结核杆菌DNA检测对结核性胸膜炎的诊断价值

目的探讨胸腔积液中结核杆菌DNA（Tb-DNA）检测对结核性胸膜炎的诊断价值。方法采用PCR方法检测68例胸腔积液患者胸水TB-DNA含量,与胸水涂片找抗酸杆菌比较其诊断结核性胸膜炎的敏感性、特异性。结果 Tb-DNA检测与涂片找抗酸杆菌诊断结核性胸膜炎的敏感性为42.5%、0%,特异性为92.9%、100.0%,P〈0.05。结论胸腔积液Tb-DNA检测适用于结核性胸腔积液的早期诊断。     

PCR扩增IS6110用于检测痰液中结核分枝杆菌的评价

为评价ＰＣＲ扩增ＩＳ６１１０检测结核分枝杆菌的特异性，用Ｂａｃｔｅｃ培养法对４５例可疑肺结核病人痰样品进行分枝杆菌检测；用４对分别针对ＩＳ６１１０不同区域引物和一对分枝杆菌属特异的１６ＳｒＲＮＡ基因引物对这４５例痰样品及其培养物和２７株已知分枝杆菌属菌株进行ＰＣＲ扩增检测。结果所有分枝杆菌ＤＮＡ均扩增出了１６ＳｒＲＮＡ基因片段，结核分枝杆菌ＤＮＡ均扩增出了ＩＳ６１１０的４个不同区域片段，非典型分枝杆菌ＤＮＡ均未扩增出ＩＳ６１１０片段，但存在假阳性和假阴性     

结核杆菌蛋白芯片检测对肺结核的诊断价值

目的 评价结核杆菌蛋白芯片检测技术对肺结核诊断的价值.方法 采用结核杆菌蛋白芯片检测200例肺结核病患者和100例健康人群血清标本,应用概率论对检测真实性和可靠性做出评价.结果 结核蛋白芯片检测灵敏度为75.5％,特异度为98％,误诊率为2％,漏诊率为24％,准确率为83％,阳性预期值为98.7％,阴性预期值为66.6％,尤登指数为0.735.结论 结核杆菌蛋白芯片检测方法简便、快捷、经济,实用性好,不受人为因素干扰,是结核病辅助诊断的好方法,值得推广.     

RD1、RD2区域抗原多肽对结核病诊断的价值

选取68例活动性肺结核病患者、54例潜伏性结核感染患者和68例健康对照组的血清,检测RD1、RD2区域抗原多肽。RD1、RD2区域抗原多肽检测阳性共48例,总体阳性率为70.59%,敏感度为70.59%(48/68),肺外结核组为45.45%(10/22)。初治组敏感度为43.90%(18/41),复治组为44.44%(12/27)(P>0.05)。随治疗时间的延长,RD1、RD2区域抗原多肽检测阳性率呈递减趋势。应用RD1、RD2区域抗原多肽在诊断感染结核病方面具有中等敏感度、极高特异度及阳性预测值,与结核病的其他诊断方法联用可以提高诊断的准确性。     

内镜下活组织结核杆菌检测对回盲部良性溃疡的诊断价值

回盲部溃疡性病变在内镜下检出率呈增高趋势,此处最难鉴别的疾病是肠结核和克罗恩病。临床表现及影像学诊断对这两种疾病均不具有特异性,即使根据内镜下表现和活检病理也很难将两者区分开来。我们通过内镜下活组织结核杆菌检测进行前瞻性研究,旨在探讨此类疾病正确诊断的方法,以期提高诊断的准确率。1资料与方法1．1病例选择2007年1月至2008年12月在河北省人民医院行结肠镜检查的患者3783例,共检出回盲部溃疡51例,其中恶性病变24例,非恶性溃疡27例。将非恶性溃疡27例作为本研究对象,男16例,女11例,年龄13～69岁,平均（38．6±22．5）岁。患者主要临床表现为腹痛,常以右下腹和脐周为主,     

评价血清中结核杆菌特异性蛋白抗体对诊断肺结核的应用价值

目的 评价结核分枝杆菌特异性蛋白抗体检测对肺结核诊断的应用价值.方法 对370例活动性肺结核患者、42例非结核性肺部疾病患者和30例健康献血员进行血清结核分枝杆菌特异性蛋白抗体检测,同时对全部肺结核和非结核性肺部疾病患者进行痰抗酸杆菌涂片和培养.结果 370例临床诊断的活动性肺结核患者,结核分枝杆菌特异性蛋白抗体检测阳性284例,阳性率76.8％;42例菲结核性肺部疾病患者,假阳性4例,假阳性率9.5％;30例健康献血员对照组,假阳性1例,假阳性率3.3％.检测菌阳肺结核的敏感性为81.4％,,菌阴肺结核的敏感性为72.9％;阳性检出率76.8％远高于细菌学的阳性检出率45.1％,x2=77.72,P＜0.05,具有统计学意义.结论 结核分枝杆菌特异性蛋白抗体检测对肺结核的诊断具有较好的敏感性和特异性.     

三种结核蛋白抗体联合检测在老年早期结核病诊断中的价值研究

选取2012年3月~2014年6月我中心确诊治疗的老年早期结核病患者64例作为结核组,同期选取中心体检健康人员20例作为健康组,所有受试者应用蛋白芯片法检测结核分枝杆菌LAM、16KDa和38Kda抗体,统计分析所有受试者三种结核蛋白抗体表达情况,并分析三种结核蛋白抗体及其联合检测对老年早期结核病的诊断价值。结核组患者LAM、16KDa和38KDa抗体表达阳性率明显高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05);在诊断敏感度、特异度、准确度方面,三种抗体联合检测>单独LAM>单独38KDa检测>单独16KDa检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结核分枝杆菌LAM、16KDa和38KDa抗体均可作为诊断老年早期结核病的重要参考指标,且三种抗体联合检测诊断具有更高的敏感度、特异度、准确度,值得临床作进一步推广。     

不典型溃疡型肠结核与Crohn病的鉴别诊断

近年结核发病率有上升趋势,缺乏特异性临床表现的肠结核亦相应增多,易误诊。我院2006年1月～2009年1月收治不典型溃疡型肠结核8例,病初均误诊为Crohn病,现报告如下。     

环介导等温扩增技术快速检测结核分枝杆菌核酸

摘要:目的：建立一种快速准确的检测结核分枝杆菌（MTB）核酸的环介导等温扩增（LAMP）方法。 方法：以重复插入序列IS6110为目的基因,设计LAMP引物,特异检测MTB核酸。用本法与痰涂片抗酸染色镜检法、实时荧光PCR法对100例可疑患者痰标本进行对比检查。 结果：LAMP法特异性强,仅扩增MTB复合群核酸;灵敏度高,检测限达100 fg;而实时荧光PCR检测限为1 pg。对100例疑似结核病患者痰液标本检测,涂片抗酸染色法、LAMP法、实时荧光PCR法的阳性率分别为28%、39%和38%。 结论：本研究建立的LAMP方法检测MTB核酸特异性强、灵敏度高、时间短且操作简便,有望成为临床快速检测MTB的新方法。     

血清结核杆菌抗体胶体金法的应用价值

目的探讨结核分枝杆菌血清快速检测方法的灵敏度、特异性以及其对结核病的临床诊断及疗效的价值。方法对776例结核病及疑似结核患者的呼吸道和体液标本用涂片法、聚合酶链反应(PCR)荧光定量法和胶体金法同时进行检测,比较3种检测方法的灵敏度及特异性。结果 3种检测方法的灵敏度及特异性分别是:涂片法27.3%和100.0%,胶体金法52.3%和88.5%,PCR-荧光法65.9%和100.0%。结论血清结核分枝杆菌抗体胶体金法具有显著优势,特异性、灵敏度均较高,且操作简便、快速,实验室要求不高,便于推广,对临床诊断结核病和评价结核病患者疗效具有较高的实用性,也是一种较为理想的实验室检测方法。     

荧光定量聚合酶链反应检测在肺结核诊断中的应用价值

目的分析荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(TbDNA)在诊断肺结核中的应用价值。方法选择2018年1月-2020年1月湖南省儿童医院收治的21例肺结核患儿作为肺结核组,另外选择同时期21例排除肺结核感染的肺部疾病患儿作为非肺结核组。全部患儿均行痰涂片抗酸染色镜检、纤维支气管镜(纤支镜)痰涂片抗酸染色镜检和BALF中TbDNA荧光定量PCR检测。比较3种检测方法对肺结核诊断的特异度、敏感度、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)。结果痰涂片抗酸染色镜检、纤支镜痰涂片抗酸染色镜检和荧光定量PCR的敏感度分别为19.05%、14.29%、76.19%,特异度分别为100.00%、100.00%、95.24%,PPV分别为100.00%、100.00%、94.12%,NPV分别为55.26%、53.85%、80.00%。荧光定量PCR检测BALF中TbDNA的敏感度明显高于痰涂片抗酸染色镜检和纤支镜痰涂片抗酸染色镜检(76.19%比19.05%、14.29%),差异有统计学意义(P<0.05);3种检测方法的特异度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过荧光定量PCR检测BALF中的TbDNA,具有快速、敏感度高、特异度高的特点,利于早期诊断肺结核,尤其是对于痰涂片检测呈阴性及无典型影像学特征的患儿,可以明显提高确诊率,其结果能够作为诊断肺结核的主要指标。     

新型二聚体蝎型探针技术在结核分枝杆菌荧光定量聚合酶链反应中的应用

目的利用二聚体蝎型荧光探针技术，建立一种敏感特异、快速价廉且能广泛应用的结核分枝杆菌DNA荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测方法。方法构建重组质粒pMD18-T-senX3-regX3 IR作为标准品，自行设计二聚体蝎型探针，优化定量PCR体系，并进行方法学评价及初步临床应用。结果（1）成功构建了重组质粒pMD18-T-senX3-regX3IR。（2）建立了利用二聚体蝎型荧光探针的荧光定量PCR方法，其线性范围：10^1～10^7拷贝／μ1；灵敏度：10^1拷贝／μ1；重复性：批内变异系数（CV）为2．35％，批间CV为3．17％，日间CV为4．06％；特异性100％；（3）初步临床应用证明：该方法比商品化Taqman方法阳性检出率更高，检测时间更短和成本也明显降低。结论本研究首次建立了以二聚体蝎型荧光探针技术为平台的结核分枝杆菌荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法，这为应用二聚体蝎型荧光探针技术开辟检测结核分枝杆菌的分子诊断新途径奠定了一定的基础。     

实时荧光定量聚合酶链反应技术在结核性脑膜炎中的诊断价值

目的 用涂片、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测结核分枝杆菌,探讨其临床应用价值.方法 对临床确诊的结核性脑膜炎(n =110)、可疑结核性脑膜炎(n=205)和非结核性脑膜炎(n=100)患者的脑脊液标本分别采用涂片、RT-PCR两种方法进行检测,对结果进行对比分析.结果 415例脑脊液标本中,脑脊液涂片检查阳性率为2.4％(10/415),PCR检测阳性率为12.5％(52/415);脑脊液涂片、PCR法检测110例临床确诊的结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为6.4％(7/110)、26.4％(29/110);检测205例临床可疑结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为1.5％(3/205)、11.2％(23/205).比较两种方法的阳性检测率,差异有统计学意义(P＜0.05),检测100例非结核患者脑脊液标本,涂片及PCR检测均为阴性.结论 RT-PCR法检测脑脊液中TB-DNA对结核性脑膜炎的诊断有决定意义,具有较高临床应用价值.     

实时荧光定量PCR法检测鼻咽癌患者血浆游离EB病毒DNA的临床应用

目的 了解本地区鼻咽癌（NPC）患者血浆游离EB病毒DNA（EBV—DNA）的检出状况,探讨其诊断价值和临床意义。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术对110例鼻咽癌患者和91例其他恶性肿瘤患者（对照组）进行血浆EBV～DNA检测。结果 NPC患者EBV-DNA阳性率为56．4％（62／110）,对照组阳性率为8．8％（8／91）,经Х^2检验,Х^2=32．36,P〈0．01。男性NPC患者外周血浆EBV-DNA的阳性率为64.4％（47／73）,女性患者阳性率为40．5％（15／37）,经Х^2检验,二者差异有统计学意义（Х^2=5．67,P〈0.05）。62例血浆EBV-DNA阳性的NPC患者的拷贝数与8例血浆EBV—DNA阳性的其他恶性肿瘤患者的拷贝数比较,差异无统计学意义（经Wilcoxon非参数秩和检验,uc=1．57,P〉0．05）。结论 FQ-PCR检测血浆EBV-DNA对NPC辅助诊断有很高的临床实用价值,男性NPC患者对EBV的免疫力低于女性,更易受侵,其原因与机制有待进一步研究。     

实时荧光聚合酶链反应检测支气管肺泡灌洗液结核分枝杆菌DNA诊断肺结核价值

目的探讨实时荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)检测支气管肺泡灌洗液结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(TBDNA)诊断肺结核的临床价值。方法选取我院收治的115例肺结核患者作为研究对象,所有患者均进行支气管肺泡灌洗液TB-DNA检测、血清结核分枝杆菌特异性抗原(TB-SA)抗体检测、痰涂片抗酸染色镜检等。结果支气管肺泡灌洗液TB-DNA检测、血清TB-SA抗体检测、痰涂片抗酸染色镜检诊断肺结核的敏感度分别为65.2%(75/115)、50.4%(58/115)、20.9%(24/115)。支气管肺泡灌洗液检测TB-DNA诊断肺结核的敏感度显著高于血清TBSA抗体、痰涂片抗酸染色镜检(均P0.05)。结论采用FQ-PCR检测支气管肺泡灌洗液TB-DNA诊断肺结核具有较高的敏感度。     

荧光定量聚合酶链反应检测细胞角蛋白19在乳腺癌诊疗中的应用

目的　探讨荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)技术检测细胞角蛋白 19(CK19)基因表达在乳腺癌诊疗中的应用价值。方法　采用FQ PCR法 ,以甘油醛 3 磷酸脱氢酶 (GAPDH)为内对照 ,测定 15名健康女性体检者、2 5例良性乳腺疾病和 76例乳腺癌患者外周血中CK19的表达量。结果　CK19和CK19/GAPDH在正常对照组和良性乳腺疾病组间的差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,而乳腺癌组则显著高于前两组 (P <0 0 5 ) ,GAPDH在三组间的差异均无显著意义 (P >0 0 5 )。乳腺癌组的CK19和CK19/GAPDH阳性率为 5 3 9% (41/ 76 ) ,而另两组均为阴性。 2 7例乳腺癌患者术前 ,化疗后 1、2 8和5 6dCK19和CK19/GAPDH均呈下降趋势 ,但化疗后 1和 2 8d与术前比较 ,差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,化疗后 5 6d则显著低于术前 (P <0 0 5 )。结论　FQ PCR技术是较灵敏和特异的快速定量检测CK19方法 ,可用于乳腺癌的诊断和疗效监测。     

PCR检测技术在结核病诊断中的价值

用ＰＣＲ技术对１７５例临床可疑结核病，但常规培养或抗酸染色阴性的病理标本中结核菌ＤＮＡ进行了检测。结果发现有２２．３％（３９／１７５）的样本结核菌ＤＮＡ阳性。结果提示，ＰＣＲ技术在检测结核菌ＤＮＡ中具有简便、快速和灵敏的特点，其阳性结果说明被测样品中有结核菌的存在，对结核病的确诊有重要辅助意义。