骨髓增生异常综合征患者CD34、CD95的表达及临床意义

目的研究骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓CD34^＋细胞比率及CD34^＋细胞CD95（Fas）表达率并探讨其临床意义。方法应用流式细胞术检测26例MDS患者骨髓单个核细胞（BMMNC）中CD34^＋细胞比率及CD34^＋细胞Fas表达率。结果MDS患者CD34^＋细胞比率RAEB、RAEB—T组较RA组、正常对照组显著增高（P〈0．01）;RAEB、RAEB-T组间比较差异有显著性（P〈0．01）;RA组与正常对照组之间则无显著性差异（P〉0．05）。CD34^＋细胞Fas表达率RA、RAEB、RAEB—T组均较正常对照组显著增高（P〈0．01）;RA与RAEB、RAEB—T组间比较差异有显著性（P〈0．01）;RAEB与RAEB—T组间比较则无显著性差异（P〉0．05）。结论CD34^＋细胞比率进行性升高系提示MDS病情进展的标志;CD34^＋细胞Fas表达率在MDS显著增高但于疾病恶性转化过程中其表达率逐渐降低;细胞增殖与凋亡异常可能系MDS主要发病机制之一。     

再生障碍性贫血和骨髓增生异常综合征患者骨髓CD34+细胞及其粒细胞集落刺激因子受体表达的研究

目前普遍认为，再生障碍性贫血（AA）是一类T淋巴细胞功能亢进引起的造血功能衰竭性自身免疫性疾病，而骨髓增生异常综合征（MDS）是一组起源于CD34^＋造血干／祖细胞的造血系统恶性肿瘤，尽管二者发病机制不同，但均可表现为全血细胞减少。为了深入揭示AA和MDS本质，我们用流式细胞术（FCM）对AA和MDS患者CD34^＋细胞占骨髓单个核细胞（BMMNC）的比例及其表面的G—CSF受体（G—CS—FR）表达水平进行研究，现将结果报道如下。     

rhG-CSF对骨髓采集物中记忆T细胞上黏附分子表达的调节作用

本研究主要探讨人重组粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）对骨髓采集物记忆T细胞上黏附分子表达的调节作用。采用流式细胞仪检测稳态骨髓（SS—BM）和rhG—CSF预激的骨髓（G—BM）中CD4^＋、CD8^＋T细胞百分比及其记忆细胞表面黏附分子CD49d、CD54、CD62L和CD11a的表达。结果显示：rhG—CSF应用后骨髓采集物中CD4^＋、CD8^＋T细胞在淋巴细胞中的比例明显降低（P〈0．001）,记忆T细胞的比例没有明显变化;CD49d在CD4^＋和CD8^＋T细胞的表达百分比显著下降（p〈0．05）,但在记忆T细胞的表达百分比没有明显的变化;CD54在CD4^＋及其记忆T淋巴细胞和CD8^＋T淋巴细胞的表达百分比明显降低（P〈0．05）,而在CD8^＋记忆T细胞的表达百分比没有明显变化;CD62L在CD4^＋、CD8^＋及其记忆T细胞的表达百分比显著下降（P〈0．01）;CD11a在CD4^＋及其记忆T细胞的表达百分比明显降低（p〈0．05）,而在CD8^＋及其记忆T细胞的表达百分比没有明显变化。结论：rhG—CSF部分下调骨髓中CD4^＋、CD8^＋以及相应的记忆T细胞上黏附分子表达。     

四色流式细胞术分析骨髓增生异常综合征原始细胞免疫表型

为了研究骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓原始细胞免疫表型特征，应用四色流式细胞术对常规设门及二次设门策略选取的29例MDS患者的骨髓细胞悬液中，CD34^＋细胞进行免疫表型分析。结果表明：①随着MDS的进展（RA／RAS→RAEB→RAEB—T），根据CD45／SSC图中选取的原始细胞群中，CD34^＋细胞比例逐渐增高．分别为8．0％、46．4％、76．8％，各亚型之间差别有显著意义（P〈0．05）。②在CD45 vs SSC散点图上，设门所取的原始细胞抗原表达随着RA／RAS→RAEB→RAEBT的进展，HLA—DR、CD13、CD33、CD117表达逐渐增高，CD15表达逐渐减低，差别均有显著意义（P〈0.05）。③在CD45VSCD34散点图上二次设门取CD34^＋原始细胞行抗原表达的分析，同样异常表达HLA—DR及髓系抗原CD13、CD33和CD117，比例高于常规分析法（P〈0．05），CD15比例减低，在RA／RAS中CD13、CD33、CD117和HLA—DR的表达较常规分析的原始细胞比例明显增高（P〈0.05），相关抗原的表达率在各亚型间差别无显著意义（P〉0．05）。结论：常规设门法能反映MDS疾病的进展，而二次设门策略则更能反映MDS原始细胞的生物学特征，CD34的异常表达代表原始细胞的不成熟性和异质性，在临床高度怀疑但形态学和细胞遗传学不能诊断时，原始细胞免疫分型对MDS的诊断更具意义。     

rhG-CSF动员的外周血采集物与稳态骨髓中CD4^＋CD8^＋初始及记忆T细胞亚群的比较

本研究探讨重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）动员的外周血采集物（G—PB）与稳态骨髓（SS—BM）中CD4^＋、CD8^＋初始、记忆T细胞亚群的差异。依据细胞表面CIM5RA和CD62L的表达将CD4^＋、CD8^＋T细胞划分为初始T细胞（naive，CIM5RA^＋CD62L^＋）、中心记忆T细胞（centralmemory，TCM，CIM5RA—CD62L^＋）、效应记忆T细胞（effeetor memory，TEM，CIM5RA^-CD62L^-）、终末分化效应记忆T细胞（terminally difierentiated effeetor memory，TTTp，CIM5RA^＋CD62L^-）。用流式细胞仪测定G—PB与SS—BM中CD4^＋、CD8^＋初始和记忆T细胞的比例组成，并计算每微升采集物中各细胞亚群的绝对数量。结果表明：G—PB中CD4^＋、CD8^＋T细胞的比例组成及CD4^＋／CD8^＋比值均高于SS—BM（P〈0．05）；G—PB中CD4^＋初始T细胞的比例显著低于SS—BM（P〈0．001），而CD4^＋TEM比例显著高于SS—BM（P〈0．001）；G—PB中CD8^＋初始和记忆T细胞亚群的比例与SS—BM无显著差异（P〉0．05）；与SS—BM相比，G—PB中CD4^＋CD62L^＋T细胞的比例明显降低（P=0．001），每微升G—PB移植物中的各淋巴细胞亚群均明显高于SS—BM（P〈0.001）。结论：G—PB与SS—BM中CD4^＋、CD8^＋初始和记忆T细胞亚群在相对和绝对数量方面存在明显的差异，这种差异可能影响G—PB和SS—BM移植后急性、慢性移植物抗宿主病发生率及其程度的异同。     

骨髓增生异常综合征患者CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞、调控基因FOXP3的表达及意义

目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞）和调控基因FOXP3的表达及意义。方法分离22例MDS患者[MDS组,根据MDS分型标准分为：难治性贫血组（RA组）6例、难治性血细胞减少伴有多系发育异常组（RCMD组）11例、难治性贫血伴原始细胞增多组（RAEB组）5例]和8例正常健康者骨髓单个核细胞,采用免疫荧光标记和流式细胞仪检测CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞占CD4^＋ T细胞比例;提取骨髓单个核细胞RNA,采用RT-PCR检测FOXP3基因的表达水平。结果MDS组CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例、FOXP3基因表达水平与正常对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;RA组、RAEB组CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例、FOXP3基因表达水平与正常对照组比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）;RCMD组CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例、FOXP3基因表达水平与正常对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;RCMD组、RAEB组CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例、FOXP3基因表达水平与RA组比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）;RA组、RCMD组CD4^＋ CD25^＋ Treg比例、FOXP3基因表达水平与RAEB组比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）。结论MDS患者CD4^＋ CD25^＋ Treg占CD4^＋ T细胞比例及FOXP3基因表达水平随预后危险级别的升高而升高,提示免疫异常是MDS疾病的发生、发展的一个促进因素。     

rhG-CSF对健康供者外周血和骨髓免疫特性影响的比较

本研究探讨rhG—CSF对健康供者外周血采集物（G—PB）和骨髓采集物（G—BM）免疫学特性影响的异同。用MTT法和夹心酶联免疫复合物（ELISA）法检测G—PB和G—BM中T淋巴细胞增殖能力和IL-4、IFN-7的分泌，并用流式细胞术测定两种移植物的T细胞亚群、树突状细胞（DC）亚群、单核细胞及共刺激分子CD28的表达。结果表明：G—PB中淋巴细胞，CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞，DC1、DC2以及单核细胞的含量，CD4／CD8的比值高于G—BM（P〈0，001）。G—PB的T淋巴细胞增殖能力高于G—BM（P〈0．05）；每微升G—PB移植物中T淋巴细胞分泌细胞因子IFN-γ,IL-4的量均明显高于G—BM，且G—PB中IL-4／IFN-γ比值小于G-BM（P〈0．001），DC2与T淋巴细胞的比值也低于G—BM（P〈0．01）；而G-PB中CD4^＋、CD8^＋细胞上CD28表达的百分比和总体表达均高于G—BM（P〈0．001）。结论：rhG—CSF体内应用诱导G—PB和G—BM产生的T细胞免疫低反应性是有差异的，而两者之间的差异是G—PB和G—BM移植后移植物抗宿主病（GVHD）发生率和程度不同的免疫学基础。     

骨髓增生异常综合征淋巴细胞亚群及其激活状态的分析

本研究探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者外周血T细胞亚群，B细胞，NK细胞数量及激活状态的临床意义．采用流式细胞术对30例MDS患者外周血T细胞，B细胞，NK细胞及其表面活化分子CD28，CD45RA，CD45RO，CD69，HLA—DR的表达进行检测和分析。30例MDS患者中低危组（RA＋RAS）22例，高危组（RAEB＋RAEBT）8例。结果表明：MDS组T细胞（CD3^＋细胞）的百分率低于正常对照组，CD4^＋CD45RA^＋细胞（未致敏CD4^＋细胞）的数值低于正常对照组。MSD组早期活化T细胞（CD3^＋CD69^＋细胞）和晚期活化T细胞（CD3^＋HLA—DR^＋细胞）的数值均显著高于正常对照组。低危组（RA和RAS）主要表现为T细胞活化功能的改变：早期活化T细胞（CD3^＋CD69^＋细胞）和晚期活化T细胞（CD3^＋HLA—DR^＋细胞）比例均增高，以及B细胞数量的减少。高危组（RAEB和RAEBT）主要表现为T细胞亚群数量的改变：CD3^＋细胞，CD3^＋CD4^＋CD8^-细胞（T辅助细胞）数量的减少，CD3^＋细胞HLA—DR和CD69的表达并不增高。NK细胞数量减少。结论：MDS病人存在有T细胞数量和功能的异常，且随着病情的进展而发生改变，所以T细胞亚群及活化功能的检测对于判断疾病的进程和指导治疗具有重要的意义。     

G-CSF对慢性粒细胞白血病患者bcr/abl+-CD34+细胞增殖、分化的影响

目的了解G-CSF对bcr／abl^＋-CD34^＋细胞增殖、分化的影响。方法采集慢性粒细胞白血病（CML）患者的bcr／abl^＋-CD34^＋细胞，分别以0、10、100、1000ng／ml的G-CSF与之共培养，并以正常骨髓CD34’细胞为对照，通过锥虫蓝拒染法、流式细胞术和光学显微镜观察研究其细胞增殖、周期分布、抗原分化和形态变化特点。结果所有实验组bcr／abl^＋-CD34^＋细胞均明显增长，其中G-CSF10ng／ml组培养48、96h，其细胞数显著高于同期无G-CSF组（P〈0．05）；而正常CD34^＋细胞数只在G-CSF存在的情况下增长明显，其中G-CSF100ng／ml组培养48、96、144h细胞数均显著高于同期无G-CSF组（P值分别为〈0．05，0．01，0．01）；G-CSF10、100、1000ng／ml组的bcr／abl^＋-CD34^＋细胞培养144h其Go／G1期比例显著低于G-CSF空白组（P〈0．05）；而正常CD34^＋细胞G-CSF10、100、1000ng／ml组培养48和96h其Go／G1期比例均明显低于无G-CSF组（P〈0．01）；bcr／abl^＋-CD34^＋细胞及正常CD34^＋细胞CD34抗原表达均随培养时间延长而下降，伴随CD33和CDl3抗原先升后降，其变化与G-CSF浓度无关。但bcr／abl^＋-CD34^＋细胞的各抗原分化显著快于正常CD34^＋细胞。bcr／abl^＋-CD34^＋细胞和正常CD34^＋细胞均随着增殖分化表现出终末细胞的形态特征。结论G-CSF能促进bcr／abl^＋-CD34^＋细胞及正常CD34^＋细胞的增殖，但并非前者增殖的必要条件。bcr／abl^＋-CD34^＋细胞比正常CD34^＋细胞分化更快，但两类细胞的分化速度均与G-CSF浓度无关。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓CD34-和CD34+细胞凋亡与增殖的意义及对生存的影响

本研究分析骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓CD34^＋和CD34-细胞凋亡和增殖情况,探讨MDS的发病机制,并判断其与疾病预后的关系。流式细胞术分析20例高危MDS、20例低危MDS患者及10例正常对照者骨髓CD34^＋细胞的比例、CD34^＋细胞和CD34-细胞凋亡、增殖的百分率,计算各组中的凋亡／增殖（A／P）比。并用单变量和多变量生存分析法分析CD34^＋细胞和CD34-细胞增殖和凋亡对预后的影响。结果表明：①MDS高危组患者骨髓CD34^＋细胞的比例明显高于低危组（P〈0．05）,而低危组与对照组比较无显著差异;②CD34^＋,CD34-细胞的凋亡率在MDS低危组中均为最高,明显高于MDS高危组和对照组。在低危组中,CD34-细胞的凋亡率为（80．36±1．82）％,明显高于CD34^＋细胞的（54．75±2．18）％（P〈0．05）,而在高危组中,CD34^＋,CD34-细胞的凋亡率无显著差异;③CD34^＋细胞的增殖率在MDS高危组中最高,明显高于低危组和对照组,而CD34-细胞的增殖率在MDS高危和低危组间无显著差异。高危组CD34^＋细胞的增殖率为（50．67±3．37）％,明显高于CD34-细胞的（30．99±1．96）％（P〈0．05）;④CD34^＋、CD34-细胞的A／P值在MDS低危组均明显高于高危组和正常对照组,而CD34-细胞的A／P值在MDS高、低危组均明显高于CD34^＋细胞的A／P值（P〈0．05）。此外,CD34^＋细胞的凋亡率与生存及预后明显相关。结论：CD34^＋细胞百分率随MDS危险度增加而逐渐增加,在低危组中以CD34-细胞的凋亡占主导,随着病情进展,在高危组中则以CD34^＋细胞的增殖占主导,提示异常的凋亡和增殖在MDS的发生和发展中起重要作用。此外,CD34^＋细胞的凋亡率可能是独立的预后不良因素,抑制凋亡可能诱导MDS向白血病的转化。     

抑癌基因pten在骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病的表达

为了研究pten基因在骨髓增生异常综合征（MDS）、急性髓系白血病（AML）患者中的表达及其意义，采用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫印迹杂交（Western blot）方法检测Jurkat细胞株、35例MDS、45例AML及20例正常人骨髓有核细胞中pten mRNA及其蛋白的表达。结果表明：pten mRNA在阴性对照Jurkat细胞株不表达。MDS组的阳性表达率（77．1％）低于正常对照组（90．0％），但差异无统计学意义（P〉0．05）；AML组阳性表达率（60．0％）低于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；MDS—RAEB组阳性表达率（70．0％）低于MDS—RCMD组（86．7％），初发／复发AML组阳性表达率（53．3％）低于完全缓解AML组（73．3％），但差异均无统计学意义（p〉0．05）。对各组pten mRNA相对表达量分析发现，MDS及AML组均明显低于正常对照组（P〈0．005）；MDS-RAEB组低于MDS-RCMD组（P〈0．05）；初诊／复发的AML组明显低于完全缓解的AML组（P〈0．001）；MDS组与AML组相比，差异无统计学意义（p〉0．05）。PTEN蛋白表达阳性率在MDS组（65．7％）及AML组（54．8％）均低于正常对照组（90％）（P〈0．05）；MDS—RCMD组（80．O％）与MDS—RAEB组（55．0％）相比，阳性表达率均无统计学意义（P〉O．05），但初诊／复发的AML组（44．4％）与完全缓解的AML组（73．3％）相比，差异有统计学意义（p〈0．05）。结论：pten mRNA在MDS、AML中表达完全缺失并不多见，但表达强度较正常人明显减弱。PTEN蛋白在MDS、AML中阳性表达率低于正常人，且与mRNA表达水平不一致。pten基因的表达异常参与了MDS及AML的发病。     

再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征、急性髓系白血病患者CD8＋T细胞亚群的变化及临床意义

摘要本研究检测再生障碍性贫血（AA）、骨髓增生异常综合征（MDS）和急性髓系白血病（AML）患者细胞毒T细胞亚群平衡及其活性的改变，探讨三种疾病造血异常的细胞免疫机制，为临床治疗选择提供实验室依据。采用流式细胞术检测AA组17例、MDS组35例（其中RA19例，RAEB16例）、AML组15例和正常对照组10例的细胞毒性T细胞（Tc1、Tc2）以及部分T细胞亚群比例并进行对比分析。结果表明：与正常对照组相比，AA组、MDS-RA组Tc1、Tc1／Tc2、CD8＋HLA-DR＋、CD3＋CD8＋CD28＋、CD8＋CIM5RO＋显著升高，Tc2无明显统计学差异，CD8＋CD45RA＋显著减低；MDS-RAEB组Tc1、CD3＋CD8＋CD28＋、CD8＋HLA．DR＋比例显著减低，Tc、Tc1／Tc2无明显变化，CD8＋CD45RA＋减低但差异不明显，CD8＋CD45RO＋显著升高；AML组Tcl、CD3＋CD8＋CD28＋、CD8＋CD45RA＋、CD8＋CD45RO＋、CD8＋HLA。DR＋，Tc1／Tc2显著减低，Tc2显著上升。结论：AA、MDS不同阶段、AML患者的细胞免疫状态不同，在AA和MDS早期阶段，Tc1／Tc2的平衡向Tcl偏移，且伴有T细胞亚群活性增加；而在MDS晚期和AML阶段，则向Tc2偏移，T细胞亚群活性减低。前者可能与骨髓造血衰竭密切相关，而后者可能是恶性克隆免疫挑挽的重要机制之一．     

CD38、CD133抗原在骨髓增生异常综合征中的表达及临床意义

目的 分析CD38、CD133抗原在骨髓增生异常综合征(MDS)中的表达及临床意义.方法 MDS患者31例,其中难治性贫血(RA)21例,RA伴铁幼粒细胞增多(RAS)1例,RA伴原始粒细胞增多(RAEB)9例;各种贫血患者11例(贫血组);以同期收治血常规一系或二系减少但骨髓象正常的非血液病患者10例为对照组;采用流式细胞术对3组患者CD38、CD133表达情况进行分析.结果 31例MDS患者有18例(58.1%)表达CD38,其中RA 12例,占57.1%(12/21),RAEB 6例,占66.7%(6/9);20例表达CD133(64.5%),其中RA 11例,占52.4%,RAS 1例,RAEB 8例,占88.9%.对照组CD38、CD133阳性表达率均为10.0%(1/10),贫血组分别为9.1%(1/11)和18.2%(2/11).与贫血组比较:RA组CD38阳性表达率高于贫血组,差异有统计学意义(x2=6.91,P=0.01).RAEB组CD38及CD133阳性表达率表达亦高于贫血组,差异有统计学意义(x2值分别为7.21、9.90,P值分别为0.01、0.00).MDS组CD38、CD133阳性表达率显著高于对照组(x2值分别为7.02,8.99,P均＜0.05).RA组CD38、CD133阳性表达率亦高于对照组,差异有统计学意义(x2值分别为6.18、5.13,P值分别为0.01、0.02);RAEB组CD38、CD133阳性表达率亦高于对照组,差异均有统计学意义(x2值分别为6.54、11.82,P值分别为0.02、0.00).结论 在常规开展的抗体组合的基础上,利用流式细胞术检测CD38、CD133可提高MDS的诊断率.     

再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病患者CD4＋T细胞亚群转录因子表达的变化及其临床意义

本研究通过检测CD4＋T细胞亚群特异性转录因子的mRNA（T-bet、GA TA-3、Foxp3、RORγt）在再生障碍性贫血（AA）、骨髓增生异常综合征（MDS）和急性髓系白血病（AML）患者外周血中的表达变化,探讨3种疾病的细胞免疫状态及其作用机制.采用实时荧光定量方法检测AA组23例、MDS组42例、AML组17例和正常组16例外周血单个核细胞（PBMNC）中转录因子的T-bet、GA TA-3、Foxp3、RORγt mRNA表达并进行对比分析.结果显示：与正常组比较,AA组患者T-bet、RORγt mRNA的表达均显著增高（P＜0.01）,GATA-3、Foxp3表达减低（P＜0.01）.MDS组T-bet、GATA-3 mRNA表达无显著性变化,而Foxp3、RORγt表达均显著增高（P＜0.05）;MDS-RA组T-bet、RORγt表达均较正常组升高（P＜0.01）,GA TA-3表达显著性减低（P＜0.05）,Foxp3较正常组无显著性差异;MDS-RAEB和AML组T-bet、RORγt表达均低于正常对照（P＜0.05）,而GA TA-3、Foxp3mRNA表达均高于正常对照组（P＜0.01）.结论：AA、MDS不同阶段以及AML患者外周血中CD4＋T细胞转录因子表达水平不同,提示细胞免疫状态有差异,在AA和MDS早期阶段,异常免疫介导的造血细胞过度凋亡在骨髓衰竭中可能起重要作用,而在MDS晚期阶段和在AML时,恶性克隆的大量积聚可能是其主要原因.     

骨髓增生异常综合征富集造血祖细胞半胱天冬酶活性检测及意义

目的　了解骨髓增生异常综合征 (MDS)患者不同阶段骨髓造血祖细胞凋亡的变化及半胱天冬酶caspase3、caspase9的作用。方法　应用负筛选法纯化MDS患者骨髓造血祖细胞 (包括CD3 4 +和CD3 4 -细胞 ) ,通过AnnexinⅤ方法检测其凋亡 ,同时应用分光光度法测定细胞内caspase3、caspase9的活性。结果　①MDS RA组 12例 ,凋亡率为 39.5 % ;RAEB组 10例 ,凋亡率为 31.0 % ,两组凋亡率均明显高于对照组 (P <0 .0 1)。RAEB t/AML组 12例 ,凋亡率为 18.8% ,与对照组相比 ,差异无显著性。②MDS RA组caspase3活性较正常对照升高约 4 5倍 (P <0 .0 1) ,caspase9的活性较正常对照升高约 2 0倍(P <0 .0 1)。RAEB组 ,caspase3活性较正常对照升高约 14倍 (P <0 .0 1) ,caspase9的活性较正常对照升高 2倍余 (P <0 .0 1)。RAEB t/AML组 ,caspase3活性稍高于正常对照 (无统计学意义 ) ,caspase9的活性与正常对照相比 ,差异无显著性。③RAEB组中有 3例最终转为急性髓系白血病 (AML) ,其凋亡率、caspase3和caspase9的平均吸光度值均相应下降。结论　MDS患者骨髓造血祖细胞在疾病不同阶段凋亡率是不同的 ,caspase3、caspase9活性升高 ,可能是造成MDS骨髓造血祖细胞过度凋亡的重要原因 ,caspase9活性下降可能是MDS发展过程中骨髓造     

骨髓增生异常综合征患者骨髓细胞周期及CD34+细胞增殖特征的研究

目的　探讨骨髓增生异常综合征 (MDS)患者骨髓细胞周期分布及CD34 细胞增殖特征。方法　碘化丙锭细胞核染色分析MDS、MDS转化的急性髓系白血病 (MDS AML)和原发性AML患者骨髓G0 /G1期、S期和G2 /M期细胞比例 ;免疫荧光双标法分析 3组患者骨髓CD34 细胞中增殖性抗原Ki6 7的表达。结果　与正常组相比 ,MDS患者和原发性AML患者骨髓单个核细胞 (BMM NC)G0 /G1期细胞比例呈明显增高趋势 [(92 .4 8± 4 .4 8) %、(96 .71± 2 .75 ) %对 (86 .94± 6 .77) % ](P<0 .0 5 ) ,而MDS组与正常组相比 ,S期和G2 /M期比例呈明显降低趋势 [(6 .79± 3.98) %、(0 .86±0 .82 ) %对 (11.97± 7.0 0 ) %、(1.10± 0 .98) % ](P值均 <0 .0 5 )。MDS AML患者与原发性AML相比 ,G0 /G1期细胞为 (91.16± 7.0 9) %对 (96 .71± 2 .75 ) % ,S期为 (7.90± 6 .70 ) %对 (2 .87± 2 .4 9) %、G2 /M期为 (0 .96± 0 .99) %对 (0 .4 3± 0 .4 2 ) % ,S G2 /M期为 (8.84± 7.0 9) %对 (3.34± 2 .83) % (P值均 <0 .0 5 )。MDS患者骨髓CD34 Ki6 7 细胞明显高于正常组 [(1.13± 1.10 ) %对 (0 .2 4±0 .2 2 ) % ](P <0 .0 1) ,MDS低危组患者CD34 Ki6 7 细胞为 (0 .5 4± 0 .4 9) % ,明显低于高危组 [(1.6 9± 1.6 6 ) % ](P <0 .0     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症、再生障碍性贫血和骨髓增生异常综合征患者三种GPI-锚蛋白的表达及临床意义

目的　观察阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)、再生障碍性贫血 (AA ,再障 )和骨髓增生异常综合征 (MDS)患者外周血粒细胞三种GPI 锚蛋白 (GPI AP)CD55、CD59和CD87的表达情况 ,测定血清可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体 (su PAR)水平 ,探讨它们的临床意义。方法　PNH组 2 2例 ,其中4例合并血栓性疾病 ,5例为AA PNH综合征 ;再障组 30例 ,其中重型再障 9例 ,慢性再障 2 1例 ;MDS RA组 2 7例 ;健康对照组 2 0名。以流式细胞术检测外周血粒细胞CD55、CD59和CD87的表达 ,ELISA法检测血清su PAR。结果　 2 0名健康人外周血粒细胞三种GPI AP阳性比例均大于 90 % ,CD59稳定性最好。PNH组三种GPI AP的阳性比例均显著下降 ,血清su PAR水平显著升高 ,与正常对照组比较 ,均有显著性差异。其中 ,频发组较不发作组三种GPI AP的表达率均明显降低 ,CD55的差异有显著性。PNH患者中 ,血栓阳性组较血栓阴性组CD87的表达率降低有显著性 ,血清su PAR水平显著升高。再障组粒细胞CD87表达率较正常对照组显著降低。 5例AA PNH综合征患者三种GPI AP的表达率与PNH患者比较 ,均无显著性差异 ;与再障患者比较 ,均显著降低。MDS RA组三种GPI AP的表达率较健康对照组均无显著性差异。结论　以流式细胞术检测外周血粒细胞CD55、CD59和CD     

骨髓增生异常综合征患者CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞特点及环孢素对其的影响

目的探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastie syndrome,MDS)-难治性贫血(refractory anemia,RA)及难治性血细胞减少伴有多系发育异常(refractory cytopenia with multiple dysplasia,RCMD)患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与白细胞介素(interleukin,IL)-10表达水平,评估环孢素对MDS患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的影响。方法选择2016年1月至2018年1月于新疆维吾尔自治区人民医院25例MDS-RA及RCMD患者(MDS组)和13名健康对照(健康对照组),采用流式细胞术及酶联免疫吸附试验检测外周血标本CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10表达水平,检测MDS-RA及RCMD患者在应用以环孢素为基础的免疫抑制方案治疗前、治疗6个月后及MDS组治疗有效及无效的CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10的表达情况。结果全部25例患者中,13例(52%)有效,12例(48%)无效。MDS组CD4+CD25+FOXP3+Treg占CD4+T细胞比例显著高于健康对照组[(0.37±0.10)%与(0.12±0.06)%,t=2.02,P<0.001]。MDS组IL-10水平显著高于健康对照组[(7.16±1.27)μg/L与(2.75±1.06)μg/L,t=2.03,P<0.001]。MDS治疗有效组CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例低于无效组[(0.15±0.06)%与(0.26±0.08)%,t=1.71,P<0.001],有效组IL-10水平低于无效组[(3.22±1.01)μg/L与(4.25±1.22)μg/L,t=2.06,P=0.030]。25例MDS患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg比例与IL-10表达水平呈正相关关系(r=0.35,P=0.02)。结论MDS患者存在CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与IL-10的表达升高,环孢素治疗后降低。     

骨髓核素显像在再生障碍性贫血鉴别诊断中的应用

目的结合９９ｍＴｃ硫胶体全身骨髓显像对一些长期不能确诊的再生障碍性贫血（再障）病例作出诊断。方法对４７例不完全符合再障诊断标准患者进行９９ｍＴｃ硫胶体全身骨髓显像,９９ｍＴｃ硫胶体注射剂量（３７０～５５０）ＭＢｑ／（２～５）ｍｌ。结果一至两系或全血细胞减少,骨髓增生活跃伴显影骨髓减少及灶状显影组共３０例,确诊为慢性再障２８例、骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）２例,其表现为骨髓显影抑制型１２例、灶状显影型１８例。骨髓显影增强伴外周骨髓扩张组,确诊为ＭＤＳＲＡ８例、ＭＤＳＲＡＥＢ２例,其外周骨髓呈中度以上扩张。再障阵发性睡眠性血红蛋白尿症综合征７例,在病情转化过程中中心骨髓均有轻度增强表现。结论全身骨髓显影不良、显影骨髓总量减少有助于对不典型再障的诊断,显影骨髓分布不均及灶状显影为再障较特异的表现。中心性骨髓活性增强及分布扩张为ＭＤＳ与再障骨髓图像鉴别的重要依据,同时这一现象也有助于确定再障病情的转化。利用骨髓显像解释穿刺结果有实用价值。