血管内皮祖细胞和血管内皮生长因子促进预构皮瓣血管新生作用的比较

目的 比较血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在促进预构皮瓣血管新生作用上的差异,探讨EPCs移植提高预构皮瓣存活面积的可行性.方法 分离雄性Wistar大鼠(45只)一侧股血管柬,转位植入腹部皮下,建立预构皮瓣实验模型.将体外诱导分化的EPCs(组Ⅰ,n=15)和VEGF(组Ⅱ,n=15)分别注射于皮瓣局部,对照组仅注射PBS溶液(组Ⅲ,n=15).4周后形成以植入血管为蒂的岛状皮瓣,原位缝合;术后7 d对皮瓣存活率、血管密度计数进行检测.结果 组Ⅰ、组Ⅱ、组Ⅲ的皮瓣存活率分别为(87.26±10.13)%、(66.13±9.9)%、(55.59±13.06)%,组Ⅰ分别与组Ⅱ和组Ⅲ比较,差异均有统计学意义(P<0.001);微血管密度分别为:(38.67±9.52)个/mm~2、(25.83±6.33)个/mm~2、(26.5±5.61)个/mm~2(P<0.05).结论 EPCs促进预构皮瓣血管新生的作用优于VEGF,局部应用骨髓来源的EPCs可以有效地提高预构皮瓣存活面积.     

疏血通注射液对大鼠随意型皮瓣存活的影响

目的研究疏血通注射液对大鼠背部随意型皮瓣存活的影响。方法采用改良的大鼠McFarlane皮瓣制作方法,将Sprague Dawley大鼠随机分为疏血通实验组和生理盐水对照组,实验组每只每天腹腔注射疏血通注射液1．5mL／kg,对照组每只每天腹腔注射生理盐水1．5mL／kg。术后第7天处死大鼠分别进行皮瓣存活面积比的检测,并取皮瓣近、中、远区组织切片光镜下观察,免疫组化法检测血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果术后7d,实验组皮瓣的存活面积比为（72．52±2．23）％,对照组皮瓣的存活面积比为（50．36±2．37）％,实验组存活面积比显著高于对照组（P〈0．01）。实验组中区皮瓣的组织水肿、炎症细胞浸润情况明显比对照组减轻,并且出现大量的新生血管,中区新生血管密度（27．42±4．21）个／mm^2,与对照组（17．45±5．43）个／mm^2差异有统计学意义（P〈0．05）。实验组VEGF表达量为4731．24±448．99,对照组为2466．01±801．67,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论疏血通注射液可能通过增加VEGF表达等途径,促进皮瓣新生血管增生,改善皮瓣血供,减轻炎症反应,从而改善大鼠随意型皮瓣的存活。     

腺病毒-VEGF基因重组体促进预构皮瓣成活的实验研究

目的：应用大鼠预构皮瓣模型,探讨基因治疗技术产生的血管内皮生长因子促进预构皮瓣血管新生和皮瓣存活的可能性,为临床上寻找加速预构皮瓣成熟的新方法提供实验依据。方法：20只SD大鼠每只腹部两侧各构建一个预构皮瓣,共构建40个皮瓣,每只大鼠两侧皮瓣按随机原则进行不同的处理,分别归于实验组或对照组,每组各20个皮瓣。于大鼠腹部两侧各标记3cm×2cm矩形预构区,短边平行于腹股沟韧带,自尾侧短边中点向后纵向切开后肢皮肤,剥离出长约2cm的股动静血管束,远端结扎切断。在两侧预构区域的中轴线上,于真皮与肉膜层间各制作一皮下隧道,实验组的隧道壁皮下组织内注射携带有VEGF基因的腺病毒,同法向所有对照组的隧道壁软组织内注射等量生理盐水。将已剥离好的血管束向颅侧翻转置入相应皮下隧道内。所有已植入股血管的预购区域2周后均被制成以植入血管束为蒂的岛状皮瓣,从两组中各取一个皮瓣进行免疫组化染色,观察有无VEGF生成,其余岛状皮瓣均缝回原处。形成岛状皮瓣后第七天观察皮瓣存活及血管新生情况。结果：实验组与对照组的皮瓣平均存活率分别为（90．48±1．89）％、（69．75±2．36）％,其差异有统计学意义（P〈0．01）;血管放射显影图上,实验组植入血管周围见广泛白色显影,尤以血管两端明显,而对照组新生血管显影仅局限于植入血管周围;组织学切片显示实验组植入血管周围新生血管丰富,以毛细血管为主,并见肉芽成份,对照组新生血管相对较少,两组间新生小血管管腔大小则无明显差异;免疫组化检测显示仅实验组皮瓣中有VEGF表达。结论：腺病毒-VEGF基因重组体能通过促进预构皮瓣的血管新生,增加预构皮瓣的存活率。     

苦碟子注射液对大鼠随意皮瓣存活的影响

目的：观察苦碟子注射液研究苦碟子注射液对大鼠随意型皮瓣存活的影响对大鼠随意皮瓣成活的影响。方法：将2～3月龄重SD大鼠24只,采用随机抽签法分为2组（实验组和对照组,每组12只）。采用改良的大鼠随意型皮瓣制作方法造模,实验组每天腹腔注射苦碟子注射液5 ml/kg ,对照组每天腹腔注射生理盐水5 ml/kg。术后第7天颈椎脱臼处死大鼠分别进行皮瓣存活面积比的检测,同时取皮瓣近中远端组织经组织染色切片后光镜下观察,免疫组化法检测血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果：术后7 d,实验组皮瓣存活面积比为（70．432±3．867）％,显著高于对照组的（50．498±2．346）％（P＜0．01）;实验组皮瓣组织水肿、炎症细胞浸润情况比对照组明显减轻;切片观察出现较多新生血管,Ⅱ区新生血管密度（（30．11±5．53）/mm2,与对照组（20．13±4．11））/mm2比较,差异有统计学意义（P＜0．01）,Ⅲ区坏死严重。实验组VEGF表达量为（4867．31±452．36）,与对照组的VEGF表达量（2387．45±768．46）比较,差异有统计学意义（P＜0．01）。结论：苦碟子注射液可以提高VEGF的表达量、促进毛细血管新生,减轻皮瓣炎性浸润,还可以明显提高大鼠随意型皮瓣的成活率,为临床皮瓣移植研究提供了新的思路。     

VEGF明胶缓释微球对大鼠背部随意皮瓣存活的影响

目的研究局部注射血管内皮生长因子(VEGF)复合明胶微球对SD大鼠背部随意皮瓣存活的影响.方法采用改良的乳化冷凝法交联制备复合VEGF的明胶缓释微球,将其注射于大鼠背部随意皮瓣,24只SD大鼠随机分为复合VEGF微球组(A组)、VEGF治疗组(B组)和对照组(C组),术后7天分别进行皮瓣存活率、新生血管计数的检测.结果术后7天皮瓣的存活率分别为(68.54±2.79)%,(58.65±3.26)%,(45.43±2.71)%,治疗组存活率显著高于对照组(P＜0.05),且存活质量A组最好;皮瓣内新生血管计数分别为(31.16±4.38),(25.41±4.06),(18.68±5.44)具有显著差异性.结论VEGF缓释微球可以促进缺血皮瓣的血管新生,提升皮瓣存活率.     

微囊化重组CHO细胞移植促进大鼠心肌梗死后血管新生的实验研究

目的在大鼠心肌梗死部位植入微囊化重组中华仓鼠卵巢（chinese hamster ovary，CHO）细胞，观察其分泌的血管内皮细胞生长因子（VEGF）是否可以促进心肌梗死部位的血管新生，改善心功能。方法通过质粒转染的方法构建可以分泌VEGF的重组CHO细胞系，用微囊包裹，观察微囊内细胞的生长及分泌情况。制备大鼠心肌梗死模型，随机将48只8周龄SD雄性大鼠分成微囊化细胞移植组（MC—CHO组）、单纯细胞移植组（CHO组）、空微囊移植组（MC组）和无血清培养基移植组（对照组），每组12只。移植3周后检测心功能改善情况，病理切片观察微囊结构及囊内细胞存活情况，注射部位微血管计数比较促血管新生效果。结果体外检测可见重组CHO细胞在微囊生长迅速，第8d时培养上清中VEGF达3852pg／ml；移植3周后MC—CHO组左心室大小和心功能明显好于其它3组，差异有统计学意义（P〈0．05）；局部微血管密度MC—CHO组较CHO组、MC组和对照组明显增加（22．3±3．1vs．15．6±2．8，11．4±2．5和13．2±2．7个／每高倍视野，P〈0．05）；组织学检查可见微囊结构完整，内有存活且具有分泌功能的CHO细胞。结论微囊化重组CHO细胞移植可促进大鼠心肌梗死后血管新生，改善心功能。     

转染血管内皮生长因子基因的小鼠NIH3T3细胞移植促进皮瓣早期血运重建的研究

目的探讨转染血管内皮生长因子（VEGF）基因的小鼠NIH3T3细胞移植对缺血皮瓣的血管新生和皮瓣存活率的影响。方法体外PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒转染小鼠NIH3T3细胞,免疫组化方法检测小鼠NIH3T3细胞体外表达VEGF的情况,CM-DiI标记小鼠NIH3T3细胞。将小鼠随机分为3组：A组[PcDNA3．1（-）／VEGF165质粒转染的NIH3T3细胞移植]、B组（单纯NIH3T3细胞移植）、C组（单纯DMEM培养基注射）。每只小鼠背侧皮下按组分别注射细胞悬液和培养基,注射后酶联免疫吸附（ELISA）法连续检测大鼠血浆VEGF浓度,注射后第4天掀起一个蒂在尾侧的4．0cm×1．5cm的随意皮瓣。术后第7天分别观察皮瓣的存活率、血流灌注、皮瓣毛细血管密度、NIH3T3细胞在皮瓣内的分布和存活情况。结果转染VEGF165基因的小鼠NIH3T3细胞体外和体内检测均高表达VEGF165蛋白。A组的皮瓣存活率、毛细血管密度、血流灌注比值均显著高于另外两组（P〈0．05）。结论转染VEGF基因的小鼠NIH3T3细胞皮下移植可促进缺血皮瓣的血管新生,提高存活率。     

转基因的骨髓间充质干细胞治疗大鼠缺血皮瓣

目的探讨转染血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)同种异体移植促进缺血皮瓣的血管新生,从而提高皮瓣存活率的可能性。方法体外分离、培养、鉴定SD大鼠MSCs,PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染MSCs,免疫荧光方法检测MSCs体外表达VEGF的情况,CM-DiI标记MSCs。SD大鼠随机分3组:A组[PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染的MSCs移植]、B组(单纯MSCs移植)、C组(DMEM-F12培养基)。每只大鼠背侧皮下按组分别注射细胞悬液和培养基,注射后ELISA法连续检测大鼠血浆VEGF浓度,注射后第4天掀起1个蒂在尾侧的9 cm×2 cm的随意皮瓣。在术后第14天分别观察皮瓣的存活率、激光多普勒血液监测仪监测血流灌注、CD34免疫组织化学检测皮瓣毛细血管密度、荧光显微镜检测MSCs在皮瓣内的分布和存活状况。结果转染VEGF165基因的MSCs体外和体内检测均高表达VEGF165蛋白。A、B、C三组的皮瓣存活率分别为(83.1±2.6)%、(66.4±6.1)%、(51.5±7.5)%(P< 0.05);A、B、C三组的毛细血管密度(条/mm2)分别为:89.2±6.1、57.1±4.7、28.7±2.8(P< 0.05);血流灌注比值A组高于B、C两组,B组高于C组(P<0.05);转染VEGF165基因的MSCs移植SD大鼠皮瓣后,MSCs存活并参与血管新生。结论转染VEGF基因的大鼠MSCs体外培养后异体移植可促进缺血皮瓣的血管新生,提高存活率。     

bFGF微球对大鼠背部任意皮瓣存活的影响

目的：研究局部注射碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）复合明胶微球对SD大鼠背部任意皮瓣存活的影响。方法：采用改良的乳化冷凝法交联制备复合bFGF明胶缓释微球,将其注射于大鼠背部任意皮瓣,24只SD大鼠随机分为bFGF微球组（A组）、bFGF治疗组（B组）和对照组（C组）,术后7天分别进行皮瓣存活率、新生血管计数的检测。结果：术后7天皮瓣的存活率分别为（65.42±2.19）%,（54.38±4.52）%,（45.43±2.71）%,微球组存活率显著高于对照组（P〈0.05）且存活质量最好;皮瓣内新生血管计数分别为28.75±2.36,21.28±3.82,18.68±5.44,具有显著性差异。结论：bFGF缓释微球可以促进缺血皮瓣的血管新生,提高皮瓣存活率。     

血管内皮祖细胞促进游离移植脂肪颗粒组织存活的实验

目的探讨血管内皮祖细胞（endothelial progenitor cell，EPC）移植促进游离移植的脂肪颗粒组织的血管新生，提高移植脂肪颗粒组织存活率。方法体外分离、培养人脐血中EPCs，然后与来自人体的脂肪颗粒组织混合移植于裸鼠背部。结果脐血中分离培养的EPCs表达血管内皮细胞生长因子受体（KDR）及细胞表面标记CD34、CD133，EPCs与脂肪颗粒组织混合移植到裸鼠3个月后，EPCs整合到缺血部位新生血管中，与对照组的脂肪颗粒组织存活率分别为（89．3±6．8）％、（42．2±2．5）％（P〈0．05），而且实验组与对照组脂肪颗粒组织周边区毛细血管密度差异有统计学意义（P〈0．05）。术后3个月2组脂肪颗粒组织周边区的EPCs密度分别为（95．2±10．5）个／mm^2、0个／mm^2（P％O．05）。结论体外培养的脐血EPCs移植体内可促进游离移植的脂肪颗粒组织的血管新生，提高存活率。     

结扎伴行静脉对逆行岛状皮瓣存活的影响

目的 以新西兰大白兔隐动静脉逆行岛状皮瓣为实验模型,探讨结扎血管蒂伴行静脉干对逆行岛状皮瓣存活的影响.方法 将10只新西兰大白兔两侧后肢左右随机分为2组,每组10个皮瓣,进行同体对照.建立隐动静脉逆行岛状皮瓣实验模型(面积3 cm×3 cm,血管蒂长4 cm,血管蒂周围保留1 cm宽筋膜).对照组:血管蒂部不做任何处理;实验组:在放大10倍手术显微镜视下于血管蒂的两端分别结扎伴行静脉干,使2根伴行静脉干完全闭塞.术后每天观察皮瓣颜色、肿胀情况.术后1周测皮瓣成活率,并切取血管蒂进行组织学观察.结果 术后两组皮瓣均有较明显的肿胀,实验组皮瓣肿胀更为明显.两组皮瓣平均成活率比较,对照组为(92.7±12.1)%,实验组为(46.8±38.3)%,差异有统计学意义(t=3.61,P＜0.01).两组皮瓣蒂部均可见扩张的微血管,高度肿胀导致坏死的皮瓣,在其蒂部扩张的微血管内可见血栓形成.结论 血管蒂的伴行静脉结扎使皮瓣更易发生静脉危象,导致皮瓣坏死.微血管内血栓形成可能是导致皮瓣静脉回流障碍的又一重要因素.

Abstract：

Objective To evaluate the effect of ligating venae commutantes in the pedicle on the survival of reverse-flow island flaps. Methods Ten New Zealand rabbits were used. Reverse flow island flap based on the saphenous artery and vein was created on both hind limbs,with a total of 20 flaps. The size of the flap was 3 cm×3 cm with a 4 cm long vascular pedicle containing 1 cm strip of connective tissue. These flaps were randomly divided into 2 groups of 10 flaps each. In group Ⅰ,the vascular pedicle (1 saphenous artery and 2 venae commutantes) was raised and its sheath was not disturbed,maintaining communicating and collateral branches intact. In group Ⅱ,the 2 venae commutantes were ligated with 8-0 suture at both ends of the pedicle under 10X microscope and the connective tissue was maintained intact. The color and congestion of flaps were observed daily. Flap survival rate was measured after one week. The vascular pedicle was harvested and observed histologically. Results The flaps began to appear obviously swelling after blood oozing stopped. The extent of swelling was more severe in group Ⅱ than in group Ⅰ. Flap survival rate of group Ⅰ (92.7±12.1)% was significantly higher than that of group Ⅱ (46.8±38.3)% (t=3.61,P<0.01). Histological examination revealed lots of dilated venules in the vascular pedicle. The amount of dilated venules in group Ⅱ was more than that in group Ⅰ. Lots of thrombi could be seen in the dilated venules in the pedicle of completely or partially necrotic flaps. Conclusion Venous crisis takes place more easily in flaps without venae commutantes,resulting in flap necrosis. The venous thrombosis may be the other important influencing factor for necrosis of reverse-flow flaps.     

大鼠隐血管束全腹壁预制皮瓣模型的实验研究

目的:探讨一种以大鼠隐血管束为预制血管蒂的全腹壁预制皮瓣模型的设计及应用价值。方法:将18只SD大鼠按Ⅰ期手术与Ⅱ期手术之间的间隔时间2、4、6周分为三组。Ⅰ期手术制备大鼠后肢隐血管束预制血管蒂,Ⅱ期手术切开皮瓣四边,形成以预制隐血管束为蒂的岛状皮瓣。Ⅰ期、Ⅱ期术后观察皮瓣血运,记录皮瓣成活面积及成活率。检测Ⅱ期皮瓣血管蒂旁局部组织中血管内皮生长因子(VEGF)含量,取成活皮瓣制作病例切片,HE染色,计算血管密度(血管数/mm2)。运用统计学方法比较各组间差异。结果:Ⅰ期术后各组大鼠腹部皮瓣全部成活;Ⅱ期术后1周,Ⅰ组皮瓣全部坏死,Ⅱ组、Ⅲ组皮瓣平均成活率分别为(14.68±1.02)%,(16.19±1.71)%(P<0.05);Ⅱ期皮瓣局部组织VEGF平均含量:Ⅰ组243.95±4.37,Ⅱ组240.89±3.11,Ⅲ组239.19±2.61(P>0.05);大鼠平均血管密度6周组较4周组略有增多,但差别不大(P>0.05)。结论:大鼠隐血管束全腹壁预制皮瓣模型,可以作为研究提高预制皮瓣成活率的基础,Ⅰ期手术与Ⅱ期手术之间的时间间隔至少需4周。     

小隐静脉栓塞对腓肠神经营养血管逆行皮瓣影响的实验研究

目的探讨小隐静脉栓塞对远端带蒂腓肠神经营养血管逆行皮瓣的影响。方法将30只大白兔小腿后侧切取远端蒂腓肠神经岛状皮瓣,随机分为三组,每组10个皮瓣。第1组在蒂部保留小隐静脉干;第2组在蒂部远端1cm将小隐静脉干结扎;第3组在蒂部远端1 cm栓塞小隐静脉干。结果第1组皮瓣的小隐静脉充盈较第2、3组显著,且第1组皮瓣均有明显淤血、肿胀。第3组皮瓣存活率（87.5%）明显高于第1组（62.3%）和第2组（81.5%）,差异均具有极显著意义（P〈0.01）。结论在小隐静脉远端栓塞或结扎阻断静脉血流灌入,均能显著提高远端蒂皮瓣的存活率,在蒂部结扎小隐静脉影响皮瓣远端供血和皮瓣成活面积。     

水蛭素对大鼠随意型皮瓣存活的影响

目的 研究水蛭素对大鼠背部超长随意型皮瓣存活的影响.方法 采用改良大鼠"McFarlane flap"模型,将实验动物随机分为水蛭素实验组(水蛭素组)和生理盐水对照组(生理盐水组),水蛭素组局部注射3 ml(30 ATU)水蛭素,生理盐水组则注射3 ml生理盐水,连续注射7 d后分别检测两组皮瓣的存活面积百分比,并取皮瓣近、中、远段(即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区)组织做光镜观察,免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞因子(bFGF)的表达.结果 术后7 d,水蛭素组皮瓣的存活面积百分比为(69.52±3.23)%,生理盐水组为(50.36±2.37)%,水蛭素组显著高于生理盐水组,差异有统计学意义(P＜0.01);水蛭素组皮瓣坏死与存活并存的Ⅱ区,组织水肿、炎性细胞浸润情况明显比生理盐水组轻.水蛭素和生理盐水组皮瓣Ⅱ区的新生血管计数分别为(28.24±4.23)个/mm2和(17.45±5.43)个/mm2,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).通过计算累积吸光度A值(IA),得到水蛭素和生理盐水组VEGF阳性量分别为9262.23±896.99和4938.05±1623.67,bFGF阳性量分别为5122.83±1176.12和2779.45±472.00,水蛭组VEGF及bFGF的表达均高于生理盐水组,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 水蛭素可能通过体内一系列复杂的调控通路,最终增加VEGF、bFGF表达,促进皮瓣新生血管增生,改善皮瓣血供,减轻炎性反应,降低缺血皮瓣的坏死率,从而提高大鼠随意型皮瓣的存活.

Abstract：

Objective To investigate the effect of Hirudin on random skin flap survival in rats.Methods 24 SD rats were randomly divided into control group and experimental group. The "McFarlane flap(3 cm ×9 cm)" rat models were established on the rat dorsum. 3 ml Hirudin (30 ATU) was injected into the flap in the experimental group, while 3 ml saline in the control group. The injection was performed for 7 days. The flap survival area in the two groups was measured. The tissue samples were taken from proximal( Ⅰ ), middle( Ⅱ ) and distal( Ⅲ ) portions of flaps for histologic study. The VEGF and bFGF expression was also detected with immunohistochemistry method. Results 7 days after operation, the flap survival rate was ( 69.52 + 3.23 )% in the experimental group, while ( 50.36 ± 2.37 )% in control group,showing a significant difference between the two groups ( P ＜ 0.01 ). In the middle portion, tissue edema and infiltration of neutrophils in experimental group was markedly slighter than that in control group. The VEGF and bFGF expression and neovascularization was enhanced markedly in experimental group.Conclusions Hirudin can increase the survival of random pattern skin flaps. It may increase the VEGF,bFGF expression through a series of complex regulatory pathway. Then flap neovascularization is promoted and the flap blood supply is increased.     

Gene therapy with adenovirus-mediated VEGF enhances skin flap prefabrication

We investigated the feasibility in rats of enhancing skin-flap prefabrication with subdermal injections of adenovirus-encoding vascular endothelial growth factor (Ad-VEGF). The left saphenous vascular pedicle was used as a source for vascular induction. A peninsular abdominal flap (8 x 8 cm) was elevated as distally based, keeping the epigastric vessels intact on both sides. After the vascular pedicle was tacked underneath the abdominal flap, 34 rats were randomly divided into three groups according to treatment protocol. The implantation site around the pedicle was injected with Ad-VEGF in group I (n = 10), with adenovirus-encoding green fluorescent protein (Ad-GFP) in control group I (n = 14), and with saline in control group II (n = 10). All injections were given subdermally at four points around the implanted vessel by an individual blinded to the treatment protocol. The peninsular flap was sutured in its place, and 4 weeks later, an abdominal island flap based solely on the implanted vessels was elevated. The prefabricated island flap was sutured back, and flap viability was evaluated on day 7. Skin specimens were stained with hematoxylin and eosin for histological evaluation. In two rats from each group, microangiography was performed to visualize the vascularity of the prefabricated flaps. There was a significant increase in survival of prefabricated flaps in the Ad-VEGF group compared to the control groups: Ad-VEGF, 88.9 +/- 6.1% vs. Ad-GFP, 65.6 +/- 9.4% (P < 0.05) and saline, 56.0 +/- 3.4% (P < 0.05). Sections from four prefabricated flaps treated with Ad-GFP revealed multiple sites of shiny deposits of green fluorescent protein around the area of local administration 1 day and 3 weeks after gene therapy. Histological examination done under high-power magnification (x400) with a light microscope revealed increased vascularity and mild inflammation surrounding the implanted vessel in all groups. However, we were unable to demonstrate any significant quantitative difference with respect to vascularity and inflammatory infiltrates in prefabricated flaps treated with Ad-VEGF compared with controls. Microangiographic studies showed increased vascularity around the implanted pedicle, which was similar in all groups. However, vascularization was distributed in a larger area in the prefabricated flaps treated with Ad-VEGF. In this study, the authors demonstrated that adenovirus-mediated VEGF gene therapy increased the survival of prefabricated flaps, suggesting that it may allow prefabrication of larger flaps and have the potential to reduce the time required for flap maturation.     

血管内皮细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子加速预构扩张皮瓣成熟的研究

目的　观察以生物蛋白胶局部缓释血管内皮细胞生长因子 (VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)应用于兔预构扩张皮瓣对细胞增殖及凋亡、血管化进程 ,以及皮瓣成熟的作用。　方法　将新西兰大耳白兔 5 3只随机分为正常、空白、生物蛋白胶、VEGF直接应用、VEGF胶及 b FGF胶共 6组 ,兔耳中央动静脉束植入预构扩张皮瓣 ,14天后形成 3cm× 5 cm岛状瓣。分别进行皮瓣成活面积、激光多普勒血流量、铅丹灌注、墨汁灌注、PCNA免疫组化和 TUNEL 凋亡检测。　结果　两种生长因子应用组皮瓣成活面积较其它组增加 ,血流灌注量增多 ,新生毛细血管密度加大 ,细胞增殖提高、凋亡减少。　结论　 VEGF和 b FGF均能通过刺激细胞增殖和减少凋亡发生来促进血管新生和预构扩张皮瓣成熟 ,用生物蛋白胶缓释生长因子有独特效果。     

脂质体介导血管内皮生长因子对不同时间断蒂大鼠随意型皮瓣的影响

目的 通过血管内皮生长因子基因对大鼠随意型皮瓣的转染,探讨基因治疗对不同时间断蒂的大鼠随意型皮瓣成活的影响.方法 以SD大鼠为实验模型制作背部随意型皮瓣,实验组注入脂质体包裹的PcDNAVEGF165(目的 基因组),对照组分别注入PcDNA(空白质粒组)和生理盐水(生理盐水组),于用药后1、3、5、7 d,每组每时相点分别随机选取10只断蒂,断蒂后7 d处死大鼠,观察下述指标:①皮瓣成活率.②皮瓣组织标本行常规HE染色检测平均微血管数目及内径.③行VEGF免疫组织化学染色检测VEGF表达情况.④取皮瓣组织标本在电镜下观察超微结构.结果 ①皮瓣成活率:1、3、5、7 d断蒂实验组皮瓣成活率分别为(45.45±12.24)%、(82.95±3.81)%、(85.00±3.38)%、(85.96±3.25)%.1 d断蒂实验组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),3、5、7 d断蒂各实验组明显高于相应对照组(P<0.05),3、5、7 d断蒂各实验组则随着断蒂时间的延迟差异无统计学意义(P>0.05).②平均微血管数目及内径:各实验组与相应对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).③各实验组VEGF染色深度明显高于对照组(P<0.05).④超微结构:实验组内有新生血管形成,内皮细胞内可见较多粗面内质网,线粒体等结构,组织内成纤维细胞增多,细胞合成代谢旺盛.结论 皮下注射脂质体介导VEGF基因可提高皮瓣成活率,促进早期断蒂,是一种简单,高效,经济,相对安全的基因治疗方法.     

兔股动脉和静脉预构轴型扩张皮瓣的实验观察

目的 通过兔股动脉、静脉预构轴型扩张皮瓣的微循环血流晕动态变化、光镜下结构的改变及其成活面积,为预构轴型扩张皮瓣的临床应用提供依据.方法 选择新西兰白兔40只,随机分为4组:预构轴型扩张皮瓣组、预构轴型不扩张皮瓣组、单纯预构轴型皮瓣组及无蒂游离皮瓣组,每组4只,前2组股动脉、静脉移位后,预构轴型扩张皮瓣组、预构轴型不扩张皮瓣组分别在肉膜深面置入容量为50 ml长方形皮肤软组织扩张器,预构轴型扩张皮瓣组7 d后开始注水;无蒂游离皮瓣组为对照组,未采取预构及扩张处理.定期对4组皮肤进行微循环血流量检测,并取样进行光镜观察.预构术后52 d,前3组形成以预构股动静脉血管束为蒂的岛状皮瓣,游离皮瓣组则形成无蒂游离皮瓣后均原位缝合,观察其成活面积.结果 预构轴型扩张皮瓣组较其他组微循环血流量增加,成活面积大[(97.54±2.73)%],光镜下改变显著(P<0.05).结论 扩张术能促进预构轴型皮瓣的血管化进程,明显增大预构轴型皮瓣成活面积,增加其移植的安全性.