病毒性心肌炎患者外周血中Th17细胞和调节性T细胞的变化研究北大核心CSCD

目的探讨病毒性心肌炎患者外周血中Th17细胞和调节性T细胞(Treg细胞)的变化情况。方法选择医院2014年1月-2016年12月病毒性心肌炎患者80例,将其分为急性期组43例、恢复期组18例和迁延及慢性期组19例,选择健康体检者80例为对照组。采用流式细胞术测定外周血Th17细胞和Treg细胞水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-21(IL-21)、转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果病毒性心肌炎急性期和迁延及慢性期Th17/CD_4^+T、Treg/CD_4^+T、Th17/Treg均高于病毒性心肌炎恢复期和对照组(P<0.05);病毒性心肌炎迁延及慢性期Th17/CD_4^+T、Treg/CD_4^+T、Th17/Treg均高于病毒性心肌炎急性期(P<0.05);病毒性心肌炎恢复期和对照组Th17/CD_4^+T、Treg/CD_4^+T、Th17/Treg比较差异无统计学意义;病毒性心肌炎急性期和迁延及慢性期IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21均高于病毒性心肌炎恢复期和对照组(P<0.05);病毒性心肌炎迁延及慢性期IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21均高于病毒性心肌炎急性期(P<0.05);病毒性心肌炎恢复期和对照组IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21比较差异无统计学意义;病毒性心肌炎急性期和迁延及慢性期TGF-β高于病毒性心肌炎恢复期和对照组(P<0.05);病毒性心肌炎迁延及慢性期TGF-β均高于病毒性心肌炎急性期(P<0.05);病毒性心肌炎恢复期和对照组TGF-β比较差异无统计学意义;病毒性心肌炎患者Th17细胞和Treg细胞呈负相关(P<0.05)。结论病毒性心肌炎急性期、迁延及慢性期患者存在外周血Th17细胞和Treg细胞失衡,以迁延和慢性期最为显著。     

多重耐药菌老年肺炎患者Th与Treg细胞及其细胞因子的表达

目的检测老年多重耐药菌(MDRO)肺炎患者辅助性T细胞(Th)和调节性T细胞(Treg)及其细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)的表达水平,探讨Th和Treg细胞介导的免疫反应在老年MDRO肺炎患者中的作用。方法选取2016年8月-2018年4月,在昆明医科大学附一院住院期间确诊为院内MDRO肺炎的老年患者30例,再根据是否需要呼吸或循环支持,将患者分为老年重症肺炎组14例、老年普通肺炎组16例,纳入同期健康体检老年人11名作为对照组。分离30例老年MDRO肺炎患者及11例健康老年人外周血的单个核细胞,采用流式细胞术检测Th1、Th2、Th17、Treg细胞各占CD4+T细胞的比例。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中相关细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β的表达水平。结果重症肺炎组Th1以及Treg细胞占CD4+T细胞的比例分别为(1.743±0.606)%、(0.978±0.271)%,较健康对照组低(P<0.05),血清中的IFN-γ及TGF-β的表达量较健康对照组低(P<0.05),且重症肺炎组的TGF-β表达量较普通肺炎组低(P<0.05);重症肺炎组的Th17细胞占CD4+T细胞的比例及IL-17A的表达量与健康对照组相比增加(P<0.05)。结论老年MDRO肺炎患者的Th1、Treg细胞所介导的免疫反应受抑制,Th17/Treg细胞失平衡,并与病情严重程度有关系。这为研究抗感染免疫治疗新策略奠定了基础。     

外周血中HMGB1水平与不明复发性流产患者Th17/Treg细胞的关系

目的探究外周血中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平与不明复发性流产(URSA)患者Th17/Treg细胞的关系。方法选取2016年2-8月期间在该院就诊的早孕期妇女209例,其中URSA早孕妇女109例(观察组),正常早孕妇女100例(对照组);采用流式细胞术分别检测两组研究对象间细胞外周血中Th17、Treg及Th17/Treg比值水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血浆HMGB1、IL-17、IL-6、转化生长因子-β(TGF-β)及IL-10表达水平,分析HMGB1与各指标的相关性。结果观察组外周血CD3~+CD8~+IL-17~+Th17细胞/CD4~+T淋巴细胞比例显著高于对照组(P0.05),而CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞/CD4+T淋巴细胞比例显著低于对照组(P0.05);观察组孕妇Th17/Treg比值显著高于对照组(P0.05);观察组HMGB1、IL-17、IL-6水平显著高于对照组(P0.05);TGF-β及IL-10水平显著低于对照组(P0.05);观察组孕妇外周血HMGB1水平与Th17相关细胞因子IL-17、IL-6表达呈正相关(r=0.663,P0.05;r=0.732,P0.05),与Treg相关细胞因子TGF-β、IL-10表达呈负相关(r=-0.783,P0.05;r=-0.831,P0.05)。结论 URSA孕妇机体外周血HMGB1水平增高,其可通过调节Th17/Treg水平参与URSA疾病的发生。     

EB病毒感染紫癜性肾炎儿童Treg/Th17平衡与肾损伤程度的关系

目的 探究EB病毒感染紫癜性肾炎(HSPN)儿童调节性T细胞/辅助性T17细胞(Treg/Th17)平衡与肾损伤程度的关系。方法 以2018年3月-2021年4月中国医科大学附属盛京医院收治的150例EB病毒感染HSPN患儿为感染组,并以同期非EB病毒感染的HSPN患儿72例为对照组,分析外周血Treg、Th17细胞比例及相关细胞因子[白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子β1(TGF-β1)]水平对EB病毒感染的诊断价值分析及对肾小管、肾小球损伤程度的评估价值。结果 感染组Treg细胞、Treg/Th17细胞比例及TGF-β1水平低于对照组,Th17细胞比例及IL-17水平高于对照组(P<0.05);外周血Treg细胞、Treg/Th17比例及TGF-β1水平随肾小管间质病理分级的升高呈降低趋势,Th17细胞及IL-17水平随肾小管间质病理分级的升高呈升高趋势(P<0.05);各指标联合检测评估肾小管损伤程度的AUC大于IL-17、TGF-β1水平单独检测(P<0.05);外周血Treg细胞、Treg/Th17比例及TGF-β1水平随肾小球病理分级的升高呈降低...     

Th17/Treg细胞在儿童支原体肺炎发病中的作用

目的探讨Th17/Treg细胞在儿童支原体肺炎发病机制中的作用。方法流式细胞术检测35例急性期、30例恢复期的支原体肺炎患儿和20例同期健康体检儿童外周静脉血Th17/Treg细胞频数,采用ELISA双抗体夹心法检测血清中IL-17、IL-10和TGF-β细胞因子的表达水平。结果 MPP患儿急性期组外周血的Th17细胞百分率均明显高于恢复期组和对照组;而Treg细胞的百分率明显低于恢复期组和对照组;MPP患儿急性期组外周血的IL-17A表达均明显高于恢复期组和对照组;而TGF-β和IL-10表达明显低于恢复期组和对照组,上述差异均有统计学意义(P0.01)。MPP急性期组和恢复期组的外周血Th17细胞百分率和血清细胞因子IL-17的表达水平呈正相关(r=0.724,r=0.738,P0.01);Treg细胞百分率与TGF-β表达水平呈正相关(r=0.826,r=0.814,P0.01)。结论 Th17/Treg细胞及其细胞因子失衡可能是儿童支原体肺炎发病的重要原因。     

卡介苗感染人树突状细胞对miRNA-99b表达和Th17/Treg分化的影响

目的 探讨牛型分枝杆菌减毒活菌—卡介苗(BCG)感染对人树突状细胞(DCs)microRNA-99b(miRNA-99b)表达的影响及对新生儿脐血CD_4~+初始T淋巴细胞分化为Th17/Treg的作用。方法 BCG感染体外培养的人树突状细胞,然后与新生儿脐血CD_4~+初始T淋巴细胞混合培养,qRT-PCR观察人树突状细胞miRNA-99b的表达变化,qRT-PCR检测CD_4~+T淋巴细胞Foxp3、ROR-γt、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)基因转录水平,观察CD_4~+T淋巴细胞分化亚型的改变;ELISA法检测培养上清INF-γ、IL-17和IL-23表达水平。结果 BCG感染后,人树突状细胞miRNA-99b基因表达增加(P<0.001);CD_4~+T淋巴细胞IFN-γ、IL-10基因表达增加(P<0.05),ROR-γt基因表达降低(P<0.05),Foxp3基因转录增加,但差异无统计学意义;感染组培养上清中INF-γ表达水平增加(P<0.001),IL-17和IL-23表达水平均有一定的增加,但差异无统计学意义。结论 结核感染可能通过影响树突状细胞miRNA-99b的表达进而诱导初始CD_4~+T淋巴细胞分化为Th17/Treg的失衡参与结核病的发病过程。     

儿童支原体肺炎感染Th17/Treg平衡及IL-6/STAT3、IL-2/STAT5通路影响

目的探讨儿童支原体肺炎感染的Th17/调节性T细胞(Treg)细胞水平变化及白细胞介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活子3(STAT3)、白细胞介素-2(IL-2)/信号转导和转录激活子5(STAT5)信号通路作用。方法选择2017年6月-2018年12月海南省妇女儿童医学中心医院收治的儿童支原体肺炎感染患儿107例作为研究对象,其中急性期49例,恢复期58例。另选择2017年6月-2018年12月健康体检小儿50名作为对照组。采用流式细胞术检测Th17和Treg细胞水平,采用酶联免疫吸附法测定血清IL-2和IL-6水平,采用实时荧光定量PCR术检测STAT3mRNA和STAT5mRNA表达。结果急性期组Th17和Th17/Treg高于恢复期组和对照组,而Treg%低于恢复期组和对照组(P<0.05);恢复期组Th17和Th17/Treg高于对照组,而Treg低于对照组(P<0.05)。急性期组血清IL-2水平低于恢复期组和对照组,而血清IL-6水平高于恢复期组和对照组(P<0.05);恢复期组血清IL-2水平低于对照组,而血清IL-6水平高于对照组(P<0.05)。急性期组STAT3mRNA高于恢复期组和对照组,而STAT5mRNA低于恢复期组和对照组(P<0.05);恢复期组STAT3mRNA高于对照组,而STAT5mRNA低于对照组(P<0.05)。结论Th17/Treg及IL-6/STAT3、IL-2/STAT5信号通路参与了儿童支原体肺炎感染发生、发展,支原体肺炎感染患儿体内存在Th17与Treg细胞亚群失衡,存在IL-6/STT3信号通路激活,IL-2/STAT5信号通路活性下调。     

Th17/Treg平衡在子痫前期发病中的变化及IL-21、TGF-β对其调节作用的研究

目的:探讨辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)在子痫前期(PE)发病中的变化以及白介素-21(IL-21)、转化生长因子-β(TGF-β)对其调节作用。方法:选择在甘肃省妇幼保健院确诊的PE患者35例及同期正常妊娠孕妇30例为研究对象。晨起空腹采集外周静脉血4ml,分离培养外周血单个核细胞,采用流式细胞仪检测外周血Th17和Treg细胞的数量,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血IL-21和TGF-β的水平。结果:PE组Th17细胞在CD4~+T细胞中的占比高于正常妊娠组(P0.05),而Treg细胞在CD4~+T细胞中的占比低于正常妊娠组(P0.05),PE组Th17/Treg值以及IL-21和TGF-β水平均高于正常妊娠组(均P0.05)。结论:Th17/Treg平衡失调,可能是引起PE的原因;IL-21、TGF-β可能参与了对Th17/Treg平衡的调节。     

IL-37对变应性鼻炎患者相关细胞因子免疫调控研究

目的探究白介素37(IL-37)在变应性鼻炎(AR)患者外周血单核细胞(PBMCs)的表达水平及对相关细胞因子的免疫调控分析。方法选取120例AR患者作为研究组,另选择同期健康志愿者120例作为对照组,检测各组血清IL-37蛋白及mRNA表达,辅助性T细胞1(Th1)、Th2、Th17、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)和Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞百分比及相关细胞因子水平;提取2组PBMCs,并应用浓度为100、200 ng/mL的重组人IL-37蛋白(rIL-37)干预,分析干预前后相关细胞因子水平变化。结果研究组血清IL-37水平及IL-37 mRNA表达均显著低于对照组,Th1细胞、Th17细胞百分比及Th1/Th2比例显著高于对照组,Th2细胞、CD4+CD25+Treg细胞、Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞百分比显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组IL-1β、IL-6、IL-17水平显著高于对照组,IL-4、IL-10、IL-27、IFN-γ、TGF-β1水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清IL-37与IL-1β、IL-6、IL-17存在负相关性,与IL-4、IL-10、IL-27、IFN-γ、TGF-β1存在正相关性(P<0.05)。rIL-37干预后,研究组IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、IL-27、IFN-γ、TGF-β1各指标变化更加显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。200 ng/mL组干预PBMCs细胞各细胞因子变化水平相较于100 ng/mL组各指标变化更显著(P<0.05)。结论变应性鼻炎患者IL-37表达明显下降,进而影响了Th1/Th2、Th17/Treg细胞平衡,导致抑炎因子水平降低,促炎因子水平升高,在AR发病中具有重要作用。     

外周血Treg细胞与Th17细胞在寻常型银屑病中的表达及临床意义

目的 探讨寻常型银屑病患者外周血调节性T细胞(Treg)与辅助性T细胞17(Th17)的表达及临床意义。 方法 选择2014年5月-2016年5月眉山市人民医院收治的54例寻常型银屑病患者作为研究组,另选择同期于该院进行体验的54例健康受检者作为对照组。应用流式细胞技术检测两组外周血Treg细胞、Th17细胞比例,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-23(IL-23)、白细胞介素-17(IL-17),并分析上述指标与寻常型银屑病患者皮损面积和严重程度评分(PASI)相关性。 结果 研究组Th17细胞、Th17/Treg、IL-23、IL-17、IL-17/TGF-β水平分别为(4.60±1.58)%、(1.75±0.57)、(155.20±25.52)ng/L、(70.18±20.52)ng/L、(0.16±0.06)显著高于对照组的(0.82±0.35)%、(0.17±0.08)、(63.20±12.52)ng/L、(19.55±6.50)ng/L、(0.04±0.01),差异均有统计学意义(均P<0.01)。研究组Treg细胞、TGF-β水平分别为(2.82±0.85)%、(475.52±45.85)ng/L显著低于对照组的(5.30±1.70)%、(652.52±58.65)ng/L,差异均有统计学意义(均P<0.01)。寻常型银屑病患者PASI评分与Th17、IL-17、IL-23、IL-17/TGF-β及Th17/Treg呈正相关(P<0.01);TGF-β、Treg细胞百分比与PASI呈负相关(r=-0.523、0.842,均P<0.01)。 结论 寻常型银屑病患者Treg细胞异常降低,Th17细胞异常升高,其发病与Treg增殖不足及Th17异常活化有关。     

Comparison of neurosphere cells with cumulus cells after fusion with embryonic stem cells: reprogramming potential

Embryonic stem cells (ESCs) are the pluripotent cells that also have the capacity to induce the genomic reprogramming of differentiated somatic cells. The progressively restricted genomic potential of somatic cells observed during embryonic development can be reverted to a pluripotent state by the formation of cell hybrids with ESCs. To assess the reprogramming potential of ESCs, we investigated the reprogramming of one of two different somatic cell populations, neurosphere cells (NSCs) and cumulus cells (CCs), after fusion with ESCs. Specifically, hybrid cells were produced by cell fusion of E14 ESCs with either NSCs or CCs containing the neo/lacZ and Oct4-GFP transgenes. The first reprogramming event, observed by the presence of Oct4-GFP in the hybrid cells, could be identified on Day 2, at approximately 45 h after fusion in both ESC-NSC and ESC-CC hybrids. In addition, the two ESC-somatic cell hybrids exhibit a similar reprogramming rate and share characteristics with the E14 ESC line: (1) expression of pluripotent markers (Oct4, Rex-1 and nanog); (2) inactivation of differentiated tissue-specific gene expression; and (3) the capacity to differentiate into all three germ layers. Taken together, our results suggest that the ESC-somatic cell hybrids have fully acquired ESC characteristics and that somatic cells of different tissue origin have the same potential to be reprogrammed after fusion with ESCs.     

树突状细胞激活效应细胞作用的初步研究

目的探讨树突状细胞（DC）对肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）和小鼠脾淋巴细胞（小鼠脾LC）的最佳激活作用比例.方法联合应用GM-CSF、IL-4和小鼠H22肝癌细胞全细胞性抗原致敏从荷瘤小鼠四肢长骨提取的DC,依据不同的激活比例用致敏DC体外激活TIL和小鼠脾LC,采用乳酸脱氢酶（LDH）4小时释放法测定、观察被不同程度激活的TIL和小鼠脾LC对小鼠H22肝癌细胞的杀伤活性.结果当E/T为1：400和1：200时,所激活的TIL或小鼠脾LC的杀伤活性较弱,线性关系不明显,P＞0.05;当E/T为1：100时,杀伤活性有较明显的提高,与前两者比较,P＜0.05;当E/T=1：50时,杀伤活性徒增,与前三者比较均有显著性差异;而当E/T=1：25,1：12.5和1：6.25时,杀伤活性与E/T=1：50时基本没变化,P＞0.05.结论当E/T=1：50时,DC能使小鼠脾LC和TIL充分激活,显著提高其对小鼠H22肝癌细胞的体外杀伤活性.     

肝实质细胞和肝非实质细胞及非肝细胞的共培养

生物人工肝有望成为肝衰竭患者有效的体外肝支持治疗手段,而建立生物人工肝的前提是要获得足够数量高活性和良好功能的肝细胞.大量研究发现,肝细胞共培养能明显增强肝细胞功能,保持肝细胞的表型.此文就近年来肝细胞和非实质细胞、非肝细胞共培养的效果、方法和可能的机制作了综述.     

Generation and functional assessment of antigen-specific T cells stimulated by fusions of dendritic cells and allogeneic breast cancer cells

We have reported that fusions of patient-derived dendritic cells (DC) and autologous breast cancer cells induce T-cell responses against autologous tumors. However, the preparation of fusion cells requires patient-derived tumor cells, and these are not always available in the clinical setting. In the present study, we explore an alternative approach to constructing DC-breast cancer fusion vaccine by using breast cancer-cell lines. DC generated from HLA-A*0201-positive donor were fused to HLA-A*0201+ allogeneic MCF7 breast cancer cells. These fusion cells co-expressed tumor-associated antigens and DC-derived costimulatory and MHC molecules. Both CD4 and CD8 T cells were activated by the fusion cells as demonstrated by the production of IFN-gamma. The fusion cells induced strong antigen-specific cytotoxic T lymphocytes (CTL) activity against their parent cells. The lysis of targets was restricted by HLA-A*0201, since killing was blocked by the anti-HLA-A2 mAb. Similar CTL activity against HLA-A*0201-positive targets was induced when T cells were cocultured with fusions of DC and HLA-A*0201-negative allogeneic BT20 breast cancer cells. In addition, administration of T cells stimulated by DC-breast cancer fusion cells regressed 7-day-old tumors and rendered mice free of disease up to 90 days. These results suggest that tumor-cell lines can be used as a fusion partner in the construction of DC-tumor fusion vaccine. Such fusion cells hold promise since they can be used as a vaccine for active immunotherapy or as stimulators to activate and expand T cells for adoptive immunotherapy.     

Influence of glutamine-supplemented Caco-2 cells on cytokine production of mononuclear cells

BACKGROUND: Caco-2 cells, cultured with mononuclear cells, were used as an in vitro model of human intestinal cell function. This study shows the effect of glutamine (Gln) supplementation on the production of tumor necrosis factor alpha, interleukin-10 (IL-10), and interleukin-6 (IL-6). METHODS: Confluent Caco-2 cells were cultured in media with Gln at 0 mmol/L, 4 mmol/L, or 10 mmol/L +/- 1 microg/mL lipopolysaccharide (LPS), treated with fluorescein isothiocyanate- (FITC-) conjugated intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) mononuclear antibody, and assessed for ICAM-1 expression levels via flow cytometry. Confluent Caco-2 cells alone in apical inserts, or mononuclear cells (MNCs) alone in basal chambers of transwells, were cultured in media with 0 mmol/L, 4 mmol/L, or 10 mmol/L Gln. Supernatants were taken to assess cytokine and endotoxin levels. Confluent Caco-2 cells in apical inserts of transwells were cultured in media containing Gln at 0 mmol/L, 4 mmol/L, or 10 mmol/L, whereas MNCs were cultured in the basal chamber in media containing Gln at 4 mmol/L +/- LPS. Supernatants were collected to determine cytokine levels in each chamber. RESULTS: With Gln supplementation of the media at 10 mmol/L, enterocytes displayed a decrease in ICAM-1 expression. MNCs showed a decrease in tumor necrosis factor alpha and IL-6 production and an increase in IL-10 production when incubated with Caco-2 cells in media supplemented with Gln at 10 mmol/L. CONCLUSIONS: Although cytokine production by Caco-2 or mononuclear cells incubated alone was not influenced by the Gln concentration of the media, cultured together, Gln levels affected cytokine production by mononuclear cells, which suggests that Caco-2 cells produce mediators in Gln-rich conditions that can influence mononuclear cell cytokine production.     

人子宫内膜细胞原代培养与间质细胞MTS比较

目的探究原代人子宫在位内膜细胞分离及培养的简易方法,比较分离培养单一间质细胞和混合培养间质细胞之间的差异。方法采用单纯胰蛋白酶,分段消化人子宫内膜组织,经过两次筛网过滤、离心纯化技术,分离、纯化人子宫内膜间质细胞(ESC)和腺上皮细胞(EEC),采用免疫荧光方法对细胞进行鉴定,采用Cell Titer96~ Aqueous One Solution Reagent(MTS)方法监测细胞之间增长速度。结果间质细胞多呈梭形或多角形,纯度可达97%以上。腺上皮细胞多似蝌蚪形或多角形,纯度可达93%以上。混合培养细胞比单一培养细胞增殖能力强。结论采用单纯胰蛋白酶分段消化法和二次筛网过滤法可成功分离子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞,具有获得细胞成活率高、生长稳定的优点,混合培养间质细胞,保留细胞间整体性,可为进一步研究子宫内膜细胞提供一定的实验基础。     

胚胎干细胞在心肌样环境中向心肌样细胞的分化情况

目的探讨心肌细胞促进胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)分化为心肌样细胞的诱导作用。方法收集小鼠3.5d胚龄的囊胚,将其培养在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上,4～5d后取内细胞团接种在饲养层上分离培养出ESCs。取3～5代ESCs,先将ESCs悬浮培养形成2～3d的拟胚体(embryoid bodies,EBs),再与新生大鼠心肌细胞共培养诱导向心肌细胞分化,相差显微镜下观察分化细胞的形态学变化,免疫细胞荧光技术检测心肌细胞特异性肌钙蛋白T(TnT)、а-肌动蛋白(а-Actin)的表达。结果诱导d3起可见自发性、有节律跳动的拟胚体出现,12d时共培养组约有93%的拟胚体出现节律性收缩,显著高于对照组,均表达心肌细胞特异性蛋白cTnT、а-actin,心肌细胞直接接触诱导组其分化比率达56.5%,分化的细胞形态较单一。结论心肌细胞与胚胎干细胞直接接触能促进胚胎干细胞向心肌细胞分化。     

Differentiation of embryonic and adult stem cells into insulin producing cells

Replacement of insulin producing cells represents an almost ideal treatment for patients with diabetes mellitus type 1. Transplantation of pancreatic islets of Langerhans is successful in experienced centers. The wider application of this therapy, however, is limited by the lack of donor organs. Insulin producing cells generated from stem cells represent an attractive alternative. Stem cells with the potential to differentiate into insulin producing cells include embryonic stem cells (ESC) as well as adult stem cells from various tissues including the pancreas, liver, bone marrow and adipose tissue. The use of human ESC is hampered by ethical concerns but research with human ESC may help us to decipher important steps in the differentiation process in vitro since almost all information available on pancreas development are based on animal studies. The present review summarizes the current knowledge on the development of insulin producing cells from embryonic and adult stem cells with special emphasis on pancreatic, hepatic and human mesenchymal stem cells.     

奈达铂对宫颈癌Hela及Siha细胞的作用

目的:比较奈达铂(NDP)体外对人宫颈腺癌细胞Hela细胞及鳞癌细胞Siha的抑制作用并探讨其作用机制。方法:以2.5～40μg/ml NDP分别作用于Hela及Siha细胞24 h,48 h,72 h,MTT法检测抑制率,计算半数抑制浓度(IC50);利用流式细胞术(FCM)观察细胞凋亡率及周期变化;半定量PCR法分析基因半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3,Caspase 9)及基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达变化。结果:NDP对宫颈癌Hela细胞及Siha细胞均有抑制作用,呈时间-剂量依赖性,NDP对Hela细胞的抑制率大于Siha细胞;FCM显示,随时间、浓度增加,Hela及Siha细胞凋亡率增加,相同浓度和作用时间下,Hela细胞的凋亡率大于Siha细胞(P<0.05),S期细胞的比例增加,G0/G1期比例减少,G2/M期比例变化不明显;与对照组相比,Caspase 3,Caspase 9表达增加,MMP-2表达减少。结论:NDP可抑制宫颈腺癌细胞Hela及鳞癌细胞Si-ha的增殖,NDP体外对Hela细胞的抑制作用更强。NDP的作用机制与诱导细胞凋亡、细胞周期阻滞、上调Caspase3和Caspase9的表达有关;下调MMP-2的表达可能有利于降低宫颈癌细胞的侵袭力。