝炎病毒(HAV)在粪便悬液中,于干燥并在25℃和42%相对湿度下保存一个月后,是否仍具有传染性,作者将上述粪便标本溶解后给易感狨猴接种,然后观察其HAV感染情况。HAV接种物系取自1只实验感染的黑猩猩粪便,该动物曾接种1名急性甲型肝炎病人的粪便悬液。于接种后6天采集的猩猩粪便中,用固相放射免疫实验(SPRIA)检测     

鉴定粪便中霍乱弧菌的一种快速试验

本试验的培养基由两部份组成:(1)“A”琼脂培养基:蛋白胨(Bacto)1g,NaCl2g,颗粒状琼脂(BBL)1g,缓冲液(Merck's Buffer Titrisol pH9)100ml;(2)“B”肉汤培养基:蛋白胨(Bacto)1g,NaCl2g,蒸镏水100ml,最终 pH=8.2。由于本试验联合应用琼脂—肉汤培养基,因此简称“A—B”试验,其全份培养基称为“A—B”培养基。本法具体操作如下:用巴斯德长尖吸管,吸取稀释的粪便(水样便作1:1稀释,软便1:10稀释)悬液0.5ml,加入盛有     

乳胶凝集检测技术用于沙门菌快速筛选的研究

目的评价乳胶凝集试剂盒对粪便标本中沙门菌可疑菌落的筛选性能。方法按照WS 271—2007《感染性腹泻诊断标准》的方法,从临床粪便标本中分离出104株可疑菌落,然后分别用沙门菌乳胶凝集试剂盒和三糖铁培养基进行初筛,最后用API 20E细菌鉴定条进行确认,分别从灵敏度及特异性方面对乳胶凝集试剂盒和三糖铁的性能进行评介。结果沙门菌乳胶凝集试剂盒筛查粪便标本分离的可疑菌落,灵敏度达到97.14%;特异度达到97.10%,远优于三糖铁测定的特异度(15.94%)。结论沙门菌乳胶凝集试验具有非常高的灵敏度及特异度,可以筛掉绝大多数的阴性菌落,而且对于目标菌落的识别率很高,是一种非常有效的快速筛选方法,值得推广应用。     

乙型流行性感冒杆菌感染的快速诊断

作为乙型流行性感冒杆菌(Hib)感染的快速诊断,作者应用胶乳凝集反应(LPA)、简化LPA与对流免疫电泳(CIE)三种方法在敏感性、特异性及实用价值等方面作了比较。(1)LPA 10%胶乳悬液1份加1:500稀释的全Hib抗血清80份,使抗体吸附于胶乳上,离心复悬2次,最后配成0.125%悬液     

改变冲洗液温度解除前列腺摘除术后膀胱痉挛的临床观察

目的研究改变冲洗液温度,解除前列腺摘除术后膀胱痉挛的效果。方法对前列腺摘除术后出现膀胱痉挛的50例患者随机分治疗组和对照组,两组患者均在出现膀胱痉挛后,治疗组用25～30℃的灭菌生理盐水冲洗膀胱,对照组皮下注射阿托品0.5mg或肌注曲马多100mg,于10分钟及20分钟分别观察其好转率及治愈率。结果10分钟及20分钟的好转率分别为:治疗组88%,对照组32%;治疗组100%,对照组56%;10分钟及20分钟的治愈率分别为:治疗组84%,对照组8.0%;治疗组96%,对照组48%。治疗组10分钟及20分钟的好转率及治愈率明显高于对照组,两组比较p<0.05。结论膀胱痉挛与膀胱冲洗液的温度有直接的影响,用25～30℃的灭菌生理盐水冲洗膀胱能使膀胱痉挛迅速好转或治愈。     

两种试验方法对3种含氯消毒剂部分消毒性能的评价

目的:了解试验方法对不同含氯消毒剂消毒性能评价的影响。方法:按照1999年版规定的载体浸泡定量杀菌试验和2002年版规定的悬液定量杀菌试验方法,对三种含氯消毒剂杀菌效果进行了比较。用1999年版载体法测定3种含氯消毒剂达到消毒合格所需的剂量均较低,有效氯50mg/L~200mg/L作用2·5min~10min,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭率≥99·90%;有效氯1000mg/L~2000mg/L作用15min~20min,对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭率≥99·90%。结果:按照2002年版规范,悬液法达到消毒合格的剂量均有不同程度的提高,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭对数值≥5·00的消毒合格剂量分别是:洁尔速溶消毒片有效氯200mg/L作用10min,健来牌含氯消毒剂有效氯600mg/L~700mg/L作用5min~10min,众智牌84消毒液有效氯500mg/L作用10min~15min。对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值≥5·00的消毒合格剂量分别是:洁尔速溶消毒片有效氯2000mg/L作用40min,健来牌含氯消毒液有效氯6000mg/L作用60min,众智牌84消毒液有效氯5000mg/L作用30min。结论:用不同方法得到的3种消毒剂有效浓度有差异,杀菌效果有差异,用2002年版悬液定量杀菌试验方法得到的消毒效果较差。     

舌下含化巯甲丙脯酸治疗高血压急诊20例

本文采用舌下含化巯甲丙脯酸(简称巯甲)治疗高血压急诊20例报告如下: 临床资料一、男11例,女9例。34—73岁。19例原发性,1例肾性。18例曾长期服用复方降压片或/和罗布麻片无效,2例未曾接受治疗血压180—242/100—140mmHg。二、治疗方法:用巯甲1片(25mg)置于舌下,给药后常规观察3小时血压、心率:5分钟1次连续4次;10分钟1次连续4次;30分钟1次连续4次。三、观察结果:均在5—10分钟起效,起效     

朝鲜出血热病原因子在人源系细胞中的繁殖

多年来人们企图在原代、传代及双倍体细胞上来分离、传代流行性出血热病毒,均未获得成功。最近French和Lee等报道,他们已将朝鲜出血热病原因于适应到人肺癌A-549传代细胞(一株Ⅱ型肺泡上皮细胞)中。其方法是先用76/118株病毒第四代感染的黑线姬鼠的肺组织悬液,再感染黑线姬鼠后21天杀死,将其混合的肺组织制成10%悬液,然后用此悬液10~(-1)稀释度(用10%胎牛血清E-199液稀释)分别接种18种原代、双     

N-肉桂酰-N-2,3-二甲基羟胺无火焰原子吸收分光光度法测生物样品中微量钒

作者用N-肉桂酰-N-2,3-二甲苯羟胺(CXA)作螯合剂萃取钒,为防止钒与碳管生成难离解的碳化钒,所用碳管涂有一层热解石墨。样品(含钒10～80 ng/ml)经硝酸、高氯酸消化后转入分液漏斗,逐滴加入高锰酸钾(0.02N),直到粉红色能保持5分钟时为止。加入CXA(1 ml)和浓盐酸,使溶液酸度为6 N。振摇三分钟,取下层四氯化碳液20μl进行测定。操作条件:钒共振线318.4 nm、灯电流10     

术尔泰手术用液抑菌性能及稳定性试验观察

目的观察术尔泰手术用液的抑菌性能及其稳定性。方法采用悬液法对其进行抑菌试验和稳定性试验研究。结果浓度为1:2时,作用3分钟对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌平均抑菌率为100.00%;浓度为1:4时,作用5分钟对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌平均抑菌率为99.99%,浓度为1:8时,作用10分钟对金黄色葡萄球菌平均抑菌率为95.22%,该抑菌剂经37℃存放3个月后,将三个试验浓度均提高10%,其对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率均达到或超过存放前相应作用时间的平均抑菌率。结论术尔泰手术用液具有较强的抑菌作用,性能稳定。     

抗甲型肝炎抗原的抗体在世界各地的流行情况

作者对比利时、瑞士、南斯拉夫及塞内加尔等的677个健康人及美国629人的血清以56℃灭活30分钟后,用免疫粘附血球凝集法来检查抗-HA。每份血清滴度等于或高于1/10就认为阳性。同时用放射免疫试验法(AUSAB)来检查抗-HBs。结果:在1297份血清中,776例抗-HA阳性,在阳性血清中有7.1%的滴度≥1: