肝癌和癌旁组织中乙型肝炎表面抗原及丙型肝炎抗原表达与肝纤维化标志物的相关性

目的研究肝癌组织、癌旁组织中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎抗原表达与血清肝纤维化标志物的相关性。方法采用免疫组织化学法对肝癌组织及癌旁组织中的HBsAg、丙型肝炎抗原表达进行了标记和分析,同时检测其血清肝纤维化标志物水平,并研究它们的相关性。结果肝癌血清肝纤维化标志物水平在乙型、丙型肝炎病毒混合感染组中最高,单独乙型、丙型肝炎病毒感染组次之,无病毒感染组最低,肝癌组织、癌旁组织中HBsAg、丙型肝炎抗原表达与透明质酸、层黏连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白呈正相关,相关系数分别为0.60、0.45、0.46,P值均<0.01。结论肝癌遵循慢性病毒性肝炎、肝硬化、肝癌的发展趋势,有病毒感染的肝癌组织,其血清肝纤维化水平明显高于无病毒感染者。一方面病毒的感染是肝癌发生的原因,另一方面长期的病毒血症会加重肝脏组织病变,所以病毒性肝炎的抗病毒干预治疗对肝癌的预后有着积极的意义。     

肝癌组织、癌旁组织中HBsAg、HCV抗原表达与T细胞亚群及NK活性的相关性研究

研究肝癌组织、癌旁组织中HBsAg、HCV抗原表达与T细胞亚群及NK活性的相关性。采用免疫组织化学方法(SP法)对肝癌组织及癌旁组织中的HBsAg、HCV抗原表达进行了标记和分析,同时对外周血T细胞亚群及 NK活性进行检测。肝癌患者中,CD4 细胞减少,CD8 细胞升高,CD4 ／CD8 比值及NK细胞的活性均比正常对照组明显降低,且HBsAg阳性、HCV抗原阳性者比阴性者下降更显著。肝癌组织、癌旁组织中HBsAg、HCV抗原表达与外周血T细胞亚群及NK活性Spearman相关性分析,与NK细胞、CD4 细胞、CD8 细胞、CD4 ／CD8 相关系数分别为-0．67,-0．28,0．35,-0．50(P<0．001)。肝癌患者出现免疫紊乱与乙肝、丙肝病毒感染有关,且混合感染者免疫功能紊乱较显著,提示抗病毒治疗可能改善肝癌患者的免疫功能。     

肝炎患者肝组织中丙型肝炎病毒抗原的表达及其临床意义

应用抗-HCV NS4单克隆抗体(McAb)以酶标链酶亲和素生物素化二抗方法(LAB法)，对77例肝炎患者肝穿刺标本进行免疫组织化学研究。结果表明，HCV—Ag(NS4)呈细小颗粒状位于肝细胞浆中。急慢性肝炎肝组织中HCV-Ag阳性肝细胞数较少，呈散在分布．易见于汇管区周围;慢性重症肝炎肝内HCV—Ag阳性肝细胞数较多，提示HCV可能与慢性肝炎病情加重有关。15例血清抗HCV阳性和HCV RNA阳性患者中，12例肝HCV—Ag阳性．11例血清抗-HCV阳性和HCV RNA阴性患者中，3例肝HCV—Ag阳性，提示肝HCV—Ag(NS4)的表达与血清HCV RNA水平关系较为密切。HCV可能主要通过免疫机制引起肝细胞损伤。     

HCV RNA及其编码蛋白在肝癌和癌旁肝组织中的表达

本文采用光敏生物素标记的ＨＣＶｃＤＮＡ探针和免疫金银显色法对４２例肝癌和癌旁肝组织中的ＨＣＶＲＮＡ和ＨＣＡｇ进行了检测，发现ＨＣＶＲＮＡ可以感染肝癌细胞，其分布状态及其抗原表达亦与肝组织一致。这些阳性细胞在组织中的感染状态多呈区域性，在此区域又可呈片状、簇状或散在分布。     

肝病患者肝组织HCV抗原的检测及意义

目的 探讨肝病患者肝组织丙型肝炎病毒（HCV）抗原的表达及意义。方法 应用免疫组织化学方法对252例肝病患者石蜡包埋肝组织中HVC抗原进行了检测。结果 多克隆抗HCV检出HcAg阳性25例（9．92％）,单克隆抗HCV-NS3检出HCV—NS3蛋白阳性19例（7．54％）。19例HCV—NS3阳性肝组织均同时表现HcAg阳性,二者在肝细胞分布状况相似,不同病理类型肝炎患者肝组织中HCV抗原检出率无统计学意义。252例血清检出HCV标志物阳性71例,单独抗HCV阳性者无1例肝组织中检出抗原。结论 肝组织中抗原的检出和血清HCV标志具有良好对应性,但不同血清HCV标志模式抗原检出率有统计学意义。     

原发性肝细胞癌及癌旁组织中环氧合酶-2的表达及其意义

目的：研究人原发性肝细胞癌（HCC）组织和癌旁非瘤组织中的环氧合酶－2（COX－2）蛋白及基因表达情况,方法：采用免疫组织化法和原位分子杂交法,研究27对原发性肝细胞癌及癌旁非肿瘤组织,5例正常肝组织中COX－2的蛋白和基因表达,结果：高分化HCC中COX－2蛋白表达显著高于中分化和低分化HCC（P分别＜0．05）以及癌旁组织和正常组织（P分别＜0．01）,癌旁组织的COX－2表达显著高于正常组织（P＜0．05）,癌旁组织,中分化和低分化HCC之间COX－2的表达强度差异无显著性（P＞0．05）,在COX－2蛋白阳性的肝癌细胞和癌旁肝细胞胸胞胞质中可见到COX－2mRNA呈阳性表达,结论：COX－2的过度表达可能参与了高分子HCC的致癌过程。     

肝组织中丙型肝炎病毒抗原的表达及其临床意义

目的研究肝炎患者肝组织中丙型肝炎病毒抗原的表达及其临床意义。     

肝细胞癌患者肝组织中丙型肝炎病毒抗原的定位研究

用过氧化物酶与抗过氧化物酶（ＰＡＰ）法检测了７３例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝组织中的丙型肝炎病毒抗原（ＨＣＶＡｇ）和ＨＢｓＡｇ及ＨＢｃＡｇ。结果显示：ＨＣＶＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的检出率分别为２８．８％，７５．３％和２６．０％，ＨＣＶＡｇ阳性的肝细胞多呈散在分布，ＨＣＶ染色颗粒既可见于细胞浆也可见于细胞核，ＨＣＶＡｇ的检出与ＨＢＶ的感染态多显著相关，提示，ＨＣＶ可在ＨＣＣ患者的肝细胞中表达，Ｈ     

慢性乙型肝炎患者肝组织HBsAg、HBcAg表达及临床意义

目的：探讨慢性乙型肝炎患者肝组织中HBsAg、HBcAg表达与血清乙肝病毒载量及肝组织损伤程度之间的关系。方法：对90例慢性乙型肝炎患者进行肝组织活检，进行病理诊断及乙肝病毒HBsAg、HBcAg免疫组化染色．同时荧光定量检测血清HBVDNA含量，并分析其相关性。结果：血清HBVDNA定量、肝组织炎症程度及纤维化程度与肝组织HBsAg表达强度无相关性，而与肝组织HBcAg表达强度有明显的关联性；血清HBVDNA定量与肝组织炎症程度及纤维化间无明显的相关性。结论：在慢性乙型肝炎的免疫损伤过程中，HBcAg是靶抗原，血清HBV DNA结合肝组织病毒抗原的表达可作为抗病毒治疗的指标。     

乙型肝炎相关性肝细胞癌HBV复制及其癌组织中HBsAg/HBcAg表达的研究

目的 以慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者为对照,观察乙型肝炎相关性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者血清中HBV DNA水平的变化,以及HCC组织中HBsAg/HBcAg的表达情况,探讨HBV导致HCC的可能机制.方法 HCC组89例,CHB组120例.采用实时定量PCR法检测血清HBV DNA水平;分别留取肝脏穿刺组织标本(HCC组织均带有癌旁肝硬化组织),用免疫组化法检测组织中HBsAg/HBcAg的表达情况.结果 HCC组血清HBV DNA水平明显低于CHB组(P＜0.05);在CHB组织、癌旁肝硬化组织和HCC     

乙型肝炎患者胃粘膜中HBsAg表达分析

目的探讨乙型肝炎病毒的泛嗜性.方法采用免疫组化SP法,对45例随机采样的乙型肝炎患者行胃粘膜活检,作HBsAg检测;采用ELISA法检测静脉血HBV.结果乙型肝炎患者胃粘膜中有HBsAg存在,主要呈弥漫胞浆型分布,腺腔和胃小凹及间质中也可见HBsAg颗粒;血清中HBV单项或多项阳性者,胃粘膜HBsAg阳性率相近(75～80%);各类型乙型肝炎患者胃粘膜HBsAg阳性率比较CAH＞CPH＞HLC,但彼此之间差异不显著(P＞0.005).结论乙肝患者胃粘膜中有HBsAg存在.     

慢性乙型肝炎患者肝脂肪变与肝脏HBsAg和HBcAg的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者肝细胞脂肪变与肝脏HBsAg和HBcAg表达的关系.方法 选取2005年1月至2008年6月间天津市传染病医院经肝活组织检查确诊的CHB合并肝脂肪变患者147例,另选取与其血清HBV DNA接近的无肝脂肪变的CHB患者149例,比较2组肝脏HBsAg、HBcAg免疫组织化学染色及肝脏损伤的差异.统计分析采用t检验和x2检验.结果 与无肝脂肪变组相比,肝脂肪变组平均年龄和体质指数较高(t值分别=-3.31和-6.57,P值均＜0.01),肝组织中重度炎性反应、明显纤维化及HBsAg强阳性染色的比例则较低(分别为30.6％比15.4％、26.5％比12.8％、23.1％比6.7％,x2值分别=9.63、8.92、15.76,P值均＜0.01),HBcAg强阳性染色比例亦呈下降趋势.与肝脂肪变程度F1至F2级者比较,F3至F4级者肝脏HBsAg、HBcAg强阳性染色比例呈下降趋势.结论 肝脂肪变影响CHB患者肝组织内HBsAg、HBcAg的表达,随肝脂肪变的出现及加重,HBsAg、HBcAg表达及肝组织损伤程度均呈下降趋势.     

胎盘HBsAg与新生儿乙型肝炎病毒血清学标志物的关系

目的 探讨HBsAg阳性孕妇胎盘HBsAg与新生儿HBV血清学标志物和HBVDNA的关系.方法 免疫组织化学亲和素-生物素复合物(ABC)法检测155例HBsAg阳性孕妇的胎盘HBsAg,ELISA法检测新生儿HBV血清学标志物,荧光定量PCR法检测新生儿血清HBVDNA.各指标阳性率的比较采用x2检验.结果 155例孕妇的胎盘各型细胞均存在不同程度的HBsAg阳性表达,总的胎盘HBsAg阳性58份,阳性率为37.4％;蜕膜细胞、滋养层细胞、绒毛间质细胞和绒毛毛细血管内皮细胞HBsAg阳性各有58、40、29和11份,阳性率分别为37.4％、25.8％、18.7％和7.1％;胎盘从母体面的蜕膜细胞至胎儿面的绒毛毛细血管内皮细胞HBsAg阳性率逐渐下降(趋势x2=43.01,P=0.00).胎盘HBsAg阳性与新生儿HBsAg、HBeAg阳性均有关(x2=4.88,P＜0.05;x2 =3.86,P＜0.05),而与新生儿抗-HBe、抗-HBc无关(x2=3.36,P＞0.05;x2=0.00,P＞0.05).胎儿面的绒毛毛细血管内皮细胞和绒毛间质细胞HBsAg阳性时,新生儿HBsAg阳性的危险性高(OR=5.31,95 ％CI:1.38～20.40;OR=3.33,95％CI:1.16～9.52);而滋养层细胞和绒毛间质细胞HBsAg阳性时,新生儿HBeAg阳性的危险性较大(OR=3.04,95％ CI:1.45～6.39;OR=3.05,95％CI:1.32～7.03);胎盘HBsAg阳性与新生儿HBV DNA阳性无关(x2=0.09,P＞0.05).结论 越接近胎儿面的胎盘细胞HBsAg表达阳性,新生儿HBV血清学标志物阳性的危险性越大.HBsAg在胎盘中以“逐层转移”的方式进入胎儿血循环.     

HBsAg阳性患者HBcAg表达与肝组织淋巴细胞数量变化的关系

目的研究HBsAg阳性患者HBcAg表达与肝组织中T、B淋巴细胞、NK细胞、Kupffer细胞数量等临床指标变化的关系。方法选取50例HBsAg阳性表达的患者肝组织及23例肝血管瘤患者瘤旁正常肝组织,分别进行CD3、CD57、CD20、CD68及HBcAg免疫组织化学染色;用病理图像分析仪测量每例患者肝组织和正常肝组织每平方微米面积阳性细胞数。结果HBsAg阳性表达的患者肝组织中T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞和Kupffer细胞数量明显多于正常肝组织,以T淋巴细胞数量增加最为显著（P〈0．05）,HBcAg阳性表达组与HBcAg阴性表达组肝组织中T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞和Kupffer细胞数量变化无统计学意义（P〉0．05）。HBcAg阳性表达组比HBcAg阴性表达组外周血的AFP、ALT含量高（P均〈0．05）,AST、GGT、ALP、白蛋白减少（P均〈0．05）,A／G比例降低（P〈0．01）。结论各免疫细胞数量变化与膜型HBsAg的表达有关,与核型HBcAg表达无关;但核型HBcAg的表达与各临床指标的改变密切相关。     

乙型肝炎病毒基本核心启动子和前C区突变与肝硬化肝细胞癌和非肝硬化肝细胞癌发生的关系

目的 研究慢性HBV感染者抗病毒治疗前HBV基本核心启动子(BCP)和前C区突变与肝细胞癌发生的关系.方法 收集2003年1月至2010年12月浙江省上虞市人民医院感染疾病科门诊和住院收治的慢性HBV感染患者,其中慢性乙型肝炎166例(对照),肝硬化肝细胞癌患者158例和非肝硬化肝细胞癌患者57例,采用PCR扩增后直接测序法检测HBV BCP和前C区突变,同时确定基因型.数据采用x2检验及Logistic回归分析.结果 患者以HBV基因B型为主,其中慢性乙型肝炎有124例,肝硬化肝细胞癌有126例,非肝硬化肝细胞癌有50例.以慢性乙型肝炎患者作为对照组,在单变量分析中BCP V1753突变(x2=7.927,P=0.005)、BCP T1762/A1764双突变(x2=12.796,P＜0.01)、前C区A1896突变(x2=6.890,P=0.009)和前C区A1899突变(x2=11.850,P=0.001)与肝硬化肝细胞癌的发生有关;前C区A1896突变(x2 =27.310,P＜0.01)和前C区A1899突变(x2=7.575,P=0.006)与非肝硬化肝细胞癌的发生有关.多因素Logistic回归分析发现,在HBeAg阳性患者中,BCP T1762/A1764双突变(wald=6.180,P=0.016,OR=8.883)和前C区A1899突变(wald=10.279,P=0.001,OR=7.475)是肝硬化肝细胞癌发生的危险因素;前C区A1896突变(wald=4.324,P=0.038,OR=4.439)和前C区A1899突变(wald=4.850,P=0.028,OR=6.010)是非肝硬化肝细胞癌发生的危险因素.在HBeAg阴性患者中,仅前C区A1896突变(wald=15.448,P＜0.01,OR=12.128)是非肝硬化肝细胞癌发生的危险因素.结论 BCP T1762/A1764双突变与HBeAg阳性患者的肝硬化肝细胞癌发生有关,前C区A1896突变与HBeAg阳性和阴性患者的非肝硬化肝细胞癌发生有关,前C区A1899突变与HBeAg阳性患者的肝硬化肝细胞癌和非肝硬化肝细胞癌发生有关.     

广东地区原发性肝癌与乙型肝炎病毒基因型的相关性

目的研究广东地区原发性肝癌（HCC）与HBV基因型的相关性。方法2003至2005年慢性HBV感染相关肝脏疾病患者共298例，其中HCC73例，肝硬化（LC）53例，慢性乙型肝炎（CHB）91例，无症状HBV携带者（ASC）81例。采用PCR-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析及克隆测序方法对血清HBVDNA进行基因分型，比较各组患者HBV基因型的分布及临床特征。结果298例患者基因型分布为B型142例，占47．65％；C型156例，占52．35％。HBVC基因型在HCC患者分布明显高于其他对照组（X^2=45．20，P〈0．01）。HCC组中男性比例明显高于女性；HCC和LC组平均年龄显著高于其他组。结论广东地区HBV相关性肝病HBV基因型主要为C型和B型，HBVC基因型感染可能为HCC的高危因素之一。     

肝癌家族史与肝癌关系的20年前瞻性队列研究

目的 探讨肝癌高发区肝癌家族史与肝癌发生的关系.方法 用1992年在江苏省启东市建立的由1 438名参加者组成的肝癌前瞻性研究队列,分析1992年5月至2012年11月20年间一级亲属肝癌家族史与肝癌发生的关系.率的组间差异比较采用x2检验,均数差异比较采用t检验,危险度评估计算相对危险度(RR)及95％可信区间(CI).结果 队列合计随访25 753人年.有一级亲属肝癌家族史[FH(+)]325人,发生肝癌69例,发病率1 244.36/10万人年;无一级亲属肝癌家族史[FH(-)]1 113人,发生肝癌103例,发病率509.70/10万人年,两组差异有统计学意义(x2=35.40,P＜0.01),RR=2.44,95％ CI为1.80 ～ 3.31.FH(+)/HBsAg(+)、FH(-)/HBsAg(+)、FH(+)/HBsAg(-)、FH(-)/HBsAg(-)组肝癌累积发生率分别为32.21％、19.80％、1.71％、0.65％.FH(+)/HBsAg(+)者发生肝癌的危险性显著高于FH(-)/HBsAg(+)者(x2=12.97,P＜0.01),RR=1.75,95％CI为1.29 ～ 2.38;与HBsAg(-)/FH(-)者相比,RR高达59.59.HBsAg(-)/FH(+)者的肝癌发病率是HBsAg(-)/FH(-)人群的2.60倍,但差异无统计学意义(x2=1.310,P=0.252).母亲患肝癌者的肝癌发病率显著高于父亲患肝癌者(x 2=4.393,P=0.036),RR=1.86,95％ CI为1.03 ～ 3.36.FH(+)肝癌患者中,56.52％ (39/69)的发病年龄小于50岁,与FH(-)肝癌(40.78％,42/103)相比,差异有统计学意义(x 2=4.111,P=0.043).结论 一级亲属肝癌家族史与肝癌发生密切相关,在肝癌发生中与HBsAg存在协同作用.肝癌发生的遗传学机制值得进一步深入研究.     

Significance of hepatitis B virus surface antigen, hepatitis C virus expression in hepatocellular carcinoma and pericarcinomatous tissues

AIM： To investigate the correlation between hepatitis B virus surface antigen （HBsAg）, hepatitis C virus （HCV） expression in hepatocellular carcinoma （HCC）, the HAI score of the noncancerous region of the liver and the serum Alpha fetoprotein （AFP） level.
METHODS： The patterns of HBsAg and HCV in 100 cases of HCC and their surrounding liver tissues were studied on paraffin-embedded sections with immunohistochemistry, the histological status was determined by one pathologist and one surgeon simultaneously using the hepatitis activity index （HAIl score, and AFP was detected by radioimmunity. The study included 100 consecutive patients who underwent curative resection for HCC. Based on HBsAg and HCV expression, the patients were classified into 4 groups： patients positive for HBsAg （HBsAg group）, patients positive for HCV （HCV group）, patients negative for both HCV and HBsAg （NBNC group） and patients positive for both HBsAg and HCV （BC group）.
RESULTS： The BC group had significantly higher HAI scores than the other three groups. （BC 〉 HCV 〉 HBsAg 〉 NBNC）. HBV and HCV virus infection was positively correlated with HAI （rs = 0.39, P = 0.00011. The positive rate of AFP （85.7%） and the value of AFP （541.2 ng/mL） in the group with HBV and HCV co-infection were the highest among the four groups. The positive rate （53.3%） of AFP and the value of AFP （ 53.3 ng/mL） in the group with none-infection of HBV and HCV were the lowest. HBV and HCV virus infection was positively correlated with AFP（rs = 0.38, P = 0.0001）.
CONCLUSION： The AFP increase in patients with liver cancer was positively correlated with the infection of HBV and HCV. The-serum AFP elevation by the infection of HBV and HCV is one of mechanisms which lead to hepatocarcinogenesis, and the antivirus intervening treatment of hepatitis is significant for the prognosis of liver cancer. From our Spearman＇s rank correlation analysis, we can conclude that the severity of virally induced