沙门菌和志贺菌通用增菌液增菌效果实验观察

在对食品生产经营单位或公共场所从业人员作伤寒、痢疾带菌检查，对各类食品样品作沙门、志贺菌检测时，由于沙门菌和志贺菌检验所用的增菌液不同，即使是对同一份标本也只能分别增菌，分别划线分离，使实验室的工作量成倍增加，同时由于两者增菌时间不相同，（沙门菌18～24h，志贺菌6～8h），给实验测定的工作安排带来一定困难，因此，研究和选择合适的可同时用作沙门、志贺菌增菌的通用增菌液，对提高实验室的工作效率具有重要的现实意义。选择了市售的2个牌号的沙门、志贺菌增菌液与SC增菌液及GN增菌液分别进行了增菌效果的对比观察，现将结果报告如下。     

泰山风景区从业人员沙门菌属和志贺菌属带菌情况分析

沙门菌属和志贺菌属是人群中最重要的肠道传染病病原菌,其有些菌型可引起人的急性腹泻和食物中毒爆发,因此沙门菌和志贺菌检测是饮食服务和公共场所从业人员体检的重要检测项目之一。它为切断传染源,有效防止肠道传染病流行和食物中毒发生具有重要意义。为了解泰山风景区从业人员肠道沙门菌、志贺菌携带情况,进一步加强饮食服务行业的卫生监督管理,对泰山景区1997年～2 0 0 2年的检测情况进行分析,结果报告如下:1　材料与方法1.1　标本来源　1997年～2 0 0 2年对泰山风景区所辖饮食服务和公共场所的从业人员,在健康体检时采集的粪便标本。1.…     

沙门-志贺菌增菌培养基的研究

目的采用分值计算法研制沙门、志贺菌增菌培养基和制订质量标准。方法分值计算法。结果大肠埃希菌菌落平均菌落直径为0.99 mm,S=0.17;生长率为15.7%,δρ=3.12;痢疾志贺菌菌落平均菌落直径为1.48mm,S=0.29;生长率为70.2%,δρ=8.98;鼠伤寒沙门菌菌落平均菌落直径为1.65 mm,生长率为99.2%δρ=3.41。三株指示菌菌悬液浓度用沙门-志贺增菌培养基稀释10-8~10-12,培养6 h后计数结果:大肠埃希菌10-10稀释度为1.0cfu/ml;痢疾志贺菌10-11稀释度为1.0 cfu/ml;鼠伤寒沙门菌10-11稀释度为3.0 cfu/ml。质量分值结果表明:大肠埃希菌质量分值≥29.9(其中:菌落直径分值≥10.00;菌落差分值≥14.90;生长率分值≥5.00)。痢疾志贺菌质量分值≥13.05(其中:菌落直径分值≥10.00;菌落差分值≥-1.95;生长率分值≥5.00)。鼠伤寒沙门菌质量分值≥11.65(其中:菌落直径分值≥10.00;菌落差分值≥-3.35;生长率分值≥5.00)。结论沙门、志贺菌增菌培养基对大肠埃希菌具有较好的抑制作用;对痢疾志贺菌达到促生长的作用;对鼠伤寒沙门菌的生长未受到不良的影响。     

沙门菌、志贺菌和金葡菌复合增菌培养基研制

目的 研制用于沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌同时增菌的培养基.方法 根据微生物营养素需求,筛选可添加成分进行单因素比较试验,确定出培养基合适的组分,采用平板菌落计数法和多重PCR法验证培养基增菌效果.结果 成功研制出能够用于沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌复合增菌的培养基(3S),当接种量约为1 CFU/mL,37 ℃培养12 h后,3种目标菌以相对一致的速度增殖,可达到107～108CFU/mL;应用多重PCR可同时扩增出目的 条带.结论 3S可用于沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌复合增殖培养,配制方便、增菌快速、节约成本和时间,具有良好的市场前景.     

上海市青浦区健康人群沙门菌属和志贺菌属带菌情况分析

沙门菌属和志贺菌属是人群中最重要的肠道传染病病原菌 ,但在健康人群中也可有一定的携带率 ,是食物中毒事件发生的重要隐患之一。为掌握本地区健康人群沙门菌属和志贺菌属的带菌情况 ,我们对 1992～ 1998年全区各乡镇的 10 82 75份健康从业人员标本沙门菌属和志贺菌属的检测结果进行了分析 ,现报告如下 :1　材料与方法1.1　材料1.1.1　标本来源　由各乡镇卫生院及本中心采集从业人员肛拭一支 ,保存于Cary -Blair半固体培养基进行运送 ,当天送青浦区疾病预防控制中心检验科作细菌培养。从 1992年到 1998年 ,共采集从业人员肛拭标本 10 82 7…     

计算分值法在沙门氏菌和志贺氏菌增菌液培养基的应用

肠道致病菌的分离 ,通常采取ＧＮ和ＳＣ等增菌液 ,但各种增菌液均有各自的特点和分离肠道致病菌的局限性。本次实验研究目的是制备既可使沙门氏菌和志贺氏菌同步增菌 ,又可在增菌过程中抑制非致病菌的生长。并采用计算分值的方法来优选配方。现报告如下。材料与方法1　试验指示菌　鼠伤寒沙门氏菌 (Ｓ .ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍＡＴＣＣ5 0 0 13)、痢疾志贺氏菌 (Ｓ .ｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅＡＴＣＣ 12 0 2 2 )和大肠埃希氏菌 (Ｅ .ＣＯＩｉＡＴＣＣ 2 5 92 2 )。2　分值计算法　参照杨更发[1] 、陈天寿[2 ] 方法。2 1　试验培养基 :每 10 …     

上海市闵行区饮食和公共场所从业人员沙门和志贺菌属带菌情况

沙门菌属和志贺菌属是人群中重要的肠道传染病病原菌，因其在人体中的隐性携带，所以要特别警惕由于此种情况引发的食物中毒和食源性肠道传染病。为掌握本地区从业人员沙门菌属和志贺菌属的带菌情况及流行趋势，为制定疾病预防控制措施提供可靠依据，我们对2001～2003年全区各乡镇283685份从业人员健康检查肛拭标本进行了沙门菌属和志贺菌属的监测和分析，现报告如下：     

市售GN增菌液增菌效果观察

GN增菌液主要用于肠道带菌者与食品标本中志贺菌的增菌。我们对市售3种GN增菌液增菌效果进行了观察，发现按常规法测试GN增菌液增菌效果不明显，但纯菌种增菌后随着增菌时间的延长，增菌效果良好。     

上海市奉贤区从业人员肠道沙门菌和志贺菌检测结果

沙门菌属和志贺菌属是人群中最重要的肠道传染病病原菌,因其在人体中的隐性携带,其有些菌型可引起人的急性腹泻和食物中毒爆发。因此,沙门菌和志贺菌的检测是饮食服务和公共场所从业人员体检的重要检测项目之一,它对传染源管理,有效阻止肠道传染病流行和食物中毒的发生具有重要意义。为掌握奉贤区从业人员沙门菌属和志贺菌属的带菌情况及流行趋势,进一步加强饮食服务行业的卫生监督管理,我们对奉贤区2004—2006年全区各镇79319份从业人员健康检查肛拭标本进行了沙门菌属和志贺菌属的检测,结果报告如下。     

改良李斯特菌增菌液的研究

目的:研制改良李斯特菌增菌液。方法:用不同浓度的吖啶黄、萘啶酮酸、亚碲酸钾、氯霉素对单增李斯特菌、大肠杆菌及蜡样芽胞杆菌进行抑制效果试验。结果:浓度在15~10 mg/L时,吖啶黄对蜡样芽胞杆菌有较强的抑制性,对单增李斯特菌、大肠杆菌几乎不起作用;20~10 mg/L浓度的萘啶酮酸、25~15 mg/L浓度的亚碲酸钾对大肠杆菌、蜡样芽胞杆菌均有较强的抑制性,但对单增李斯特菌无抑制性;15~3 mg/L 4种浓度的氯霉素对3种菌均有较强的抑制性;用吖啶黄15 mg/L、萘啶酮酸20 mg/L、亚碲酸钾15 mg/L的李斯特菌改良增菌液增菌,单增李斯特菌检出率明显高于国标法(P<0.05)。212件样品的单增李斯特菌检出率由0.94%提高到7.08%。结论:该增菌液选择性强,检出率高,值得推广和应用。     

Isolation of Shigella sonnei by fluid media.

Selenite F broth prepared in the laboratory from single ingredients was found to be significantly more efficient than nutrient broth in the isolation of Shigella sonnei from human faeces. It was more efficient than direct plating on deoxycholate citrate agar for diagnosisng Sonne dysentery in a local outbreak. The difference was significant. There was, however, no significant advantage for enrichment over direct plating when stools posted from Briston to Cardiff were examined. Laboratory prepared selenite F broth was preferable to the same medium purchased commercially from two different firms. The product of one frim was significantly better than that of the other. Two methods of sterilization of laboratory prepared selenite F broth were studied. Seitz filtered selenite was less inhibitory to the growth of samll numbers of Shigella sonnei. Sterilization by heating in free steam for periods of 15 min and over impaired the ability of selenite F broth to allow multiplication of small numbers of Shigella sonnei.     

Isolation of salmonellas and Shigella sonnei from a laboratory bench.

An area of the laboratory bench on which slide agglutinations were performed in the diagnosis of salmonella and shigella infection was examined for these organisms. Impression plates and broth-moistened swabs were used for sampling. Both techniques gave satisfactory results, but the contact plates provided positive results a day earlier than the swabs. Suitable precautions to minimize contamination of the bench surface are discussed.     

志贺菌耐多药外排泵emrE基因作用分析

目的 对临床耐多药志贺菌株H24的1种小多重耐药性家族(SMR)外排泵emrE基因进行定向分子进化,研究基因突变增强emrE外排泵耐药性的潜力,调查志贺菌外排泵基因emrE基因垂直进化对临床耐药发展的影响。方法 通过用体外易错PCR(EP-PCR)方法对emrE基因进行随机突变实验,用微量稀释生长曲线法进行菌株的耐药性筛选,用荧光实时定量RT-PCR测定基因表达情况,应用DNA分析软件DNAStar进行生物信息学分析。结果 在31个突变子中筛选到了突变子ep2-emrE(DH5α),它的emrE基因有6个氨基酸突变,分别为Thr-28→Ala,Cys-39→Ser,Tyr-40→终止子,Ser-72→Arg,Leu-93→Phe,Ile-101→Phe。它不但增强四环素和红霉素的耐药能力,还产生新的氯霉素耐药能力。结论 尽管emrE基因较易获得新增耐药性,但在志贺菌对四环素、红霉素等抗生素耐药性发展中,emrE基因的进化突变没有被筛选,表明有其他能力更强的耐药基因在突变进化中起作用。     

多重实时PCR快速同时检测沙门菌和志贺菌

目的 建立改良分子信标，多重实时PCR同时检测沙门菌和志贺菌的快速方法，应用于食源性致病菌的快速诊断。方法 根据GenBank公布的沙门菌侵袭性基因invA和ssaR基因，分别设计一对引物和改良分子信标探针，用同色荧光标记，用于同体系检测沙门菌。志贺菌根据ipaH基因的保守序列，设计引物和改良分子信标探针，加入沙门菌检测体系中，建立三重实时PCR一改良分子信标检测体系，应用于同时对沙门菌、志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测。结果 改良分子信标一多重实时PCR反应体系DNA灵敏度为69～93fg/μl。菌液灵敏度为32～64CFU／ml或1～2CFu／PCR反应体系，无交叉反应。该反应体系同时检测134株沙门菌和67株志贺菌，均出现特异的荧光信号，两种细菌检测互不干扰。对细菌性食物中毒样本等共1100份同时进行沙门菌和志贺菌检测，569份沙门菌实时PCR阳性，其中551份沙门菌培养阳性；42份志贺菌实时PCR阳性，其中41份志贺菌培养阳性。从样品处理到检测结果仅需时间2h至1d。结论 改良分子信标-多重实时PCR检测体系快速、灵敏度高，特异性强，可用于沙门菌和志贺菌食物中毒的快速诊断，伤寒、痢疾等肠道传染病的初筛及预防医学门诊的健康人群体检，为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。     

改良分子信标-实时PCR快速检测志贺菌

目的：建立改良分子信标-实时PCR检测志贺菌的快速方法，应用于志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测。方法：根据GenBank公布志贺菌ipaH基因的保守序列，设计引物和改良分子信标探针，建立实时PCR-改良分子信标检测体系，应用于对志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测。结果：改良分子信标-实时PCR反应体系DNA灵敏度为93fg/μl，菌液灵敏度为64cfu／ml或2cfu／PCR反应体系，无交叉反应。此反应体系检测67株志贺菌，均出现特异的荧光信号。对细菌性食物中毒样本等共657份样品进行志贺菌检测，42份志贺菌实时PCR阳性，其中41份志贺菌细菌培养阳性。从样品处理到检测结果仅需2h～1d时间。结论：改良分子信标-实时PCR检测体系快速、灵敏度高，特异性强，可用于志贺菌食物中毒的快速诊断，为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段，对于提高肠道门诊的工作效率有重要意义。     

人苍白杆菌改良头孢哌酮麦康凯培养基分离

目的 了解人苍白杆菌形态、培养、生化及药敏等特性,建立对人苍白杆菌选择性的分离方法.方法 用改良头孢哌酮麦康凯平板对人苍白杆菌分离,API 20 E和VITEC2GN进行生化鉴定,AST-GN 10进行药敏测定.结果 在206份检样中分离出21株人苍白杆菌;人苍白杆菌生化特点是对糖和醇类不利用;替卡两林、哌拉西林等抗生素对人苍白杆菌的MIC≥128;头孢类抗生素的MICI≥64;四环素、左氧氟沙星、环丙沙星、美罗培南、亚胺培南等的MIC均≤1.结论 改良头孢哌酮麦康凯平板对人苍白杆菌分离具很高的选择性,适合自然环境和临床检验中对人苍白杆菌分离鉴定;人苍白杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药性较高.