自身免疫性溶血性贫血患者的血型检定研究

为了观察自身抗体对ABO和RhD血型检定的干扰，对38例自身免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia，AIHA)患者血液标本进行ABO和RhD常规定型，氯奎放散试验后定型及基因定型。结果表明：38例AIHA患者中，ABO血型难定者11例(31.6％)，均为间接抗球蛋白试验阳性及正反定型不合。RhD(-)误定RhD( )1例，并含抗-D。采用氯奎放散试验后血型皆正确检定。结论：AIHA患者的自身抗体干扰血型检定，必须采用多种技术才能正确检定血型，确保安全输血。     

微柱凝胶法检测ABO疑难血型的临床应用

目的 探讨微柱凝胶法(MGT)检测ABO疑难血型的敏感性及影响因素.方法 应用(MGT)法检测38 600例患者的ABO血型,同时用试管法进行复查对照,对正反定结果不一致的血标本,增加离心或37℃孵育时间去除血清中的纤维蛋白和冷凝集素,对血型抗原明显减弱或抗体效价降低者,采用增加定型血清或被检血清的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15-30 min,然后采用(MGT)法检测.结果 MGT法检测ABO血型抗原明显减弱或抗体效价降低者的敏感性高于试管法.MGT法检测ABO血型,对正反定结果不一致者35例,其中患者血浆含纤维蛋白9例、血清蛋白异常增高4例、高效价冷凝集素5例、血型抗原明显减弱8例、抗体效价降低9例.结论 纤维蛋白、高效价冷凝集素、血型抗原减弱或抗体效价降低均可干扰ABO血型鉴定结果.增加离心或37℃孵育时间去除定型血清或患者血浆剂量血清中的纤维蛋白和冷凝集素,增加定型血清或患者血浆的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15-30分钟,然后采用MGT法检测,可提高ABO血型鉴定的准确性和输血安全.     

微柱凝胶法检测ABO疑难血型的临床应用及方法学探讨

目的探讨微柱凝胶法（MGT）检测ABO疑难血型的敏感性及影响因素。方法应用（MGT）法检测38600例患者的ABO血型,同时用试管法进行复查对照,对正反定结果不一致的血标本,增加离心或37~C孵育时间去除血清中的纤维蛋白和冷凝集素,对血型抗原明显减弱或抗体效价降低者,采用增加定型血清或被检血清的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15—30min,然后采用（MGT）法检测。结果MGT法检测ABO血型抗原明显减弱或抗体效价降低者的敏感性高于试管法。MGT法检测ABO血型,对正反定结果不一致者35例,其中患者血浆含纤维蛋白9例、血清蛋白异常增高4例、高效价冷凝集素5例、血型抗原明显减弱8例、抗体效价降低9例。结论纤维蛋白、高效价冷凝集素、血型抗原减弱或抗体效价降低均可干扰ABO血型鉴定结果。增加离心或37℃孵育时间去除定型血清或患者血浆剂量血清中的纤维蛋白和冷凝集素,增加定型血清或患者血浆的剂量,预先将抗原抗体混合置37℃反应15—30分钟,然后采用MGT法检测,可提高ABO血型鉴定的准确性和输血安全。     

ABO疑难血型鉴定1例

输血是外科手术、出血性疾病、急性感染伴休克等疾病常用的治疗方法。但是,输血时常常在血型鉴定中遇到ABO亚型、白血病抗原性减弱、新生儿抗体未形成等导致血型正反定型不符〔1〕。本科最近遇到一例因天然抗-B抗体减弱而导致ABO血型鉴定困难,现报告如下。     

Natural and recombinant A and B gene encoded glycosyltransferases

The human blood group A and B synthesizing enzymes are glycosyltransferases that catalyse the transfer of a monosaccharide residue from UDP-GalNAc and UDP-Gal donors, respectively, to alphaFuc1,2-Gal terminated blood group H acceptors. Extensive investigations of their substrate specificity and physical properties have been carried out since their initial discovery. These studies demonstrated a rigid specificity for the acceptor structure, crossover in donor specificity and immunological similarity along with chromatographic differences. Cloning of the enzymes has shown that they are highly homologous, differing in only four of their 354 amino acids. Changing the residues Arg176-->Gly, Gly235-->Ser, Leu266-->Met and Gly 268-->Ala converts the enzyme specificity from blood group A to blood group B glycosyltransferase. Structure function investigations have been carried out by systematic interchange and modification of these four critical amino acids. These studies have shown that donor specificity is attributed to the last two amino acids. Mutants have also been produced with greatly enhanced turnover rates as well as hybrid A/B enzymes that catalyse both reactions efficiently.     

保山市72928例献血员ABO、Rh血型分布调查

目的了解保山市献血员中主要民族的ABO、Rh血型分布,建立本地稀有血型献血员档案,满足无偿献血员的招募和临床用血需要。方法用微板法对ABO、Rh血型进行检测。抽取124名RhD阴性者,用试管法对C/c、E/e进行筛选。结果 7个主要献血民族中,汉、彝、白、傈僳、回族ABO血型分布为A>O>B>AB;布朗、傣族为O>B>A>AB;Rh阴性比率:汉族0.33%,彝族0.35%,白族0.09%,布朗族0.00%,傈僳族0.32%,傣族0.21%,回族0.18%;Rh表型主要有ccdee(60.5%)、Ccdee(33.1%)、CCdee(4.0%)、ccdEe(2.4%),没有发现其他表型。结论保山市汉、彝、白、傈僳、回族献血员ABO血型分布率与中国汉族人群的分布相符;布朗、傣族则与其不同;Rh阴性频率处于0.00%~0.35%之间,体现了血型分布在本市的地域和民族特点。     

Challenges in the transfusion management of a 15-month-old pediatric patient with Bombay blood group phenotype

Bombay blood group phenotype is often mistyped as O group which can lead to hemolytic transfusion reactions. There are a very few case reports of Bombay blood group phenotype in pediatric age group. Herein, we report an interesting case of Bombay blood group phenotype in a fifteen-month-old pediatric patient who presented with features of raised intracranial pressure and required an emergency surgery. The Bombay blood group was detected on detailed immunohematology work up which was further confirmed by molecular genotyping. The challenges faced in developing countries for transfusion management of such a case have been discussed.     

Basic principles of the ABO and Rh blood group systems for hemapheresis practitioners

Since 1901, more than 20 distinct blood group systems have been identified and characterized. Yet, the ABO System, the first described, remains the most clinically significant in blood transfusion and organ transplantation medicine. The ABO antigens are the only cellular antigens which consistently produce a potent, naturally occurring antithetical antibody which circulates in the plasma of healthy individuals. ABO antigens are expressed on most blood cells, organs, and tissues and in most body fluids. Expression of the antigens results from the interaction of several separate, but closely related genes: ABO. H. and Secretor (Se). Blood group specificity depends upon the inheritance of the ABO and H genes, and the subsequent expression of these antigens on the red blood cells. The “D” or Rh₀ antigen is the most clinically significant blood group antigen next to the ABO antigens. The D antigen belongs to the Rh System, which consists of a trio of genes that are so closely linked that they are inherited as a package. The antigens are an integral part of the red blood cell membrane. They lend stability to the membrane structure when they are normal, but result in decreased red cell survival when absent. Rh antibodies are immune antibodies requiring a stimulus and can cause significant transfusion and childbearing complications if present. © 1992 Wiley-Liss, Inc.     

BECKM AN PK7300全自动血型检测系统可疑结果的原因分析

目的：探讨BECKMAN PK7300全自动血型检测系统在血站实验室用于血型筛查时出现结果可疑的原因以及应用中的注意事项。方法选取天津市血液中心2015年5月至2015年8月ABO及Rh血型经微板法鉴定后的无偿献血者的标本14417例,再由PK7300进行检测,统计分析ABO及Rh血型结果判读的正确率、错误率以及对可疑结果的原因进行分析。结果ABO血型结果一次性判读正确率为99．01％,失败率0．99％（其中正反定型不符0．48％）,无错误判读;Rh（D）血型正确判读率100％。结论 BECKMAN PK7300全自动血型检测系统结果准确可靠,实现了血型检测的自动化、标准化,减少人为因素对实验的影响,反应图像可长期保存,保证结果的可溯性,节约成本,适用于血站实验室血型批量化检测需要。     

2种微柱凝胶卡鉴定3岁以下婴幼儿ABO及血型对比研究

目的比较国产微柱凝胶血型鉴定卡（甲卡）与进口微柱凝胶血型鉴定卡（乙卡）鉴定3岁以下婴幼儿ABO及RhD血型的效果。方法首先采用甲卡对3岁以下婴幼儿EDTA抗凝血标本进行A抗原、B抗原及D抗原初步鉴定,再采用乙卡对同一批婴幼儿不抗凝血标本的A抗原、B抗原、D抗原进行复核,对比两者血型鉴定结果符合程度及凝集强度。结果共检测6月龄以下患儿3 938例,其中早产儿96例,足月新生儿355例,血液病患儿570例,其他疾病患儿2 917例。A抗原、B抗原、D抗原初检及复检两种卡符合率100%;早产儿A、B抗原凝集强度3＋以上者两种卡均达83%左右,两者相比差异无统计学意义（P〉0.05）。检测7月龄至3岁患儿12 500例,A抗原、B抗原、D抗原初检及复检符合率100%。检出A亚型、B亚型各2例。结论甲卡在鉴定3岁以下婴幼儿A抗原、B抗原、D抗原的能力方面与乙卡没有差别,两者均能够保证患儿血型鉴定及安全输血的需求。     

甲氧基聚乙二醇修饰改造RhD(+)血型的初步研究

Rh血型与ABO血型一样是重要的血型系统，Rh血型不符会引起严重的输血反应及新生儿溶血病。中国人群中RhD阴性血型的比例仅为0．2％-0．5％，将RhD阳性红细胞改造成RhD阴性红细胞在临床输血中有重要的意义。本研究用4种不同端基的甲氧基聚乙二醇(mPEG)，修饰A型、B型、AB型和O型的RhD( )红细胞，比较4种mPEG衍生物对RhD抗原的修饰效果。同时观察mPEG修饰对红细胞形态、结构和功能的影响。结果表明，mPEG—BTC(苯并三唑端基PEG)较其他3种PEG的修饰效果好，在1mmol／L时可以有效地遮蔽红细胞表面RhD抗原，而对红细胞形态、渗透脆性、自身溶血、乙酰胆碱酯酶、胆固醇、ATP、2，3-DPG含量以及变形性无影响。结论：初步实现了将RhD( )红细胞修饰改造成RhD(-)红细胞的目的。     

扬州地区献血者ABO及Rh血型人群分布及其相关性调查

目的 探讨扬州地区献血者ABO,Rh血型人群分布状况,并对其相关性进行调查研究.方法 选择2010年1月至2011年6月本市中心血站采集的街头无偿献血者血液样本63925例作为研究对象.采用U型微量板法对血液样本进行ABO正、反定型,Rh血型鉴定及分型,Rh阴性确认试验采用3种不同厂家生产的IgG抗D试剂进行抗人球蛋白法确认.计算检测样本基因频率、单倍型频率及预期值,并对表型观察值与预期值进行X2检验,以此检验Hardy-Weinberg吻合度.结果 ABO血型基因频率为r＞p＞q,表型分布特征为O＞A＞B＞AB;Rh表型人群分布为CCDee＞CcDEe＞CcDee＞ccDEE＞ccDEe＞CCDEe＞ccDee,ccdee＞Ccdee＞CCdee＞ccdEe＞CcdEe＞ccdEE,单倍型频率为CDe＞cDe＞cDE＞CDE,cde＞Cde＞cdE＞CdE,基因频率特点为D＞d,C＞c,e＞E.经X2检验,ABO血型与Rh血型的预期值与观察值之间比较差异均无统计学意义(P＞0.05),Hardy-Weinberg吻合度良好.结论 本地区ABO血型与Rh血型分型人群分布符合群体遗传学中的Hardy-Weinberg群体基因平衡定律.通过对扬州地区的献血者ABO,Rh血型分布调查,可准确掌握扬州地区献血人群的血型分布规律,对于开展无偿献血者招募、合理制定采供血计划和血液储备及稀有血型库的建立均有着重要的参考意义和指导价值.     

中国人群LW血型基因多态性的研究

本研究探讨中国人群Landsteiner—Wiener（LW）血型基因的多态性。随机采集深圳市血液中心160名非血缘关系无偿志愿捐血者外周血样EDTA抗凝血标本，并提取DNA。对这160例DNA标本直接进行LW血型基因的第一外显子测序分析，同时用优化的LWa／LWb等位基因PCR—SSP方法进行了的基因分型。结果表明：在对这160例捐血者基因组DNA的分子生物学研究中发现LW血型等位基因均为LWa纯合子。结论：在中国人群中LWa等位基因更常见，本次研究中100％的献血者LW血型等位基因均为LWa，目前还未发现LWb等位基因。     

ABO反定型试剂红细胞的质量控制

已知血型的试剂红细胞是ABO血型的血清学鉴定中检测抗体必不可少的试剂。为了提高ABO血型检定结果的准确性，解决自制试剂红细胞无标准和无质控的问题，本研究组建立了ABO反定型试剂红细胞的质控方法，进行了试剂红细胞的特异性和亲和性检测、振荡检测、流式细胞术和原子显微镜观察。通过筛选建立了质控参考品，并在此基础上确定质量检定标准及质控方法，同时对制备的3批次试剂红细胞进行了评价。研究结果表明：制备的反定型试剂红细胞既能保证质量和性能的稳定，又能最大限度地降低批次间的差异。结论：制备的AB0反定型试剂红细胞解决了自制红细胞的质控问题，并能提高血型检定结果的准确性。     

中国南京地区十个红细胞血型系统稀有抗原的大规模调查

本研究调查南京地区人群中稀有血型杭原的类型及分布情况,为稀有血型病人的临床用血和献血招募提供基础性资料.采用4M尿素对红细胞进行Kidd血型系统的Jk(a-b-)表型筛选;利用抗血清对H系统的H-、MNS系统的GPA-,Gerbich系统的GPC-、Ii系统的i+,Lutheran系统的Lub-表型进行筛选;对Kell...     

血型血清学与电子交叉配血试验的比较研究

目的初步探讨电子交叉配血在临床输血中的应用价值。方法采用微孔板法检测4 126名献血者的ABO和Rh系统血型;用微柱凝胶法筛查意外抗体及鉴定抗体特异性;在此基础上建立献血者数据库。采用微柱凝胶法对10 685名住院患者作常规ABO和Rh(D)血型以及意外抗体筛查和鉴定,配血以血型血清学和电子交叉配血2种方式进行;对9 996名住院患者以ABO和Rh(D)血型相容作血清学交叉配血,并对其中2 920人作电子交叉配血;同时对689名住院患者作ABO和Rh系统血型鉴定和意外抗体筛查,对意外抗体筛选结果为阴性的患者作电子和血清学交叉配血。结果初步建立了可应用于电子交叉配血的献血者数据库,对2 920名经ABO和Rh(D)血型检测及无意外抗体的住院患者和657名经ABO和Rh血型检测及无意外抗体的住院患者,与4 113名献血者分别作了6 109次和1 227次电子交叉配血与血清学交叉配血试验,2种方法结果完全一致;电子交叉配血与血清学交叉试验配血时间分别为15和45 min。结论电子交叉配血的建立和临床应用是可行的,除了同样准确外,其最大的优势是比血清学交叉配血试验时间明显缩短。     

O型孕妇血清IgG抗AB效价测定的临床意义

目的对夫妻血型不合的O型孕妇进行血清IgG抗AB效价测定并初步探讨其临床意义。方法采用2-me裂解-37℃吸收-56℃释放-微柱凝胶法分别检测O型男性献血员血清和不同胎次孕妇的血清IgG抗AB效价。结果O型男性献血员血清IgG抗AB总阳性率为18．3％（11／60），且IgG抗A或抗B效价小于512者血清中均未检到IgG抗AB；孕妇组的总阳性率为52．8％（38／72），其中第一胎孕妇血清IgG抗AB阳性率为47．4％（18／38），非第一胎孕妇血清IgG抗AB阳性率为58．8％（20／34）。统计学结果表明，孕妇组与献血员组的IgG抗AB阳性率有显著性差异（P〈0．01）。结论IgG抗AB与妊娠可能密切相关，胎母血型不合的妊娠（包括流产），可能会导致O型孕妇血清IgG抗AB效价升高。通过IgG抗AB效价的动态测定有望对新生儿溶血病或者胎儿血型进行预测。     

用噬菌体呈现技术表达抗人红细胞血型B抗原的单链抗体

本研究的目的是构建表达抗人红细胞血型B抗原5D12杂交瘤细胞的单链抗体(ScFv)。应用重组噬菌体抗体技术,分离与构建5D12 McAb单链抗体基因,将其克隆入噬粒pHEN-1中,转化E.coli TGl,M13KO7辅助噬菌体援救构建5D12噬菌体单链抗体库;用完整红细胞亲和富集法淘选阳性重组噬菌体,重组噬菌体鉴定及序列测定分析;免疫杂交试验检测重组噬菌体单链抗体的特异性抗原活性。经M13K07援救E.coli TGl转化菌中的pHEN-1重组噬菌体,得到滴度为3×10~9pfu/ml噬菌体单链抗体库;免疫杂交试验证实表达产物保留了亲本单抗对人红细胞血型B抗原的特异性亲和力。本研究成功地构建5D12 McAb单链噬菌体抗体库,为进一步研制高特异性和高亲和力的基因工程原核血型检定抗体试剂奠定了基础。     

B等位基因调控区突变可能导致弱B表型

目的 :对1例血清学血型鉴定困难的患者进行ABO基因分型,分析引起血型鉴定困难的原因及其突变基因。方法:采用微柱凝胶法及全自动血型鉴定系统,对该例患者进行血清学血型鉴定及抗人球蛋白试验和抗体筛查,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增结合Sanger测序及PCR产物克隆的方法,分析该患者及其父母ABO基因的增强子、启动子、第1~7外显子区及其侧翼序列,寻找变异位点。结果:该例患者的血清学正定型为ABweak,ABO基因外显子分型结果为A102/B101,其B等位基因增强子CBF/NF-Y微卫星区比正常的4个43 bp串联多了一个串联,B等位基因启动子缺少-35~-18的18 bp序列。结论:该患者B等位基因调控区内的变异很可能是引起其B抗原弱表达的原因。     

江西地区汉族人群Diego和Dombrock血型基因频率调查

目的调查200名江西地区汉族随机献血者的Diego(Di)和Dombrock(Do)2个稀有血型系统,取得相应基因频率资料,为临床输血提供相应资料。方法采集200名江西地区汉族随机献血者,应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法检测Di和Do 2个血型系统。结果 200名随机献血者中Di血型查出2种基因表现型,分别为Dia-b+196例、Dia+b+4例,Dia+b-及Dia-b-未检出;Dia基因频率为0.01,Dib基因频率为0.99。Do血型查出3种基因表现型,分别为Doa+b-2例,Doa+b+16例,Doa-b+182例;Doa基因频率为0.05,Dob基因频率为0.95。结论本地区Di血型系统的表现型多数为Dia-b+、少数为Dia+b+,Dia+b-及Dia-b-未见;Do血型系统的表现型多数为Doa-b+、少数为Doa+b+和Doa+b-。