大鼠红细胞悬浮液阻抗谱Cole-Cole数学模型分析

目的建立大鼠红细胞阻抗谱的两项式Cole-Cole数学模型分析方法及其模型参数,探讨红细胞阻抗谱的β散射和δ散射来源。方法在0.01~100 MHz范围,使用Agilent4294A阻抗分析仪对红细胞悬浮液进行阻抗测量,并利用Cole-Cole方程的非线性数值计算,对Bode图和Nyquist图进行了曲线拟合的残差分析,建立大鼠红细胞Cole-Cole数学模型参数。结果大鼠红细胞阻抗谱的Cole-Cole数学模型参数:高频阻抗极限值R∞=63/Ωcm;第一弛豫阻抗增量ΔR1=59/Ωcm,第一特征频率fC1=2.4 MHz,第一弛豫散射角α1=0.07,第二弛豫阻抗增量ΔR2=48/Ωcm,第二特征频率fC2=370 MHz,第二弛豫散射角α2=0.22。结论两项式Cole-Cole数学模型可以表征大鼠红细胞阻抗频谱的β和δ弛豫行为。β散射由细胞膜的容性响应构成,δ散射来源于细胞内血红蛋白的频率响应。     

多频电阻抗扫描的Cole-Cole模型分析

目的研究适合于多频电阻抗扫描测量数据的分析方法,为深入研究电阻抗扫描技术打下基础。方法根据传统的阻抗形式Cole—Cole模型经验公式,推导出与电阻抗扫描测量结果匹配的导纳形式Cole-Cole公式。依据最小二乘原理,估计导纳形式Cole—Cole模型的各个参数。结果人体实测数据的导纳形式Cole-Cole轨迹图与最小二乘估计圆弧吻合良好。同一电极阵列上的测量数据可以按照电极位置生成导纳形式Cole—Cole模型4个参数的三维分布图。结论导纳形式Cole—Cole轨迹图能清晰地反映不同电极处的传输导纳随激励频率改变而引起的差异。导纳形式Cole—Cole模型的参数分布图,可从不同的物理含义上解释多频电阻抗扫描测量的结果。两者都有助于准确诊断疾病。     

尾吊对大鼠心肌损伤及其机制探讨

目的 研究尾吊对大鼠心肌细胞的损伤作用及其机制.方法 雄性SD大鼠分为5组,采用鼠头低位30°尾吊方法模拟失重不同时间,测定各组动物血清LDH和CK-MB活性和血液儿茶酚胺和糖皮质激素浓度;检测线粒体ATP合成的速率和线粒体膜通透性转换孔(MPTP)开放程度.结果 尾吊2周出现明显的心肌缺血性ST段升高和T波高耸、血清LDH和CK-MB活性升高(P＜0.05).尾吊第2周开始血液中儿茶酚胺和糖皮质激素显著升高(P＜0.05),第3周开始出现心肌线粒体ATP酶合成活力的显著下降(P＜0.05)和线粒体膜通透性转换孔的开启.结论 循环血中儿茶酚胺和糖皮质激素的升高可能是尾吊致心肌损伤的重要内分泌机制,线粒体能量代谢的紊乱是介导心肌细胞损伤的重要细胞内机制.     

小猪血液的多频电阻抗特性及其等效电路模型的研究

目的 研究血液的电阻抗频率特性，构建血液的复电阻抗等效电路模型，为研究腹部慢性出血的无创监测提供一些基础数据。方法 采用英国Solartron公司1260型频响分析仪，四电极测量法，进行了0Hz～20MHz频率内各个阶段的血液组织复电阻抗频率特性离体测量。结果 估算出了特征频率屉的范围，根据实验数据重建了血液的复电阻抗电路模型并得到了串连电路模型的凡，R0，R∞，PCPE，TCPE特征参数值。β弛豫在测量频率1MHz左右开始明显，大于6MHz以后杂散电容效应开始显著。小猪的血液组织的电阻抗特性符合COLE模型的规律，特点是fc值比较大（〉1MHz）。初步分析了血液特征频率fc值比较高的原因。结论 和其他腹部组织相比，小猪血液组织的多频特性特点明显：电阻率值明显小；容性效应在频率相对较高时才出现。对组织的高频测量要减小杂散电容对实验结果的影响。     

尾悬吊大鼠后肢动脉平滑肌细胞钾离子通道活性的改变

目的 观察模拟失重是否可引起大鼠后肢动脉平滑肌细胞钾离子通道功能改变，以阐明模拟失重所致后肢动脉血管收缩反应降低的机理。方法 用离体股动脉血管环制备测定l周及4周模拟失重大鼠股动脉对钾离子通道阻断剂盐酸四乙铵(TEA)和4-氨基吡啶(4-AP)收缩反应的变化。并采用膜片钳全细胞记录方法直接观察隐动脉平滑肌细胞(VSMCs)大电导钙激活钾离子通道(BKCa)和电压依赖性钾离子通道(Kv)电流密度的改变。结果 l周及4周模拟失重大鼠股动脉血管环对60mM KCl的收缩反应下降；对TEA或4-AP的收缩反应与其对60mM KCl收缩反应的比值在模拟失重l周及4周后则均显著升高，但该比值在模拟失重l周与4周组间无显著差异。膜片钳实验结果表明，l周模拟失重大鼠隐动脉VSMCs BKCa电流密度和Kv 电流密度均显著升高。结论 模拟失重大鼠股动脉对KCl的收缩反应降低；而后肢动脉平滑肌细胞BKCa及Kv活性增高，钾离子通道活性的改变可能是导致模拟失重大鼠后肢动脉收缩反应下降的原因之一。     

尾吊、噪声及其复合因素对大鼠免疫功能的影响

目的研究尾吊、噪声以及两种因素复合对大鼠免疫功能的影响。方法大鼠30°尾吊21 d、噪声2h及尾吊(21 d)+噪声(2 h)复合处理后,测定大鼠体重、胸腺重、脾重、白细胞及其分类,流式细胞术、Griess法分别测定T淋巴细胞亚群和血清NO含量。结果与对照组相比,尾吊组与尾吊+噪声复合应激组大鼠体重显著下降(P0.01),外周血白细胞数、中性粒细胞数及其百分比显著增加(P0.01),而淋巴细胞百分比显著下降(P0.05),尾吊+噪声复合应激组大鼠T淋巴细胞数和Th亚群数增加(P0.05),Th/Tc比显著升高(P0.01),各处理组大鼠血清NO含量均显著降低(P0.01)。结论尾吊明显影响大鼠体重、外周血免疫细胞含量和分布以及血清NO含量,噪声对尾吊大鼠淋巴细胞亚群的变化有协同效应。     

强骨抗萎方增强尾吊大鼠承重骨骨矿密度

目的 研究中药复方-强骨抗萎方(QGKWP)对尾吊大鼠骨代谢的影响.方法 21只雄性SD大鼠随机分为对照组(Con),尾吊组(TS)和强骨抗萎方处理组(QGKWP),分别填喂2.5 mL生理盐水或30mg/g中药复方,早晚各1次.每周利用双能X射线吸收测定法检测其骨密度.实验28天后,取血清测定碱性磷酸酶(ALP)、骨碱性磷酸酶(BALP)、骨γ碳氧谷氨酸蛋白(BGLAP)和脱氧吡啶(DPD).同时检测承重骨力学性能、骨干重和骨灰重.免疫组化检测骨Ⅰ型胶原(type Ⅰ collagen),骨钙素(osteocalcin)和骨桥蛋白(osteopontin)含量.结果 与尾吊组相比,强骨抗萎方组股骨、胫骨和腰椎骨密度显著升高,血清ALP和BGLAP表达增加.QGKWP还能明显升高尾吊大鼠股骨Ⅰ型胶原和骨桥蛋白的表达.结论 强骨抗萎方可部分逆转由尾吊引起的失重效应,在对抗骨丢失方面有潜在应用价值.     

尾吊对大鼠比目鱼肌中ERK1/2磷酸化状态的影响

目的观察尾吊模拟失重后大鼠比目鱼肌中ERK1／2磷酸化状态的变化。方法采用尾部悬吊大鼠模拟失重效应,以Western blot技术检测游离的大鼠比目鱼肌中总的ERK1／2含量和其磷酸化状态的变化。结果7d和14d尾吊模拟失重后,大鼠比目鱼肌内总ERK1／2的含量没有发生改变。而ERK1磷酸化状态在7d和14d模拟失重后均显著降低。ERK2的磷酸化状态在尾吊7d后显著下降,而在14d尾吊后其下降程度却未达显著性。结论尾吊模拟失重后可降低大鼠比目鱼肌内ERK1／2的磷酸化状态。     

苯对尾悬吊大鼠血细胞及脂质过氧化的影响

目的:探讨苯吸入染毒对尾吊模拟失重大鼠血液系统、脂质过氧化水平及抗氧化酶的影响.方法:将20只雄性SD大鼠随机分为2组:对照组和染毒组.对照组吸入新鲜空气,染毒组吸入10 mg/m3的苯气体,每天24 h,连续7 d.结果:与对照组相比,染毒组中白细胞(WBC)显著低于对照组(P＜0.05);血红蛋白(HGB)显著低于对照组(P＜0.05);淋巴细胞(LYM)极显著低于对照组(P＜0.01);嗜碱性粒细胞(BAS)显著高于对照组(P＜0.05);T淋巴细胞亚群分类:CD4极显著降低(P＜0.01)、CD8极显著升高(P＜0.01).染毒组中血清超氧化物歧化酶SOD活力极显著低于对照组(P＜0.01);血清谷胱甘肽过氧化酶GSH-PX活力极显著高于对照组(P＜0.01).结论:苯吸入染毒7 d可导致尾吊SD大鼠血液学指标的改变,表现为WBC降低,HGB降低,淋巴细胞(LYM)降低,BAS升高;HGB明显降低,RDW明显升高.脂质过氧化及抗氧化酶指标的改变,表现为SOD活力降低和GSH-PX活力升高.     

抗阻力锻炼对8周尾吊大鼠骨丢失的对抗作用

目的 研究抗阻力锻炼对8周模拟失重大鼠骨丢失的防护效果.方法 40只Wister大鼠随机分为对照组(Con)、尾吊组(HU)、尾吊+站立组(HU+ST)、尾吊+站立抗阻力锻炼组(HU+RE).尾吊时间8周,尾吊期间锻炼组大鼠每周以65%～75%1RM进行抗阻力锻炼5 d,每天4组×12次.尾吊后分别用MicroCT和三...     

人结肠上皮NCM460细胞电阻抗谱的实验研究

目的研究细胞容积比值(cell volume ratio,CVR)对人结肠上皮NCM460细胞电阻抗谱的影响。方法采用Agilent 4294A阻抗分析仪测量了不同浓度NCM460细胞的电阻抗值和相位角,经过幅-频曲线和相-频曲线以及Nyquist图的综合分析,提取NCM460细胞的特征参数,观察细胞容积比值对NCM460细胞电生理性能的影响。结果 1)细胞容积比值对阻抗幅值最大增量(ΔZmax)、相位角峰值(θp)、低频阻抗值(Re ZL)和阻抗虚部峰值(Im Zp)等均有影响,并它们与细胞容积比值之间呈线性相关关系;2)特征频率(fc)与细胞容积比值无关,它来源于细胞膜的界面极化效应,是NCM460细胞对交流电场响应的电阻抗谱标志性参数。结论电阻抗谱方法能够获取NCM460细胞电学特征,为进一步的结肠癌细胞电生理研究提供了观测指标与方法。     

静脉血与末梢血血细胞检测结果分析

目的探讨静脉血与末梢血细胞检测结果的差异性，为临床提供更准确的检验结果。方法对140例健康成人与120例患者采用同时检测末梢血和静脉血细胞，对结果进行比较分析。结果静脉血与末梢血检测血细胞存在明显差异。结论血细胞检测标本的采集不当会给结果带来较大误差。因此在临床对于血细胞的分析要求采集静脉血，才能保证血液分析结果的准确性。     

不同频率电针刺激对大鼠髌腱血流量变化的影响

目的:探讨分析不同频率电针治疗时肌腱血流的变化及其变化机制。方法:将40只Wistar大鼠分为2Hz组、10Hz组、100Hz组和针刺(10Hz)+阿托品组、针刺(10Hz)+酚妥拉明组。手术剥离出大鼠胫骨粗隆上缘的髌腱,利用超声测定技术,观察针刺足三里和梁丘穴前后髌腱血流量的变化。并采用静脉滴入阿托品和酚妥拉明的方法,对针刺作用机制进行分析。结果:(1)2Hz组和10Hz组在针刺过程中,髌骨腱血流量分别下降至针刺前的82.11±10.8%、49.17±11.63%,针刺停止后,两组血流量却逆转为高于针刺前的水平,以10Hz组上升幅度较为明显;(2)100Hz组针刺过程中,血流量下降至针刺前的37.54±12.79%,针刺停止后血流量未恢复到针刺前的水平;(3)针刺(10Hz)+阿托品组:针刺时血流量降低至44.61±12.01%,停针后血流量未出现增加现象;(4)针刺(10Hz)+酚妥拉明组:针刺时血流量增加至119.73±14.66%,针刺停止后血流量继续增加。结论:(1)电针刺激期间髌腱血流下降,刺激停止后血流量明显增加;(2)中、低频率刺激对血流量增加效果优于高频刺激;(3)针刺对血流量的影响与舒血管神经和缩血管神经的调节有关。     

Sprague-Dawley大鼠外周血来源间充质干细胞的动员、分离培养及鉴定

目的:探讨Sprague-Dawley大鼠外周血来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)的动员、分离培养及鉴定方法,分析其表面标记和多向分化潜能,为运动创伤中的细胞治疗和组织工程产品培育提供新来源的、可以微创获得和自体细胞移植的种子细胞。方法:联合动员大鼠外周血MSC,采集腹主动脉外周血4 ml,使用淋巴细胞分离液结合密度梯度离心方法分离外周血单核细胞,体外培养至第3代,于显微镜下观察其形态和生长状态。取第3代MSC,鉴定其表型并向成骨、成脂和成软骨诱导分化,以证明其干细胞的特性。结果:经淋巴分离液结合密度梯度离心方法分离培养的外周血单核细胞,3~5天可见少量长梭形细胞贴壁,7~9天见细胞成簇生长,并形成克隆集落。第3代细胞形态较均一,生长增殖良好;表达典型的MSC标记CD44和CD90,不表达造血干细胞标记CD34和CD45。成骨诱导21天后,茜素红和ALP染色阳性,有矿化结节形成。成脂诱导21天后,油红O染色阳性,细胞内有脂滴形成。细胞微团无血清成软骨诱导21天后,甲苯胺蓝染色阳性,细胞外有蛋白多糖分泌;免疫组织化学染色示,特异性软骨基质II型胶原表达阳性。结论:采用联合药物动员方法能促进干细胞向外周血释放,分离培养的外周血干细胞经鉴定为MSC,体外具备三系分化潜能,有望成为运动创伤中新的细胞治疗和组织工程产品培育的种子细胞来源。     

脐带血清与细胞因子在造血细胞培养中的效应比较

目的：比较人脐带血清（CBS）与细胞因子在骨髓血细胞培养中的效应。方法：在体外人骨骨CFU－GM、CFU－E、BFU－E、CFU－GEMM、CAFC、LTC－IC培养体系中,加入CBS或／和细胞因子,观察所形成的集落。结果：与细胞因子比,CBS中含有较高的GM－CSF、EPO、SCF、IL－3、IL－6等活性,能直接刺激骨髓造血细胞形成。结论：CBS内的造血刺激活性能刺激CFU－GM、CFU－E、BFU－E、CFU－GEMM的生长,使CAFC、LTC－IC、得到明显扩增,具有一定应用前景。     

低温冻存脐血树突状细胞的生物特性研究

目的 考察经低温保存的脐血树突状细胞所表现的生物特性，为树突状细胞的应用提供保存方法。方法 取新鲜脐血细胞和脐血细胞培养产生的树突状细胞，加5％二甲基亚砜－6％羟乙基淀粉的保存剂，－80℃冰箱降温，－196℃保存，40℃复温（前者称“冻存脐血”，后者称“树突状细胞”），再用树状突细胞培养增殖法培养，检测；细胞增殖量，台盼蓝拒染回收率，不染色和染色观察，表面抗原，树状突细胞的混合淋巴细胞刺激指数、抗毒－杀灭效应处理率，比较其变化。结果 形成树突状细胞的时间冻存脐血培养比新鲜脐血迟，细胞增殖量低，冻存脐血台盼蓝拒染为95.8%。冻存树突状细胞形成贴壁树突样细胞比新鲜树突状细胞迟，细胞数增殖量低，冻存树突状细胞的台盼蓝拒染为88.7%。冻存脐血与新鲜脐血比，冻存树突状细胞与新鲜树突状细胞比，其树突样细胞量、CD1a、CD83、HLA-DR表达低；冻存脐血与新鲜脐血比，冻存树突状细胞与新鲜树突状细胞比，刺激指数、效应处理率均低。结论 用5％二甲基亚砜－6％羟乙基淀粉低温保存脐血细胞或经培养增殖的脐血树突状细胞，复温后培养，树突状细胞的生物特性受到了损伤，但仍完整，回收率＞85％。     

脐带血清在骨髓造血祖细胞培养中的效应

目的:探讨人脐带血清(CBS)在骨髓造血祖细胞培养中的效应,为脐血的应用提供实验依据.方法:用人骨髓单个核细胞,分别加入CBS或混合脐带血清(MCBS)和细胞因子,进行造血祖细胞(CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM)培养,观察集落数.结果:10?S能直接刺激骨髓细胞CFU-GM的形成.CBS的刺激活性和骨髓细胞血型相同与否无关.4人份以上的MCBS,刺激产生的CFU-GM显著高于单人份、双人份混合者,活性稳定.在CFU-GM培养时,20%MCBS与100ng/mlGM-CSF、20%马血清具有相同的效果.MCBS可提高CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM常规体系的集落产率.10%MCBS相当于65.6ng/ml GM-CSF、0.23U/ml、0.3U/ml 0.46U/ml Epo对CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM所起的作用.20%MCBS可直接刺激CFU-E形成.如培养体系内无BpA(爆式集落活性)存在时,形成 BFU-E、CFU-GEMM较少或几乎为零,当含BpA时,可形成一定量的BFU-E、CFU-GEMM集落.结论:CBS(MCBS)内含有能刺激CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM的生长活性;同血型或不同血型4人份以上混合,其刺激活性高,且稳定.具有良好的应用前景.