胃癌患者外周血中CK19,CK20表达的临床研究

目的:研究胃癌患者外周血CK19、CK20的表达,并探讨其临床意义.方法:用流式细胞术(FCM)方法,检测66例胃癌、7例消化系统良性疾病及21例本院健康职工外周血CK19、CK20的表达.结果:7例消化系统良性患者、21例本院健康职工外周血CK19、CK20无表达.66例胃癌患者CK19、CK20、CK19 CK20阳性表达率分别为53.1%(35/66)、56.1%(37/66)、46.9%(31/66).TNM分期之间比较,Ⅳ期与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期差异有显著性意义(P＜0.01).Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之间相互比较,差异无显著性意义(P＞0.05).转移程度比较,差异有显著性意义(P＜0.01).胃癌远处转移诊断敏感度高达90%.结论:胃癌患者外周血CK19、CK20可以作为检测胃癌微转移的指标.     

Hp感染与胃癌中癌基因和抑癌基因蛋白表达的关系

目的研究Hp感染与胃癌发生的关系及其可能的致癌机制。方法经内镜和病理诊断的胃癌91例,用快速尿素酶试验,改良W-S银染色和PCR方法检测上述标本中Hp;以S-P免疫组织化学法检测P21、P53、C-mcy及C-erbB-2,并用阳性表达积分半定量和免疫组化图像分析进行比较。结果Hp阳性胃癌组(44例)的P21、P53、C-myc及C-erbB-2表达阳性率较Hp阴性胃癌组(47例)为高。Hp阳性组这4种癌基因蛋白的阳性表达积分、平均光密度和积分光密度均显著高于Hp阴性组(P<0.05～0.01)。结论Hp感染与胃癌中P21、P53、C-myc及C-erbB-2的异常表达密切相关,提示Hp感染可使胃粘膜细胞的癌基因活化和抑癌基因突变或失活,促进胃粘膜细胞恶性转化而导致胃癌发生。     

幽门螺杆菌感染和maspin基因表达与胃癌相关性的研究

目的:探讨幽门螺杆菌(Hp)感染和maspin基因表达与胃癌发生发展的关系。方法:Grams染色和改良W-S银染法观察65例浅表性胃炎、58例癌前病变和79例胃癌黏膜组织中Hp感染情况,免疫组化技术检测不同胃黏膜组织maspin基因表达产物。结果:胃癌组、癌前病变组Hp感染率分别是79.7%(63/79)、58.6%(34/58),均明显高于慢性浅表性胃炎组的30.8%(20/65),χ2值分别为35.034、9.645,P值分别为0.000、0.002;胃癌组Hp感染率高于癌前病变组,χ2=7.221,P=0.007。Maspin蛋白表达在浅表性胃炎、癌前病变及胃癌中阳性率分别是58.5%(38/65)、82.8%(48/58)和32.9%(26/79),浅表性胃炎和癌前病变组maspin表达均高于胃癌组,χ2值分别为9.428、33.457,P值分别为0.002、0.000;癌前病变组织中maspin表达高于浅表性胃炎,χ2=8.603,P=0.003。在浅表性胃炎、癌前病变及胃癌组织中,Hp感染阳性组maspin表达阳性率均较Hp感染阴性组低,且差异有统计学意义,χ2值分别为6.548、26.619和4.950,P值分别为0.010、0.000和0.029。胃癌组织中maspin蛋白的表达与肿瘤分化程度、周围组织浸润及淋巴结是否发生转移显著相关,P值分别为0.017、0.033和0.006。结论:Hp感染在胃黏膜演变过程中起着重要作用,Hp感染可能通过使maspin基因失活从而诱发胃黏膜的癌变,maspin蛋白的表达失活可能是Hp致癌的作用机制之一。     

Hp感染与胃癌组织HIF-1α表达相关性及生物学意义的研究

目的:探讨胃癌组织HIF-1α的表达与幽门螺杆菌(Hp)感染的相关性,以及两者与胃癌临床病理特征之间的关系。方法:采用快速尿素酶试验和组织学改良Giemsa染色法联合检测130例胃癌组织与70例慢性胃炎组织中Hp感染情况,采用免疫组织化学PV9000法,检测130例胃癌组织与70例慢性胃炎组织中HIF-1α蛋白的阳性表达情况。结果:胃癌组明确感染Hp的患者有100例,Hp阳性感染率为72.0%,明显高于胃炎组的46.0%,χ2=9.703,P<0.01;胃癌组HIF-1α蛋白阳性表达率为56.0%,明显高于胃炎组的14.0%,χ2=24.138,P<0.01;Hp(+)组HIF-1α蛋白的阳性表达率为63.9%,明显高于Hp(-)组的35.7%,χ2=6.495,P<0.05;胃癌组织中Hp感染与HIF-1α蛋白表达之间存在正相关,r=0.255,P<0.05;Hp感染与胃癌组织浸润深度及有无淋巴结转移有关,P值均<0.05,而与组织分化程度无关,P>0.05。HIF-1α蛋白的表达水平与胃癌组织浸润深度(P<0.05)及有无淋巴结转移(P<0.01)有关,而与组织分化程度无关,P>0.05。结论:Hp感染与HIF-1α蛋白表达可能在胃癌的发生中起协同作用,并与胃癌的浸润深度及淋巴结转移等密切相关。     

CK20mRNA和hTERTmRNA表达与胃癌患者外周血微转移的研究

原发性肝癌是全球高发病率的恶性肿瘤之一。手术切除是治疗原发性肝癌的首选手段, 然而手术切除后复发率、转移率高, 预后差是严重制约手术治疗远期疗效的重要因素。肝癌的转移是一个多步骤、多因素相互作用的复杂过程。近年来研究发现微转移是引起肿瘤复发和转移的根源, 微转移的检测对肿瘤的准确分期、指导治疗、判断预后有重要意义, 目前常用肝癌微转移灶检测标志物包括端粒酶、甲胎蛋白mRNA、MicroRNAs、上皮型钙黏素、CD44v6 mRNA和细胞角蛋白。本文从肝癌微转移灶的概念背景、标本来源、检测标志物、检测方法及相关临床意义等方面对肝癌微转移的研究进展进行综述, 旨在探讨微转移灶检测在肝癌临床治疗及预后中的重要意义。     

乳腺癌患者外周血CK19表达临床意义的分析

目的:探讨乳腺癌患者外周血CKl9的表达及其临床意义.方法:采用流式细胞术检测50例乳腺癌患者化疗前后外周血CK19的表达;22例乳腺良性病变患者及健康人20名作为正常对照.结果:乳腺癌患者外周血CK19的表达与正常对照组相比较,差异有统计学意义,P<0.05.肿瘤的大小、腋窝淋巴结及TNM分期与外周血CK19的表达有关(P<0.05).结论:应用流式细胞术检测外周血CK19的表达可作为-临床监测、指导辅助治疗和判断预后的参考指标.     

幽门螺杆菌感染与胃癌组织环氧合酶2表皮生长因子受体和血管内皮生长因子的表达

目的 探讨环氧合酶2(COX-2)、表皮生长因子受体(EGFR)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌组织中的表达,三者间的相关性及其与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系.方法 采用免疫组化法检测61例胃癌组织及相应的20例癌旁组织中COX-2、EGFR和VEGF的表达;采用Westernblot方法检测10例胃癌组织及其相应癌旁组织中COX-2、EGFR和VEGF蛋白的表达;用快速尿素酶诊断法和13C呼气试验检测47例胃癌患者Hp感染状况.结果 免疫组化检测结果显示,COX-2、EGFR和VEGF在胃癌组织中的阳性表达率分别为59.02%、36.07%、60.66%,均明显高于癌旁组织(分别为25.00%、0和30.00%;均P＜0.05),三者在胃癌组织中的表达且呈正相关.COX-2和EGFR在Hp感染阳性胃癌组织中的阳性表达率分别为75.76%和45.45%,高于Hp感染阴性者(28.57%和14.29%;均P＜0.05).Western blot检测结果表明,胃癌组织中COX-2、EGFR和VEGF的灰度值分别为51.29±23.42、35.89±12.50和48.55±10.33,均显著高于癌旁组织(均P＜0.05).结论 COX-2、EGFR和VEGF在胃癌组织中高表达,Hp感染可能上调胃癌组织中COX-2、EGFR的表达.     

幽门螺杆菌与胃癌相关性研究

（目的）研究幽门螺杆菌（Ｈｐ）与胃癌发生之间的关系。（方法）用美蓝染色对７４１例胃炎性病变和１３１例胃癌病人之胃粘膜活检组织的Ｈｐ感染情况进行检测。（结果）胃癌组和慢性萎缩性胃炎组（ＣＡＧ）Ｈｐ检出率分别为６２．５９％和６１．６０％,明显高于慢性浅表性胃炎组（ＣＳＧ）的３８．６１％（Ｐ〈０．０１）。胃癌组中,伴有癌周粘膜肠化生者Ｈｐ检出率明显高于不伴肠化生才（Ｐ〈０．０５）,在活动性ＣＳＧ和ＣＡＧ     

幽门螺杆菌与胃癌相关性研究

［目的］研究幽门螺杆菌（Ｈｐ）与胃癌发生之间的关系。［方法］用美蓝染色对７４１例胃炎性病变和１３１例胃癌病人之胃粘膜活检组织的Ｈｐ感染情况进行检测。［结果］胃癌组和慢性萎缩性胃炎组（ＣＡＧ）Ｈｐ检出率分别为６２．５９％和６１．６０％,明显高于慢性浅表性胃炎组（ＣＳＧ）的３８．６１％（Ｐ＜０．０１）;胃癌组中,伴有癌周粘膜肠化生者Ｈｐ检出率明显高于不伴肠化生者（Ｐ＜０．０５）;在活动性ＣＳＧ和ＣＡＧ中,Ｈｐ检出率分别为８９．４１％和９０．５３％,而在非活动性ＣＳＧ和ＣＡＧ中仅分别为１．７１％和１．２３％,两者差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。［结论］提示Ｈｐ感染与胃癌的发生有显著的相关性;Ｈｐ有可能通过引发活动性胃炎、腺体萎缩、上皮肠化生等方式参与胃癌的发生。     

幽门螺杆菌感染对胃癌及癌前病变中PCNA表达的影响

探讨胃粘膜幽门螺杆菌感染与胃癌发生的关系。方法采用免疫组化ＳＰ法检测基本正常胃粘膜（对照组,３０例）、肠化生（３０例）、不典型增生（２２例）及胃癌（２５例）组织中细胞核增殖抗原（ＰＣＮＡ）的表达,采用快速尿素酶反应检测Ｈｐ感染情况。结果ＰＣＮＡ表达与胃粘膜病变程度呈正相关（γ＝０．６５５,Ｐ〈０．０１）;各组间Ｈｐ感染率无显著性差异,在肠化生及不典型生组中ＨＰ感染者的ＰＣＮＡ表达明显高于ＰＨ阴性者     

胃癌中DNA甲基化转移酶3A的表达与幽门螺杆菌感染的关系

目的 探讨胃癌患者胃黏膜上皮组织中DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)表达与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系.方法 选取胃癌(GC)、腺瘤性息肉(GA)、慢性萎缩性胃炎(CAG)、慢性非萎缩性胃炎(CNAG)患者各30例,比较不同患者胃黏膜组织中DNMT3A mRNA的表达水平及Hp的感染情况.结果 4种胃部疾病患者胃黏膜组织中DNMT3A mRNA的相对表达量比较,差异有统计学意义(P﹤0.01).随着病情的发展,DNMT3A mRNA的相对表达量呈逐渐升高趋势.GC患者胃黏膜组织中DNMT3A mRNA的相对表达量高于CAG和CNAG患者,GA患者胃黏膜组织中DNMT3A mRNA的相对表达量高于CNAG患者(P﹤0.05).在同种疾病的胃黏膜组织中,Hp感染胃部疾病患者胃黏膜组织中DNMT3A mRNA的相对表达量高于非Hp感染的胃部疾病患者(P﹤0.05).低分化、伴有淋巴结转移GC患者GC组织中DNMT3A mRNA的相对表达量分别高于高中分化、不伴淋巴结转移的GC患者(P﹤0.05).结论 Hp感染可诱导胃黏膜中DNMT3A高表达,DNMT3A表达的上调可能促进GA、GC的发生发展,Hp感染和DNMT3A可协同作用参与从慢性炎症向GC发展的过程.     

腋淋巴结阴性乳腺癌外周血CK19mRNA表达与临床病理因素相关性的探讨

目的:观察腋淋巴结阴性乳腺癌患者外周血中CK19 mRNA的表达情况,探讨其表达与临床病理指标间的关系及意义.方法:用RT-PCR方法检测113例乳腺癌患者和30例健康志愿者外周血中CK19 mRNA的表达,并分析CK19mRNA的表达情况与乳腺癌患者的年龄、肿瘤大小、月经状态、肿瘤组织学分级、病理类型、临床病理分期(TNM分期)、雌激素受体表达、孕激素受体表达、Ki-67增殖表达和HER-2表达等指标之间的关系.结果:113例乳腺癌患者的外周血中有41例患者的CK19 mRNA阳性表达,阳性率为36.3%;30例健康志愿者的外周血中有1例CK19 mRNA阳性表达,阳性率为3.3%.两者相比差异有统计学意义,P=0.000.乳腺癌患者的外周血中CK19 mRNA的表达与乳腺癌患者的年龄、月经状态、雌激素受体表达和孕激素受体表达等均无相关性,P>0.05;但与肿瘤大小、肿瘤组织学分级、病理类型、临床病理分期、HER-2表达和Ki-67增殖表达等指标均有相关性,P<0.05.结论:腋淋巴结阴性乳腺癌患者外周血中的CK19 mRNA表这是一个判断微转移的敏感指标,肿瘤的大小、组织学分级、TNM分期、病理类型、HER-2表达及Ki-67增殖表达可评估该类患者外周血微转移的风险.     

病理无转移胃癌淋巴结CK18与胃癌组织Tiam1 mRNA表达水平的关系

转移是影响胃癌患者预后的最主要因素.有研究表明,Tiam1基因的表达与恶性肿瘤的转移密切相关~([1]).我们应用TaqMan探针实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitive PCR,RTFQ-PCR)方法,检测了24例病理诊断为无淋巴结转移的胃癌患者199枚淋巴结的CK18 mRNA拷贝数,同时检测了患者胃癌组织中Tiam1 mRNA表达水平,以探讨RTFQ-PCR测定CK18表达对胃癌淋巴结微转移的诊断意义,明确胃癌淋巴结CK18 mRNA表达与胃癌组织Tiam1mRNA表达水平的关系.     

胃癌患者外周血Survivin水平与幽门螺杆菌感染的关系

目的 探讨胃癌患者外周血中Survivin mRNA水平与幽门螺杆菌（Hp）感染的关系。方法 应用实时荧光定量qPCR技术检测胃炎及化疗前胃癌各50例患者外周血中Survivin mRNA表达,并采用快速尿素酶试验与Giemsa 染色2种方法检测Hp感染情况。结果 胃炎患者外周血中未检测到Survivin mRNA表达;胃癌组患者Survivin表达检测率为84.0％（42/50）,外周血Survivin mRNA表达水平的中位数为0.46。Survivin表达水平与胃癌患者的年龄、性别及淋巴结转移均无关（P＞0.05）,而与TNM分期有关（P＜0.0001）。胃癌患者Hp感染率为80.0％（40/50）,显著高于胃炎患者的58.0％（29/50）,差异有统计学意义（P＜0.05）。Hp阳性的胃癌患者外周血Survivin mRNA表达水平为0.578±0.507,显著高于Hp阴性患者的0.194±0.419,差异有统计学意义（P＜0.05）。经Spearman相关分析,胃癌患者Survivin mRNA表达与Hp感染呈正相关（r=0.464, P＜0.05）。结论 Hp感染及Survivin与胃癌发生可能有关,Survivin可能参与了Hp感染性胃癌的发展。     

胃癌组织幽门螺杆菌感染与EB病毒潜伏膜蛋白表达的相关性

目的:观察胃癌组织中幽门螺杆菌(H.pylori)感染和EB病毒潜伏膜蛋白(EBV-LMP)的同步表达情况,探讨两者在胃癌中的相互关系.方法:80例正常胃黏膜组织和97例胃癌组织,利用HE染色对所取标本进行组织病理学诊断,EBV-LMP测定采用免疫组化SP法,H.pylori感染判定采用HE,H.pylori-DNAPCR和血清ELISA法测定IgG抗体三种方法.结果:正常胃黏膜组织未见EBV-LMP的表达,胃癌黏膜组织EBV-LMP表达阳性率为7.2%(7/97),胃癌组织EBV-LMP表达明显高于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P＜0.05).本组病例中H.pylofi感染的胃癌黏膜组织中EBV-LMP的阳性表达率为13.5%(7/52),无H.pylori感染的胃癌组织EBV-LMP的阳性表达率为0,H.pylori感染的胃癌组织EBV-LMP表达明显高于无H.pylori感染的胃癌组织,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:正常胃黏膜组织无EBV-LMP的表达,胃癌组织中EBV-LMP表达明显高于正常胃黏膜组织,H.pylori感染胃癌组织比无H.pylori感染胃癌组织EBV-LMP呈现高表达,H.pylori感染和EB病毒感染在胃癌的发生和发展过程中可能具有更加深在的相互关系.     

早期宫颈癌患者外周血CK19和CK20mRNA的检测及临床意义

目的:研究早期宫颈癌患者外周血中CK19、CK20mRNA的表达及其临床意义。方法:采用RT-PCR法术前检测250例ⅠA~ⅡA期宫颈癌患者和50例妇科良性肿瘤患者及18名健康自愿者外周血中CK19、CK20mRNA的表达,并分析其与临床病理因素的关系。结果:250例早期宫颈癌患者外周血中CK19、CK20mRNA的阳性表达率分别为36%和24%,而在妇科良性肿瘤中分别为3.0%和0%,18例健康自愿者无一例表达CK19、CK20mRNA阳性(P<0.01);CK19、CK20mRNA的单独阳性表达率除与脉管瘤栓显著相关外(P<0.01),与宫颈癌的预后因素如分期、分化、组织类型、淋巴结转移、肿瘤大小均无关(P>0.05),而CK19、CK20mRNA双阳性表达与淋巴结转移和脉管浸润及近期盆腔外的转移显著相关(P<0.01)。结论:外周血中CK19、CK20mRNA的表达可以作为检测早期宫颈癌微转移的生物学指标,但对预后的意义有待于进一步研究。     

幽门螺杆菌感染与胃癌与癌前病变的环氧合酶—2及p21表达的研究

目的 研究HP感染与胃癌及癌前病变中环氧合酶－2（cox-2)、p21表达的关系，以探讨HP致癌的可能机制。方法 经胃镜和病理诊断明确的病例共120例，包括慢性浅表性胃炎（CSG）、肠上皮化生、不典型增生、胃癌各30例。以ABC免疫组化检测上述标本的cox-2、p21，以改良Giemsa法检测HP。结果 胃癌组肠型胃癌HP阳性率为83．3％（20／24），弥漫型6例中HP阳性1例。胃癌HP阳性率与CSG比较差异有高度显著性（P＜0．01），肠型胃癌HP阳性率与胃癌阳性率比较有显著性差异（P＜0．05）。各组HP阳性的cox-2及p21与其HP阴性者作相应比较均有显著或高度显著性差异（P＜0．05－0．01）。结论 提示胃癌可能与HP感染有关，而HP感染与肠型胃癌的关系更为密切，HP感染可使胃黏膜中cox-2过度表达，导致细胞凋亡受抑制，并通过使癌基因激活从而可能引起胃癌的发生。     

CK7、CK14、CK19和CK20在胃肠癌转移诊断中价值的新发掘

目的：重新评估CK7、CK14、CK19和CK20在胃肠癌淋巴结微转移中的诊断价值和意义。方法：采用组织芯片和免疫组化方法检测CK7、CK14、CK19和CK20在正常黏膜(n=112)、原发癌(n=112)、淋巴结转移癌(n=106)和肝脏转移癌(n=37)中的表达,比较它们在转移灶与原发灶间表达差异以及与临床病理参数之间的关系。结果：CK19在各种组织中的表达均为100%,原发癌和转移癌间呈一致性表达；而CK20和CK7的表达随肿瘤的发生和进展逐步下降,淋巴结转移灶中的表达水平显著低于原发癌中的表达水平(P＜0．05),CK20和CK7的下降表达与肿瘤的浸润深度有关(P＜0．05)；CK7的下降表达与肿瘤的远处转移有关(P＜0．01),胃癌中CK7的表达率高于肠癌中的表达(P=0．003),CK20正好相反(P＜0．001)。CK14在各种组织中的表达率较低,在胃肠癌的诊断中的价值不大。结论：CK19是检测胃肠癌转移的一个理想指标,而CK20和CK7在检测微转移中价值有待评估,其表达下调可能在胃肠癌发展至转移中起重要作用。