高效液相色谱法测定大鼠血浆中伊马替尼浓度及其药动学

目的建立大鼠血浆中伊马替尼的高效液相色谱测定方法,研究伊马替尼在大鼠体内的药动学特征。方法血浆经高氯酸沉淀,以ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈:0.1%TFA:水=20:36:44(V/V/V),流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为282 nm。测定10只雄性SD大鼠单剂量伊马替尼50 mg/kg(-1),检测波长为282 nm。测定10只雄性SD大鼠单剂量伊马替尼50 mg/kg^(-1)灌胃后的血药浓度经时过程。由DAS2.0程序处理计算药动学参数。结果伊马替尼浓度在0.10(-1)灌胃后的血药浓度经时过程。由DAS2.0程序处理计算药动学参数。结果伊马替尼浓度在0.10²0.00μg·mL20.00μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 8),定量下限为0.10μg·mL(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 8),定量下限为0.10μg·mL^(-1),日内、日间RSD均小于10%,回收率均大于85%,伊马替尼在大鼠体内峰值浓度p_(max)为(11.8±2.0)μg·mL(-1),日内、日间RSD均小于10%,回收率均大于85%,伊马替尼在大鼠体内峰值浓度p_(max)为(11.8±2.0)μg·mL^(-1),达峰时间t_(max)为(3.0±0.7)h,AUC_(0-∞)为(126±28)μg·mL(-1),达峰时间t_(max)为(3.0±0.7)h,AUC_(0-∞)为(126±28)μg·mL^(-1),AUC_(0-∞)为(128±28)μg·h·mL(-1),AUC_(0-∞)为(128±28)μg·h·mL^(-1),t_(1/2α)为(2.4±0.8)h,t_(1/2β)为(7.8±0.9)h。结论本方法准确可靠、简便快速,适用于大鼠血浆伊马替尼浓度的测定及其药动学研究。     

高效毛细管电泳法测定大鼠血浆中头孢地尼浓度及其药动学研究

目的:测定大鼠血浆中头孢地尼浓度,并进行药动学考察。方法:采用高效毛细管电泳法(HPCE)。使用熔融硅胶毛细管柱(75μm,总长为30 cm,有效长度为21.5 cm),缓冲液为20 mmol/L柠檬酸,进样电压为10 k V持续10 s,分离电压为-20 k V,检测波长为214 nm。取6只大鼠ig头孢地尼溶液(20 mg/kg),分别于给药前及给药后0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、6、12、24 h经尾缘静脉取血0.2 m L进行测定。采用BAPP 2.0软件计算药动学参数。结果:头孢地尼质量浓度在0.2~50μg/m L范围内线性关系良好(r=0.999 7),定量下限为0.2μg/m L;日内(n=6)、日间(n=3)精密度试验的RSD均不大于12.2%;稳定性试验的RSD≤9.10%(n=6);方法回收率为95.4%~114.3%(RSD=9.0%,n=6);基质效应为63.5%~70.2%(RSD=10.39%,n=6)。头孢地尼在大鼠体内的t1/2为(0.54±0.01)h,MRT为(1.90±0.14)h,c_(max)为(32.92±0.81)μg/m L,t_(max)为(1.50±0.02)h,AUC_(0-24 h)为(46.65±0.44)μg·h/m L,AUC_(0-∞)为(46.83±0.44)μg·h/m L。结论:该方法快速、准确、简便,可用于大鼠血浆中头孢地尼浓度的测定及其药动学考察。     

阿司匹林磷脂复合物自微乳在大鼠体内的药动学及生物利用度研究

目的:研究阿司匹林磷脂复合物自微乳在大鼠体内的药动学行为及生物利用度。方法:将12只SD大鼠随机分为阿司匹林混悬液组(10 mg/kg)和阿司匹林磷脂复合物自微乳组(10 mg/kg),每组6只。各组大鼠分别ig给药,并于给药前及给药0.083、0.25、0.5、0.75、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0、12.0 h后于颈静脉采血0.6 mL。采用高效液相色谱法测定2组大鼠血浆中水杨酸的浓度,并采用DAS 2.0药动学软件计算药动学参数和相对生物利用度。结果:阿司匹林混悬液和阿司匹林磷脂复合物自微乳在大鼠体内的药动学过程均符合一室模型。水杨酸在阿司匹林混悬液组和阿司匹林磷脂复合物自微乳组大鼠的c_(max)分别为(1.904±0.208)、(6.457±1.091)μg/mL,AUC_(0-12 h)分别为(12.860±1.327)、(47.270±12.860)μg/(h·mL),t_(max)分别为(2.167±0.983)、(0.917±0.540)h。与ig阿司匹林混悬液比较,ig阿司匹林磷脂复合物自微乳在大鼠体内水杨酸的c_(max)、AUC_(0-12 h)均显著增加(P<0.01),t_(max)显著减小(P<0.05),相对生物利用度为367.57%。结论:阿司匹林制成磷脂复合物自微乳后可提高水杨酸在胃肠道的吸收,相对生物利用度较高。     

齐墩果酸与二氢齐墩果酸灌胃及静脉注射给药后在大鼠体内的药动学研究

目的:研究齐墩果酸及其衍生物二氢齐墩果酸ig及iv给药在大鼠体内的药动学及绝对生物利用度。方法:12只SD大鼠随机分为齐墩果酸给药组和二氢齐墩果酸给药组,每组6只,两组大鼠均ig给药(50 mg/kg),1周后于尾iv给药(2 mg/kg)。分别于给药前及给药后(ig为0.1、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、5、7、9、12 h,iv为0.05、0.15、0.25、0.5、0.75、1、2、3、5、7、9、12 h)尾静脉取血0.3 mL,采用超高效液相色谱(UPLC)-四级杆串联飞行时间质谱法(QTOF)测定血药浓度,DAS 2.0药动学软件计算药动学参数与绝对生物利用度。结果:大鼠ig与iv齐墩果酸后,AUC_(0-∞)分别为(232.10±7.17)、(1 203.99±19.65)ng·h/mL,t1/2分别为(1.75±0.10)、(1.41±0.04)h;ig给药后c_(max)为(121.3±18.92)ng/mL,t_(max)为(0.54±0.10)h,绝对生物利用度为0.77%。大鼠ig与iv二氢齐墩果酸后,AUC_(0-∞)分别为(382.03±23.73)、(386.14±10.65)ng·h/mL,t_(1/2)分别为(2.47±0.45)、(1.44±0.03)h;ig给药后c_(max)为(124.52±12.28)ng/mL,t_(max)为(0.63±0.14)h,绝对生物利用度为3.96%。结论:在大鼠体内,二氢齐墩果酸的绝对生物利用度显著高于齐墩果酸。     

头痛宁鼻腔喷雾剂在大鼠体内的药动学及脑靶向研究

目的:研究头痛宁鼻腔喷雾剂经鼻给药后在大鼠体内的药动学及脑靶向情况。方法:84只SD大鼠分为鼻腔给药组和静脉给药组,每组42只,给药剂量均为1.2 mL/kg。分别于给药后5、10、15、30、60、90、120 min于腹主动脉取血5 mL,并取脑组织(每个时间点6只)。采用高效液相色谱-串联质谱法测定各组大鼠血浆和脑组织中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的浓度,采用DAS 2.0软件计算药动学参数及脑靶向性指数。结果:鼻腔给药组大鼠血浆中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的c_(max)分别为(0.202 4±0.015 8)、(0.373 8±0.085 7)μg/mL,t_(max)均为(10.000 0±0.000 0)min,AUC_(0-∞)分别为(16.542 9±2.110 3)、(27.452 7±5.572 1)μg·h/mL;脑组织中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的c_(max)分别为(0.180 2±0.038 4)、(0.320 4±0.027 7)μg/g,t_(max)均为(10.000 0±0.000 0)min,AUC_(0-∞)分别为(17.105 3±2.432 9)、(24.541 6±3.753 4)μg·h/g。静脉给药组大鼠血浆中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的c_(max)分别为(0.300 2±0.016 1)、(0.526 7±0.044 1)μg/mL,t_(max)均为(10.000 0±0.000 0)min,AUC_(0-∞)分别为(28.010 5±4.112 8)、(60.294 1±11.290 2)μg·h/mL;脑组织中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的c_(max)分别为(0.149 8±0.031 5)、(0.199 8±0.040 1)μg/g,t_(max)均为(15.000 0±0.000 0)min,AUC_(0-∞)分别为(22.643 4±2.883 1)、(36.721 8±14.885 6)μg·h/g。升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷脑靶向性指数分别为2.387 0、2.176 1。结论:头痛宁鼻腔喷雾剂鼻腔给药后一部分药物可经鼻腔吸收直接转运至脑,制成鼻腔喷雾剂科学合理。     

左氧氟沙星片及胃漂浮缓释微丸在大鼠体内的药动学比较研究

目的:建立测定大鼠血浆中左氧氟沙星浓度的方法,并比较左氧氟沙星片及胃漂浮缓释微丸在大鼠体内的药动学差异。方法:将SD大鼠随机分为左氧氟沙星片组和左氧氟沙星胃漂浮缓释微丸组,每组6只。分别空腹灌胃相应药物40 mg/kg(以生理盐水为溶剂),并于给药前及给药后0.25、0.5、1、2、4、8、12、24 h自眼眶取血0.3 mL,采用超高效液相色谱法(UPLC)测定大鼠血浆中左氧氟沙星的浓度。色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C_(18),流动相为0.1%甲酸溶液-乙腈(78∶22,V/V),流速为0.3 mL/min,检测波长为294 nm,柱温为40℃,进样量为2μL。采用DAS 3.0软件计算两组大鼠的药动学参数,采用F检验考察两者的差异。结果:左氧氟沙星检测质量浓度的线性范围为0.20～20.12μg/mL,定量下限为0.20μg/mL,最低检测限为0.04μg/mL;日内、日间RSD均小于10%,回收率符合2015年版《中国药典》生物样品定量分析的相关要求。大鼠单剂量灌胃左氟氧沙星片及胃漂浮缓释微丸后的平均药-时曲线均符合二室模型,达峰浓度(c_(max))分别为(12.13±1.67)、(8.76±1.13)μg/mL,达峰时间(t_(max))分别为(0.86±0.15)、(2.48±0.45)h,消除半衰期(t_(1/2β))分别为(4.67±0.95)、(6.67±1.01)h,药-时曲线下面积(AUC_(0-t))分别为(42.95±4.21)、(126.48±9.44)μg·h/mL,AUC_(0-∞)分别为(50.66±6.72)、(132.61±10.63)μg·h/mL。与左氧氟沙星片比较,左氧氟沙星胃漂浮缓释微丸的c_(max)显著降低,t_(max)、t_(1/2β)、AUC、平均驻留时间均显著延长或升高(P<0.05);相对生物利用度为294%。结论:本研究建立的UPLC法操作简便,专属性强,灵敏度、精密度高,可用于大鼠血浆中左氧氟沙星质量浓度的检测及药动学的研究。将左氧氟沙星制成胃漂浮缓释微丸后,其药动学参数变化明显,药物在大鼠体内的滞留时间明显延长,生物利用度显著提高。     

芦丁与槲皮素不同配比对大鼠体内芦丁药动学的影响

目的:探讨芦丁与槲皮素不同配比对大鼠体内芦丁药动学的影响。方法:将30只大鼠随机分为芦丁组(芦丁-槲皮素物质的量之比为4∶0,下同)、槲皮素组(芦丁-槲皮素=0∶4)、BL_1组(芦丁-槲皮素=3∶1)、BL_2组(芦丁-槲皮素=2∶2)、BL_3组(芦丁-槲皮素=1∶3),每组6只,各组大鼠ig给药10 mg/kg(以芦丁和槲皮素中槲皮素母核计)。分别于给药前及给药后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12、16、20、24 h后尾静脉取血0.3 m L,处理后采用高效液相色谱法测定血浆中槲皮素(芦丁代谢产物)的血药浓度,采用DAS 2.0药动学软件计算药动学参数。结果:芦丁、槲皮素、BL_1、BL_2、BL_3组大鼠AUC_(0-24 h)分别为(4.908±0.877)、(8.382±3.671)、(8.473±0.709)、(4.366±2.297)、(8.914±2.642)μg·h/L,MRT_(0-24 h)分别为(9.675±1.359)、(3.142±0.489)、(3.517±1.128)、(3.376±1.046)、(4.494±1.653)h,t_(max)分别为(5.726±5.645)、(1.375±0.703)、(1.125±1.438)、(1.417±2.300)、(1.292±0.954)h,c_(max)分别为(0.609±0.202)、(2.341±0.539)、(2.425±1.217)、(1.464±0.677)、(3.325±2.425)μg/L。与芦丁组比较,槲皮素、BL_1、BL_3组大鼠AUC_(0-24 h)、c_(max)显著升高(P<0.05),t_(max)、MRT_(0-24 h)显著降低(P<0.05);BL_2组大鼠c_(max)显著升高(P<0.05),t_(max)、MRT_(0-24 h)显著降低(P<0.05)。与槲皮素组比较,除BL_2组大鼠AUC_(0-24 h)显著降低外(P<0.05),BL_1、BL_2、BL_3组大鼠AUC_(0-24 h)、MRT_(0-24 h)、t_(max)、c_(max)差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:槲皮素可提高芦丁在大鼠体内的相关指标。     

雷公藤甲素在正常大鼠和佐剂性关节炎模型大鼠体内的药动学研究

目的:研究雷公藤多苷片中活性成分雷公藤甲素在正常大鼠和佐剂性关节炎模型大鼠体内的药动学特征,为其临床合理用药提供参考。方法:将12只SD大鼠随机分为正常组和模型组,每组6只。模型组大鼠sc完全弗氏佐剂0.1 m L复制佐剂性关节炎模型,正常组大鼠sc等体积生理盐水。造模14 d后,两组大鼠均ig雷公藤多苷片混悬液96 mg/kg,分别于给药前及给药后10、30、45、60、90、120、150、180、240、300、420 min眼眶取血0.4 m L,采用高效液相色谱法测定雷公藤甲素的血药浓度;采用DAS 2.0药动学软件计算药动学参数,并进行比较。结果:雷公藤甲素在正常组、模型组大鼠体内的c_(max)分别为(1.139±0.114)、(0.916±0.103)μg/m L,t_(max)分别为(2.167±0.606)、(3.083±0.801)h,t_(1/2α)分别为(5.500±3.610)、(5.593±1.795)h,AUC_(0-7 h)分别为(5.052±0.371)、(4.707±0.347)μg·h/m L,MRT_(0-7 h)分别为(3.224±0.119)、(3.429±0.139)h,CL分别为(11.616±2.986)、(11.246±2.638)m L/h。与正常组比较,模型组大鼠c_(max)显著减小,t_(max)和MRT_(0-7 h)显著延长(P<0.05)。结论:佐剂性关节炎会影响大鼠体内雷公藤甲素的药动学特征,其可促进大鼠体内雷公藤甲素的吸收与消除。     

玄麦甘桔中指标性成分血药浓度的UPLC-MS/MS法测定及药代动力学研究

目的建立玄麦甘桔颗粒中指标性成分甘草苷和哈巴俄苷在大鼠血浆中的超高效液相-质谱/质谱定量测定方法,并研究其体内药动学过程。方法色谱柱:菲罗门Kinetex C_(18)柱(50 mm×3 mm,2.6μm);柱温:20℃;流动相为0.1%甲酸(A)-乙腈(B);梯度洗脱;流速为0.3 mL/min;进样量:5μL。采用ESI源,多反应监测模式(MRM)负离子模式下检测各成分血药浓度。6只雄性大鼠灌胃玄麦甘桔颗粒药液后分别于给药后0.03、0.08、0.16、0.33、0.67、1、1.5、2、3、4、6、8、12 h,眼内眦取血0.5 mL测定血药浓度,并用DAS 3.0软件计算药动学参数。结果以芦丁为内标,甘草苷、哈巴俄苷的检测范围分别为0.78~50.0 ng/mL(r=0.997 9)和1.66~106.10 ng/mL(r=0.995 8)。方法回收率>82.3%,日内精密度与日间精密度RSD均<8.8%。甘草苷、哈巴俄苷大鼠体内的t_(1/2)分别为(3.46±2.08)、(3.28±1.17)h,C_(max)分别为(27.55±21.12)、(16.28±14.53)μg/L,t_(max)分别为(0.31±0.19)、(0.33±0.18)h,AUC_(0~12 h)分别为(48.82±11.35)、(64.85±46.70)μg·h/L。结论该方法快速、灵敏,重复性好,可用于玄麦甘桔颗粒2种指标性成分在大鼠体内的药代动力学研究。     

阿德福韦衍生物灌胃给药后的代谢产物阿德福韦在大鼠体内的药动学研究

目的:建立阿德福韦(PMEA)的含量测定方法,并研究阿德福韦衍生物[阿德福韦前药,阿德福韦-熊去氧胆酸-3-丙基酯,L-亮氨酸-3-丙基酯(PMEA-1c)]灌胃给药后的代谢产物PMEA在大鼠体内的药动学。方法:采用高效液相色谱-串联质谱(HPLCMS/MS)法。色谱柱为BEH C_(18),流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水(梯度洗脱),流速为0.25 mL/min,柱温为30℃,进样量为1μL;检测离子对为PMEA质荷比(m/z)274.1→162.1,葛根素(内标)m/z 417.1→267.1。12只大鼠随机分为阿德福韦酯(ADV)组(阳性对照,90 mg/kg)、PMEA-1c组(160 mg/kg),每组6只,分别灌胃给予相应药物1次,于给药后0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、8、10、12、24 h尾静脉取血测定PMEA血药浓度;利用DAS 2.0软件计算相关药动学参数。结果:PMEA检测质量浓度线性范围为6.1～440.0 ng/mL(r=0.998 5),日内、日间精密度和稳定性试验的RSD均<10%(n=3、5、6),准确度为82.16%～97.33%(RSD≤6.4%,n=5),基质效应为95.96%～106.35%(RSD≤4.9%,n=5);ADV组和PMEA-1c组大鼠血浆中PMEA的t_(1/2)分别为(1.762±0.117)、(2.548±0.174)h,AUC_(0-24) h分别为(2 170.059±146.091)、(4 704.257±176.792)μg·h/L,c_(max)分别为(613.092±9.504)、(697.295±15.275)μg/L;与ADV组比较,PMEA-1c组大鼠t_(1/2)、AUC_(0-24 h)、AUC_(0-∞)、c_(max)均显著增加(P<0.01或P<0.001)。结论:建立的方法准确可靠,本实验结果表明PMEA-1c代谢为单室模型,其可作为阿德福韦前药的潜力药物,为阿德福韦前药的继续研究奠定了基础。