植生克雷伯菌与肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶编码基因研究

目的调查一组耐药克雷伯菌属β-内酰胺酶编码基因表达状况以及KPC型β-内酰胺酶编码基因与插入序列的关系,为临床治疗提供参考依据。方法收集医院2009年10月-2011年3月分离出的20株克雷伯菌属,采用K-B纸片扩散法进行抗菌药物敏感性判断;采用聚合酶链反应(PCR)法检测A、B、C、D等4类40种β-内酰胺酶基因,PCR法连锁检测KPC型β-内酰胺酶编码基因与插入序列,采用Chromas软件对PCR阳性产物测序结果进行读序,并对测序结果用Chromas直接作BLAST Search比对。结果 20株克雷伯菌属共检出5种A类β-内酰胺酶编码基因TEM、SHV、CTX-M-1群、LAP、KPC,1种C类β-内酰胺酶编码基因DHA,1种D类β-内酰胺酶编码基因OXA-1群,阳性检出率依次为SHV100.0%、TEM8 5.0%、DHA85.0%、CTX-M-1群55.0%、KPC45.0%、LAP10.0%和OXA-1群5%;9株KPC阳性菌株KPC-ISKpn6连锁检测均为阳性。结论产β-内酰胺酶是克雷伯菌属耐β-内酰胺类药物的重要成因之一,KPC型β-内酰胺酶编码基因由插入序列ISKpn6介导。     

耐药肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶编码基因及KPC-ISKpn6连锁检测

目的研究和分析18株耐药肺炎克雷伯菌产β-内酰胺酶基因表达及KPC型阳性菌株与插入序列ISKpn6的关联。方法采用微生物鉴定仪鉴定并通过gyrA、parC基因测序和比对确认了18株肺炎克雷伯菌,对抗菌药物的药敏试验采用K-B纸片扩散法;40种β-内酰胺酶基因和KPC型β-内酰胺酶编码基因与插入序列(KPCISKpn6)连锁检测均采用PCR法,β-内酰胺酶编码基因的亚型通过测序和比对进行确认。结果 18株耐药肺炎克雷伯菌除对四环素、米诺环素的敏感率>83.3%外,对其余抗菌药物的敏感率均<50.0%,有的甚至100.0%耐药;40种β-内酰胺酶基因中共检出TEM-1 17株、CTX-M-3 4株、LAP-2 1株、KPC-2 14株、IMP-4 2株、DHA-1 4株、OXA-1 1株共7种耐药基因亚型,且基因检出与其细菌耐药表型相符合;14株KPC-2型阳性菌株KPC-ISKpn6连锁检测均为阳性。结论耐药肺炎克雷伯菌每一株均有阳性基因检出,且检出的7种耐药基因亚型分布于β-内酰胺酶4个类别中,显示耐药株携带的β-内酰胺酶编码基因多种性;14株携带KPC-2型基因的阳性株其KPC-ISKpn6连锁检测均为阳性,提示KPC-2型β-内酰胺酶编码基因与插入序列ISKpn6高度关联。     

肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因与插入序列连锁检测分析

目的调查肺炎克雷伯菌的耐药性以及插入序列与β-内酰胺酶基因可能存在的关系。方法收集医院2011年1月-2012年3月19株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,采用16SrDNA扩增与测序后确认菌种,采用聚合酶链反应(PCR)法分析A^D类等4类共22种β-内酰胺酶基因与插入序列(ISKpn6、ISKpn7),并作了β-内酰胺酶基因与插入序列连锁检测。结果 19株肺炎克雷伯菌均检出blaTEM和blaKPC型β-内酰胺酶基因,并且blaKPC与ISKpn6连锁检测均呈阳性。结论检出blaKPC型β-内酰胺酶基因并有可能高表达,是该组菌株对β-内酰胺类药物耐药的主要原因。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌获得性耐药元件指标聚类分析

目的了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)对β-内酰胺类与氨基糖苷类药物的耐药相关基因与可移动遗传元件存在状况,以及获得性耐药相关基因与可移动遗传元件存在的相互关系。方法收集2014年1-12月住院患者标本中分离到的20株CRKP,用gyrA测序后BLASTn比对确认菌种,再采用聚合酶链反应(PCR)法分析40种β-内酰胺酶基因、6种氨基糖苷类修饰酶、6种16SrRNA甲基化酶、12种可移动遗传元件遗传标记和blaKPC型与ISKpn6连锁检测,并对检测结果作指标聚类分析。结果 20株CRKP对9种β-内酰胺类与氨基糖苷类均耐药;获得性耐药相关基因与可移动遗传元件标记每株均有阳性发现,共检出4种β-内酰胺酶基因(blaTEM、blaSHV、blaKPC、blaIMP),1种氨基糖苷类修饰酶基因(aac(3)-Ⅱ)、1种16SrRNA甲基化酶基因(rmtB),8种可移动遗传元件遗传标记(traA、trbC、tnp513、IS26、IS903、ISEcp1、ISKpn6、intⅠ1);5株CRKP blaKPC-ISKpn6连锁检测为阳性;指标聚类分析提示,β-内酰胺酶基因blaIMP与tnp513强关联;β-内酰胺酶基因blaKPC、blaSHV及16S rRNA甲基化酶基因rmtB与ISKpn6、ISEcp1、traA强关联;氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅱ与IS26、IS903、intⅠ1、trbC强关联。结论肺炎克雷伯菌耐药表型与基因型结果相符,对β-内酰胺类与氨基糖苷类药物的耐药与可移动遗传元件介导的blaTEM、blaSHV、blaKPC、blaIMP、aac(3)-Ⅱ、rmtB相关。     

合肥某院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因及毒力因子分析

目的探讨合肥地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药机制及毒力因子的特点。方法收集2015年1月-2017年1月合肥市第一人民医院南区分离的38株CRKP,采用全自动微生物系统、改良Hodge试验和EDTA协同试验、基因测序、膜蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),对其药敏、耐药表型、耐药基因、毒力位点、膜蛋白突变进行检验。结果 38株CRKP仅替加环素、阿米卡星、左氧氟沙星和环丙沙星仍保持>60.0%的敏感性,其余均高度耐药。检出32株(84.21%)菌株携带了碳青霉烯酶耐药基因,其中肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶Ⅱ型(KPC-2)26株(68.4%),新德里β-内酰胺酶Ⅰ型(NDM-1)12株(31.58%);同时携带KPC-2和NDM-1 6株(15.8%);31株(81.58%)携带超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因;25株(65.79%)存在膜孔蛋白基因缺失;选取2株膜孔蛋白缺失和2株膜孔蛋白不缺失的菌株进行菌株膜蛋白SDS-PAGE验证与基因检测结果一致。共检出荚膜K1型5株,K57型1株,其他32株属于尚未分型。黏液表型调控基因(rmpA)阳性16株,气杆菌属编码基因(aerobaction)阳性12株,其中10株两者均阳性。所有菌株Ⅰ型菌毛黏附蛋白编码基因(FimH-1)均阳性。结论本次分离的合肥地区CRKP以KPC和NDM型为主,同时检出了携带KPC的K1荚膜型高毒力菌株,应引起重视。     

徐州地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌流行病学及耐药机制分析

目的分析徐州地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)流行病学情况及耐药机制。方法收集2017年1月-2017年5月徐州某教学医院肺炎克雷伯菌93株,采用全自动微生物分析系统进行菌株鉴定和药敏试验,PCR技术检测1、2和3类整合酶基因及碳青霉烯酶耐药基因,脉冲场凝胶电泳(PFGE)对CRKP进行同源性分析。结果 93株肺炎克雷伯菌检出CRKP 41株,检出率44.1%;CRKP菌株除对阿米卡星、复方新诺明、四环素、替加环素耐药率较低,对其他类抗菌药物耐药率均90%;非CRKP菌株除对替卡西林耐药率100.0%,对其他类抗菌药物耐药率均90%;CRKP与非CRKP菌株整合子阳性率差异无统计学意义;41株CRKP菌株,整合子阳性率24.4%,均为1类整合子,blaKPC基因阳性率73.2%,blaNDM基因阳性率14.6%;52株非CRKP菌株,整合子阳性率21.2%,均为1类整合子,blaKPC基因阳性率1.9%;PFGE显示,41株CRKP菌株分4型,以A型为主,34株占82.9%。结论徐州地区CRKP检出率较高,CRKP菌株以产KPC、NDM型为主,对大多数抗菌药物耐药,应引起临床及院感高度重视。     

产KPC与NDM碳青霉烯酶细菌多重PCR方法的构建与临床应用研究

目的 建立一种适于临床微生物实验室快速检测blaKPC与blaNDM基因的多重PCR方法.方法 根据Gene Bank提供的序列,人工合成blaKPC与blaNDM基因模板以及多重PCR反应的引物;利用产KPC的大肠埃希菌作为阳性对照,对新构建的多重PCR反应进行验证,并且对临床15例临床分离鉴定的疑似产KPC与NDM的耐药细菌进行检测.结果 成功构建了用于检测blaKPC与blaNDM基因的多种PCR反应体系,可以筛查出产KPC的大肠埃希菌;检测的15株临床分离鉴定的细菌均为阴性.结论 构建的多重PCR反应体系可以快速准确地对临床产KPC与NDM细菌进行检测,以用于临床疑似细菌的进一步确认.     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性及基因分型

目的了解老年患者分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型。方法药敏试验采用微量肉汤稀释法测定肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药性,聚合酶链反应(PCR)法检测β-内酰胺酶耐药基因型并测序。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌仅对第三代头孢菌素与β-内酰胺酶抑制剂合剂、碳青霉烯类抗菌药物较敏感;产ESBLs肺炎克雷伯菌中blaTEM、blaSHV、blaCTX-M-1群、blaCTX-M-9群、blaOXA-1群等5种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为95.0%、30.0%、50.0%、5.0%、10.0%,同时携带2、3种以上耐药基因的菌株分别占40.0%和25.0%。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性严重,基因型以blaTEM、blaCTX-M-1为主。     

临床多药耐药鲍氏不动杆菌分布及β-内酰胺酶基因型分析

目的调查多药耐药鲍氏不动杆菌的分布及β-内酰胺酶耐药基因的流行情况。方法收集2017年6月-8月安徽省立医院住院患者标本中分离得到的多药耐药鲍氏不动杆菌(Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii,MDRAB)菌株。采用VITEK-2COMPACT全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验。应用PCR法检测β-内酰胺酶耐药基因。结果 71例多药耐药鲍氏不动杆菌主要来自ICU占67.6%,大多来源于痰标本占84.5%。对10种常用抗菌药物耐药率为79.4%～100.0%,其中对头孢菌素类、环丙沙星以及亚胺培南的耐药率均为100.0%。检测出的β-内酰胺酶耐药基因有blaOXA-23(90.1%,64例)、blaTEM(66.2%,47例)、blaKPC(1.4%,1例)和blaSHV(1.4%,1例),其中1例菌株同时携带blaKPC、blaSHV以及blaTEM三个耐药基。结论医院多药耐药鲍氏不动杆菌情况较严重,β-内酰胺酶相关耐药基因广泛存在于多药耐药鲍氏不动杆菌中,多药耐药鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药可能与β-内酰胺酶耐药基因表达相关。     

应用多重PCR在肠杆菌科细菌中检测blaTEM、blaSHV、blaOXA 1基因

目的应用多重聚合酶链反应（PCR）法在肠杆菌科细菌中检测blaTEM、blaSHV、blaOXA 1基因。方法收集2004年10月-2005年7月湖南地区中南大学3所附属医院临床标本分离的多重耐药肠杆菌科细菌171株，以美国临床实验室标准化研究所（CLSI）规定的方法进行超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）表型确证试验，多重PCR进一步进行blaTEM、blaSHV、blaOXA 1三种耐药基因的检测。结果171株多重耐药的肠杆菌科细菌中，142株（83.04%）ESBLs表型检测阳性，经多重PCR扩增，105株获得阳性结果。根据扩增片段大小判断：检出携带blaTEM菌株85株，携带blaSHV菌株26株，携带blaOXA 1菌株10株，其中15株菌同时携带多种耐药基因。结论多重PCR可以快速、准确地检测出ESBLs表型阳性肠杆菌科细菌是否携带blaTEM、blaSHV、blaOXA 1基因。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因检测及同源性

目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药基因型及同源性。方法收集某院2015年9月—2016年2月临床标本分离的38株CRKP,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测耐药基因型,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性。结果 38株CRKP主要来源于重症监护病房(ICU)及外科重症监护病房(SICU),分别占39.48%、34.21%。38株CRKP均检出blaKPC和blaSHV耐药基因,6株检出blaCTX耐药基因。PFGE显示共分成A、B、C、D4个谱型,其中以C型为主(65.78%,25/38)。A型菌株中菌株14、15、16携带blaKPC-2型、blaSHV型、blaCTX-M-15耐药基因,此3株细菌均是SICU患者分离的,菌株14和15分离自同一天,菌株16分离时间延后一周;C型菌株中,菌株10、18、25、28的同源性为100%,菌株10、18分离自ICU患者,菌株25、28分离自神经内一科患者(均从ICU转出),均是在ICU住院期间检出,且分离时间相差1 d。结论该院CRKP耐药基因型以blaKPC及blaSHV为主,存在克隆株医院内流行。     

老年患者肺炎克雷伯菌分离株β-内酰胺酶基因分型研究

目的了解肺炎克雷伯菌(KPN)老年患者分离株β-内酰胺酶产生状况。方法对20株KPN进行了15种β-内酰胺酶基因(blaTEM、blaSHV、blaLEN、blaOKP、blaCTX-M-1群、blaCTX-M-2群、blaCTX-M-9群、blaOXA-1群、blaOXA-2群、blaOXA-10群、blaPER、blaGES、blaVEB、blaDHA、blaACT-1)检测。结果20株KPN检出blaTEM、blaSHV、blaCTX-M-1群、blaCTX-M-9群、blaOXA-1群、blaDHA等6种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为95%、30%、50%、5%、5%、15%;20株KPN中有19株至少检出1种β-内酰胺酶基因,15株同时检出>2种β-内酰胺酶基因,最多同时检出4种β-内酰胺酶基因。结论该20株KPNβ-内酰胺类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶密切相关。     

江苏省溧阳地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药元件及亲缘关系研究

目的了解医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)常见耐药原件的携带及亲缘关系。方法收集2014年1月-2016年1月在院患者中分离20株CRKP,采用PCR分析了40种β-内酰胺类酶基因与11种可移动遗传元件(MGEs)标记基因检测,并同步检测了20种氨基糖苷类药物获得性耐药基因。且进一步对检测结果作样本聚类分析,了解其亲缘关系。结果 20株CRKP对β-内酰胺类药物(亚胺培南、美罗培南、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦)、氨基糖苷类药物(庆大霉素、阿米卡星)、喹诺酮类药物(诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星)等12种抗菌药物均耐药;20株CRKP均检出blaTEM与blaKPCβ-内酰胺酶基因;氨基糖苷类药物获得性耐药基因每株也均有检出,但不同基因阳性率不同;MGEs每株也均有检出,但intⅠ1与IS903阳性率不同;样本聚类分析提示,20株CRKP呈明显的聚集现象(A群),并可分为A-A群与A-B群。结论医院CRKP部分存在同源性,主要流行基因型为blaTEM与blaKPC,流行MGEs遗传标记为trbC、ISEcp1、IS26与ISKpn6,需要加强医院感染管理。     

携带blaKPC基因肺炎克雷伯菌的氨基糖苷类耐药元件研究

目的调查宁波两家医院24株携带blaKPC基因耐碳青霉烯类抗菌药物肺炎克雷伯菌(CRKP)的氨基糖苷类耐药基因和可移动遗传元件遗传标记的存在状况,并分析其亲缘关系。方法收集两家医院2016年1月-12月分离出的24株携带blaKPC基因的CRKP菌,采用聚合酶链反应(PCR)法检测氨基糖苷类及可移动遗传元件标记基因,将氨基糖苷类耐药元件检测结果作样本聚类分析。结果 20株菌rmtB和ant(3")-Ⅰ基因均阳性,1株菌仅rmtB基因阳性,接合性质粒标记traA、trbC检出率分别为91.7%和95.8%,插入序列IS26、IS903、ISEcp1检出率分别为87.5%、91.7%和87.5%,样本聚类分析显示菌株分为A与B二群,A群菌株有明显的聚集性。结论本组CRKP菌株携带氨基糖苷类获得性耐药相关基因导致对氨基糖苷类抗菌药物耐药,指标聚类分析提示菌株之间存在克隆传播。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌β-内酰胺酶基因研究

目的检测20株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的β-内酰胺酶基因,以便了解该20株产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶基因亚型携带存在状况。方法收集医院2013年分离到的20株产ESBLs大肠埃希菌,采用聚合酶链反应(PCR)方法分析16种A类β-内酰胺酶基因、6种C类β-内酰胺酶基因、3种D类β-内酰胺酶基因。结果 20株产ESBLs大肠埃希菌对头孢呋辛、头孢噻肟、头孢吡肟的耐药率均为100.0%;共检出4种A类β-内酰胺酶基因,其中检出blaTEM16株、blaSHV1株、blaCTX-M-1 cluster 3株、blaCTX-M-9 cluster 14株,检出率分别为80.0%、5.0%、15.0%、70.0%,C类β-内酰胺酶基因检出blaDHA2株,检出率为10.0%,D类β-内酰胺酶基因检出blaOXA-1 cluster 3株,检出率为15.0%;20株产ESBLs大肠埃希菌每一株均有β-内酰胺酶基因检出,少者检出1种,多者同时检出2⁴种,且该组菌株blaCTX-M总检出率85.0%。结论产β-内酰胺酶基因是该组大肠埃希菌对β-酰胺类抗菌药物产生耐药的重要原因。     

临床分离耐亚胺培南革兰阴性菌的耐药性研究

目的研究临床分离耐亚胺培南(IMP)革兰阴性菌的耐药性。方法琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),应用泵抑制剂检测外排泵,鉴定β-内酰胺酶(Bla)表型和测定等电点(pI),PCR扩增检测耐药基因。结果 121株IMP耐药革兰阴性菌对常用抗菌药物耐药率为56.5%～100.0%,102株产6种、3种和4种不同pI的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC)和金属β-内酰胺酶(MBL),92株PCR扩增检出blaTEM、blaSHV、blaCTX-M、blaKPC、blaPER、blaOXA-23、blaDHA、blaampC、blaMIR、blaIMP、blaVIM等基因,75株外排泵阳性,98株菌膜蛋白基因缺失,108株存在≥2种耐药机制。结论临床耐IMP革兰阴性菌存在多药耐药性和多种耐药机制,应注意检测和监控。     

产超广谱β-内酰胺酶变形杆菌耐药机制和分子流行病学研究

目的：对产超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)变形杆菌的耐药机制和分子流行病学进行初步探讨。方法：收集、鉴定菌株，进行ESBLs检测，PCR扩增blaTEM和blaSHV基因、等电聚焦测定β－内酰胺酶等电点和染色体DNA的PFGE分析。结果：分离的45株变形杆菌中有7株产ESBLs,blaTEM和blaSHV基因扩增和等电聚集结果显示7株产ESBLs变形杆菌全部为TEM型β－内酰胺酶；PEGE结果时间上和空间上未见有相关菌株的存在或明显的集中趋势。结论：合理使用抗生素对预防耐药菌的产生和控制医院感染十分重要；对患有产ELBLs变形杆菌感染的患者应加强消毒隔离措施，防止医院感染的暴发和流行。     

泛耐药肺炎克雷伯菌的耐药基因研究

目的 了解1株对临床常用18种抗菌药物(包括亚胺培南、美罗培南)均耐药的肺炎克雷伯菌(KPN)所携带的耐药基因状况.方法 对该株KPN进行了9类耐药基因的PCR法检测,包括β-内酰胺酶基因blaTEM、blaSHV、blaLEN、blaOKP、blaCTX-M-1、2、9群、blaOXA-1、2、10群、blaCARB、blaPER、blaVEB、blaGES、金属β-内酰胺酶基因blaIMP、blaVIM、blaKPC,AmpC酶基因blaDHA、blaACT/MIR、blaCMY/MOX、blaCMY/LAT,氨基糖苷修饰酶基因aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅰ b、aac(6')-Ⅱ、ant(2")-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ,喹诺酮类耐药基因qnrA、TMP耐药基因dfrA1、dfrA17,消毒剂磺胺耐药基因qacE△1-sul1,整合子遗传标记基因intⅠ1、intⅠ2、intⅠ3,转座子遗传标记基因tnpA、merA,共计36种.结果 KPN共检出7种耐药基因,分别为β-内酰胺酶基因blaTEM,blaSHV,金属β-内酰胺酶基因blaKPC-2,氨基糖苷修饰酶基因aac(3)-Ⅱ,ant(3")-Ⅰ,消毒剂磺胺耐药基因qacE△1-sull,整合子遗传标记基因intⅠ1.结论 在该株泛耐药KPN中发现了少见的blaKPC-2金属β-内酰胺酶基因,该菌对18种抗菌药物的耐药可能与其同时携带有多种耐药基因有关,临床应对此类菌株引起重视.     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌产酶耐药机制及同源性分析

目的探讨肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要产酶机制及同源性。方法收集长沙市第一医院2016年12月-2017年12月临床分离的非重复碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP),采用改良碳青霉烯酶灭活试验(mCIM)检测碳青霉烯酶,聚合酶链反应(PCR)法检测常见耐药编码基因。脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)分析同源性。结果共收集到57株CRKP,mCIM试验阳性率为91.23%(52/57)。PCR共检出6种耐药基因,包括blaSHV、blaCTX-M-9群、blaKPC-2、blaTEM、blaCTX-M-1群和blaNDM-1,检出率分别为94.74%、68.42%、68.42%、56.14%、3.51%和1.75%,其中2株携带blaCTX-M-1群的菌株经测序证实为blaCTX-M-80和blaCTX-M-123,blaCTX-M-9群中1株为blaCTX-M-27,2株为blaCTX-M-14,其余均为blaCTX-M-65。PFGE结果显示,57株CRKP可分为A~H共8种不同的型别,以A型为主,占76.79%,其中A6亚型占32.56%。MLST结果显示,共检出ST11和ST29两种型别,以ST11为主,占75.00%。结论该院临床分离的肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的重要机制为产KPC-2型碳青霉烯酶,且同时携带多种超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因。PFGE和MLST结果表明:该院临床分离的CRKP存在克隆传播,需加强流行病学监控。     

产NDM-1、IMP-4和KPC-2碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌耐药特点

目的探讨本院临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药基因的携带情况及对17种常用抗菌药物的耐药特点。方法采用VITEK Compact-2全自动微生物分析系统进行菌株的鉴定和药敏试验,收集耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌24株,采用改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶;PCR技术扩增耐药基因,包括碳青霉烯酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和Amp C酶基因,并对扩增产物进行测序和BLAST比对分析。结果菌株对头孢菌素类、单环内酰胺类、β-内酰胺酶抑制剂复合物、氟喹诺酮类和呋喃妥因等抗菌药物表现出较高的耐药性,但对氨基糖苷类药物丁胺卡那和妥布霉素的敏感性较好,敏感率分别为100.0%和62.5%。24株耐药菌株中,有16株改良Hodge试验阳性,阳性率为66.7%;PCR扩增结果显示:12株检测出blaKPC-2基因,3株检测到blaIMP-4基因,2株blaNDM-1阳性,所有菌株都携带blaSHV基因,12株携带blaTEM基因,13株携带blaCTX-M基因,7株携带blaDHA基因。结论本院CRKP以产KPC-2为主,但同时还出现了NDM-1和IMP-4金属酶。