食品中诺如病毒RT-PCR检测技术研究进展

诺如病毒(Norovirus,NoV)是急性胃肠炎暴发的重要病原,其特殊的生物学特性容易引起食品的污染。对食品中NoV的准确检测能为诺如病毒胃肠炎防控提供科学依据。反转录(RT)-PCR技术是目前食品NoV检测的主要方法,检测过程包括病毒富集、RNA提取、引物设计、RT-PCR反应、扩增产物鉴定共5个步骤,其中病毒富集是检测的关键及难点。影响食品中NoV的RT-PCR检测结果的因素较多,目前尚无一种标准的检验方法,因此有必要加快相关检验方法研究,建立高风险食品的病毒检测方法以指导实际工作。     

贝类中诺如病毒检测方法的研究进展

诺如病毒(norovirus,NVs)是非细菌性胃肠炎的首要致病原因,世界上50%以上的胃肠炎暴发都由它引起。诺如病毒主要通过食物、水以及人与人之间接触传播,被污染的食物中以贝类中富集的诺如病毒最难检测,但贝类在2000—2007年的世界食源性诺如病毒感染中占了17.5%。本文就世界各国对贝类中诺如病毒检测方法的研究进展进行综述。     

佛山市南海区诺如病毒引起急性胃肠炎暴发的流行病学研究

目的 了解佛山市南海区暴发的急性胃肠炎中诺如病毒感染的流行特征.方法 对南海区 2006-2007 年暴发的2起急性病毒性胃肠炎疫情进行流行病学调查和分子流行病学研究,将收集到的患者的粪便、肛拭子标本,采用针对诺如病毒的特异性引物和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术进行检测,再经过分析核酸序列分析病毒的基因型.结果 两起暴发流行的急性胃肠炎均由GⅡ.4亚型的诺如病毒引起.结论 诺如病毒是引起南海区秋冬季急性胃肠炎暴发流行的主要病原体,且引起暴发的流行病毒株属于GⅡ.4型.     

一起诺如病毒引起的急性胃肠炎RT-PCR检测

目的对急性胃肠炎疫情标本进行疑似诺如病毒核酸RT-PCR检测,以确诊其致病原。方法从34例病人粪便中提取RNA,用引物JV13i、JV12y进行诺如病毒核酸RT-PCR扩增,再对其扩增产物进行琼脂糖凝胶检测;同时采用ELISA法检测粪便中的诺如病毒抗原,并用基因序列分析进行检测结果验证。结果34份标本中有26份诺如病毒核酸RT-PCR检测阳性,阳性率为76.5%,经基因序列分析,也证实为诺如病毒;而ELISA只检测到9份标本为阳性,阳性率为26.5%。结论RT-PCR和ELISA的阳性结果均证实该起疫情为诺如病毒感染所致。RT-PCR法比ELISA法灵敏度高,特异性强,且成本较低,但是操作较为繁琐。     

山东口岸首起输入性群体性诺如病毒感染事件处置

诺如病毒（norovirus）是全球急性胃肠炎最常见的原因,也是食源性胃肠炎的主要原因,所致胃肠炎以起病急、病程短为特点。诺如病毒的感染性很强,很少的病毒量（小于100个病毒颗粒）即可造成感染。     

某老年护理院诺如病毒性胃肠炎暴发原因分析

诺如病毒(Norovirus,NoV)属于人类杯状病毒,是引起人类非细菌性急性胃肠炎的重要病原体.NoV与流感病毒相似,具有传染性强、传播迅速快,能够感染所有的年龄组人群,特别是免疫力低下的老年人,感染后极易引起暴发,成为难以控制的胃肠炎疾病,Ralph Baric等[1]称之为"胃肠性流感".随着检测技术发展,近年来老年护理院内由NoV引起的急性胃肠炎暴发的报道越来越多[2-4],严重影响到老年人的身心健康.为此对某老年护理院于2010年1月发生的一起急性胃肠炎疫情进行分析,为今后老年人NoV性胃肠炎暴发的病原体分析与防控提供参考依据.     

某老年公寓诺如病毒胃肠炎暴发疫情调查

[目的]回顾分析本市某老年公寓暴发一起以呕吐、腹泻为主要症状的胃肠炎疫情,为胃肠炎暴发处理提供依据. [方法]收集整理暴发疫情调查资料,根据临床、流行病学和实验室检验结果进行分析. [结果]该老年公寓共发生32例胃肠炎病例,罹患率为21.77%;采用预防措施后无续发病例,采集18件病人粪便标本中ELASA检出诺如病毒阳性5件,阳性率27.8%;RT-PCR检出诺如病毒7件阳性,阳性率38.9%,基因测序分析研究证实为诺如病毒GGⅡ/4型. [结论]该起腹泻疫情为诺如病毒感染所致,对现场进行消毒预防续发病例的发生是非常有效的.     

浙江省2006-2007年暴发性胃肠炎中诺如病毒的分子流行病学分析

目的 分析浙江省2006-2007年暴发性病毒性胃肠炎中诺如病毒感染的分子流行病学特征.方法 收集监测期间暴发性病毒性胃肠炎疫情患者的粪便标本及相关流行病学资料.采用RT-PCR及荧光定量RT-PCR检测诺如病毒.随机选掸部分阳性标本扩增部分多聚酶区和衣壳蛋白片段,进行序列测定,结合诺如病毒I(GI)、Ⅱ(GⅡ)基因型参考株进行进化分析.结果 诺如病毒感染暴发性胃肠炎共5起,发生时间均集中于9-12月,送检标本63份,诺如病毒检测阳性45份.序列分析结果显示,浙江省诺如病毒序列与诺如病毒GⅡ/4型参考株同源性最高,其中与北京2006年、荷兰2006年诺如病毒GⅡ/4型变异株最为接近,核苷酸同源性分别为99.7%和98.5%～99.0%.诺如病毒与北京、荷兰流行的GⅡ/4型变异株处于同一分支.结论 诺如病毒是浙江省病毒性腹泻暴发疫情的重要病原体,流行时间集中于秋季,其流行株为GⅡ/4型变异病毒株.     

诺如病毒感染国内外研究进展

全球诺如病毒胃肠炎暴发呈明显增加趋势。诺如病毒不同型别之间的重组频繁发生,诺如病毒感染已成为危害人类健康的重要的公共卫生问题。本文就诺如病毒的病原学、流行病学、检测方法和诺如病毒胃肠炎的临床表现、诊断、治疗及预防进行了综述。     

诺如病毒的病原特点和感染机制研究进展

诺如病毒是最早被确定为引起胃肠炎的病原,但由于诺如病毒不易获得和无常规检测方法限制了人们对诺如病毒是重要病原的认识。近年,随着对诺如病毒的深入研究和新的检测技术的应用,逐渐提高了人们对诺如病毒影响的认识。就诺如病毒的病原特点和感染机制研究进展进行综述。     

GⅠ.P11-GⅠ.6型诺如病毒分子特征分析

目的 分析引起北京市丰台区某小学1起胃肠炎疫情的诺如病毒分型特征，为诺如病毒防控提供参考依据。方法 2021年10月在北京市丰台区某小学发生1起胃肠炎疫情，留取粪便标本做便常规检测和便隐血检测，并在便标本中提取核酸，使用荧光定量PCR技术进行诺如病毒核酸检测，采用一步法逆转录PCR扩增特异性核酸片段分析诺如病毒亚型。结果 共14例胃肠炎病例，14份粪便标本便常规结果正常，7份便隐血结果阳性，阳性率为50.0%。13份标本检测出诺如病毒阳性，基因型别为GⅠ.P11-GⅠ.6。结论 本次疫情检测出的诺如病毒型别引起的胃肠炎便隐血阳性率较高，超过其他文献报道的比率，并发现其在氨基酸水平上聚合酶区和VP1区都发生了关键位点的变异。需持续进行疫情监测和防控工作，以减少该类疫情的发生。     

一起老年病区诺如病毒医院感染暴发的调查

目的对北京某所三甲医院老年病区暴发的一起诺如胃肠炎医院感染进行调查。方法根据统一设计的流行病学调查表,逐一对腹泻、呕吐患者进行个案调查;收集感染者的人口统计学等信息,同时采集便标本,使用实时RT-PCR检测诺如病毒,对第二轮产物进行测序,并通过BLAST进行诺如病毒基因库比较。结果 2007年10月31日-11月12日共发生24例诺如病毒胃肠炎医院感染,包括17例住院患者,5名医务工作者及2名其他人员;该病区68.0%的患者被感染;对收集到的13份便标本进行诺如病毒检测,其中9份结果阳性,均属于GⅡ-4基因型。结论此次急性胃肠炎医院感染暴发是由诺如病毒引起的,涉及患者、医务工作者及其家属,于暴发3周后得到控制。     

诺如病毒医院内消毒隔离措施的制定与实施

目的针对杭州市部分医院在住院患者中发生急性非细菌性胃肠炎，制定消毒隔离措施。方法2006年12月23日至2007年1月9日，某院一内科病区发生急性胃肠炎19例，其中3例患者采集粪样送检诺如病毒监测。结果经RT—PCR检测，3份粪样中，2份诺如病毒（GⅡ）核酸阳性；该院内科病区的急性胃肠炎罹患率为37．25％（19／51）；为此，本文针对诺如病毒的病原学特点及多途径感染的流行病学特征，制定了包括对污物、物表、物品消毒以及患者的隔离和个人防护等10项措施，并立即付诸实施。结论该院内科病区的急性胃肠炎疫情得到有效控制，疫情未在其他病区扩散蔓延。制定的诺如病毒医院内消毒隔离措施是有效的、可行的。     

广州市1起诺如病毒急性胃肠炎暴发的实验室检测

目的确定1起学校急性胃肠炎暴发原因。方法采集病例粪便标本,直饮水标本,采用实时荧光定量(Real-time)PCR和RT-PCR方法检测病毒核酸,阳性标本测序分析。结果 5份粪便标本中3份呈诺如病毒阳性,2份直饮水标本均呈诺如病毒阳性。3份病例粪便标本病毒株核苷酸序列一致,均为GⅡ-4型,提示病毒同源。结论对诺如病毒进行核酸检测,证实该疫情为一起诺如病毒GⅡ-4型引起的急性胃肠炎暴发。     

诺如病毒影响及口岸预防

诺如病毒是急性非菌性胃肠炎的病原之一。近几年，美国、加拿大、日本、新加坡及意大利等多个国家先后爆发诺如病毒感染疫情，其中以日本的疫情最为严重。诺如病毒感染的爆发会给各国的医学机构带来沉重的负担，对旅游业、饮食业、食品贸易带来严重影响。为了预防和控制诺如病毒感染在口岸的爆发和传播，对诺如病毒的概况、特点、流行情况、影响及口岸预防工作进行了综述。     

深圳地区2006年诺如病毒分子流行病学研究

诺如病毒是世界范围内引起急性胃肠炎的主要病原体,1990年首次证实我国也存在该病毒引起的感染[1],此后北京、长春、河北、兰州、广州、福州等地均发现存在诺如病毒感染,表明我国急性胃肠炎病例诺如病毒感染亦相当普遍.本研究对2006年深圳地区急性胃肠炎中诺如病毒进行分子生物学研究.     

2013年广州市某小学诺如病毒感染痰隋的流行病学分析

目的探讨诺如病毒感染引起的急性胃肠炎的暴发特点和流行原因,为制定防控策略提供依据。方法采用现场流行病学调查方法,结合临床表现及实验室检测对广州市某小学暴发的诺如病毒引起的感染性腹泻疫情进行流行病学分析。结果2013年12月23—26日广州市某小学共发生急性胃肠炎病例107例,均为学生,罹患率9．18％;95．33％（102／107）表现为呕吐,46．73％（50／107）为发热,27．10％为（29／107）腹泻,症状较轻。进行校外托管是该起疫情的危险因素（OR=3．215,95％CI：1．150-8．987,X^2=5．107,P〈0．05）。采集的12例病例粪便／肛拭子样本,7例为诺如病毒GⅡ型阳性。结论在校外托管班进行午餐和午休托管可能是本次诺如病毒感染疫情发生的危险因素,校外托管班应引起教育和卫生部门的关注。     

一起邮轮诺如病毒痰隋的病原学检测

[目的]总结诺如病毒实验室诊断经验,进一步完善诺如病毒的检测方法。（方法]针对上海口岸发生的又1起邮轮急性胃肠炎爆发疫情,应用酶联免疫吸附实验（ELISA）、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、电镜观察等技术,对送检的9份粪便标本进行检测。[结果]运用2种ELISA试剂盒在9份标本中分别检出4份和5份标本诺如病毒抗原阳性;运用逆转录-聚合酶链方法,发现9份标本中有7份扩增出诺如病毒特异性条带;运用电镜在镜下观察到诺如病毒颗粒。[结论]诺如病毒检测方法的建立将为口岸公共卫生突发事件应急体系的建设提供重要的技术支持。     

病毒性胃肠炎的病原学检测

目的 了解某医院的不明原因胃肠炎病例的病原学特点,为科学预防可能的流行病提供科学依据.方法 收集某医院2010年12月出现胃肠炎症状的10例患者的排泄物进行病原学检测,包括轮状病毒、诺如病毒、札幌病毒、星状病毒以及肠腺病毒5种肠道病毒的荧光定量PCR检测和测序分析.结果 10份粪便标本中,7例检测到诺如病毒核酸阳性,经测序分析为GⅡ.4亚型,未检测到其他病毒,确定为该病毒感染所致.结论 南京地区存在诺如病毒的威胁,导致该医院患者胃肠炎的病原是诺如病毒.与其他国家和地区一样,GⅡ.4亚型为主要感染亚型,应加强相应的抗病毒健康教育宣传,尤其是可能导致传播的预防工作.     

2015年-2017年湖州诺如病毒感染的流行特征研究

目的研究湖州地区诺如病毒(NoV)的流行病学模式和遗传特征。方法2015年1月-2017年12月,收集急性胃肠炎患者的粪便标本,进行实时RT-PCR(qPCR)检测NoV。RT-PCR用于基因组扩增和序列测定。病毒基因型别使用在线NoV分型工具(http://www.rivm.nl/mpf/norovirus/typingtool)分型。结果NoV感染的总体流行率为23.7%(414/1757)。在414个NoV阳性标本中,393个被鉴定为NoV GⅡ,11个属于NoV GⅠ,10个是NoV GⅠ和GⅡ共同感染。共235份标本成功测序,这3年的主要流行型别是GⅡ.Pe-GⅡ.4 Sydney2012和GⅡ.P17-GⅡ.17,2017年还出现新的流行优势株GⅡ.P16-GⅡ.2。全年均检测到NoV感染,流行高峰发生在每年的冬春期间。结论在2014年10月GⅡ.17首次在湖州出现后,稳步取代了以前流行的GⅡ.4 Sydney 2012菌株。但在2016年GⅡ.4 Sydney 2012又回到主导地位,2017年出现新的流行优势株GⅡ.P16-GⅡ.2。