乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响

目的：观察乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响，从而进一步了解乌司他丁抑制炎症反应的作用机制。方法：创伤失血性休克患者60例随机分为对照组（n=30）和乌司他丁组（n=30），乌司他丁组在麻醉诱导后切皮前静注乌司他丁30万U，对照组采用等量生理盐水。于麻醉诱导后切皮前。切皮后2h、4h。术后第1天、第2天、第3天采集动脉血。以流式细胞仪检测TLR4的表达变化。用ELISA试剂盒检测血浆TNF-α和IL-6浓度。结果：两组各时点CD14^＋单核细胞表面TLR4表达以及TNF-α、IL-6均较麻醉诱导后切皮前增加（P〈0．05）；乌司他丁组各指标值均较对照组上升幅度低（P〈0．05）。结论：乌司他丁可有效抑制单核细胞表面TLR4的表达，抑制炎症因子的释放，对创伤失血性休克患者有一定的保护作用。     

乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响

目的:观察乌司他丁对创伤失血性休克患者外周血单核细胞TOLL样受体4表达的影响,从而进一步了解乌司他丁抑制炎症反应的作用机制。方法:创伤失血性休克患者60例随机分为对照组(n=30)和乌司他丁组(n=30),乌司他丁组在麻醉诱导后切皮前静注乌司他丁30万U,对照组采用等量生理盐水。于麻醉诱导后切皮前,切皮后2h、4h,术后第1天、第2天、第3天采集动脉血,以流式细胞仪检测TLR4的表达变化,用ELISA试剂盒检测血浆TNF-α和IL-6浓度。结果:两组各时点CD14+单核细胞表面TLR4表达以及TNF-α、IL-6均较麻醉诱导后切皮前增加(P<0.05);乌司他丁组各指标值均较对照组上升幅度低(P<0.05)。结论:乌司他丁可有效抑制单核细胞表面TLR4的表达,抑制炎症因子的释放,对创伤失血性休克患者有一定的保护作用。     

连续血液净化在感染性休克患者麻醉中的应用

评价连续血液净化在感染性休克患者麻醉中的临床效果.连续血液净化能够维持患者内环境及血流动力学稳定,减少血管活性药物的用量.     

急性肺损伤大鼠肺组织TOLL样受体4及CD14mRNA的表达

目的 探讨内毒素致急性肺损伤大鼠肺组织TOLL样受体4及CD14 mRNA表达的变化.方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为2组:对照组、LPS模型组,每组再分为4 h和8 h两个亚组.尾静脉注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg)建立大鼠急性肺损伤模型.检测大鼠动脉血气、肺体指数,实时荧光定量PCR测定肺组织TOLL样受体4及CD14 mRNA的表达,并观察肺组织病理变化.结果 与对照组相比,模型组4 h和8 h时大鼠肺组织中的TLR4及CD14 mRNA表达均显著增高(P＜0.05或P＜0.01).病理学观察显示,模型组大鼠肺组织出现出血及坏死.结论 内毒素致急性肺损伤的发病机制可能与TLR4及CD14 mRNA的表达升高有关.     

肾功能障碍感染性休克患者应用持续血液净化的治疗效果观察

目的:观察肾功能障碍感染性休克患者应用持续血液净化的治疗效果。方法:资料选取本院2013年7月-2014年7月收治的肾功能障碍感染性休克患者共90例,随机分为研究组与对照组,研究组45例予血液进化治疗,对照组45例予血液透析治疗,观察治疗前后两组肾功能指标、血气分析指标及升压药物使用浓度。结果:研究组血肌酐(113.26±7.34)μmol/L,尿素氮(5.07±0.62)mmol/L,均显著优于对照组,比较差异明显具统计学意义(P0.05),研究组PaO2(91.42±8.56)mmHg,HCO3-(23.85±3.21)mmol/L,均显著优于对照组,比较差异明显具统计学意义(P0.05),研究组升压药使用浓度显著低于对照组,比较差异明显具统计学意义(P0.05)。结论:肾功能障碍感染性休克患者应用持续血液净化的治疗效果显著。     

肾功能障碍感染性休克患者应用持续血液净化的治疗效果观察

目的：观察肾功能障碍感染性休克患者应用持续血液净化的治疗效果。方法：资料选取本院2013年7月－2014年7月收治的肾功能障碍感染性休克患者共90例,随机分为研究组与对照组,研究组45例予血液进化治疗,对照组45例予血液透析治疗,观察治疗前后两组肾功能指标、血气分析指标及升压药物使用浓度。结果：研究组血肌酐（113．26±7．34）μmol／L,尿素氮（5．07±0．62）mmol／L,均显著优于对照组,比较差异明显具统计学意义（P＜0．05）,研究组PaO2（91．42±8．56）mmHg,HCO3－（23．85±3．21）mmol／L,均显著优于对照组,比较差异明显具统计学意义（P＜0．05）,研究组升压药使用浓度显著低于对照组,比较差异明显具统计学意义（P＜0．05）。结论：肾功能障碍感染性休克患者应用持续血液净化的治疗效果显著。     

连续性血液净化对老年感染性休克外周血T淋巴细胞亚群影响观察

目的:探讨连续性血液净化对老年感染性休克外周血T淋巴细胞亚群影响观察.方法:选择2009 年6月至2010 年12 月我院ICU 收住的老年感染性休克患者30 例.全部患者均予以病因治疗,针对病原菌采用积极的抗感染、扩容、纠正酸中毒、使用血管活性药物、机械通气辅助呼吸治疗、液体复苏及营养支持等治疗.同时采用连续性血液净化治疗.采用流式细胞术测定外周静脉血T细胞亚群(CD3+ 、CD4+ 、CD8+).结果:本组研究30 例均完成连续性血液净化治疗,14d 时生存14 例,病死率53.33%,治疗过程中均未发现消化道出血、恶性心律失常、循环不稳定等相关想不良耐受副反应;CBP 治疗后APACHE Ⅱ评分及MODS 评分均明显下降(p<0.05); 血气分析较治疗前稳定,血PH 值、氧合指数、肌酐、尿素氮等指标较前明显改善,差异均有统计学意义(p<0.05;p<0.01);CBP 治疗后外周血T淋巴细胞亚群中CD3+ 和CD4+ 较治疗前明显升高,CD8+ 明显降低,治疗前后比较差异均有显著性(p<0.05).结论:连续性血液净化治疗能够有利于老年感染性休克患者纠正机体免疫功能失衡,改善机体的免疫功能,值得临床推广使用.     

TOLL样受体在新生儿感染性疾病中的表达分析

目的：观察Toll样受体1、2、3、4在新生儿感染性疾病中的表达情况,探讨它们在新生儿抗感染免疫中的作用。方法收集感染性疾病患儿外周血（感染性疾病包含有败血症、细菌性肺炎、脑膜炎、坏死性小肠结肠炎、尿路感染）和爱婴区健康新生儿对照组外周血。采用RT-PCR法测定TLR 1～4 mRNA转录水平（与hGAPDH拷贝数比较）。结果（1）TLR 1、2、4 mRNA在感染组表达明显增加,与对照组比较差异有统计学意义（P﹤0.05）;（2） TLR 3 mRNA在感染组表达较正常对照却明显下调,比较差异有统计学意义（P﹤0.05）。结论与TLR 2、TLR 4一样,TLR 1和TLR 3也参与了新生儿感染性疾病的调控,但具体信号传导途径尚需进一步研究。     

连续肾脏替代疗法血液净化对重症监护室感染性休克患者疗效的影响研究

目的:评价连续肾脏替代疗法血液净化在重症监护室感染性休克患者中的应用效果。方法:收集在重症监护室(ICU)接受治疗的54例感染性休克临床资料,经数字表随机分为两组,每组各27例。对照组接受常规治疗,观察组则在其基础上给予连续肾脏替代疗法血液净化治疗,比较两组患者治疗前后降钙素原(PCT)、动脉血乳酸(LAC)指标水平变化以及病死率。结果:两组治疗前PCT、LAC水平差异无统计学意义(P>0.05),分组治疗后均获改善,且观察组改善效果明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组病死率明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:连续肾脏替代疗法血液净化应用于感染性休克患者的治疗中效果突出,可清除循环中炎性反应介质,改善血流动力学,减少患者死亡率,值得临床推广应用。     

TOLL样受体4的研究进展

TOLL蛋白最早由生物学家1980年研究黑腹果蝇时发现．是一种导致黑蝇的胚胎发育发生变化的突变基因。1997年．美国科学家Medzhitor^［1］首次发现与果蝇蛋白同源的人TOLL蛋白基因和它编码的TOLL样受体蛋白,即如今的TOLL—like—receptor（TLR1-13）,分别命名为TLRS1—13。TLIKS属于模式识别受体,可对病原体相关分子模式（pathogen associate molecular patterns,PAMP5）进行识别,     

结核病患者中性粒细胞表面Toll样受体2和Toll样受体4的表达及意义

目的:检测结核病患者外周血中性粒细胞(PMN)体外感染结核分枝杆菌(M.tb)前后表面Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)的表达,并探讨其意义。方法:采用流式细胞仪检测结核病患者PMN表面TLR2和TLR4的表达,同时检测正常人PMN表面TLR2和TLR4的表达率;再用M.tb感染结核病患者和正常人外周血,检测PMN表面TLR2和TLR4表达情况。结果:结核病患者外周血感染M.tb前PMN表面TLR2和TLR4表达率明显高于正常人(P0.01);结核病患者和正常人外周血在感染M.tb后PMN表面TLR2和TLR4表达率均较感染前明显降低(P0.01)。结论:结核病患者PMN表面TLR2和TLR4的表达和活化有助于机体抵御结核感染,TLR2和TLR4共同参与了宿主对M.tb的免疫应答。     

Toll样受体4与心血管疾病

Toll样受体4(TLR-4)作为人类发现的第一个TLR相关蛋白,是介导脂多糖应答的主要受体,能够识别特定类型微生物的保守分子成分,激活天然免疫以及帮助机体建立获得性免疫。近年来研究发现,TLR-4与心血管疾病的发生、发展密切相关。氧化应激和炎性反应渗透在心血管疾病中心肌与血管的损伤各个环节,而TLR-4在其中发挥着十分重要的作用。     

血必净对内毒素血症大鼠心肌细胞Toll样受体4表达的影响

目的 研究血必净注射液对内毒素血症大鼠心肌细胞Toll样受体4(TLR4)表达的影响,为临床脓毒症休克的治疗提供理论依据.方法 成年Wistar雄性大鼠80只,随机分为模型组、治疗A组、治疗B组和正常组,每组20只.前3组大鼠腹腔注射内毒素(本研究采用大肠杆菌脂多糖)15 mg/kg,正常组腹腔注射等容量0.9%氯化钠溶液.腹腔注射完毕后即刻,模型组皮下注射0.9 %氯化钠溶液10 mL/kg,治疗A组皮下注射血必净5 mL/kg及0.9%氯化钠溶液5 mL/kg,治疗B组皮下注射血必净10 mL/kg.各组大鼠均在皮下注射后即刻、30 min、2 h、6 h分别随机抽取5只留取相应标本并处死.采用免疫组织化学法检测心肌TLR4表达的变化.结果 皮下注射后2及6 h,模型组的心肌TLR4表达较正常组显著升高(P值均<0.05),治疗A组和治疗B组的心肌TLR4表达也较正常组显著升高,但较模型组显著下降(P值均<0.05);治疗B组皮下注射后6 h的心肌TLR4表达显著低于治疗A组(P<0.05).结论 血必净注射液能有效抑制内毒素所致的心肌细胞炎症信号TLR4表达的激活,减轻心肌的炎性反应.     

脂多糖诱导下急性肾功能衰竭小鼠肾脏中TOLL样受体4的表达

目的:探讨TOLL样受体4(TLR4)在脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肾功能衰竭(ARF)肾脏中表达及意义。方法:建立LPS诱导的小鼠ARF模型。应用免疫组织化学SABC法、Western blot及RT-PCR法检测肾组织TLR4蛋白及mRNA的表达变化。TUNEL法检测肾脏的凋亡情况。结果:TLR4在正常组(NG)肾脏中主要分布于肾小管、管周、肾间质区,肾小球系膜区也有表达,而ARF组TLR4在上述区域的表达显著增加,以近端小管、肾间质、远端小管、肾血管等部位较明显,两组光密度值比较有明显差异(P<0.05);TLR4的表达与肾功能的改变呈正相关(r=0.91);与NG组相比,ARF组的TLR4蛋白及mRNA水平的表达显著上调,以造模24 h后最明显;TUNEL法显示凋亡小体主要出现在ARF组肾脏的近端小管及管周围,肾小球无明显变化。结论:TLR4在脂多糖诱导的小鼠ARF肾脏中有较高表达,同时在其肾近端小管及小管周围组织发现较明显的凋亡小体。二者在ARF发病中可能起重要作用。     

动态监测动脉血乳酸对感染性休克患者预后的评价

目的探讨动脉血乳酸动态监测指标与感染性休克患者预后的关系。方法将96例感染性休克伴有动脉血乳酸水平升高(≥2.0 mmol/L)的患者根据是否存活分为死亡组(46例)和存活组(50例),比较两组动脉血乳酸监测指标(动态乳酸水平、乳酸清除率、乳酸持续升高时间)、急性生理和慢性健康状况Ⅱ评分及多脏器功能障碍综合征发生率。结果死亡组入ICU后0、6、24和48 h的动脉血乳酸水平、APACHEⅡ评分、多脏器功能障碍综合征发生率均显著高于存活组(P<0.05),早期目标导向治疗达标率明显低于存活组(P<0.01)。存活组6、24 h乳酸清除率明显高于死亡组(P<0.01),6 h乳酸清除率≥10%时病死率明显降低。多元Logistic回归分析显示24 h动脉血乳酸水平及6 h乳酸清除率是感染性休克患者死亡的独立危险因素。结论动态动脉血乳酸水平、6 h乳酸清除率是评估感染性休克患者预后的良好指标。     

炎症信号受体Toll基因在人肺腺上皮细胞和血管内皮细胞的表达

目的　研究炎症信号受体 Toll m RNA在人单核吞噬细胞系 (THP- 1)、脐静脉血管内皮细胞(UVECs)和肺腺上皮细胞系 (SPC- A- 1)的表达情况。方法　分别设计人 TL R2 和 TL R4两对特异引物 ,从 THP- 1、UVECs和 SPC- A- 1提取总 RNA,采用一步法 RT- PCR和地高辛标记的 Northern杂交技术检测 TL R2 和 TL R4在 3种细胞的表达。结果　 RT- PCR和 Northern杂交显示 ,3种细胞均表达 TL R4受体 ,但仅 THP- 1和人 U VECs表达 TL R2 受体。结论　本实验结果表明除单核吞噬细胞外 ,大血管内皮细胞和肺腺上皮细胞亦表达 Toll受体基因 ,提示在炎症反应中 Toll信号受体可能介导这些细胞效应分子基因转录激活的信号传导。     

特异性shRNA抑制人近端肾小管上皮细胞Toll样受体4的表达

目的:研究RNA干扰法对人近端肾小管上皮细胞(HKC)中Toll样受体4(TLR4)表达的抑制作用。方法:将针对TLR4分子设计的采用体外转录生物合成的特异性短发卡RNA(shRNA)双链分子用脂质体转染的方法导入体外培养的HKC;应用免疫荧光染色在共聚焦显微镜下观察TLR4的分布及表达强弱;半定量RT-PCR和免疫蛋白印迹检测TLR4及内参照-βactin在mRNA水平和蛋白水平的表达量。结果:干扰组TLR4的荧光强度显著低于对照组,其mRNA和蛋白的表达量分别下降了67%和62%。同时观察到TLR4主要分布于HKC细胞的胞膜及胞质区。结论:采用生物体外转录的方法成功合成针对TLR4的shRNA双链分子,并有效地转入HKC细胞中使TLR4的表达下调。     

己酮可可碱预处理对单纯性失血性休克致小鼠急性肺损伤的影响及其机制

目的观察给予己酮可可碱(PTX)预处理对失血性休克致急性肺损伤(ALI)小鼠的影响,初步探讨PTX的作用机制。方法小鼠分为对照组、失血性休克组及PTX组。通过肺组织HE染色观察病理改变,同时检测肺干湿比(W/D)和髓过氧化物酶(MPO)活性。通过ELISA方法检测肺组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-1β变化,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达,通过Western blot检测肺组织TLR4蛋白的变化。结果失血性休克诱导小鼠产生ALI,肺W/D和MPO活性明显增加,TNF-α、IL-1β、TLR4 mRNA和TLR4蛋白表达也增高,与对照组有显著性差异(P0.01)。PTX预处理能减轻失血性休克所致ALI,降低肺W/D和MPO活性,同时导致TNF-α、IL-1β、TLR4 mRNA和TLR4蛋白表达下降。结论 PTX预处理对失血性休克所致ALI起保护作用,可能与通过下调TLR4抑制促炎症因子表达有关。     

连续性血液净化在挤压综合征的应用

挤压综合征(CS)随着天灾的多发、机械时代的到来已成为发病率越来越高的一种危重疾病。随着连续性血液净化(CBP)技术的不断发展,该技术对该疾病治疗的优势也越来越明显。但是,直到现在国内仍没有全面、系统、量化的标准为CS患者行连续性血液治疗。现就CBP对CS治疗的机制、时机、滤器、模式和剂量的选择等问题行简要的综述,希望为CBP在CS的应用提供一些思路。     

Toll样受体9与消化系统疾病的相关研究进展

Toll样受体(TLRs)是广泛表达于哺乳动物细胞的跨膜受体,是机体抵抗外界病原微生物入侵的屏障,也是天然免疫应答与获得免疫应答的桥梁。TLR9为TLRs成员之一,在机体产生炎症和肿瘤时表达明显增加,与炎症的严重程度及肿瘤的恶性程度有一定的相关性。TLR9模式识别外来病原体和机体产生的一些自身物质,进而激活髓系分化蛋白88依赖性信号通路,使机体产生免疫应答而参与炎症和肿瘤的发生、发展。所以,TLR9有可能成为新的治疗靶点以控制炎症和肿瘤的发展。