黑翅土白蚁抗肾阳虚的实验研究

目的观察黑翅土白蚁对肾阳虚大鼠肾功能的影响并探讨其机制。方法用腺嘌呤制备肾阳虚大鼠模型。SD雄性大鼠50只,随机分为5组:正常对照组、模型对照组、金匮肾气丸组、黑翅土白蚁高、低剂量组。各治疗组给予相应药物28 d后,测定大鼠血清中总超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、睾丸酮、促甲状腺激素(TSH)、甲状腺激素(T4)水平。结果 黑翅土白蚁能使肾阳虚大鼠血清中SOD、睾丸酮、TSH、T4水平明显升高,MDA水平明显下降。结论 黑翅土白蚁具有提高肾阳虚大鼠的抗氧化能力,减少自由基的损伤,改善甲状腺、肾上腺功能,保护肾脏的作用。其机制可能与其对下丘脑-腺垂体-性腺轴的作用有关。     

灵龟八法按时开穴灸对衰老大鼠睾丸细胞凋亡的影响

目的:观察灵龟八法按时开穴灸对衰老大鼠超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量及抗凋亡调控因子B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和促凋亡调控因子Bcl相关X蛋白(Bax)表达的影响,探讨其作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、灵龟八法组,每组8只。除空白组外,其余两组均以D-半乳糖溶液(500 mg/kg)腹腔注射复制亚急性衰老模型。造模成功后,灵龟八法组大鼠予以灵龟八法按时开穴灸治疗,每穴艾灸3壮,1次/d,连续28 d。采用ELISA法观察大鼠血清中SOD、MDA的含量;HE染色法观察大鼠睾丸组织一般形态和间质细胞数量的变化;TUNEL染色法检测大鼠睾丸细胞凋亡率;Western blot法检测大鼠睾丸组织中Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清SOD含量、睾丸组织间质细胞数量减少(P<0.01),血清MDA含量增多(P<0.01),睾丸细胞凋亡率、睾丸组织中Bax蛋白的相对表达量升高(P<0.01),睾丸组织中Bcl-2蛋白的相对表达量降低(P<0.01)。与模型组比较,灵龟八法组大鼠血清SOD含量、睾丸组织间质细胞...     

天蚕壮阳散对肾阳虚型雄性亚健康大鼠血清SOD、MDA的影响

目的探讨天蚕壮阳散干预雄性"肾阳虚"型亚健康大鼠的亚健康状态。方法 15只雄性大鼠作为正常对照组,灌胃生理盐水,25只雄性大鼠用维生素B4造模,控制用药剂量及灌胃时间,观察其阳虚症状,两组大鼠各取5只检测其血清SOD、MDA,显微镜观察其睾丸微细结构;造模组大鼠分成两组:天蚕壮阳散干预组和模型对照组,每组各10只,天蚕壮阳散干预组灌胃天蚕壮阳散,模型对照组和正常对照组灌胃生理盐水,干预结束后每组各取5只检测其血清SOD、MDA水平,显微镜观察其睾丸微细结构。结果维生素B4建立的雄性"肾阳虚"型亚健康大鼠模型出现阳虚症状,血清SOD活性低、MDA浓度高,睾丸曲细精管生精细胞排列紊乱、层次减少、管腔扩大,细胞处于变性阶段。经天蚕壮阳散干预后大鼠阳虚症状减轻,血清SOD活性明显升高、MDA浓度显著下降。睾丸曲细精管生精上皮增生明显,细胞层次增多、排列紧密,与正常大鼠睾丸曲细精管几无差异。结论维生素B4建立雄性"肾阳虚"型亚健康大鼠模型成功。天蚕壮阳散有改善肾阳虚型亚健康症状的作用。     

不同构建方法对肾阳虚大鼠模型的影响

目的:探讨简便有效的肾阳虚建模方法及对大鼠的影响,为方剂药效学及机制研究奠定基础。方法:用腺嘌呤皮下注射和氢化可的松肌肉注射构建肾阳虚大鼠模型,观察大鼠表现及肾脏睾丸病理变化,测定其脏器指数、自主活动度、游泳时间、血清尿素(SU)、血清肌酐(Cr)、SOD和MDA活力。结果:与空白组相比,两种建模方法均使大鼠自主活动度和游泳时间降低(P0.05),肾脏指数和睾丸指数增高(P0.05);腺嘌呤组大鼠的Cr水平、SOD活力和MDA活力均升高(P0.05);氢化可的松组大鼠的Cr水平和SOD活力降低(P0.05)、MDA活力升高(P0.05);病理变化上,两种建模方法均出现炎性细胞浸润肾间质、睾丸生精小管略萎缩,排列疏松,各级生精细胞排列松散等现象。结论:腺嘌呤与氢化可的松构建肾阳虚模型在虚证表现和肾脏睾丸病变上相似,但腺嘌呤可能是通过损害肾滤过水平、睾丸生理功能等引起Cr、SOD和MDA活力升高,氢化可的松则可能是通过耗散机体能量,减弱机体抵抗能力,影响Cr生成、降低SOD活力和增高MDA活力,具体原因有待进一步探究。     

血必净对大鼠睾丸扭转/复位缺血再灌注损伤的修复作用

【目的】 探讨血必净注射液对大鼠睾丸扭转/复位缺血再灌注（I/R）损伤的修复作用。【方法】 将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,血必净低、高剂量组和地塞米松组,每组8只。除假手术组外,其他各组大鼠构建睾丸扭转/复位模型。术后,血必净低、高剂量组和地塞米松组大鼠分别对应腹腔注射0.5、2.0 mL·kg-1·d-1血必净注射液和0.5 mL·kg-1·d-1地塞米松,连续3 d。给药结束后,采用苏木素-伊红（HE）染色法观察睾丸组织病理学改变,酶联免疫吸附分析（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和Toll样受体4（TLR4）的含量,采用硫代巴比妥酸法检测睾丸组织丙二醛（MDA）含量,采用羟胺法测定睾丸组织超氧化物歧化酶（SOD）水平,末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记（TUNEL）染色法检测睾丸组织生殖细胞凋亡水平。【结果】 与假手术组比较,模型组睾丸曲细精管排列紊乱,生殖细胞脱落,睾丸组织 MDA 含量、生殖细胞凋亡水平,血清 TNF-α、IL-1β 和 TLR4 水平均升高,睾丸组织 SOD 水平降低（均 P＜ 0.05）。与模型组比较,血必净组生精细胞排列逐渐清晰,脱落细胞减少,睾丸组织MDA含量、生殖细胞凋亡水平,血清TNF-α、IL-1β和TLR4水平均降低,睾丸组织SOD水平升高（均P＜0.05）。【结论】 血必净可改善睾丸I/R病理损伤,降低生殖细胞的凋亡,减轻氧化应激,降低炎症因子的表达,对大鼠睾丸扭转/复位I/R损伤有修复作用。     

天年饮对亚急性衰老大鼠睾丸组织SOD活性及生精细胞凋亡的影响

目的 :观察天年饮 (Tiannianyin ,TNY)对亚急性衰老大鼠睾丸组织超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase ,SOD)的活性及对睾丸生精细胞凋亡的影响。方法 :采用D -半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老大鼠模型 ,检测TNY灌胃前后大鼠血清睾酮含量、睾丸组织SOD的活性及睾丸生精细胞凋亡的情况。结果 :D -半乳糖致亚急性衰老大鼠血清睾酮含量及睾丸组织SOD的活性均明显下降 ,与正常大鼠比较差异显著 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;经TNY灌胃后二者均升高接近正常水平 ,与模型大鼠相比有明显差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。D -半乳糖致亚急性衰老大鼠睾丸曲细精管凋亡百分率及凋亡细胞阳性率均升高 ,与正常组比较差异显著 (P <0 0 5 ) ;经TNY灌胃后 ,二者均降低 ,与模型大鼠比较有明显差异 (P <0 0 5 )。结论 :TNY可提高亚急性衰老大鼠血清睾酮含量、睾丸组织SOD的活性及降低衰老大鼠睾丸生精细胞的凋亡指数 ,具有一定延缓性腺衰老的作用。     

肾阳虚大鼠下丘脑神经元型NOS mRNA表达及补肾药的调整作用

目的：研究补肾中药对肾阳虚大鼠下丘脑组织中NO/cAMP信号传导系统的影响。以探讨肾阳虚的发病机制。方法：用醋酸可的松肌肉注射法建立大鼠肾阳虚模型。采用放射免疫分析法测定cGMP含量,用反转录PCR半定量法测定nNOSmRNA水平,观察补肾药复方对肾阳虚大鼠血清NO水平及下丘脑组织中组分别增加175%和223%,下丘脑组织NOS活性升高,nNOS表达增强,血清和下丘脑组织cGMP水平升高。补肾药对上述指标有不同程度的下调。肾阳虚证时下丘脑NOS/cGMP信号传导系统作用增强,补肾药对其具有调整作用。结论：实验结果揭示NO/cAMP系统在肾阳虚证发病机制中起一定作用。这也为下丘脑在肾阳虚发病中的重要地位提供了理论依据。     

清香散对湿热证大鼠的抗氧化和肝细胞凋亡作用

目的：观察湿热证大鼠模型的氧化损伤和肝细胞凋亡情况,以及清香散对湿热证大鼠的抗氧化和肝细胞凋亡的作用。方法：Wistar大鼠随机分为湿热证模型组、清香散治疗组和正常对照组,采用流式细胞术分析和电镜检测肝细胞凋亡改变,同时测定血清超氧化歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和肝组织脂质过氧化物(120)水平。结果：湿热证模型大鼠肝细胞出现明显凋亡形态改变,凋亡率明显增加,血清SOD活性下降,MDA含量上升,肝脏IPO含量明显上升。清香散治疗组大鼠肝细胞凋亡率明显下降,血清SOD活性上升,MDA含量下降,肝脏120含量明显下降。结论：清香散具有抑制湿热证大鼠模型氧化过程和抗细胞凋亡的功能。     

山楂叶总黄酮对2型糖尿病大鼠睾丸组织氧化应激的影响

目的:研究山楂叶总黄酮(HLF)对2型糖尿病大鼠睾丸组织氧化应激的影响。方法:大鼠采用高脂高糖饮食8周后腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法制备2型糖尿病大鼠模型。造模成功后的大鼠随机分为模型组和H LF低(50mg/kg)、中(100mg/kg)、高(200mg/kg)剂量组,每组16只,另取16只正常大鼠作为正常组。各组大鼠分别灌胃给予相应药物或生理盐水,每日1次,疗程6周。干预结束后,测定各组大鼠空腹血糖水平,称量体重并计算睾丸指数,测定血清睾酮含量;取睾丸组织测定酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)和谷氨酰转肽酶(γ-GT)含量;测定睾丸组织中抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)]活性和丙二醛(MDA)含量;末端标记法(TUNEL)观察睾丸组织细胞凋亡状况并计算凋亡指数(AI),Western blotting法测定睾丸组织中NF-κB蛋白表达。结果:与模型组比较,HLF中、高剂量组大鼠空腹血糖水平显著降低,睾丸指数和血清睾酮含量显著升高,睾丸组织中A CP、LDH、γ-GT含量显著升高,SOD、GSH-Px、CAT活性均显著升高且MDA含量显著降低,差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01)。模型组睾丸组织凋亡细胞数量较正常组明显增多,经H LF治疗后上述病理性变化和细胞凋亡状况均明显改善,其中以H LF高剂量组效果最为显著;与模型组比较,HLF中、高剂量组A I显著降低(P0.05,P0.01),睾丸组织中NF-κB蛋白表达量显著下调(P0.05,P0.01)。结论:HLF具有抑制2型糖尿病大鼠睾丸组织氧化应激损伤的作用,从而起到保护2型糖尿病大鼠睾丸组织的作用。     

右归丸对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-性腺轴影响的实验研究

目的:探讨右归丸对氢化可的松所致肾阳虚动物模型下丘脑-垂体-性腺轴的影响。方法:氢化考的松法制造大鼠肾阳虚模型,观察模型组、用药组、空白组体重变化,睾丸重量及HE染色后睾丸精曲小管的变化。放射免疫法测取血清睾酮含量,比较各组差异。结果表明,右归丸能显著提高肾阳虚大鼠的睾酮含量,对大鼠肾阳虚证有改善作用。     

山茱萸水提取物对肾阳虚动物模型肝脏和睾丸影响的实验研究

目的 :探讨山茱萸补肾阳作用。方法 :应用氢化考的松所致的肾阳虚动物模型 ,观察山茱萸水溶物对肾阳虚大鼠的影响。结果 :山茱萸水溶物具有使肾阳虚大鼠肝脏重量接近正常 ,肝细胞病理改变减轻 ,肝细胞RNA和糖原含量升高 ,丙二醛含量下降 ;它还能使肾阳虚大鼠睾丸脏器系数向正常方向逆转 ,使睾丸间质细胞内RNA含量增加。结论 :山茱萸水溶物具有保护和改善肾阳虚动物模型肝脏和睾丸器官机能的功效。     

毓宫胶囊对肾阳虚型子宫发育不良大鼠IL2-IFN-NKC免疫调节网影响的研究

[目的]观察毓宫胶囊对肾阳虚型子宫发育不良大鼠IL2(白介素-2)-IFN(干扰素)-NKC(自然杀伤细胞)免疫调节网的影响,探讨其治疗子宫发育不良的机制。[方法]通过对幼龄SD雌鼠40只随机分为4组:正常对照组(A组)、模型组(B组)、右归丸组(C组)、毓宫胶囊组(D组),肌注地塞米松复合双侧卵巢切除建立肾阳虚型子宫发育不良模型,对模型动物用毓宫胶囊治疗,右归丸做对照,治疗18d后处死,取胸腺、脾脏、子宫称质量,并测定脾组织IL2、IFN、NKC活性。[结果]肾阳虚子宫发育不良大鼠胸腺、脾脏、子宫质量以及IL2、IFN、NKC活性均较正常组明显下降(P<0.01),毓宫胶囊能提高胸腺、脾脏、子宫质量及IL2、IFN、NKC活性(P<0.01)。[结论]肾阳虚型子宫发育不良大鼠的非特异性免疫力下降;毓宫胶囊在促进肾阳虚型子宫发育不良大鼠子宫发育的同时,提高IL2、IFN、NKC活性,正向调节其免疫功能。即毓宫胶囊有调节神经内分泌免疫网的作用。     

强肌健力饮对肾阳虚证大鼠环核苷酸水平的调节作用

目的:观察强肌健力饮对肾阳虚证大鼠血浆环核苷酸水平的影响,探讨该方防治肾阳虚证的作用机理。方法:选用SD雄性大鼠,随机分为正常对照组,肾阳虚模型组,强肌健力饮低、中、高剂量组、右归丸组;采用氢化可的松致肾阳虚证大鼠模型,观察各组动物胸腺和肾上腺重量指数,以及血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量和cAMP/cGMP比值的变化。结果:肾阳虚模型组大鼠血浆cAMP含量及cAMP/cGMP比值与正常对照组相比均降低(P<0.01),cGMP含量则显著升高(P<0.01)。而强肌健力饮各剂量均能使cAMP含量和cAMP/cGMP比值升高及降低cGMP含量(P<0.01),又可使胸腺指数增大等作用。结论:强肌健力饮能够改善肾阳虚证大鼠的肾虚症状,其作用机理与调节cAMP、cGMP水平有关。     

毓宫胶囊对肾阳虚型子宫发育不良大鼠IL2-IFN-NKC免疫调节网影响的研究

【目的】观察毓官胶囊对肾阳虚型子宫发育不良大鼠IL2（自介素-2）-IFN（干扰素）-NKC（自然杀伤细胞）免疫调节网的影响，探讨其治疗子宫发育不良的机制。【方法】通过对幼龄SD雌鼠40只随机分为4组：正常对照组（A组）、模型组（B组）、右归丸组（C组）、毓宫胶囊组（D组），肌注地塞米松复合双侧卵巢切除建立肾阳虚型子宫发育不良模型，对模型动物用毓宫胶囊治疗，右归丸做对照，治疗18d后处死，取胸腺、脾脏、子宫称质量，并测定脾组织IL2、IFN、NKC活性。【结果】肾阳虚子宫发育不良大鼠胸腺、脾脏、子宫质量以及IL2、IFN、NKC活性均较正常组明显下降（P〈0．01），毓宫胶囊能提高胸腺、脾脏、子宫质量及IL2、IFN、NKC活性（P〈0．01）。【结论】肾阳虚型子宫发育不良大鼠的非特异性免疫力下降；毓宫胶囊在促进肾阳虚型子宫发育不良大鼠子宫发育的同时，提高IL2、IFN、NKC活性，正向调节其免疫功能。即毓宫胶囊有调节神经内分泌免疫网的作用。     

真武汤对肾阳虚肾衰模型大鼠肾脏病理影响

目的:本研究以形态学等检测技术,观察真武汤对肾阳虚型慢性肾衰模型大鼠肾组织的影响。方法:通过研究温补肾阳传统名方真武汤对肾阳虚慢性肾衰模型肾脏病理的影响,观察真武汤对肾功能的保护作用。结果:与对照组比较,模型组大鼠肾组织光镜观察可见肾小球充血、囊腔扩大、间质纤维组织增生及大量炎细胞浸润,肾小管呈代偿性扩张。真武汤组大鼠肾组织光镜观察可见病理损伤明显减轻。结论:肾阳虚型慢性肾衰模型大鼠肾组织病理可见明显损伤,真武汤能够使其逆转。     

霍山石斛不同提取物对肾阴虚证、肾阳虚证小鼠抗疲劳作用及物质基础研究

目的:研究霍山石斛水提物、醇提物对肾阴虚证、肾阳虚证小鼠抗疲劳作用及其物质基础。方法:180只健康昆明雄性小鼠适应性喂养7d后随机分为空白组、肾阴虚模型组、肾阳虚模型组、西洋参组、人参组、肾阴虚各给药组、肾阳虚各给药组,分别每日灌服甲状腺素溶液和氢化可的松溶液制备肾阴虚证、肾阳虚证动物模型,给药14d,检测各组小鼠的力竭游泳时间、肝糖原、肌糖原、血乳酸(BLA)、游离脂肪酸(FFA)、血尿素氮(BUN)、甘油三酯(TG)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的变化。结果:与肾阴虚模型组比较,霍山石斛水提物各剂量组、醇提物高剂量组能升高模型小鼠的力竭游泳时间,升高肝糖原和肌糖原含量,降低血清FFA、BUN和TG,提高LDH值,降低肝脏CK、Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-ATP酶值(P<0.05,P<0.01)。与肾阳虚模型组比较,霍山石斛水提物高剂量组能升高模型小鼠的力竭游泳时间,升高肝糖原和肌糖原含量,降低BLA水平,升高血清FFA、BUN、TG、CK及肝脏LDH、Na⁺-K⁺-ATP酶值(P<0.05,P<0.01),霍山石斛醇提物高剂量能升高模型小鼠的力竭游泳时间和肌糖原含量(P<0.05)。结论:霍山石斛水提物能提高肾阴虚证、肾阳虚证小鼠的抗疲劳作用,具有双向调节作用,可能是霍山石斛补虚作用的主要物质基础,霍山石斛醇提物仅能提高肾阴虚证小鼠的抗疲劳作用,可能是霍山石斛滋阴清热功效的主要物质基础。     

肾阳虚大鼠垂体-甲状腺轴功能动态分析

目的:了解肾阳虚时垂体-甲状腺轴功能动态变化特征。方法:肌肉注射可的松复制肾阳虚大鼠模型,采用分批宰杀的方法观察早期、中期和晚期肾阳虚大鼠垂体-甲状腺轴功能指标,分析变化规律和特征。结果:肾阳虚不同时期垂体-甲状腺轴功能下降程度不一。结论:较理想的肾阳虚动物模型时间为15~30天。     

维生素AD对肾阳虚证模型大鼠肾上腺、睾丸、血清睾酮水平的影响

目的:探索维生素AD对肾阳虚证模型大鼠肾上腺、睾丸、血清睾酮水平的影响。方法:将大鼠随机分为正常组、维生素AD高剂量组、维生素AD治疗剂量组、维生素AD低剂量组、模型组,以氢化可的松建立肾阳虚模型,维生素AD高剂量组、维生素AD治疗剂量组、维生素AD低剂量组用维生素AD浓缩滴剂灌胃;正常组、模型组灌以生理盐水。2周后,用Elecsys-2010全自动电化学发光免疫分析仪测血清睾酮,用分析天平称取肾上腺、睾丸的质量。结果:模型组血清睾酮含量显著低于正常组(P<0.05),肾上腺质量也显著低于正常组(P<0.05);维生素AD低剂量组肾上腺质量显著高于模型组(P<0.05);维生素AD治疗剂量组血清睾酮含量显著高于模型组(P<0.05)。结论:维生素AD可提高肾阳虚证模型大鼠的肾上腺质量,并能提高其血清睾酮含量。补充维生素AD可作为肾阳虚证预防和治疗的辅助疗法。     

四逆汤不同提取液对甲减阳虚证大鼠生殖器官及性激素的影响

目的:研究四逆汤不同提取液对甲减阳虚证大鼠模型下丘脑-垂体-性腺轴的影响,探讨四逆汤发挥助阳作用的机制与物质基础。方法:灌胃丙基硫氧嘧啶溶液法造模,用四逆汤不同提取液对此动物模型进行治疗,实验结束后,摘取生殖器官,测其质量指数并作病理切片,同时检测性激素水平。结果:四逆汤不同提取液可以对抗大鼠模型睾丸、前列腺质量指数的增加,减轻其病理损伤,且明显提高性激素睾酮水平,四逆汤醇提液疗效显著。结论:四逆汤可改善阳虚证大鼠生殖器官质量指数及性激素水平。     

白附子对正常和肾阳虚证大鼠毒性作用的差异

目的从代谢组学角度探讨正常和肾阳虚证大鼠对白附子的毒性反应的差异。方法将80只SD雄性大鼠随机分为肾阳虚证模型组和正常组,采用肌肉注射氢化可的松琥珀酸钠的方法造模,造模结束后,把两组大鼠随机分为低剂量、小剂量、中剂量和大剂量给药组和空白组,每组8只;对各给药组大鼠连续14d灌胃给予不同浓度的白附子溶液,剂量依次为0.32、0.64、1.28、2.56g/(kg·d),空白组给予生理盐水;末次给药24h后取血浆,采用高效液相色谱-质谱联用的代谢组学技术检测血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(COR)、环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)。结果氢化可的松造模可引起血浆代谢物溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)水平和溶血磷脂酰胆碱(LPC)水平的下调。正常大鼠和肾阳虚证大鼠给予白附子后两者内源性代谢产物存在差异,随着白附子剂量的增加,正常大鼠LPC水平和LPE水平有下降的趋势,而模型大鼠LPC和LPE水平基本保持在稳定状态。结论肾阳虚证大鼠对白附子的毒性反应低于正常大鼠,印证了在证候理论指导下进行中药毒性评价的合理性。