615系小鼠可移植性乳腺癌株(Ca763)的实验研究

本文报道我室建立的另一个615系小鼠乳腺癌株Ca763,它来自一只经产雌鼠的自发A型乳腺癌。在同系成年615系小鼠中保种传代,现已传至224代,其移植成功率均为100%,无自然缓解。平均存活期为17±2.1天。Ca763生长迅速,其移植成功率、瘤重、瘤系数与615小鼠的鼠龄、性别无关。Ca763在建株和不断传代过程中其病理组织学较早地发生明显的改变,移植瘤已不复具有A型乳腺癌的典型特征,分化降低,但很少转移。 Ca763对临床常用各类抗癌药10种中,对其中6种有不同程度敏感性并有其特点。     

615系小鼠可移植性乳腺癌株(Ca761)的实验研究

Ca761是将615系小鼠的一自发A型乳腺癌,经同系移植而建立的一个新的小鼠乳腺癌模型。经11年190多代的移植,生长特性已基本稳定:它是615系小鼠的一个同基因型瘤株,在615系小鼠中移植成功率为100%,无自然消退,宿主平均存活时间为17.6±4.6天;基本不受615系小鼠性别和年龄的影响,无论是用埋块法或悬液法接种,或经液氮冷冻,复苏,其生长特性均保持稳定。 Ca761有明显的转移倾向;并已建成其腹水型及体外细胞系;它对所试12种常用抗癌药中的7种表现出不同程度的敏感性,这与乳癌的临床化疗情况有一定的相似性,故Ca761对肿瘤和乳腺癌的防治研究可能具有较大的实用价值。     

615系小鼠可移植性乳腺癌Ca763和Ca761的超微结构

本文报告615系小鼠可移植性乳腺癌Ca763和Ca761的透射电镜观察。发现两瘤株细胞均呈片状或散在分布,未形成原始腺腔样结构。细胞大小不一,多形性,由发育不良的紧密连接相连,间质极少,几无淋巴细胞浸润。Ca761、Ca763原代癌属A型腺泡癌,多代移植使瘤组织类型发生了变异,腺泡型去分化为实性型,瘤组织中也未见B型病毒样颗粒,而A型颗粒则存在于Ca761、Ca763各代粗面内质网内。Ca761胞质内可见大量成团排列的胞质细丝,但未见致密小体及胞质微饮小泡。Ca763少部分瘤细胞内亦可见与质膜平行排列的胞质细丝,有时可见半桥粒和不连续的基板,少数细胞可见直接从中心粒长出的纤毛突向细胞间隙。     

Ca759乳腺癌带瘤小鼠脾脏的抑制细胞

本文报道615系小鼠于接种Ca759乳腺癌后,其脾脏细胞能非特异性地抑制正常615系小鼠脾脏淋巴细胞对ConA刺激的增生反应。采用玻皿粘附及尼龙毛柱等细胞分离技术分析抑制细胞的属性,发现用抗Thy—1血清加补体处理带瘤小鼠的脾脏胞,不能去除其对ConA反应系统的抑制作用,而带瘤及正常小鼠脾脏巨噬细胞均具有一定的抑制活性,但前者较后者的抑制活性更强(抑制率分别为100%和71%)。将去除了巨噬细胞的带瘤小鼠脾细胞进一步经尼龙毛分离,发现尼龙毛粘附细胞及非粘附细胞均产生一定的抑制作用。实验结果提示,Ca759带瘤小鼠脾脏存在着不同组分的抑制细胞系统,包括抑制性细胞及抑制性巨噬细胞,它们均可能对带瘤宿主发挥免疫抑制作用。     

615系小鼠自发性乳腺癌Ca841、Ca842原代瘤的超微结构

615系小鼠原代乳腺癌Ca841、Ca842的组织学所见主要为大小不一的腺泡样结构。腺泡由排列紧密、大小较为一致的瘤细胞和肌上皮细胞组成,间质极少,符合小鼠A型乳腺癌诊断。癌细胞分明、暗两种,外形不规则,表面多微绒毛,核质比高,核大多呈卵圆形,偶见畸形。核仁增大、增多,可见边集。细胞器简单,除大量多聚核蛋白体外,有少量粗面内质网。胞质内可见70nm左右的A型病毒样颗粒,腺泡腔面微绒毛上可见正在出芽的B型病毒样颗粒,腺腔中有大量100nm大小的成熟B型病毒样颗粒。     

三株小鼠乳腺癌(Ca759, Ca761, Ca763)的肿瘤演进

观察了三株615系小鼠可移植性乳癌(Ca759、Ca761、Ca763)在建株和保种过程中肿瘤组织形态学与生物学行为方面的变化。分析比较肿瘤的演进过程,其共同特点为:瘤组织结构趋向简化,核分裂数增多,接种后肿瘤生长的潜伏期和宿主生存期缩短。但是这些变化发生的迟早、进展快慢及形态学表现等,在三个瘤株之间也有某些差异。Ca759自第1代至140代,Ca761自第1至79代,传代过程组织结构简化均呈渐进性。Ca763移植至第5代后肿瘤潜伏期与宿主存活期急剧缩短,组织学图象与原发瘤及第4代有显著差别。Ca761自80代以后宿主存活期突然缩短,瘤细胞核分裂数增多。三个瘤株演进的这些差异似乎表明在引起演进的机制上存在着差别,这是值得进一步探讨的问题。     

615系小鼠可移植性乳腺癌—Ca759的超微结构

本文报告615小鼠可移植性乳腺—Ca759的电镜观察。肿瘤由大小不一,多形性的癌细胞密集排列而成,间质极少,符合小鼠B型乳腺癌中髓样癌诊断。癌细胞分明,暗两种,多呈合体生长,部分细胞有紧密连接,并可见原始腺腔样结构。核质比大;核不规则,可见假包涵体;核仁大,多边集;有丝分裂多见。胞质中大量游离核蛋白体,高尔基复合体不明显,中等量中粗面内质网,多呈囊状扩张,内可见许多圆形致密颗粒,内微囊少见。癌巢中央多有退变现象,有淋巴细胞浸润,并有癌溶现象。细胞内、外未寻见典型病毒颗粒。     

615系小鼠自发乳腺癌的发病率及病理形态学观察

100对615系种鼠,常规饲养繁殖,观察33个月(终生),其乳腺癌发病率为5.5%(11例全部发生于经产雌鼠),低于肺腺癌(11%,22例,雌雄各半)而居第二位,故615系小鼠仍属低乳癌品系。对615系小鼠的46例自发乳腺癌进行了病理形态学检查分析:瘤细胞可分为小、中、大三类。组织分型属A型者18例,多由小细胞及少量中细胞构成;属B型者28例,除小细胞外往往可见较多的中细胞甚或主要由大细胞与中细胞构成。B型乳腺癌的分化程度似较A型者为低。转移主要发生于肺部。7例经镜检证实属乳腺癌的肺转移瘤,其原代瘤属A型者1例,属B型者6例。肺转移瘤的组织像与原发瘤基本相同者4例;而细胞变大,呈实心排列,显示分化程度低于原发瘤者3例。     

615系小鼠可移植性肝癌中H-ras基因的表达

作者用盐酸胍法从615系小鼠原发性可移植性肝癌(H651、H22)实体瘤组织及正常615系小鼠肝组织(N615)中制备总RNA,经Oligo(dT)纤维素亲和层析法纯化得到 poly(A)~+RNA,再经兔网织红血球溶胞物体系测活及电泳鉴定后,作Northern 印迹和经α-~(32)P-标记的H-ras、Ki-ras及C-myc癌基因分子探针杂交,发现:仅H615中有H-ras基因的明显表达信号,N615中仅有弱表达。     

615系小鼠可移植性肝癌(H615)带瘤动物细胞免疫功能变化的动态观察

实验采用外周血淋巴细胞ANAE活性和脾细胞E玫瑰花结反应作为指标,对H615带瘤小鼠的细胞免疫功能进行了动态观察。结果表明,带瘤动物外周血淋巴细胞的ANAE阳性率和T/B比值,以及脾细胞的E—RFC阳性率在H615生长的潜伏期均无明显变化,进入缓慢生长期后则均明显升高,处于H615的快速生长期时均显著降低,且外周血淋巴细胞ANAE阳性率和脾细胞E—RFC阳性率的变化时相,规律比较一致。     

三株小鼠乳腺癌(Ca759,Ca761,Ca763)带瘤小鼠的免疫形态学研究

通过对三株(Ca759,Ca761,Ca763)可移植性乳腺癌带瘤小鼠的双侧腋下与腹股沟区淋巴结、脾脏、胸腺及肿瘤周围间质的组织学动态变化进行比较观察,认为此三组带瘤小鼠免疫形态学的共同变化是;1.淋巴结副皮质区缩小(开始时间各有早晚);2.淋巴结髓质增宽,表现为髓索浆细胞增多,窦组织细胞增生及窦扩张;3.脾红髓增生致脾进行性增大;4.晚期胸腺萎缩。而在三株带瘤宿主中由形态学改变所反映的免疫功能损害各有差别。早期副皮质增生见于Ca759组,不见于Ca761与Ca763组;副皮质区缩小,髓质增宽在Ca761组出现最早,进展最剧,晚期脾白髓萎缩见于Ca761与Ca763组,而不见于Ca759组;胸腺萎缩在Ca761组出现最早,程度显著,而在Ca759组则直到濒死前才发生。本文并分析了淋巴结等免疫器官形态学改变与外周血和肿瘤局部浸润淋巴细胞增减的相关程度及肿瘤本身性质对宿主免疫状态的影响。     

615小鼠可移植性乳癌Ca761不同途径转移能力初步探讨

本文将第215代Ca761脚掌移植的同一小鼠所产生的腘窝或腹股沟淋巴结与肺转移瘤分别移植于两组健康小鼠脚掌,同时取第215代Ca761腋部皮下移植的肺转移瘤移植于第三组健康小鼠,如此循环5代以上,获得Ca761-FL、Ca761-FP、Ca76l-AP三个亚株。对照实验表明:淋巴结转移率,Ca761-FL高于Ca761-FP。肺转移率,Ca761-FP高于Ca761-FL。结果显示Ca761肿瘤细胞向淋巴道与血道转移途径的选择与瘤细胞本身生物学性质有关。此外,Ca761-AP_7脚掌移植组淋巴结转移高于Ca761-AP_7腋下移植组,提示移植部位对转移途径的选择有影响。本实验早期及晚期带瘤小鼠的肺和淋巴结转移灶可同时或单独出现,提示瘤细胞可自移植部位分别进入淋巴道或血道。转移早期,肺转移为肺泡间隔型和胸膜下型的微小病灶;晚期,肺泡间隔型和胸膜下型的病灶增大,并出现支气管肺动脉支周围转移灶。提示经血道到肺的转移瘤也可穿出肺泡壁毛细血管进入淋巴循环。     

615小鼠可移植性肝癌(H615)的酶组织化学研究

对615小鼠可移植性肝癌(H615)组织,用26种酶组织化学方法研究其代谢特点,与正常肝组织相对比,发现该肝癌细胞中糖原消失,酶的变化附合癌组织内糖原合成减弱、葡萄糖分解亢进、但以酵解为主.三羧酸循环及氧化磷酸化过程减弱.糖的异生亦减弱,但通过戊糖支路合成核酸增加.同时伴有氨基酸的跨膜内运增多,细胞内溶酶体酶功能亢进,以及肝癌标志酶的出现     

瘤苗免疫对615小鼠可移植性肝癌生长的影响

615小鼠经H615瘤块移植致敏后并不能抵御相同肿瘤的接种攻击,亦无存活时间延长的现象。用H615组织匀浆免疫的小鼠接种肿瘤后,肿瘤生长加速;60天处死时平均肿瘤重量较对照组明显增加(P<0.05),发癌率也由对照组的80%增至100%(P>0.05)。但同时接受上述处理的小鼠却没有明显的肿瘤促进作用,文内对此进行了讨论。 实验结果显示主动免疫不能抑制肿瘤的生长,反而有促进肿瘤生长的可能。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳分析615纯系小鼠血清蛋白

目的：根据各种蛋白质在一定的泳动条件下,都有一定的相对迁移率不同的特点,分析６１５ 纯系小鼠血清中的蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶上的分布,进行了定位分析。方法：采用高ｐＨ 不连续性聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质特殊染色法。结果：６１５ 鼠血清蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶上可分离出１３ ～１５ 条区带,脂蛋白３ 条、白蛋白２ 条、糖蛋白５ 条、铜蓝蛋白１ 条、血红蛋白１ 条、结合珠蛋白３ 条。根据每种蛋白质的Ｒｍ 值定位顺序从阳极到阴极依次为１ ．糖蛋白、２．脂蛋白、３ ．白蛋白、４．脂蛋白、５ ．糖蛋白、６ ．巨球蛋白（ 根据其它资料） 、７ ．铜蓝蛋白、８ ．结合珠蛋白、９ ．Ｈｂ、１０ ．运铁蛋白（ 根据其它资料）、１１ ．脂蛋白、１２ ～１４ ．均为糖蛋白。光密度扫描６１５ 鼠血清蛋白质相对面积比分别为白蛋白为４８－４、α１ 球蛋白为６－９、α２ 球蛋白２３－８ 、β球蛋白为５－０ 、γ球蛋白为１３－８ 。结论：６１５ 鼠血清蛋白质的定位分析对于６１５ 鼠可移植性淋巴细胞型白血病鼠的蛋白质研究具有一定的实际意义,利用Ｒｍ 值来作蛋白质定位分析简单易行,关键在于掌握实验条件的恒定。     

人胰腺癌裸鼠移植瘤系JF305的建立及生物学特性的研究

采用手术切除人胰腺癌标本进行裸鼠皮下移植,建立了人胰晾癌裸鼠移植瘤系JF305,该瘤系具有移植成功率高、生长速度快的特点。其组织学和生物学研完基本保持了较好的稳定性。染色体分析以超二倍体为主,核型显示为人类染色体核型。因此,JF305是胰腺癌定位诊断和导向治疗研究的较好实验模型系统。