补肾中药对雷公藤多苷所致雄性幼鼠生殖损伤的保护作用及最终生育能力的影响

目的: 探讨雷公藤多苷(glycosides of Tripterygium wilfordii,GTW)对雄性幼鼠生殖损伤和损伤后最终生育能力的影响及补肾中药(菟丝子黄酮、六味地黄丸)的保护作用。方法: ①生殖损伤研究:3~4周龄SD雄性幼鼠48只,随机分为4组:空白组(CMC-Na)、雷公藤多苷组(9 mg·kg^-1·d^-1)单独ig,六味组(六味地黄丸1 g·kg^-1·d^-1＋GTW 9 mg·kg^-1·d^-1),黄酮组(菟丝子黄酮0.1 g·kg^-1·d^-1+GTW 9 mg·kg^-1·d^-1)混合ig,持续12周后,处死取一侧睾丸、附睾立即称质量,计算脏器指数,称重后放入固定液中保存,待观察睾丸组织形态学改变;②生育能力研究:成年大鼠100只,每组25只,分组喂养方法同上,持续12周后,将所有大鼠分笼喂养,每笼1只,按照1:1比例放入成年雌性大鼠1只,分3次合笼,每次合笼时间为15 d,合笼后观察雌鼠受孕率、仔鼠离乳存活率、仔鼠生长发育情况。结果: 雷公藤多苷对睾丸病理组织生精细胞肿胀变性,精原细胞、精母细胞、精子细胞明显减少,菟丝子黄酮、六味地黄丸能明显减轻这种损伤;用药12周后雄性幼鼠体重、睾丸质量、睾丸指数、附睾质量、附睾指数与空白组相比无显著性差异(P＞0.05);每次合笼后受孕率、离乳存活率、幼鼠的生长发育与空白组相比无显著性差异。结论: 雷公藤多苷对雄性幼鼠生殖系统的损伤是可逆的,对睾丸的病理组织损伤是可以恢复的,补肾中药具有保护这种病理组织损伤作用;雷公藤多苷对最终的生育能力没有影响,对幼仔生长发育没有影响。     

菟丝子黄酮对雷公藤多苷损伤雄性幼鼠睾丸组织凋亡相关蛋白Bcl-2和蛋白Bax表达的影响

目的：研究菟丝子黄酮对雷公藤多苷（GTW）损伤雄性SD幼鼠睾丸组织凋亡相关蛋白蛋白Bcl-2和蛋白Bax的表达的影响。方法：健康3周龄SD雄性幼鼠36只,随机分为三组：空白组、雷公藤多苷组、菟丝子黄酮＋雷公藤多苷组。免疫组化法测定Bcl-2/Bax表达。结果：各实验组Bcl-2蛋白表达：雷公藤多苷组表达最少,与其他各组之间比较（P〈0.05）差异有统计学意义。空白组表达最高,菟丝子组次之,空白组与菟丝子组之间比较（P〉0.05）差异没有统计学意义。各实验组Bax蛋白表达：雷公藤多苷组表达最高,与其他各组之间比较（P〈0.05）差异有统计学意义。空白组表达最少,空白组与菟丝子组之间比较（P〈0.05）差异有统计学意义。结论：菟丝子黄酮能增强雄性幼鼠生育能力,其机制可能是对抗雷公藤多苷所致雄性幼鼠睾丸组织Bcl-2蛋白表达减少和Bax蛋白表达增强。     

菟丝子黄精颗粒剂对雷公藤多苷所致生殖损伤雌鼠卵巢损伤及smad4 mRNA表达的影响

目的 研究雷公藤多苷(GTW)对卵巢组织smad4 mRNA表达的影响以及菟丝子与黄精的干预作用.方法 采用4周龄SD雌鼠,将实验大鼠据体质量随机分3组,分别为空白对照组、GTW组、干预组,连续灌胃12周后处死动物检测指标.结果 GTW组卵巢次级卵泡数值最小,与空白组间差异有统计学意义(P＜0.05),与干预组间差异也有统计学意义(P＜0.01),空白组与干预组间差异没有统计学意义(P＞0.05);黄体数比较各组间差异没有统计学意义(P＞0.05).GTW组smad4 mRNA表达与空白组间差异有统计学意义(P＜0.01),与干预组间差异也有统计学意义(P＜0.05);空白组与干预组间差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 雌性幼鼠服用雷公藤多苷可造成卵巢组织病理改变,其中smad4 mRNA表达的下降可能是GTW导致雌性生殖损伤的关键点之一.中药菟丝子、黄精可以促进该过程的修复.     

雷公藤多苷致雄性生殖功能损害研究进展

雷公藤多苷作为目前中药治疗肾脏疾病最有效的药物之一,其不良反应表现日益突出。就雷公藤多苷致雄性生殖损害作一综述,从病理生理、生殖内分泌、分子机制、基因遗传等多角度探讨其作用机制。中医认为"肾主生殖",精子的生成有赖于肾阴的濡养和肾阳的温煦,故精子的数量和质量取决于肾中真阳真阴的盛衰,以补肾填精温阳法为治疗之要旨。文章从现代医学和传统中医两方面阐述雷公藤多苷对雄性生殖系统损伤的作用机制,为更安全和广泛的应用雷公藤多苷提供了理论和实验依据。     

补肾中药对雷公藤多苷所致生殖损伤雄性幼鼠血清睾酮及睾丸组织P450scc的影响

目的:研究雷公藤多苷(glycosides of Tripterygium wilfordii,GTW)对幼年雄性大鼠血清睾酮及睾丸组织中睾酮生成酶细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(cyto-chrome P450 side chain cleavage,P450scc)的影响以及补肾中药(菟丝子黄酮、六味地黄丸)对其损伤的干预作用.方法:3～4周龄SD雄性幼鼠48只,随机分为4组:空白组(CMC-Na)、多苷组(9 mg·kg-1·d-1)单独ig,六味组(六味地黄丸1g·kg-1·d-1 +GTW9 mg· kg-1·d-1),黄酮组(菟丝子黄酮0.1 g·kg-1·d-1+GTW 9mg · kg-1·d-1)混合ig,持续给药12周后,处死大鼠留取血清和睾丸组织,采用放免法检测血清睾酮浓度;采用RT-PCR和Western blot检测睾丸组织中p450scc在基因和蛋白水平的表达.结果:GTW组与空白组相比可以明显降低血清睾酮(P＜0.01);六味组与多苷组相比可以明显提高血清睾酮(P＜0.05);在蛋白水平GTW与空白组相比可以明显降低睾丸组织P450scc(P ＜0.05);在基因水平GTW组与其他组比较无显著性差异.结论:GTW对幼年大鼠生殖系统有一定损伤作用;六味地黄丸可以通过提高雄鼠血清睾酮水平而达到保护生殖损伤的作用.     

雷公藤多苷对小儿生殖安全性评价研究的思考

文章详细论述了雷公藤多苷用药的现状以及生殖安全性研究存在着诸多不足等问题,明确提出应加强对雷公藤多苷的生殖毒理研究,这不仅有助于提高雷公藤多苷治疗水平及应用范围,同时对“优生优育”具有现实与深远意义。     

“壮水之主”法减轻雷公藤多苷所致女性生殖损伤的思路探讨

雷公藤多苷是目前最常用的雷公藤制剂之一,具有抗炎、调节免疫等作用,其对临床上某些自身免疫性疾病及肾脏病的独特疗效几乎是其他类似药物所无法替代的,但其可能引起的生殖损伤是阻碍其在临床应用的瓶颈所在。女性患者在临床使用中常出现月经周期紊乱、经量减少甚至闭经、不孕等症状,其主要的毒性机制在于损伤卵巢的生殖及内分泌功能和抑制卵泡的生长发育等,故在临床用药时,了解雷公藤多苷对女性生殖的损伤作用、掌握其解毒方法十分必要。然而针对以上问题,目前并没有明确的解决方法。中医理论认为“肾主生殖”,且肾阴肾精与女性经卵的关系密切,故考虑雷公藤多苷所致生殖系统损伤隶属于肾虚阴伤精亏范畴,进而提出“壮水之主”法,指出临床使用中可通过补肾滋阴填精而有效减轻雷公藤多苷对女性的生殖毒性损伤,并总结目前中药、经方、验方、针刺等方面的已有相关研究来佐证“壮水之主”法的必要性,以期为雷公藤临床的安全合理用药提供理论指导依据。     

雷公藤多苷对大鼠卵巢功能耗损的影响与菟丝子总提取物干预作用的实验研究

目的:观察雷公藤多苷(Tripterygium Glycosides,TG)对大鼠卵巢功能耗损的影响,并探讨菟丝子提取物对其卵巢功能的保护和修复作用。方法:将SD大鼠50只随机分为A、B1、B2、C1、C2共5组,每组10只。A为空白对照组,每天0.1m L 0.9%氯化钠注射液灌胃;B1、B2为TG给药组,于每天8∶0、20∶00分别灌胃TG 50mg/kg/d,连续给药14d;C1、C2为菟丝子提取物给药组,每天灌胃菟丝子提取物895.69mg/kg,给药2次,上午下午各1次,连续3d。HE染色观察卵巢组织形态,放射免疫法检测血清雌二醇(E_2)、促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)水平。结果:与A组比较,B1、B2组动情周期延长为7~8d/次,卵巢萎缩,结构受损。E_2、FSH、LH水平均无明显改变;而C1、C2组动情周期延长为7~8d/次,偶为5d/次,卵巢结构病变减轻,E_2、FSH及LH水平均无明显改变。结论:TG可致大鼠卵巢功能损害,晚上给药较白天给药损害较轻,菟丝子提取物对其生殖系统损害有明显改善作用。     

杜仲补天素胶囊对雷公藤多苷所致雄性大鼠生殖障碍干预作用的实验研究

目的:研究杜仲补天素胶囊对雷公藤多苷所致雄性大鼠生殖障碍的干预作用并初步探讨其作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、模型组、生精胶囊560 mg/kg组、杜仲补天素485 mg/kg、970 mg/kg组。以雷公藤多苷(40 mg/kg)造模成功后,持续给药干预四周,雌雄合笼后,观察雌鼠受孕情况与产仔数,计算雄鼠脏器系数、测定各组性激素水平和氧化应激指标、观察睾丸组织形态变化、检测睾丸凋亡相关蛋白与雌激素受体蛋白表达的变化。结果:与正常组相比,模型组睾丸曲细精管空泡化,曲细精管内各级精细胞不同程度减少;睾丸系数、精子数量和精子活力均显著下降;受孕率与产仔数显著下降;雌二醇(E2)、睾酮(T)、卵泡雌激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量或活力显著下降,丙二醛(MDA)的含量显著上升;睾丸组织中B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)表达显著下调, Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达显著上调;睾丸中雌激素受体α和雌激素受体β(ERα、ERβ)蛋白的表达量显著上调。给药干预后与模型组相比,杜仲补天素胶囊组剂量依赖地使睾丸中曲细精管空泡化情况改善,各级精细胞再生;睾丸系数、精子数量和精子活力显著上升;受孕率与产仔数显著上升;E2、FSH、GSH-Px、SOD的含量或活力显著上升,MDA的含量显著下降;睾丸组织中Bax蛋白表达显著下调,Bcl-2蛋白表达显著上调;睾丸中ERα、ERβ蛋白的表达量显著下调。结论:杜仲补天素胶囊对雷公藤多苷所致雄性大鼠生殖障碍有一定的改善作用,可能是通过调控ERα、ERβ来调节氧化应激与凋亡水平实现的。     

野山楂根拮抗雷公藤多苷对雄性大鼠生殖损伤作用的研究

目的:观察中药野山楂根水煎剂对雷公藤多苷所致雄性不育大鼠生育力的影响。方法:将成年雄性大鼠随机分组,分别给予雷公藤多苷片溶液(10 mg.kg^-1),野山楂根水煎剂(1.8,5.4,18 g.kg^-1)+雷公藤多苷片溶液(10 mg.kg^-1)和蒸馏水(1 mL.kg^-1)灌胃,8周后停用雷公藤多苷,中药组继续行野山楂根灌胃。4周后各组动物与成年雌性大鼠交配,观察交配雌鼠妊娠率和平均胚胎、黄体数。测定雄鼠生殖器官性腺脏器指数、附睾精子计数、活力、存活率,观察各组动物睾丸、附睾组织病理和超微结构改变,放射免疫法测定血清和睾丸组织睾酮(T),血清卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)含量。结果:与雷公藤多苷模型组比较,野山楂根组交配雌鼠妊娠胎数、雄鼠睾丸、附睾脏器指数以及附睾精子计数、活力均有提高(P<0.05);野山楂根组精子超微结构较模型组有明显恢复;睾丸组织匀浆T显著高于模型组(P<0.01)。结论:野山楂根能够拮抗雷公藤多苷对雄性大鼠的生殖损伤作用,提高不育症模型雄鼠的生育力。     

菟丝子水提液对大鼠的急性毒性及微核试验

目的： 探讨菟丝子水提液对SD大鼠的最大给药量的急性毒性与遗传毒性。 方法： 最大给药量法检测菟丝子水提液对SD大鼠的急性毒性。SD孕鼠骨髓微核试验及胚胎肝转移微核试验,设5组：菟丝子水提液高、中、低剂量组（40,20,10 g·kg^-1）及阴性对照组（NS,10 mL·kg^-1）,阳性对照组[环磷酰胺（CP）40 mg·kg^-1],检测孕鼠骨髓嗜多染红细胞微核率及胚胎肝嗜多染红细胞微核率。 结果： 菟丝子水提液ig对SD大鼠的最大给药量为80 g·kg^-1。菟丝子水提液40 g·kg^-1可致孕鼠骨髓细胞、胚胎肝细胞嗜多染红细胞微核率升高,与阴性对照组对比,有显著性差异（P<0.01）。 结论： 菟丝子水提液对SD大鼠ig最大给药量为80 g·kg^-1,属无毒级。菟丝子水提液ig剂量在40 g·kg^-1时可诱发孕鼠及胚胎微核率增加,有潜在遗传毒性;而在20 g·kg^-1以下剂量时无显著遗传毒性。     

不同寄主植物对菟丝子药材质量的影响

目的:研究不同寄主植物对菟丝子药材质量的影响。方法:用高效液相色谱法(HPLC)、紫外分光光度法(UV)等方法,测定19个菟丝子药材中主要成分的含量。结果:菟丝子中总黄酮平均含量(1.63%)高于南方菟丝子(1.42%);寄生于大豆、黄芩、绿豆等植物上的菟丝子及南方菟丝子黄酮含量较高。结论:寄主植物影响菟丝子药材的成分及含量。     

UPLC测定不同产地菟丝子药材中6种黄酮类成分的含量

目的:采用UPLC建立同时测定菟丝子药材中金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山柰酚、异鼠李素6种黄酮类成分含量的方法。方法:以内蒙古产菟丝子为代表建立菟丝子药材中6种黄酮类成分的定量方法,用此方法测定12批不同产地菟丝子药材中6种黄酮类成分的含量。色谱条件为Agilent Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.21 m L·min~(-1),柱温30℃,检测波长360 nm。结果:金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山柰酚、异鼠李素分别在0.046 8~0.748 8μg(r=0.999 9),0.024 2~0.387 2μg(r=0.999 9),0.088 2~1.411 2μg(r=0.999 9),0.002 3~0.037 0μg(r=0.999 7),0.028 8~0.460 8μg(r=0.999 6)和0.002 3~0.037 0μg(r=0.999 4)线性关系良好,检出限分别为0.292 5,0.302 5,0.367 5,0.289 0,0.360 0,0.286 0 mg·L~(-1),定量限分别为0.877 5,1.210 0,1.470 0,1.012 0,1.260 0,1.215 5 mg·L~(-1)。平均回收率分别为99.95%,99.78%,99.53%,99.38%,100.03%,99.35%,RSD分别为1.0%,1.2%,1.0%,1.4%,1.1%,0.5%。12批来自不同产地的菟丝子6种黄酮类成分含量差异较大。结论:该方法专属性强、重复性好、快速、稳定、可控,为科学评价及有效控制菟丝子药材的质量提供依据。     

菟丝子及其主要成分黄酮对肾虚排卵障碍大鼠的影响

目的：探讨单味菟丝子（Cuscutae Semen,CS,醇提+水提总提取物）及其主要成分兔丝子黄酮（Flavones from Cuscutae Semen,FCS）对肾虚排卵障碍模型大鼠的影响。方法：48只雌性SD大鼠随机分为菟丝子高、低剂量组,菟丝子黄酮高、低剂量组,模型组和空白组,以羟基脲（600 mg·kg^-1·d^-1）灌胃建立肾虚排卵障碍模型,羟基脲灌胃后2 h各组予相应药物灌胃治疗,共计8 d,治疗后比较各组大鼠子宫指数、卵巢指数、血清性激素水平、成熟卵泡比例、黄体数。结果：①与正常组比较,模型组大鼠出现肾虚表现,卵巢病理切片提示排卵障碍,且大鼠血清雌二醇（E₂）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）水平（3.68±1.18） pmol·L^-1,（2.43±0.24） U·L^-1,（2.84±1.05） U·L^-1明显低下（P<0.05）;②与模型组比较,菟丝子高剂量组大鼠子宫指数、卵巢指数、成熟卵泡比例、血清E₂,FSH水平 （5.49±1.72）pmol·L^-1,（2.70±0.22） U·L^-1 明显增加 （P<0.05）;菟丝子黄酮低剂量组大鼠子宫指数、卵巢指数、成熟卵泡比例、血清E₂、FSH、LH水平 （6.25±2.23）pmol·L^-1,（2.78±0.14） U·L^-1,（3.65±0.78） U·L^-1明显增加（P<0.05）。菟丝子黄酮低剂量组血清LH水平 （3.65±0.78） U·L^-1 明显高于菟丝子高剂量组（3.10±0.60） U·L^-1 （P<0.05）。结论：菟丝子可有效改善羟基脲引起的肾虚排卵障碍,这种影响可能基于其主要成分黄酮的作用。     

菟丝子外用对实验性豚鼠白癜风的药效

目的:考察菟丝子外用对实验性白癜风豚鼠模型的治疗作用,为《中国药典》增补其“外用消风祛斑”的功效提供药效学依据.方法:采用H2O2化学脱色法制备实验性白癜风豚鼠模型,观察菟丝子1.86,0.93,0.49 g·kg-1外涂40 d对豚鼠皮肤黑色素分布及血浆中酪氨酸酶(TYR)、血清胆碱酯酶(CHE)和单胺氧化酶(MAO)活性的影响.结果:菟丝子外用对实验性白癜风有良好的治疗作用,给药组皮肤黑色素分布含量增多,与模型组比较,菟丝子高、中剂量组具有极显著性差异(P＜0.01,P＜0.05);菟丝子高、中剂量血浆TYR[(30.57±3.39),(24.33±1.89) ng·mL-1]明显高于模型组[(16.43±3.50) ng·mL-1](P＜0.01);菟丝子高剂量血清CHE[(94.20±6.73)U·mL-1]明显高于模型组[(86.55±5.61) U·mL-1] (P ＜0.01);菟丝子高剂量血清MAO[(36.42±3.99) U·mL-1]明显低于模型组[(40.59±4.04)U·mL-1](P＜0.05).结论:菟丝子外用对白癜风豚鼠模型有治疗作用.     

核桃楸不同药用部位总黄酮含量测定及变化规律

目的:建立核桃楸药用部位总黄酮成分含量测定方法,明确其变化规律。方法:采用75%乙醇回流对青龙衣中总黄酮类成分进行提取,以芦丁为对照品,采用硝酸铝-亚硝酸钠比色法,AB-8大孔树脂除色素,建立含量测定方法。结果:初伏前后5个采集时间青龙衣总黄酮含量分别为3.15,3.49,3.90,3.98,3.96 mg.g-1。结论:初伏前黄酮总含量较低,初伏后总黄酮含量呈逐步增加的趋势,并且有一个快速增长的过程,伏天过后含量略有下降;不同药用部位黄酮含量顺序为叶>皮>茎。     

决明子提取物对高血脂模型小鼠聚脂基因表达的影响

目的 研究决明子提取物对高血脂模型小鼠血脂水平和聚脂基因转录表达的影响.方法 用两种不同剂量的决明子提取物对小鼠进行sc给药,分别于1、2、4 h摘眼球取血后处死.试剂盒检测血脂生化指标,荧光定量PCR技术检测聚脂相关基因的转录表达规律.结果 决明子提取物处理的高血脂模型小鼠,总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDI,C)均有显著(P<0.05)或非常显著(P<0.01)降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)非常显著升高(P<0.01),总体上低剂量处理效果较好.脂肪组织中决明子提取物上调过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、固醇调节元件结合蛋白(SREBP-lc)、激素敏感性脂酶(HSL)和甘油三酯水解酶(TGH)的转录表达,1 h达非常显著(P<0.01),下调脂肪酸合成酶(FAS),同样在1 h达非常显著(P<0.01).肌肉中决明子提取物下调PPARγ、SREBP-lc、HSL和TGH的转录表达,其中PPARγ在2 h达非常显著(P<0.01),SREBP-1c、HSL在1 h达非常显著(P<0.01),TGH在2 h达非常显著(P<0.01),上调FAS转录表达且1 h达非常显著(P<0.01).结论 决明子提取物可调节高血脂模型小鼠的血脂,并通过调控脂肪组织和肌肉中脂代谢相关基因的转录表达来调节动物体脂代谢.     

苦参药材中氧化苦参碱和苦参总黄酮含量比较

目的:测定不同产地、来源苦参药材中氧化苦参碱和苦参总黄酮的含量.方法:采用高效液相法检测苦参中氧化苦参碱的含量,采用紫外分光光度法检测苦参中苦参总黄酮的含量.结果:比较了10批不同产地、来源苦参药材中氧化苦参碱和苦参总黄酮的含量,其中河南产苦参(批号110613)氧化苦参碱含量最高,达19.53 mg·g-1,广西产苦参(批号110930)中苦参总黄酮含量明显高于其他产地的苦参,为14.44 mg·g-1.结论:不同产地、来源苦参药材中有效成分的含量差异较大,在临床用药时应引起重视,在含苦参的复方制剂生产中应建立药材检测的可控标准.     

菟丝子总黄酮对过氧化氢损伤的血管内皮细胞的保护作用

目的:探讨菟丝子总黄酮对H202损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用.方法:于37℃、5％ CO2、95％空气饱和湿度的培养箱内体外培养内皮细胞,将细胞分为4组,即正常对照组:加入DMEM培养液(pH 7.2 ～7.4)、菟丝子对照组(菟丝子0.5mg·L-1)、模型组(过氧化氢终浓度为200 mmol·L-)、菟丝子+过氧化氢组(菟丝子0.5mg· L-1,过氧化氢200 mmol·L-),研究菟丝子总黄酮对受损血管内皮细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)释放情况、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及对细胞形态学的影响.结果:菟丝子总黄酮(0.5 mg·L-1)能明显减轻H2O2对HUVECs所致的氧化损伤,可明显改善氧化损伤的HUVECs形态学变化,H2O2模型组(200 mmol·L-)与空白组比较,LDH释放和MDA含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05),SOD释放水平和GSH-Px活力显著下降(P＜0.01),菟丝子(0.5mg·L-1)+ H2O2(200 mmol·L-1)组与H2O2模型组(200 mmol·L-1)比较,LDH释放和MDA含量显著下降(P＜0.01,P＜0.05),SOD释放水平和GSH-Px活力显著升高(P＜0.01).结论:菟丝子总黄酮对H202诱导的HUVECs的损伤具有保护作用.