肺癌特异性转移因子口服液的研制

目的制备羊脾特异性转移因子口服液,并检测其免疫活性。方法采用肺癌患者术后肿瘤组织加佐剂免疫羊,取其脾用透析法制备肺肿瘤特异性转移因子。检测其理化性质,并通过E玫瑰花环试验、白细胞粘附抑制法(LAI)和迟发型皮肤超敏反应实验(DTH)检测特异免疫活性。结果制品的各项理化指标均达到了国家药品标准(WS1-XG-037-2000),E-玫瑰花法结花率为20.5%,多肽含量为1.38 mg/mL,核糖含量为83.5μg/mL。该制品能明显抑制小白鼠白细胞黏附,并能诱导小鼠皮肤迟发型超敏反应,表明该口服液对T淋巴细胞的增殖和玫瑰花结的形成均有促进作用。结论本法制备的羊脾特异性转移因子口服液,为抗肿瘤制剂的研究奠定理论基础。     

人参皂苷Rk1修饰的伊曲康唑新型脂质体的构建及抗肿瘤活性初步研究

目的 制备一种人参皂苷Rk1修饰的伊曲康唑新型脂质体(R-ITZ-Lip)用于肿瘤治疗,并初步考察其体内外抗肿瘤药效。方法 采用逆向蒸发法制备R-ITZ-Lip,对其进行粒径、电位、包封率等表征研究;采用荧光显微镜和流式试验定性定量考察R-ITZ-Lip体外肿瘤细胞靶向性,采用活体和离体成像试验考察其体内肿瘤靶向性;采用MTT试验和肿瘤生长曲线考察其体内外药效。结果R-ITZ-Lip外观呈圆形,平均粒径为(124.67±2.05)nm,包封率为(97.49±1.93)%;体外细胞摄取试验结果表明,R-ITZ-Lip能够被乳腺癌细胞4T1特异性摄取,活体和离体成像结果表明R-ITZ-Lip在4T1异种移植小鼠模型的肿瘤部位分布显著增强;MTT试验表明R-ITZ-Lip对4T1细胞表现出较好的抑制作用,IC₅₀为1.37 μg·mL^-1,低于伊曲康唑胆固醇脂质体(C-ITZ-lip)的3.12 μg·mL^-1,4T1异种移植小鼠模型体内药效结果表明,R-ITZ-Lip有效地抑制了肿瘤的生长,R-ITZ-lip组的抑瘤率为83.54%,优于C-ITZ-lip组(73.87%)和ITZ注射液组(57.86%)。结论 构建了一种用于治疗肿瘤的R-ITZ-Lip,具有改善的制剂学性质,能够实现肿瘤的精准靶向,提高治疗效果。     

前列腺素E1脂质体的制备及稳定性初步研究

目的:研制含量稳定、包封率较高的前列腺素E1脂质体制剂,为临床新制剂的开发提供参考.方法:采用逆相蒸发法制备前列腺素E1脂质体,固相萃取-高效液相色谱法测定主药含量及包封率,并用加速试验对制剂的稳定性作出初步考察.结果:前列腺素E1脂质体平均粒径为127.5 nm,包封率为92.35%,具有良好的稳定性.结论:前列腺素E1脂质体制备工艺可行,质量控制方法简单、可靠,该脂质体是一种比较理想的制剂.     

Preparation and primary identification of mouse anti-human B7-H4 monoclonal antibody

目的 制备鼠抗人B7-H4单克隆抗体,并对其生物学特性进行初步鉴定.方法 用稳定表达B7-H4分子的L929/B7-H4转基因细胞免疫6-8周龄的Balb/c小鼠.取脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后,采用流式细胞术筛选阳性克隆,制备稳定分泌抗B7-H4单克隆抗体的细胞株,并用Western blot和Dot blot鉴定其生物学特性.细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定T细胞增殖情况.结果 成功获得1株稳定分泌抗人B7-H4单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为5C8.Western blot 和Dot blot结果表明,5C8能与人B7-H4蛋白特异性结合.CCK-8实验显示,5C8可以阻断B7-H4 分子对T细胞增殖的抑制作用.结论 成功获得鼠抗人B7-H4单克隆抗体,为研究B7-H4分子在肿瘤中的作用提供了手段.     

马蔺子甲素的致突变实验

<正> 马蔺子甲素(irisquinone)是从马蔺(Iris lactea pall.var.chinensis(Fisch)Koidz)的种皮中提取的一种醌类化合物。实验证明对抗多种小鼠肿瘤有效,经临床试用对肺癌、胃癌、白血病等有一定疗效。为评价其对人的安全性,我们做了微核及显性致死试验。     

皮肤点刺过敏原测试的临床应用及健康教育

变应性鼻炎人群患病率为10%～20%.诊断性辅助检查主要有变应原皮肤点刺试验、皮内试验、激发试验和特异性IgE测定.其中,变应原皮肤点刺试验其效果可靠,剂量控制严格,安全系数高,病人患者易于接受,成为目前该类疾病的首选诊断方法.我院从2009年起,对218例变应性鼻炎患者进行了21种变应原皮肤点刺试验,并对部分患者实施特异性免疫治疗和健康教育,取得了良好的效果.     

应用酯酶染色法观察正常人和食管贲门癌患者的细胞免疫水平

目前多数学者认为非特异性酸性酯酶染色法在区别 T、B 淋巴细胞上与 E 玫瑰花环试验相当,可做为检测成熟静止 T 细胞的标志和观察细胞免疫水平的手段。本文核查了非特异性酸性酯酶染色法与 E 花环试验的相关性;同时又以该法初步观察了正常人和食管贲门癌患者的细胞免疫水平。兹将结果报导如下:     

一种可用于黑色素瘤靶向递药的透明质酸纳米凝胶

黑色素瘤恶性程度高,且发病率逐年上升。本研究制备了一种能特异性靶向黑色素瘤的透明质酸纳米凝胶,将巯基化的透明质酸修饰于表面功能化的普朗尼克F127-TPGS混合胶束制备共价交联的纳米凝胶。通过测定粒径考察其体外稳定性;细胞毒性实验考察该载体材料对细胞的毒性作用;细胞摄取实验定量和定性考察B16F10黑色素瘤细胞对该纳米凝胶的摄取情况。结果显示,本研究制备了一种30 nm左右的小粒径纳米凝胶,该纳米凝胶对小鼠3T3成纤维细胞与小鼠黑色素瘤B16F10细胞均无明显细胞毒性作用,与低表达CD44受体的3T3细胞相比,高表达CD44受体的B16F10细胞的摄取效率显著增加(P<0.05)。     

聚维酮碘喷雾剂的研制

制备了聚维酮碘喷雾剂,进行了质量控制及初步稳定性考察并研究了其对小鼠皮肤的刺激性。结果表明:本品对脱毛皮肤无刺激性,稳定性考察结果表明本品应置于低温、避光保存。     

胎盘因子对冷应激小鼠的免疫调节作用

目的探讨胎盘因子 (PF )对冷应激小鼠免疫功能的调节作用。方法用超滤法从健康产妇胎盘中提取PF ;强迫小鼠在 ( 10± 0 .5 )℃水中游泳制备冷应激模型 ;检测免疫器官重量、脾脏溶血空斑形成细胞数、E花环形成率、T淋巴细胞转化试验及白细胞介素 2 (IL 2 )活性。结果PF能明显改善冷应激所引起的小鼠免疫功能抑制 ,使脾脏重量及脾脏溶血空斑形成增多 ,E花环形成率及T淋巴细胞转化提高 ,并使IL 2活性升高。结论PF对冷应激所致小鼠免疫功能抑制具有调节作用     

6厂家5-单硝酸异山梨酯缓释制剂释放度的比较

目的:对6厂家5-单硝酸异山梨酯缓释制剂的体外释放度进行考察,为临床合理用药提供参考。方法:采用《中国药典》溶出度测定法第一法的装置进行体外释放度实验,用HPLC法测定含量,以威布尔方程提取释放参数(T50,T63,m)。结果:各厂产品体外释放度均符合药典规定,不过A,C,D,F厂产品的T50和T63较长,且与B,E厂产品的T50和T63相比有统计学盖异(P<0．05);而且在这四厂产品中,C厂产品的T63最长,与A,D,F厂产品的T63相比有统计学差异(P<0．05)。结论:不同厂家生产的5-单硝酸异山梨酯缓释制剂内在质量存在差异。     

Eltor弧菌RNA的制备及其对免疫功能的影响

本文以去污剂(SDS)-酚法自Eltor弧菌小川型、稻叶型菌株提取RNA。该制剂理化特性为:(?),紫外分光测定其吸收峰在257nm处,DNA含量小于核酸量的8％,苔黑酚反应阳性。该制剂能保护C_(57)BL小鼠抗Eltor弧菌及金黄色葡萄球菌的攻击。观察到这种保护作用与RNA组分有关,而且无种属特异性。动物实验表明,以Eltor弧菌RNA制剂处理之小鼠对小鼠S_100有显著抑制作用(P<0.001)。经该制剂处理的C_(57)BL小鼠巨噬细胞对Elto孤菌的吞噬作用较对照组显著提高(P<0.01)。结果提示这种Eltor弧菌RNA制剂有可能作为一种非特异性免疫刺激剂而加以应用。     

Effects of chemical carcinogens and physicochemical factors on the UV spectrophotometric determination of DNA

The ultraviolet (UV) absorbance ratio of 260/280 nm has been used as an indicator of DNA purity. However, the A260/A280 ratio may be beyond the normal range (1.8-1.9) due to physicochemical alterations produced by pH and temperature, and carcinogenic chemical modification. When the pH of the DNA solution buffer increased from 3 to 11, the A260/A280 ratio changed significantly from 1.5 to 2.2 in mixtures of DNA bases [A:T:C:G = 28.5:28.5: 21.5:21.5, i.e., (A + T)/(all four bases) = 57%, expressed as mole percent], of deoxyribonucleosides (adenosine:thymidine:cytidine:guanosine= 28.5:28.5:21.5:21.5, as mole percent), or of deoxyribonucleotides (dAMP:dTMP:dGMP:dCMP = 28.5:28.5:21.5:21.5, as mole percent) examined. The A260/A280 ratio increased with RNA contamination and exceeded 1.9 when RNA concentration was >30%, as mole percent. In contrast, the A260/A280 ratio was linearly reduced by increasing the protein concentration. Phenol (>0.02%) contamination also reduced the A260/A280 ratio to below 1.8. Benzo[a]pyrene diol epoxide (BPDE), a reactive carcinogen metabolite of benzo[a]pyrene (BaP), decreased the A260/A280 ratio correlated with the degree to which it modified the DNA. These results suggest that the UV A260/A280 ratio is significantly affected by pH and the presence of contaminating species of macromolecules and chemicals.     

Effectiveness of thymostimulin treatment in hepatitis B surface antigen-positive chronic active liver disease. Results of a randomized clinical trial

The results of this controlled trial with thymostimulin (TP-1 Serono) on hepatitis B surface antigen (HBsAg)-positive chronic active liver disease (CALD), involving 34 consecutive patients chosen by predefined criteria and randomly allocated to control and treatment groups, show that this thymic hormone may significantly improve the clinical, biochemical, serological and immunological parameters of this disease, and ameliorate the quality of the patients' life. The treatment schedule was adjusted according to the immunological response. Our study population was too small to enable any conclusions to be drawn: further studies are therefore required to establish the exact role of thymostimulin in the treatment of HBsAg-positive CALD.     

携带人肝细胞生长因子基因重组腺病毒的构建与制备

构建一种携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒(AdHGF),并对其进行扩增、纯化与质量检测。首先构建携带人肝细胞生长因子基因的穿梭质粒pXCJL1CMV/pAHGF,然后用LipofectAMIN介导该质粒和含有E1、E3区及包装信号区缺失的复制缺陷型5型腺病毒基因组的质粒GT4050共转染293细胞,采用细胞内质粒DNA同源重组法构建重组腺病毒(AdHGF)。并以噬斑分析法筛选单克隆重组腺病毒,PCR法鉴定阳性重组腺病毒,氯化铯密度梯度离心法纯化病毒,紫外分光光度仪测定病毒颗粒数及纯度,快速CPE分析、噬斑分析法测定病毒感染滴度(pfu/ml)。采用敏感细胞病变法检测有复制能力的腺病毒。结果成功构建了重组腺病毒AdHGF,制备的病毒纯度好、滴度高,其效价比小于1∶100,并且未检测到有复制能力的腺病毒存在。研究构建制备的重组腺病毒AdHGF具有潜在的实际应用价值。     

黄芪药材高效液相色谱-二极管阵列检测法指纹图谱最佳检测波长的选择

目的选择黄芪药材高效液相色谱-二极管阵列检测法（HPLC-DAD）指纹图谱的最佳检测波长。方法提取可用于评价指纹图谱质量的相关信息数据,借助化学计量学的方法对峰数、分离度之和、相对峰面积之和、互信息ФA和互信息ФB等指标参数进行比较和分析。结果在260 nm波长下峰数、分离度之和、相对峰面积之和、互信息ФA和互信息ФB参数值分别为30（17）、190.43、4.19、2.48、737.23,均优于249 nm和280 nm波长条件下相应的参数值。结论从化学计量学方法确定的指标参数结果确定260 nm为黄芪中黄酮类成分指纹图谱的最佳检测波长,可以为HPLC-DAD指纹图谱最佳检测波长的选择提供可靠依据。     

重组腺病毒人白细胞介素2的质量分析

目的通过对重组腺病毒人白细胞介素2(Adv-IL2)的质量研究和实验方法参数的选择,建立Adv-IL2的质量控制标准。方法选用CPE法测定病毒滴度;将病毒转染Hela细胞,表达出IL-2,分别用MTT法和ELISA法测定IL-2的活性和表达量。建立了UV和IE-HPLC系统分析纯度;琼脂糖凝胶电泳检查基因组分子量和基因组酶切图谱;PCR法鉴定病毒特征基因E2B区、IL-2表达基因盒和外源因子(复制型病毒RCV,HIV,HBV和HCV);按照《中国生物制品规程》的有关规定进行了其他项目检查。结果测定的重组腺病毒人白细胞介素2原液滴度达3×10¹⁰ pfu·mL^-1。IL-2表达活性达700 U·mL^-1,表达量约25 ng·mL^-1。制品的A_{260 nm}/A_{280 nm}为1.23;IE-HPLC纯度检查大于98%。基因组分子量和基因组酶切图谱以及病毒特征基因E2B区和IL-2表达基因检查结果均在理论值范围;复制型病毒RCV,HIV,HBV和HCV检测均呈阴性;其他项目均符合规定。结论建立了重组腺病毒人白细胞介素2的质量标准,并可有效地控制制品的质量。     

调节性T淋巴细胞在HCV感染者病程不同阶段的表达

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在HCV感染者病程不同阶段的表达及其意义。方法收集非活动性HCV感染33例(A组)、活动性HCV感染32例(B组)、慢性丙型肝炎56例(C组)、HCV相关性肝硬化47例(D组)、HCV相关性肝癌45例(E组)和健康对照者60例(F组),采用流式细胞术检测外周血CD4+T细胞中CD4+CD25+Treg的表达频率,并进行统计学分析。结果 B、C、D、E组外周血CD4+T细胞中CD4+CD25+Treg的表达频率均明显高于F组(P<0.01)。组间比较,A组患者外周血的CD4+CD25+Treg细胞表达频率明显低于B、C、D、E组(P<0.01),D、E组表达频率明显高于B、C组(P<0.01)。结论 HCV感染导致CD4+CD25+Treg细胞的增殖与活化,使机体对其的免疫清除不完全,从而促进HCV感染者疾病的进展和肝癌的发生。     

5种复方丹参口服制剂质量标准对比分析与启示

目的:对比5种复方丹参口服制剂质量标准的异同,分析日用量含饮片量与活性组分含量,为临床用药综合评估提供参考.方法:从《中华人民共和国药典》2020年版提取这5种制剂的处方、制法、鉴别、检查及含量测定指标,结合用法用量计算日用量相当于饮片量及活性组分量,分析其异同.结果:复方丹参滴丸与其他4种制剂组方相似,但处方中君药丹...     

Inhibitory effect of prostaglandin E1 on laurate-induced peripheral vascular occlusive sequelae in rabbits: optimized topical formulation with beta-cyclodextrin derivative and penetration enhancer HPE-101.

Prostaglandin E1 (PGE1) and its inclusion complexes with beta-cyclodextrin (beta-CyD) and O-carboxymethyl-O-ethyl-beta-cyclodextrin (CME-beta-CyD) were made as topical preparations. The PGE1 preparations, when applied with a penetration enhancer, 1-[2-(decylthio)ethyl]azacyclopentane-2-one (HPE-101), markedly increased the regional blood flow in the ear of rabbits and were longer acting than when administered by the intravenous route. Topical application of the PGE1 preparations significantly protected rabbits against laurate-induced peripheral vascular occlusive sequelae; the protective potency increased in the order of PGE1 alone = beta-CyD complex < CME-beta-CyD complex preparation. The PGE1 preparations elicited skin reactions such as erythema and oedema depending on their vasodilating actions. These reactions disappeared gradually after removal of the preparations, and hence may not be serious obstacles for their safe use. These results suggest that combinations of CME-beta-CyD and HPE-101 work synergistically to facilitate the entry of PGE1 into the skin, and consequently enhance the therapeutic potential of PGE1 in the topical preparation tested.