NF-κB信号转导通路与胰岛素抵抗

核因子-κB(NF-κB)信号转导通路包括NF-κB、NF-κB抑制蛋白(IκB)和IκB激酶(IKK).其中,NF-κB是一种重要的核转录因子,参与炎症反应、免疫反应、细胞凋亡及物质代谢等多种生物进程.IKK具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性,能使多种蛋白的丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化.NF-κB信号转导通路的活化与胰岛素抵抗的发生密切相关.文章就NF-κB在胰岛素抵抗发生中作用作一综述.     

NF-κB信号转导通路与胰岛素抵抗

核因子-κB(NF-κB)是一种重要的核转录因子,NF-κB信号转导通路主要包括NF-κB、NF-κB抑制蛋白(IκB)和IκB激酶(IKK),其介导的炎症反应成为近年来有关胰岛素抵抗机制研究的热点。文章就NF-κB信号转导通路及其与胰岛素抵抗关系的研究进展进行综述。     

IκB激酶结构和功能研究进展

在哺乳动物中,核转录因子NF—κB家族包括五个成员：NF—κB1（p105／p50）,NF—κB2（p100／p52）,RelA（p65）,RelB,and c—Rel。它们调控与炎症反应,细胞增殖分化及凋亡相关基因的表达。IKK（IκB激酶）是一个蛋白激酶复合体,属于丝／苏氨酸激酶,在核转录因子的活化过程中起着重要的作用。外部刺激因子通过激活IκB激酶（IKK）,引起核转录因子的抑制蛋白IκB磷酸化,泛素化和降解,从而使核转录因子活化,进入细胞核内,调节相应基因的转录。此外,有很多研究也表明,IKK的组成性活化和细胞的恶性转化有密切关系。目前已经发现并克隆出了细胞因子诱导的IKK复合体的四个主要组分：IKKα、IKKβ、IKKγ和IKAP。本文综述了IKK的结构、功能,及其与肿瘤发病的关系。     

肾癌组织中NF—κB信号分子的表达及As2O3对人肾癌786—0细胞中NF—κB信号通路影响的研究

目的：探讨NF—κB信号通路与肾癌发生和发展的关系以及三氧化二砷（As2O3）对人肾癌细胞系786—0的NF—κB信号转导的影响。方法：采用ICC、ISH、Westernblot和EMSA技术检测15例肾癌组织和10例正常肾组织中NF—κB信号分子IKKα／β、IκBα、p65和ICAM-1的表达和NF—KBDNA结合活性；As2O3处理肾癌786—0细胞后NF—κB信号分子蛋白表达、p65mRNA表达和NF—κBDNA结合活性的改变。结果：肾癌组织中NF—κB DNA结合活性及p65、IKKα／B和ICAM-1蛋白表达量升高（R〈0．01），但IKB仅蛋白明显降低（P〈0．01）；经2μmol／L浓度As2O3处理786-0细胞72h后，p65mRNA含量、NF—κBDNA结合活性及p65、IKKα/β、IκBα和ICAM-1蛋白的表达量均降低（P〈0．01）。结论：NF—κBDNA结合活性及p65、IKKα/β和ICAM-1蛋白增加可能与肾癌的发生和进展有关；2μmol／L以上浓度As2O3可以全面抑制786—0细胞中p65、IKKα/β、IκBα和ICAM-1蛋白和p65mRNA的表达，抑制NF—κBDNA结合活性，可能是As2O3抑制786—0细胞增殖的另一种机制，NF-κB有可能成为抗肾癌治疗的靶点之一。     

NF-κB与心脏移植

1 NF～κB概述 核因子-κB（nuclear factor—κB NF-κB）首先是由Sen和Baltimore于1986年报道，NF-κB是一组真核细胞转录因子，由NF—κB／Rel蛋白家族成员NF—κB1（p50，其前体p105），NF-κB2（p52，前体p100），RelA（p65），RelB和C—Rel以同源或异源二聚体形式组成，不同的NF—κB／Rel蛋白双双结合形成不同的NF—κB，以p50／p65发现最早，分布和作用最广泛，是通常所说的NF-κB。通常情况下，大多数细胞中的NF—κB与其抑制因子（IκB）蛋白家族成员（包括bcBα，IκBβ，IβBγ和BcL-3等，其中M3a是最重要的NF-κB活性调控成员）相结合，     

NF-κB/IκB信号通路介导血管紧张素Ⅱ诱导的系膜细胞促炎性细胞因子表达

目的：探讨核因子—κB(NF—κB)／IκB信号通路在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小球系膜细胞促炎性细胞因子表达中的作用。方法：应用核酸酶保护法检测系膜细胞肿瘤坏死因子α(TNF—α)、IL-1α和IL-1β mRNA表达；应用凝胶电泳迁移率和Western blot检测肾小球系膜细胞中NF—κB活化、p65亚基核转位以及IκBα和IκBβ的降解。结果：正常培养状态下，系膜细胞可组成型表达TNF—α和IL—1β，而不表达IL-1αmRNA，AngⅡ刺激后促炎性细胞因子表达显著上调，NF—κB特异性抑制剂2-硫代氨基甲酸吡咯烷显著抑制AngⅡ诱导的促炎性细胞因子基因表达；AngⅡ诱导系膜细胞NF—κB活化，p65核转位及胞质内IκBα和IκBα的降解。结论：AngⅡ诱导肾小球系膜细胞中促炎性细胞因子表达可能通过NF—κB／IκB信号转导通路来实现。     

IκB激酶(IKK)与糖尿病视网膜病变

糖尿病视网膜病变是糖尿病最严重的并发症之一。核转录因子-κB是一种具有多向转录调节作用的蛋白质,在糖尿病性视网膜病变发生及发展过程中起重要作用,对于它们的关系日益受到重视。IKK激酶是核转录因子κB信号转导通路的关键性激酶,进一步研究IKK激酶可以更好地从分子生物学的角度理解糖尿病视网膜病变的发病机制,为其预防和治疗提供思路。现就核转录因子-κB和IKK激酶在糖尿病视网膜病变各个环节中的作用进行综述。     

喉癌NF-κB信号转导通路的免疫组化研究

目的 :探讨NF -κB信号转导通路中的IKK、IκB、NF -κBP6 5在喉癌组织中的表达情况及意义。方法 :采用免疫组织化学染色S -P法检测 4 0例喉癌组织、2 0例正常喉粘膜组织的IKKα、IκBα、NF -κBP6 5的表达水平。结果 :喉癌组织中IKKα、NF -κBP6 5的表达水平明显高于正常组织 ,IκBα的表达水平明显低于正常组织 (P <0 .0 5 )。有颈淋巴结转移的喉癌组织中IKKα、NF -κBP6 5表达水平比无转移的喉癌组织表达明显增强 ,IκBα表达水平则明显下降 (P <0 .0 5 )。结论 :NF -κB信号转导通路可能在喉癌的发生、发展及转移中发挥重要作用。     

肾毒血清肾炎大鼠肾组织中NF-κB活化及其意义

目的：探讨肾毒血清性肾炎大鼠肾组织核因子—κB(NF—κB)活化及其意义。方法：肾毒血清肾炎应用兔抗鼠肾小球基膜肾毒血清制备。应用凝胶电泳迁移率(EMSA)和Western blot检测。肾毒血清。肾炎大鼠。肾组织中NF-κB活化及IκBα和IκBβ的降解；采用核酸酶保护法检测肾组织中IL-8表达，并分析其与NF—κB活化的关系。结果：模型组肾组织中IL-8表达显著高于正常对照组；肾毒血清肾炎大鼠肾组织中NF—κB活化显著增强，p65由胞质转移至咆核．咆质内IκBα和IκBβ降解明显增加；NF-κB活化与IL-8表达呈显著正相关。结论：NF—κB／IκB信号通路介导小球肾炎肾组织中IL-8表达。     

核因子κB与肝脏疾病

细胞核因子κB又称κ基因结合核因子（nuclear factor kgene binding,NF—κB）,是一种广泛存在于细胞中的具有多向调节作用的蛋白质分子,参与细胞激酶、趋化因子、生长因子、细胞黏附因子及早期反应的蛋白质分子基因的转录,其活性受到一个NF—κB抑制蛋白（inhibitor of κB,IκB）的抑制。近年来研究结果表明：NF—κB能介导广泛的生物学作用,参与多种疾病的发生发展过程,尤其在肝脏疾病中发挥着不可忽视的作用,本文就核因子κB与肝脏疾病之间的关系作一综述。     

核因子κB抑制剂对岛状皮瓣缺血/再灌注损伤的保护作用

岛状皮瓣游离移植过程中发生的缺血／再灌注（ischmia—reperfusion，I／R）损伤常导致皮瓣部分或全部坏死。研究表明，由活化中性粒细胞介导的急性炎症反应是皮瓣I／R损伤的重要机制，而核因子κB（NF—κB）是一种对于许多炎症因子基因具有调控作用的转录因子。已有报道，多种组织／器官在I／R过程中发生NF—κB活化，当抑制NF—κB活性则明显减轻I／R损伤。     

绞股兰皂甙对光损伤Balb/C小鼠皮肤核转录因子kappa-B的IκB和IKK蛋白表达的影响

目的研究绞股蓝皂甙（GP）抗小鼠皮肤光损伤作用,探讨其抗损伤作用的可能机制.方法采用7次隔日UVB照射Balb/C小鼠建立皮肤光损伤的动物模型,应用Brad-Ford进行蛋白浓度的测定后用Western Blot法检测小鼠皮肤中核转录因子kappa-B（NF-κB）IκB蛋白（kappaB抑制蛋白）及IKK蛋白（κB抑制蛋白激酶）的表达.结果（1）UVB照射组的小鼠表皮中IκB蛋白水平与其它组相比明显减低,而IKK蛋白与其它组相比表达较高;（2）应用1.5%绞股蓝皂甙霜组及6%绞股蓝皂甙霜组IκB蛋白表达明显高于UVB照射组;IKK蛋白表达明显低于UVB照射组,与阳性对照VitE组小鼠皮肤中IκB蛋白、IKK蛋白的表达结果相似;（3）预先使用VitE霜组,1.5%绞股蓝皂甙霜组Balb/C小鼠皮肤组织中IκB蛋白表达高于先照紫外线UVB后用VitE霜组及1.5%绞股蓝皂甙霜组;（4）预先使用VitE霜组,1.5%绞股蓝皂甙霜组其IKK蛋白表达低于先照紫外线UVB后用VitE霜组及1.5%绞股蓝皂甙霜组.结论UVB辐射可以显著抑制Balb/C光损伤小鼠皮肤组织中抑制蛋白IκB蛋白的表达,促使IKK蛋白高表达,促使NF-κB（核转录因子-kappaB）活化;1.5%绞股蓝皂甙霜及6%绞股蓝皂甙霜可使UVB照射后光损伤Balb/C小鼠皮肤组织中IkB蛋白表达升高,恢复IκB抑制蛋白的活性;IKK蛋白表达活性受到抑制,进而抑制NF-κB通路的激活.     

EGCG影响NF—κB入核后的周期阻滞效应

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）调节肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的胃癌SGC-7901细胞核转录因子κB（NF—κB）入核后的周期阻滞效应。方法胃癌SGC-7901细胞分4组：空白对照组（常规培养换液）、TNF-α实验组（终浓度10ng／mL的TNF—α,培养60min）、EGCG组（终浓度为60μg／mL的EGCG作用24h后再加终浓度10ng／mL的TNF-α,培养60min）、阳性对照药物组（NF—κB通路阻断剂吡咯啉烷二甲基硫脲终浓度100μmol／mL预处理细胞30min后,再加终浓度10ng／mL的TNF-α,培养60min）。Western blot方法观察EGCG作用前后NF—κB蛋白在胞浆内及核内的变化;流式细胞术检测EGCG调节NF—κB入核前后细胞周期分布的变化。结果EGCG60μg／mL作用24h可有效抑制NF—κB入核。TNF—α作为NF—κB入核促进剂可以明显促进SGC-7901细胞由G1期进入S期;EGCG或吡咯啉烷二甲基硫脲（PDTC）,分别预处理SGC-7901细胞后,再以TNF-α处理细胞,结果呈现明显的G1期阻滞效应,且该效应呈浓度依赖性。结论EGCG能够抑制TNF-α诱导的NF—κB入核,并可能通过此机制发挥诱导细胞周期阻滞的作用。     

胰岛素抵抗的分子学机制

胰岛素受体底物(IRS)丝氨酸磷酸化是胰岛素信号转导通路中的一种时间依赖性生理反馈机制,代谢及炎症应激阻断其磷酸化进而导致胰岛素抵抗。诱导胰岛素抵抗的因素激活了包括抑制性κB激酶(IKKβ)、c-Jun氨基端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶、雷帕霉素靶蛋白通路和p70S6激酶在内的激酶,进而导致失控的IRS丝氨酸磷酸化。因此,这些激酶是抗胰岛素抵抗的潜在药物靶点,IKKβ/核因子κB或JNK通路靶向治疗未来可能发展为糖尿病治疗方法。     

NF—κB在模拟缺血／再灌注诱导人离体胃黏膜上皮细胞凋亡中的作用

目的观察核因子KB（NF—κB）在模拟缺血／再灌注诱导人离体胃黏膜上皮细胞凋亡中活性的变化,并进一步阐明其作用。方法采用人胃黏膜上皮细胞株进行体外培养并传代,细胞以缺氧（5％CO2、1％O2、94％N2）＋兀糖KR液模拟缺血、缺氧,复氧、复糖模拟再灌注诱导胃黏膜上皮细胞凋亡,用流式细胞术、免疫组化法、免疫印迹法观察正常对照组、模拟缺血／再灌注损伤组（I—R组）、NF—κB的抑制剂PDTC预处理组（使用10μmol·L^-1PDTC预处删胃黏膜上皮细胞24h）于模拟缺血1h、再灌注6h后细胞凋亡及NF—κB的表达情况。结果①I—R组细胞凋亡率较正常对照组明显增高（P〈0．01）,PDTC预处理组细胞凋亡率较I—R组明显下降（P〈0．01）。②正常对照组胃黏膜上皮细胞核内极少有NF—κB表达,I—R组细胞核内NF—κB表达明显增加,PDTC预处理绀NF—κB核转化现象减轻,胞核染色明显减少。③I—R组与正常对照组比较,胃黏膜上皮细胞核NF—κB蛋白表达水平显著增高（P〈0．01）;PDTC预处理组与I—R组比较,NF—κB蛋白表达水平明显降低（P〈0．01）。结论模拟缺血／再灌注能增加人肖黏膜上皮细胞核内NF—κB的表达,NF—κB的激活具有促进细胞凋产的作用;PDTC叮以抑制细胞凋亡,对人胃黏膜上皮细胞模拟缺血／再灌注损伤有保护作用。     

IKK与糖尿病肾病

糖尿病肾病是糖尿病微血管病并发症,是目前引起糖尿病患者致死致残的主要原因之一。NF-κB作为一种核转录因子,调节众多基因的表达,参与糖尿病肾病的发生和发展。IκB激酶(IKK)是NF-κB激活过程中的关键酶,通过作用于IKK达到治疗疾病的目的可作为一个研究方向。     

核因子-κB/IκB系统在慢性肾炎肾小球中的表达及意义

目的：研究慢性肾炎（CN）肾组织中核因子－κB(NF-κB）P65／IκBα系统及单核细胞趋化蛋白－1（MPC－1）的表达并探讨它们与CN肾脏病理改变和肾功能损害的关系。方法：以NF－κB亚基P65及其抑制性亚基IκBα单抗为抗体，采用ABC免疫组织化学染色检测CN肾组织NF－κB P65／IκBα表达，并进一步分析它们与肾小球内MCP－1蛋白表达，肾脏病理改变和功能损害的关系。结果：CN肾小球中NF－κB P65与MCP－1表达较正常肾组织显著增高，而IκBα表达则明显低于正常肾组织，以增殖性肾炎（MsPGN)为最显著（P＜0．01），CN肾小球NF－κB，MCP－1阳性细胞数与肾小球IκBα阳性细胞数呈负相关，而与肾脏病理改变及肾功能损害呈正相关。结论：NF－κB可能参与了CN的发病机制。     

p38蛋白激酶对脂多糖诱导肺泡巨噬细胞NF-κB活化的调控

目的探讨p38蛋白激酶对脂多糖（LPS）诱导肺泡巨噬细胞NF-κB活化的调控机制。方法分离培养肺泡巨噬细胞。设正常对照组、LPS刺激组、SB203580（p38蛋白激酶抑制剂）＋LPS组、PDTC（NF—κB抑制剂）＋LPS组和SB203580＋PDTC＋LPS组。分别采用免疫细胞化学（SP法）和Western blot检测NF—κB、p38蛋白激酶和NF—κB抑制蛋白（I-κB）的表达。结果与正常对照组相比，LPS刺激肺泡巨噬细胞后胞核NF-κB和p38蛋白激酶染色显著增强，而I—κB的表达显著降低（均P〈0．01）。SB203580、PDTC均可显著降低LPS刺激的肺泡巨噬细胞NF-κB，p38蛋白激酶胞核染色阳性细胞的百分比，并显著增强I—κB的表达（均P〈0．05）。同时应用PDTC和SB203580预孵育肺泡巨噬细胞，与LPS刺激组相比，p38蛋白激酶和NF—κB胞核染色阳性细胞百分比均显著降低（P〈0．05），I-κB的表达显著增强（P〈0．05），但分别与SB203580＋LPS和PDTC＋LPS组相比，差异均无显著性意义（均P〉0．05）。结论LPS刺激肺泡巨噬细胞p38蛋白激酶和NF—κB活化；p38蛋白激酶可能通过调节I-κB降解而调控NF—κB的活化，NF—κB可能是p38信号途径下游的最重要位点。     

核因子-κB信号通路中小泛素样修饰蛋白与2型糖尿病的关系

小泛素样修饰蛋白化是通过一系列小泛素样修饰蛋白(small ubiquitin-related modifier,SUMO)酶介导的生化级联反应将SUMO共价结合于靶蛋白的赖氨酸残基上,提高蛋白质稳定性,介导靶分子定位和功能调节的过程。经典通路κB抑制蛋白激酶(inhibitory proteinκB kinaseβ,IKKβ)/核因子κB(nuclear factorsκB,NF-κB)途径是炎性反应的关键信号转导通路。而NF-κB是公认的参与炎症和免疫反应的调节因子。研究发现,不仅NF-κB抑制蛋白(inhibitory protein,IκBa)的SUMO化修饰参与NF-kB信号通路的调节,而且SUMO酶可以直接介导NF-kB对靶基因的转录调控,某些蛋白也可能与SUMO化蛋白有相互作用。文中对SUMO修饰系统、SUMO循环及参与SUMO化循环的酶对NF-kB信号通路的转录调控及其与2型糖尿病相关性研究进行综述。     

泛素-蛋白酶体系统在核因子κB途径中的作用

核转录因子NF-κB控制着一系列的细胞和组织过程,包括从细胞的分裂、增殖、凋亡到组织器官的各种应答活动.泛素-蛋白酶体系统通过以下3个途径影响NF-κB信号转导:①泛素-蛋白酶体降解NF-κB的抑制因子IκB;②对NF-κB前体如p105和p100进行加工并使之成熟;③通过非降解依赖机制激活IκB激酶IKK,从而抑制NF-κB.本文对泛素-蛋白酶体系统对NF-κB信号转导途径的影响进行综述.