补肾中药对雷公藤多苷所致生殖损伤雄性幼鼠血清睾酮及睾丸组织P450scc的影响

目的:研究雷公藤多苷(glycosides of Tripterygium wilfordii,GTW)对幼年雄性大鼠血清睾酮及睾丸组织中睾酮生成酶细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(cyto-chrome P450 side chain cleavage,P450scc)的影响以及补肾中药(菟丝子黄酮、六味地黄丸)对其损伤的干预作用.方法:3～4周龄SD雄性幼鼠48只,随机分为4组:空白组(CMC-Na)、多苷组(9 mg·kg-1·d-1)单独ig,六味组(六味地黄丸1g·kg-1·d-1 +GTW9 mg· kg-1·d-1),黄酮组(菟丝子黄酮0.1 g·kg-1·d-1+GTW 9mg · kg-1·d-1)混合ig,持续给药12周后,处死大鼠留取血清和睾丸组织,采用放免法检测血清睾酮浓度;采用RT-PCR和Western blot检测睾丸组织中p450scc在基因和蛋白水平的表达.结果:GTW组与空白组相比可以明显降低血清睾酮(P＜0.01);六味组与多苷组相比可以明显提高血清睾酮(P＜0.05);在蛋白水平GTW与空白组相比可以明显降低睾丸组织P450scc(P ＜0.05);在基因水平GTW组与其他组比较无显著性差异.结论:GTW对幼年大鼠生殖系统有一定损伤作用;六味地黄丸可以通过提高雄鼠血清睾酮水平而达到保护生殖损伤的作用.     

菟丝子黄酮、雷公藤多苷对体外培养幼鼠生精细胞周期及凋亡的影响

目的通过观察含雷公藤多苷(GTW)、菟丝子黄酮药物血清对体外培养的大鼠睾丸生精细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响,探讨菟丝子黄酮干预GTW所致生殖损伤的作用机制。方法体外培养大鼠睾丸生精细胞,将其分为空白组、9mg GTW组(多苷1号组)、9mg GTW+菟丝子黄酮组(黄酮1号组)、12mg GTW组(多苷2号组)、12mg GTW+菟丝子黄酮组(黄酮2号组),加不同含药血清,于培养24h、48h后,通过MTT法检测含药血清对生精细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测含药血清对生精细胞细胞周期及凋亡的影响。结果生精细胞增殖方面:血清作用24h、48h时,黄酮1号组OD值明显高于多苷1号组;黄酮2号组OD值高于多苷2号组;均具有明显统计学差异(P0.05)。生精细胞S期细胞百分比:黄酮2号组较多苷2号组明显降低(P0.05);而黄酮1号组与多苷1号组比较无统计学意义(P0.05)。生精细胞凋亡方面:黄酮1号组较多苷1号组明显降低(P0.05);而黄酮2号组与多苷2号组比较无统计学意义(P0.05)。结论GTW可使体外培养幼鼠生精细胞增殖能力下降,细胞凋亡增多。菟丝子黄酮可干预生精细胞的分裂周期,同时对生精细胞凋亡有明显的调控作用。     

补肾中药对雷公藤多苷所致雄性幼鼠生殖损伤的保护作用及最终生育能力的影响

目的: 探讨雷公藤多苷(glycosides of Tripterygium wilfordii,GTW)对雄性幼鼠生殖损伤和损伤后最终生育能力的影响及补肾中药(菟丝子黄酮、六味地黄丸)的保护作用。方法: ①生殖损伤研究:3~4周龄SD雄性幼鼠48只,随机分为4组:空白组(CMC-Na)、雷公藤多苷组(9 mg·kg^-1·d^-1)单独ig,六味组(六味地黄丸1 g·kg^-1·d^-1＋GTW 9 mg·kg^-1·d^-1),黄酮组(菟丝子黄酮0.1 g·kg^-1·d^-1+GTW 9 mg·kg^-1·d^-1)混合ig,持续12周后,处死取一侧睾丸、附睾立即称质量,计算脏器指数,称重后放入固定液中保存,待观察睾丸组织形态学改变;②生育能力研究:成年大鼠100只,每组25只,分组喂养方法同上,持续12周后,将所有大鼠分笼喂养,每笼1只,按照1:1比例放入成年雌性大鼠1只,分3次合笼,每次合笼时间为15 d,合笼后观察雌鼠受孕率、仔鼠离乳存活率、仔鼠生长发育情况。结果: 雷公藤多苷对睾丸病理组织生精细胞肿胀变性,精原细胞、精母细胞、精子细胞明显减少,菟丝子黄酮、六味地黄丸能明显减轻这种损伤;用药12周后雄性幼鼠体重、睾丸质量、睾丸指数、附睾质量、附睾指数与空白组相比无显著性差异(P＞0.05);每次合笼后受孕率、离乳存活率、幼鼠的生长发育与空白组相比无显著性差异。结论: 雷公藤多苷对雄性幼鼠生殖系统的损伤是可逆的,对睾丸的病理组织损伤是可以恢复的,补肾中药具有保护这种病理组织损伤作用;雷公藤多苷对最终的生育能力没有影响,对幼仔生长发育没有影响。     

栀子苷对正常和黄疸模型大鼠的亚急性肝、肾毒性

目的:开展栀子苷对正常及黄疸模型大鼠的亚急性肝、肾毒性对比研究,为栀子临床安全用药提供科学依据。方法:SD大鼠80只,随机分为8组,空白组、栀子苷低、中、高剂量(60,180,360 mg·kg~(-1))组,黄疸模型组和α-萘异硫氰酸酯(ANIT)+栀子苷低、中、高剂量(60,180,360 mg·kg~(-1))组。黄疸模型采用ANIT造模,24 h后灌胃(ig)栀子苷。分别于给药后第7,14天,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(TBIL),尿素氮(BUN),血肌酐(SCr)活性,取大鼠肝、肾组织进行病理检测。结果:与空白组比较,第7,14天栀子苷中、高剂量组TBIL,SCr明显升高(P0.05,P0.01);黄疸模型组大鼠ALT,AST,TBIL均明显升高(P0.05,P0.01)。与黄疸模型组比,第7,14天ANIT+栀子苷低、中剂量组AST显著升高(P0.01),ANIT+栀子苷中剂量组TBIL,BUN明显升高(P0.05)。ANIT+栀子苷高剂量组ig 7 d后陆续全部死亡。病理切片显示,栀子苷给药后肝肾组织出现极轻度炎细胞浸润和肾小管嗜碱性变;模型组和ANIT+栀子苷各剂量组动物均出现胆管上皮细胞增生,纤维组织增生,并且有随剂量增大病变程度加重的趋势。结论:栀子苷剂量超过180 mg·kg~(-1)(约折合栀子生药量55 g·d~(-1))连续ig给药14 d可对正常及黄疸模型大鼠造成肝、肾损伤;且剂量超过60 mg·kg~(-1)时即会加重黄疸模型大鼠已有的肝损伤,随剂量增加病变程度加重。     

联合使用表没食子儿茶素没食子酸酯、牛磺酸和三羟基异黄酮对大鼠酒精性肝纤维化的保护作用

目的:研究联合使用表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG),牛磺酸(taurine)和三羟基异黄酮(genistein)对大鼠酒精性肝纤维化的保护作用及其作用机制。方法:Wistar雄性大鼠随机分成6组即正常组,模型组,秋水仙碱组(0.5 mg·kg~(-1)),联合用药低剂量15.625 mg·kg~(-1)组(牛磺酸12.5 mg·kg~(-1)+EGCG 1.875 mg·kg~(-1)+三羟基异黄酮1.25 mg·kg~(-1)),中剂量31.25 mg·kg~(-1)组(牛磺酸25 mg·kg~(-1)+EGCG 3.75 mg·kg~(-1)+三羟基异黄酮2.5 mg·kg~(-1)),高剂量62.5 mg·kg~(-1)组(牛磺酸50 mg·kg~(-1)+EGCG 7.5 mg·kg~(-1)+三羟基异黄酮5 mg·kg~(-1))。除正常组外,其余各组ig乙醇5.0~9.5 g·kg~(-1),正常组ig给予等量生理盐水,每天1次,连续24周。末次给药24 h后,取血,处死大鼠,采集肝组织;检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT),天冬氨酸转氨酶(AST),碱性磷酸酶(ALP),谷氨酰转移酶(GGT),透明质酸(HA),层黏连蛋白(LN)和三型前胶原(PCⅢ)水平的变化,检测肝组织中丙二醛(MDA),羟脯氨酸(Hyp),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),超氧化物歧化酶(SOD),采用免疫组化法检测各组肝组织中α-平滑肌肌动蛋(α-SMA),转化生长因子-β1(TGF-β1)及人母亲DPP同源物3(Smad 3)蛋白表达情况,同时做组织学检查,观察肝组织的病理变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠ALT,AST,ALP,GGT,MDA,Hyp,HA,LN,PCⅢ,α-SMA,TGF-β1和Smad3显著升高(P0.05),SOD和GSH-Px显著降低(P0.05);与模型组相比,联合用药可显著降低ALT,AST,ALP,GGT,MDA,Hyp,HA,LN,PCⅢ,α-SMA,TGF-β1和Smad3的表达(P0.05),显著升高SOD和GSH-Px的活性(P0.05)。结论:联合使用表没食子儿茶素没食子酸酯、牛磺酸和三羟基异黄酮用药对乙醇所致的大鼠肝纤维化具有一定的保护作用,其机制可能与加快自由基清除,减轻脂质过氧化损伤,下调α-SMA,TGF-β1,Smad3表达有关。     

罗汉果甜苷对力竭运动大鼠胃组织HSP70mRNA及蛋白表达的影响

目的:研究运动前补充罗汉果甜苷(Mog)对力竭运动大鼠胃组织热休克蛋白70(HSP70)mRNA表达和HSP70蛋白表达的影响,以初步探讨罗汉果甜苷的作用机制。方法:SD雄性大鼠50只,随机分为5组,每组10只,分别为安静组(NC),运动组(ME),运动+低剂量罗汉果甜苷组(Mog L),运动+中剂量罗汉果甜苷组(Mog M),运动+高剂量罗汉果甜苷组(Mog H)。每天在运动前30 min ig 1次,连续ig 6周,6 d/周,低、中、高3组的ig剂量分别为100,200,400 mg·kg-1,对照组ig等量生理盐水。6周力竭训练结束后,宰杀大鼠。根据试剂盒的方法测定大鼠胃组织HSP70mRNA及蛋白表达。结果:运动组大鼠胃组织HSP70mRNA表达和HSP70蛋白表达水平高于安静组(P0.05);Mog L,Mog M,Mog H各组大鼠胃组织HSP70mRNA表达和HSP70蛋白水平都高于安静组和运动组(P0.05,P0.01)。结论:罗汉果甜苷能够提高大鼠胃组织HSP70mRNA表达和HSP70蛋白表达水平,对减少胃组织的溃疡、促进损伤后的恢复、细胞生长和发育等方面发挥重要的作用。     

补肾法对雷公藤多苷片致大鼠生殖功能损伤保护作用的研究

目的:研究补肾法对雷公藤多苷片致大鼠生育功能损伤的保护作用。方法:将24只SPF级4~5周龄SD雄性大鼠随机分为4组:空白组(蒸馏水)、雷公藤多苷组(30mg/kg·d~(-1))、六味地黄丸组(六味地黄丸1g/kg·d~(-1)+多苷30mg/kg·d~(-1))、肾气丸组(肾气丸1g/kg·d~(-1)+多苷30mg/kg·d~(-1))。持续混悬液灌胃4周后,处死大鼠,留取睾丸组织,并称取重量,计算脏器指数;采用HE染色观察组织形态学变化,免疫组化法检测睾丸C-kit蛋白的表达。结果:与空白组比较,雷公藤多苷组大鼠睾丸重量、脏器指数、C-kit的表达均明显下降(P0.01);六味地黄丸组、肾气丸组与雷公藤多苷组相比可以明显提高C-kit蛋白表达(P0.05);空白组大鼠睾丸重量、脏器指数、生精细胞数、C-kit蛋白表达较六味地黄丸组、肾气丸组高,差异不具有统计学意义(P0.05);肾气丸组大鼠睾丸重量、脏器指数、C-kit蛋白表达高于六味地黄丸组,但差异不具有统计学意义(P0.05);HE染色比较:空白组睾丸组织病理形态正常,雷公藤多苷组睾丸组织中细胞排列紊乱,各级生精细胞明显减少,精子量减少,六味地黄丸组与肾气丸组睾丸损伤较雷公藤多苷组轻。结论:温补肾气及填补肾精法对雷公藤多苷所致雄性生殖损伤皆具有修复作用,可能与促进睾丸C-kit蛋白的表达,进而促进精原细胞的增殖分化有关。     

菟丝子黄精颗粒剂对雷公藤多苷所致生殖损伤雌鼠卵巢损伤及smad4 mRNA表达的影响

目的 研究雷公藤多苷(GTW)对卵巢组织smad4 mRNA表达的影响以及菟丝子与黄精的干预作用.方法 采用4周龄SD雌鼠,将实验大鼠据体质量随机分3组,分别为空白对照组、GTW组、干预组,连续灌胃12周后处死动物检测指标.结果 GTW组卵巢次级卵泡数值最小,与空白组间差异有统计学意义(P＜0.05),与干预组间差异也有统计学意义(P＜0.01),空白组与干预组间差异没有统计学意义(P＞0.05);黄体数比较各组间差异没有统计学意义(P＞0.05).GTW组smad4 mRNA表达与空白组间差异有统计学意义(P＜0.01),与干预组间差异也有统计学意义(P＜0.05);空白组与干预组间差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 雌性幼鼠服用雷公藤多苷可造成卵巢组织病理改变,其中smad4 mRNA表达的下降可能是GTW导致雌性生殖损伤的关键点之一.中药菟丝子、黄精可以促进该过程的修复.     

菟丝子黄酮对雷公藤多苷损伤雄性幼鼠睾丸组织凋亡相关蛋白Bcl-2和蛋白Bax表达的影响

目的：研究菟丝子黄酮对雷公藤多苷（GTW）损伤雄性SD幼鼠睾丸组织凋亡相关蛋白蛋白Bcl-2和蛋白Bax的表达的影响。方法：健康3周龄SD雄性幼鼠36只,随机分为三组：空白组、雷公藤多苷组、菟丝子黄酮＋雷公藤多苷组。免疫组化法测定Bcl-2/Bax表达。结果：各实验组Bcl-2蛋白表达：雷公藤多苷组表达最少,与其他各组之间比较（P〈0.05）差异有统计学意义。空白组表达最高,菟丝子组次之,空白组与菟丝子组之间比较（P〉0.05）差异没有统计学意义。各实验组Bax蛋白表达：雷公藤多苷组表达最高,与其他各组之间比较（P〈0.05）差异有统计学意义。空白组表达最少,空白组与菟丝子组之间比较（P〈0.05）差异有统计学意义。结论：菟丝子黄酮能增强雄性幼鼠生育能力,其机制可能是对抗雷公藤多苷所致雄性幼鼠睾丸组织Bcl-2蛋白表达减少和Bax蛋白表达增强。     

罗汉果黄酮对运动大鼠心肌能量代谢酶及PPARα mRNA表达的影响

目的:研究运动前补充罗汉果黄酮(MGF)对力竭运动大鼠心肌能量代谢酶和过氧化物酶体增殖剂活化受体α(PPARα)mRNA表达的影响,以初步探讨其作用机制.方法:SD雄性大鼠50只,随机分为5组,每组10只,分别为安静对照组(NC),运动对照组(ME),运动+ ig低剂量罗汉果黄酮组(MGFL),运动+ig中剂量罗汉果黄酮组(MGFM),运动+ig高剂量罗汉果黄酮组(MGFH).每天在运动前30 min ig 1次,连续ig 6周,6d/周,低、中、高3组的ig剂量分别为100,200,400mg·kg-1,对照组ig等量生理盐水.力竭训练结束后测定大鼠心肌组织肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定心肌组织PPARα mRNA表达.结果:力竭游泳运动引起大鼠心肌CK活性下降,运动对照组显著低于安静对照组(P＜0.01),MGF低剂量组低于安静对照组(P＜0.05),但MGF各组均显著高于运动对照组(P＜0.01).LDH活性在力竭游泳运动组显著低于安静对照组(P＜0.01),在MGF各组均高于运动对照组(P＜0.05或P＜0.01).SDH活性在力竭游泳运动组显著低于安静对照组(P＜0.01),MGF低剂量组低于安静对照组(P＜0.05),MGF中、高剂量组高于运动对照组(P＜0.05).运动对照组PPARα mRNA表达水平显著低于安静对照组(P＜0.01),MGFL组PPARα mRNA表达水平高于运动对照组(P＜0.05),在MGF中、高剂量组PPARα mRNA表达水平均显著高于运动对照组(P＜0.01).结论:补充罗汉果黄酮能够提高能量代谢酶CK,LDH,SDH的活性和上调PPARα mRNA表达水平,对改善机体能量代谢和保护心肌组织的过度损伤具有良好的作用.     

菟丝子水提液对大鼠的急性毒性及微核试验

目的： 探讨菟丝子水提液对SD大鼠的最大给药量的急性毒性与遗传毒性。 方法： 最大给药量法检测菟丝子水提液对SD大鼠的急性毒性。SD孕鼠骨髓微核试验及胚胎肝转移微核试验,设5组：菟丝子水提液高、中、低剂量组（40,20,10 g·kg^-1）及阴性对照组（NS,10 mL·kg^-1）,阳性对照组[环磷酰胺（CP）40 mg·kg^-1],检测孕鼠骨髓嗜多染红细胞微核率及胚胎肝嗜多染红细胞微核率。 结果： 菟丝子水提液ig对SD大鼠的最大给药量为80 g·kg^-1。菟丝子水提液40 g·kg^-1可致孕鼠骨髓细胞、胚胎肝细胞嗜多染红细胞微核率升高,与阴性对照组对比,有显著性差异（P<0.01）。 结论： 菟丝子水提液对SD大鼠ig最大给药量为80 g·kg^-1,属无毒级。菟丝子水提液ig剂量在40 g·kg^-1时可诱发孕鼠及胚胎微核率增加,有潜在遗传毒性;而在20 g·kg^-1以下剂量时无显著遗传毒性。     

地木耳菌粉对2型糖尿病大鼠血糖的影响

目的:研究云南野生地木耳粉对2型糖尿病大鼠血糖的影响。方法:采用高脂饲料饲养SD大鼠4周,按35 mg·kg-1腹腔注射给予链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病模型。糖尿病模型大鼠随机分为6组,地木耳粉低(25 mg·kg-1)、中(50 mg·kg-1)、高(100 mg·kg-1)剂量组,阳性组(盐酸二甲双胍200 mg·kg-1),模型组(等量生理盐水)和一直用普通饲料喂养的正常组,连续给药6周,检测各组大鼠体重、摄水量、排尿便量及空腹血糖。结果:给药6周后,与模型组比较,高、中、低剂量组大鼠的体质量明显增加,血糖、饮水量及排尿便量明显降低;3个剂量组的体重、摄水量、排尿便量及血糖有显著差异。与阳性组比较,3个剂量组的体重、摄水量、排尿便量及血糖无显著差异。结论:地木耳能缓解STZ致2型糖尿病大鼠症状,具有降低血糖的作用,且效果与地木耳浓度呈正相关。     

野山楂根拮抗雷公藤多苷对雄性大鼠生殖损伤作用的研究

目的:观察中药野山楂根水煎剂对雷公藤多苷所致雄性不育大鼠生育力的影响。方法:将成年雄性大鼠随机分组,分别给予雷公藤多苷片溶液(10 mg.kg^-1),野山楂根水煎剂(1.8,5.4,18 g.kg^-1)+雷公藤多苷片溶液(10 mg.kg^-1)和蒸馏水(1 mL.kg^-1)灌胃,8周后停用雷公藤多苷,中药组继续行野山楂根灌胃。4周后各组动物与成年雌性大鼠交配,观察交配雌鼠妊娠率和平均胚胎、黄体数。测定雄鼠生殖器官性腺脏器指数、附睾精子计数、活力、存活率,观察各组动物睾丸、附睾组织病理和超微结构改变,放射免疫法测定血清和睾丸组织睾酮(T),血清卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)含量。结果:与雷公藤多苷模型组比较,野山楂根组交配雌鼠妊娠胎数、雄鼠睾丸、附睾脏器指数以及附睾精子计数、活力均有提高(P<0.05);野山楂根组精子超微结构较模型组有明显恢复;睾丸组织匀浆T显著高于模型组(P<0.01)。结论:野山楂根能够拮抗雷公藤多苷对雄性大鼠的生殖损伤作用,提高不育症模型雄鼠的生育力。     

芪桑降糖方对2型糖尿病大鼠糖代谢及脂代谢的影响

目的: 研究芪桑降糖方对实验性2型糖尿病(T2DM)模型大鼠糖代谢及脂代谢的影响。 方法: 大鼠高糖高脂饲料喂养4周后,ip 40 mg·kg^-1链脲佐菌素(STZ)建立T2DM大鼠模型,随机分为糖尿病模型对照组、芪桑降糖方低剂量组(ig 180 mg·kg^-1·d^-1)、中剂量组(ig 360 mg·kg^-1·d^-1)、高剂量组(ig 540 mg·kg^-1·d^-1)及罗格列酮治疗组(ig 4 mg·kg^-1·d^-1)。持续ig给药60 d后测空腹血糖(FBG)、血脂、糖化血红蛋白(HbAlc)、胰岛素(Ins)的含量。 结果: 与正常组比较,模型组大鼠HbAlc含量显著增高(P<0.01),总胆固醇(TCH)、血清甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL均明显升高(P<0.05),高密度脂蛋白(HDL)明显下降(P<0.05)。芪桑降糖方可降低T2DM模型大鼠的FBG、HbAlc、TCH、TG、LDL水平,提高HDL和Ins水平,与模型组比较有明显改善(P<0.05),芪桑降糖方与罗格列酮药物治疗组无显著性差异。 结论: 芪桑降糖方能有效地降低T2DM模型大鼠的血糖,促进Ins分泌,纠正糖尿病大鼠脂代谢紊乱,调节血脂。     

小柴胡汤中柴胡不同剂量对正常大鼠胃窦组织MTL,AChE,NO含量的影响

目的:观察小柴胡汤中柴胡不同剂量对正常大鼠胃窦组织胃动素(MTL)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、一氧化氮(NO)的影响,并探讨其作用机制.方法:40只大鼠随机分为4组:正常对照组、小柴胡汤组[柴胡高剂量组(高)、柴胡中剂量组(中)、柴胡低剂量组(低)].每天ig给予相应的小柴胡汤水煎液药液浓缩剂(高、中、低剂量分别为13,10,9.1 g·kg-1)或等容积生理盐水ig,连续3d.末次给药后,ELISA法测定胃窦组织MTL,AChE,NO的含量.结果:与正常对照组比较,柴胡剂量最高的小柴胡汤组(高)胃窦组织MTL,AChE的含量升高(P＜0.05),而胃窦组织NO的含量则无统计学差异;小柴胡汤组(中)、(低)的胃窦组织MTL,AChE,NO与正常组比均无统计学差异.结论:应用高剂量柴胡的小柴胡汤促进胃动力的作用机制,可能与增加胃窦组织MTL,AChE的含量有关.     

四妙勇安汤活性部位对一氧化氮合成酶抑制剂诱导的高血压大鼠血管重构的作用

目的:探讨四妙勇安汤活性部位对一氧化氮合成酶抑制剂(L-NAME)诱导的高血压大鼠血管重构的作用及其机制。方法:48只Wistar大鼠随机分为6组,分别为四妙勇安汤活性部位高、中、低剂量组(1,0.5,0.25 g·kg-1·d-1),卡托普利组(50 mg·kg-1·d-1),辛伐他汀阳性药物组(10 mg·kg-1·d-1)及模型组,各组动物饮水中给予L-NAME(1 g·L-1)。给药第4周后,测定动物体重、心脏质量、血压、心率;处死后,主动脉根部切片苏木素-伊红(HE)染色,测定主动脉厚度变化;马松(Masson)染色观察冠状动脉纤维化变化;免疫组化方法观察单核巨噬细胞抗原-1(ED-1)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达变化。结果:与模型组比较,仅卡托普利组具有减轻心肌肥厚的作用;卡托普利组、四妙勇安汤活性部位高、中剂量组具有一定降低舒张压和收缩压的作用;与模型组比较,给药各组对心率均没有影响;卡托普利组、四妙勇安汤活性部位高、中剂量组可明显降低主动脉壁厚;卡托普利组、四妙勇安汤活性部位高剂量组可降低可明显减少冠状动脉周边纤维化的形成;卡托普利组、四妙勇安汤活性部位高剂量组可明显抑制冠状动脉ED-1和PCNA的表达(P0.05,P0.01)。结论:四妙勇安汤活性部位具有降低高血压作用,改善血管重构,其机制可能与其抑制冠状动脉ED-1的抗炎作用和抑制PCNA的抗增殖作用相关。     

益气活血方对糖尿病大鼠p38MAPK通路的影响

目的:观察益气活血方对糖尿病大鼠基于p38丝裂原活化的蛋白激酶(p38MAPK)信号通路对血管内皮功能受损的综合调节作用机制。方法:采用高脂高糖饮食和应用链脲佐菌素(STZ)建立大鼠糖尿病模型,将大鼠随机分成7组,分别为正常组,模型组,丹蛭降糖胶囊高、中、低剂量组(1.08,0.72,0.54 g·kg-1·d-1),盐酸吡格列酮胶囊组(10 mg·kg-1·d-1),丹蛭降糖胶囊+盐酸吡格列酮胶囊结合组(1.08 g·kg-1·d-1+10 mg·kg-1·d-1)。大鼠造模成功后分别按相应剂量药物ig给予,每日1次,连续8周,后腹主动脉采集血液样本和腹主动脉进行相关检测,蛋白质免疫印迹(Western blot)法测定p38MAPK,上游MAPK激酶3/6(mitogen activated protein kinase kinasse3/6,MKK3/6),下游核转录因子c AMP反应元件结合蛋白1(c AMP response element-bingding protein,CREB1)以及其丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(mitogen-activated protein kinase phosphatase-1,MKP-1)信号蛋白在内皮细胞的蛋白表达量;实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)方法测定单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),血管内皮细胞抵抗素在血管内皮中的mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组p38MAPK,MKK3/6,CREB1蛋白及MCP-1,血管内皮细胞抵抗素mRNA表达水平明显升高(P0.01),MKP-1蛋白表达水平明显降低(P0.01);各给药组p38MAPK,MKK3/6,CREB1蛋白及MCP-1,血管内皮细胞抵抗素mRNA表达水平均明显降低,MKP-1蛋白表达水平均明显升高,与模型组大鼠比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:益气活血方通过调节糖尿病大鼠血管p38MAPK信号通路蛋白表达水平,从而达到降低血管内皮功能损伤的作用。     

养阴益肾颗粒对糖皮质激素致肾阴虚证大鼠HPA轴的影响

目的:观察养阴益肾颗粒(YYP)对糖皮质激素(GC)致肾阴虚证大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(HPA轴)的影响。方法:将60只Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,YYP高、中、低剂量组(6.48,3.24,1.62 g·kg~(-1)·d~(-1))和六味地黄丸组(0.39 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组10只。除正常组外,其他各组大鼠予氢化可的松50 mg·kg-1ip 7 d建立肾阴虚证模型。正常组和模型组大鼠予蒸馏水(10 m L·kg-1·d-1)ig,YYP高、中、低剂量组和六味地黄丸组大鼠予相应药物ig,共7 d。观察大鼠活动度、体毛、尾色、摄食量、大便、体重等一般情况的变化,摘取两侧肾上腺,称肾上腺质量及计算肾上腺脏器指数,ELISA法检测血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH),促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT)浓度,RT-PCR检测下丘脑CRH,垂体ACTH,肾上腺CORT mRNA的表达,并行肾上腺组织形态学检查。结果:与正常组比较,模型组大鼠一般情况较差,体重明显减轻(P0.01),肾上腺质量,肾上腺脏器指数,CRH,ACTH,CORT均明显降低(P0.01),CRH,ACTH,CORT mRNA表达明显下调(P0.01),肾上腺病变重;与模型组比较,YYP高、中、低剂量组和六味地黄丸组大鼠一般情况得到改善,给药后体重增加(P0.01),肾上腺质量,肾上腺脏器指数,CRH,ACTH,CORT升高(P0.05,P0.01),CRH,ACTH,CORT mRNA表达明显上调(P0.01),肾上腺病变程度减轻。结论:养阴益肾颗粒对GC所致肾阴虚证大鼠HPA轴的抑制状态具有拮抗作用。     

南苍术与北苍术的燥性效应比较

目的:探讨南苍术和北苍术的燥性效应强弱。方法:将60只正常健康SD大鼠随机分组为6组(每组10只),分别为生理盐水组,大豆油组,南苍术低剂量组(剂量46. 25 mg·kg~(-1)·d-1),南苍术高剂量组(剂量500 mg·kg~(-1)·d-1),北苍术低剂量组(剂量46. 25 mg·kg~(-1)·d-1),北苍术高剂量组(剂量500 mg·kg~(-1)·d-1),给药体积均为0. 01 m L·g-1,灌胃给药21 d。以大鼠日均饮水量、颌下腺形态组织、尿量和肾脏中水通道蛋白2(AQP2)表达量、全血黏度为苍术燥性效应的药效评价指标,观察给予等剂量南苍术挥发油和北苍术挥发油对大鼠燥性效应的影响。结果:与大豆油组相比较,长期服用高剂量南苍术挥发油和北苍术挥发油均能使大鼠日均饮水量、尿量、全血黏度增加,AQP2表达量降低,颌下腺腺泡萎缩;但二者并无统计学差异;而低剂量南苍术挥发油和北苍术挥发油对大鼠燥性效应影响不显著。结论:等剂量的南苍术挥发油和北苍术挥发油表现出来的燥性药效无显著性差异,初步证明了临床上南苍术和北苍术通用的合理性,同时为苍术的临床合理用药提供了实验依据。     

基于p38MAPK通路探讨丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病模型大鼠血管病变的影响

目的:基于p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路观察丹蛭降糖胶囊对实验性2型糖尿病(T2DM)模型大鼠血管内皮功能受损的影响。方法:采用高脂高糖饮食及腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立T2DM大鼠模型,将104只大鼠随机分成正常组,模型组,丹蛭降糖胶囊高、中、低剂量(1.08,0.72,0.54 g·kg^-1·d^-1)组,吡格列酮(10 mg·kg^-1·d^-1)组,丹蛭-吡格列酮(1.08+0.01 g·kg^-1·d^-1)组。造模成功后分别按相应剂量ig药物,每日1次。给药8周后,所有大鼠麻醉后腹主动脉采集血液样本和处死剪取腹主动脉进行相关检测,分析其作用机制。结果:治疗8周后,与正常组相比,模型组磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK),MAPK激酶3/6(MKK3/6),核转录因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1),环氧化酶-2(COX-2),细胞间黏附分子(ICAM-1)蛋白表达水平均有上调,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)蛋白表达水平下调;与模型组相比,给药组大鼠p-p38MAPK,MKK3/6,CREB1,COX-2,ICAM-1蛋白表达水平均有下调,MKP-1蛋白表达水平明显上调(P<0.05,P<0.01)。腹主动脉免疫组化示,给药组p38MAPK蛋白表达量与模型组相比明显降低。结论:丹蛭降糖胶囊能调节T2DM模型大鼠血管p38MAPK蛋白表达水平,并可能从而改善大鼠血管内皮功能受损。