过氧化物酶体增殖因子活化受体gamma激动剂抑制腭中缝扩张后骨重建

目的探讨过氧化物酶体增殖因子活化受体gamma（PPAR-γ）激动剂对腭中缝扩张（MSE）后骨重建的影响。方法应用雄性野生型C57BL/6小鼠共60只,分为假手术＋正常饮食组;MSE＋正常饮食组;MSE＋匹格列酮饮食组。术后14d或28d处死,采用HE染色,实时荧光定量PCR方法研究匹格列酮对腭中缝扩张后骨重建的影响。结果 PPAR-γ激动剂匹格列酮减少腭中缝扩张手术后小鼠腭中缝成骨,并显著下调成骨细胞调控分子（Runx2和Dxl5）以及成骨细胞标志分子（COLIα1）的基因表达。结论在快速上颌扩大术后的腭中缝牵张成骨过程中,PPAR-γ激动剂匹格列酮抑制新骨形成;其机制可能是通过抑制成骨细胞的分化。     

过氧化物酶增殖活化受体γ对老龄鼠牙槽骨的影响

目的 观察过氧化物酶增殖活化受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)激动剂--吡格列酮对老龄鼠下颌牙槽骨骨代谢的影响.方法 取18月龄健康雄性C57BL/6小鼠20只,随机分为两组,实验组每日予以吡格列酮20 mg/kg灌胃,对照组每日予以等量生理盐水灌胃.8周后处死老龄鼠,取双侧下颌骨,行下颌骨X线检查及牙槽骨骨密度测定,牙槽骨组织形态学观察,采用骨形态计量学方法计算牙槽骨的静态骨参数.结果 实验组牙槽骨X线片的阻射程度、骨密度、骨小梁面积百分率、骨小梁的平均宽度及总胶原的含量均明显低于对照组.结论 外源性配体激活PPARγ能导致老龄鼠牙槽骨成骨及破骨代谢的失衡,促进老龄鼠牙槽骨骨质疏松的发生、发展.     

过氧化物酶增殖活化受体γ对老龄鼠髁状突的影响

目的 通过给予过氧化物酶增殖活化受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)激动剂-吡格列酮,观察PPARγ对老龄鼠髁状突软骨及软骨下骨的影响.方法 18月龄健康雄性C57BL/6小鼠20只,随机分为两组,实验组每日予以吡格列酮灌胃20 mg/kg,对照组每日予以生理盐水灌胃.8周后处死动物取双侧下颌骨,行下颌骨X线检查及髁状突骨密度测定,同时行髁状突部位组织学观察,并采用骨形态计量学方法计算髁状突软骨下骨的静态骨参数.结果 实验组髁状突的X线片灰度值、骨密度、骨小梁面积百分率、骨小梁的平均宽度、胶原纤维及弹性纤维的含量均明显低于对照组.结论 PPARγ能抑制老龄鼠髁状突的成骨代谢及软骨的增殖和分化,促进其髁状突骨质疏松的发生、发展.     

锂盐对大鼠腭中缝扩张成骨的影响

目的：观察锂盐对腭中缝扩张后新骨形成的影响。方法：使用扩大簧对Wistar大鼠作快速扩弓,腭中缝扩大3d后每日给予LiCl灌胃,对照组使用NaCl。通过甲苯胺蓝染色定量分析新骨的形成,免疫组化染色检测β-catenin的表达。结果：腭中缝扩大后第3天开始有新骨形成,应用LiCl后新骨边缘成骨细胞表达β-catenin增加。半定量分析显示实验组7d新骨形成量显著增加,是对照组的1.36倍（P〈0.05）。结论：锂盐能够通过激活β-catenin信号,促进大鼠腭中缝扩大后的新骨形成。     

乳铁蛋白对大鼠上颌扩弓及复发过程中腭中缝骨吸收的影响及机制探究

目的 研究乳铁蛋白(lactoferrin,LF)对大鼠上颌扩弓及复发过程中腭中缝破骨活动的影响,并初探其作用机制.方法 对大鼠扩弓及复发模型给予剂量为1g/kg/d的LF灌胃,用免疫组织化学染色的方法观察LF对腭中缝破骨活动的影响,检测OPG/RANKL/RANK作用轴关键因子的表达变化.结果 与单纯扩弓组相比,LF...     

PPARγ激动剂对T细胞增殖及破骨细胞形成的影响

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor-γ,PPARγ)激动剂15d-PGJ2对小鼠T细胞增殖、T细胞分泌的细胞因子表达及破骨样细胞形成的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外分离伴放线放线杆菌(A.actinomycetetemcomitans,Aa)免疫的BALB/c小鼠颈部淋巴细胞,提取T细胞进行体外扩增,分别加入浓度为0、1×10-8、1×10-7,1×10-6,1×10-5mol/L的15d-PGJ2进行干预。培养3d后,3H-Tdr掺入法测定T细胞的增殖反应;ELISA法测定细胞上清中核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)、TNF-α和IL-10的表达水平;取扩增的T细胞上清与RAW 264.7细胞共同培养后,抗酒石酸酸性磷酸酶染色(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)测定破骨样细胞的形成。采用SPSS 11.0软件包对数据进行统计学分析。结果:以1×10-5mol/L 15d-PGJ2处理的小鼠T细胞3d后,与对照组相比,T细胞增殖显著受抑;上清中RANKL、TNF-α的表达水平下降,IL-10无显著变化;TRAP染色阳性细胞数减少,具有统计学意义(P<0.05),且呈浓度依赖性。结论:PPARγ激动剂15d-PGJ2可抑制T细胞增殖,减少炎性因子分泌,降低破骨样细胞的形成,提示PPARγ配体在抑制T细胞诱导的骨吸收方面发挥积极作用。     

小鼠增强型绿色荧光蛋白-过氧化物酶体增长因子活化受体γ2融合表达重组腺病毒的构建及表达

目的构建小鼠增强型绿色荧光蛋白（EGFP）-过氧化物酶体增长因子活化受体（PPAR）γ2基因的腺病毒重组体,并检测其在感染病毒的小鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）中的表达。方法从pcDNA flag PPARγ质粒上切取目的片段PPARγ2,克隆入pEGFP-C1和pEGFP-N1,以pEGFP-C1-PPARγ2为模板通过PCR技术获得EGFP-PPARγ2基因,酶切DC315质粒,获得DC315-EGFP-PPARγ2质粒,在脂质体介导下与腺病毒辅助大质粒pBHGlox△E1、3Cre共转染HEK293细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒Ad-EGFP-PPARγ2,酶切鉴定证实构建成功。转染HEK293细胞并检测其体外表达情况,经HEK293细胞扩增后,测定病毒滴度,转染小鼠BMSC,72 h后鉴定其成脂分化情况。结果将pEGFP-C1-PPARγ2和pEGFP-N1-PPARγ2通过脂质体转染入HEK293细胞后,在倒置相差显微镜下观察,前者在细胞核内有较强的绿色荧光,后者的荧光强度则极低。对重组腺病毒进行酶切和PCR鉴定,证实含小鼠EGFP-PPARγ2的Ad5腺病毒载体构建成功。在倒置相差显微镜下观察到BMSC细胞核内有绿色荧光。结论成功构建含小鼠EGFP-PPARγ2的重组Ad5腺病毒载体,为基因辅助的脂肪组织工程技术、抗肿瘤研究等提供了安全有效的转基因载体。     

1,25-二羟维生素D3对骨髓破骨细胞形成和破骨细胞分化因子mRNA表达的影响

目的：观察不同浓度的1，25-(0H)2D3对骨髓单个核细胞诱导形成破骨细胞和对单个核细胞ODF mRNA表达的影响。进一步阐明骨吸收刺激因子在破骨细胞性骨吸收中的作用机制。方法：应用不同浓度的1，25-(0H)2D3(0、10^-10、10^-8、10^-6moL／L)诱导大鼠破骨细胞的形成，观察形成破骨细胞的数目，并采用原位杂交技术检测骨髓细胞ODF mRNA的表达。结果：随着l，25-(0H)：D，浓度的增加，多核细胞计数增多；ODF mRNA表达的阳性信号显著增强。结论：1，25-(0H)2D3通过调节骨髓细胞ODF mRNA的表达，影响破骨细胞的形成和功能，进而调节局部骨微环境内骨吸收与骨形成平衡的变化，影响骨组织改建。     

Neurokinin-1受体介导P物质对破骨细胞骨吸收功能的影响

目的 　了解P物质对体外培养大鼠破骨细胞骨吸收功能的影响和作用机制,探讨P物质在正畸牙槽骨改建中的调控机制。方法　 通过机械分离新生大鼠四肢长骨方法体外培养破骨细胞,细胞免疫组织化学染色观察NK1受体在大鼠破骨细胞内的表达情况;加入含不同浓度P物质（10-7-10-4 mol/L）和10-5 mol/L P物质受体拮抗剂（NK1受体拮抗剂）的培养液,观察P物质和NK1受体拮抗剂对破骨细胞骨吸收功能的影响。结果 免疫组化染色发现,大
鼠破骨细胞内NK1受体呈强阳性表达,着色位于细胞浆,胞核呈阴性;P物质明显增加破骨细胞的骨吸收陷窝面积（P<0.05）,但未见骨吸收陷窝数目明显增加（P>0.05）。NK1受体拮抗剂抑制了P物质对破骨细胞骨吸收功能的刺激
效应。结论 NK1受体可能介导P物质增强破骨细胞骨吸收功能,从而在正畸牙槽骨改建中发挥局部调节作用。     

PPAR-γ对组织工程化骨构建的影响

<正> 组织工程化骨构建是一个相当复杂的过程,其综合了出现损伤部位的一系列细胞、生长因子的相互作用,是利用多能间充质干细胞(MSCs)作为种子细胞,在成骨诱导剂和成骨诱导环境的作用下定向分化为成骨细胞,进而分泌矿化骨基质,并最终演变为骨细胞,实现缺损区骨修复的目标。近来的研究发现,在骨髓的间叶细胞中发现无活性的过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(perxisome proliferator-activatedreceptor-γ,PPAR-γ),当其被激活后可诱导间叶细胞     

用计算机图形分析法评价上颌扩大患者腭中缝的改变

本实验采用计算机图形分析法，对8名经螺旋扩大器扩弓，磁力扩弓治疗的患者咬X线片进行分析，测量其腭中缝面积在治疗前后的改变，结果显示螺旋扩弓患者治疗后腭中缝面积增大0.10421～0.44839cm2．磁力扩弓患者腭中缝面积增大0．09074～0．23594cm2，对腭中缝的改变做到了准确的定性、定量分析，证明是一种评价患者腮中缝改变的良好方法。     

上颌快速扩弓腭中缝血管内皮生长因子的时空表达与新骨形成的相关性研究

目的 探讨上颌快速扩弓扩张期和固定期兔腭中缝组织血管内皮生长因子（VEGF）的时空表达模式以及新骨形成情况。方法 将44只新西兰大白兔随机分为11组：实验组（共5组）、对照组（共5组）、对照0组,每组4只。用螺旋分裂基托扩大矫治器（Haas矫正器）扩张兔上牙弓,快速扩张2周,固定4周。在安装扩张器当天（对照0组）、快速扩张第1、2周、固定第1、2、4周（实验组和对照组）取兔上颌骨腭中缝组织块,采用免疫组织化学法检测VEGF在腭中缝组织中的分布和表达变化,采用过碘酸-Schiff染色法观测新骨形成。结果 快速扩张的腭中缝可见高水平的VEGF表达,VEGF阳性信号主要定位于血管内皮细胞胞浆和增殖活跃的成骨细胞胞浆。对照组VEGF在整个实验过程中均呈弱阳性表达。实验组快速扩张第1周、快速扩张第2周、固定第1周、固定第2周VEGF蛋白表达量均高于对照组。随着机械应力快速扩张,实验组VEGF蛋白表达量逐渐上升,固定1周达峰值后逐渐下降。实验组新骨形成的量均高于对照组,新骨形成的量逐渐上升,固定2周达峰值后逐渐下降。结论 上颌快速扩弓产生的机械牵张力可以导致VEGF生成增加从而促进血管及新骨的生成。     

扩张早期大鼠腭中缝细胞凋亡现象的观察

目的观察大鼠腭中缝在扩张力作用早期的细胞凋亡现象,探讨细胞凋亡在腭中缝骨改建启动过程中的意义。方法选用4周龄健康雄性Wistar大鼠25只,随机分成对照0、12、d组和实验加力1、2 d组,每组各5只。用两眼簧扩弓器施加扩张力(约50 g/0.49 N)于实验加力组大鼠的腭中缝。于加力后1 d、2 d通过苏木素-伊红染色观察腭中缝组织形态学的改变,TUNEL法观察腭中缝组织中凋亡细胞的变化。结果加力1 d后腭中缝组织明显扩宽,腭中缝边缘的骨细胞凋亡数比对照组明显增多,加力2 d后腭中缝边缘细胞大量增殖,凋亡骨细胞数有所减少,但仍多于对照组。结论细胞凋亡在扩张腭中缝组织改建的启动过程中有着重要的生物学意义。     

正畸微种植体植入早期骨改建中破骨细胞的观察

目的：观察微种植体植入早期破骨细胞的产生,探讨破骨细胞变化与骨改建的关系。方法：雄性新西兰兔20只随机分为4组,在胫骨近心端近骺板处植入微种植体1颗,分别于植入3、7、14、28 d后处死(每组5只)。HE染色观察微种植体周围骨组织的形态学变化,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色标记破骨细胞并作半定量分析。采用SPSS19.0软件包对数据进行统计学分析。结果：微种植体植入3 d后,种植体骨接触区可见大量红细胞、炎症细胞、间叶细胞和骨碎屑,无明显破骨细胞。7 d后,编织骨新生,呈颗粒状,破骨细胞位于骨陷窝中。14 d时,大量新生的编织骨呈网格状,破骨细胞增多,骨改建明显。28 d时,编织骨成片状,与层状骨相连,破骨细胞数目减少。TRAP染色半定量分析显示,破骨细胞数目在14 d时达到高峰,各时间点间均有显著差异(P<0.01)。结论：在正畸微种植体植入早期破骨细胞产生,在新骨生成的活跃阶段破骨细胞数目增多,提示破骨细胞参与微种植体周的骨改建过程。     

槲皮素在大鼠上颌快速扩弓时对腭中缝骨改建的影响

目的：研究槲皮素对大鼠上颌快速扩弓时腭中缝骨质改建的作用。方法：18只6周龄SPF级雄性Wistar大鼠,随机分为3组,A组为空白对照组,B组为扩弓组,C组为扩弓并灌服槲皮素组,每组均6只。其中,A组不扩弓,也不灌服槲皮素;B﹑C组用双眼圈簧扩弓器扩弓,力值0.98 N,C组扩弓后每天灌服槲皮素（100 mg/kg）,A、B组根据体重灌服同剂量的生理盐水。14 d后处死大鼠,标本进行石蜡切片,行常规苏木精-伊红染色、Masson三色染色、免疫组织化学染色。利用Image-pro plus软件对切片吸光度进行分析,采用SPSS 19.0 软件包对数据进行统计学分析。结果：实验第14天,H-E染色和Masson染色显示,A组腭中缝见少量纤维组织,可见软骨细胞、间充质样细胞及成骨细胞等;B﹑C组腭中缝处纤维组织较多,成纤维细胞﹑软骨细胞增多,腭中缝近骨区域处多见成骨细胞;C组成骨细胞数量明显多于B组,有新骨钙化沉积。免疫组织化学染色显示,B组大鼠腭中缝组织中的BMP-2表达量在第14天时显著高于A组（P<0.01）,C 组大鼠腭中缝组织中BMP-2 的表达量显著高于B组（P<0.05）。结论：上颌快速扩弓可扩大生长发育期大鼠的腭中缝;槲皮素能够促进大鼠上颌快速扩弓时腭中缝BMP-2的表达,使骨质沉积钙化,加速新骨形成。     

Systemic propolis stimulates new bone formation at the expanded suture: A histomorphometric study

Objective:To investigate the effects of systemically given propolis on the expanded premaxillary suture in a rat study model.Materials and Methods:The 24 rats were randomly divided into three groups—only expansion (OE), expansion plus propolis (PRO), and nonexpansion (control) groups. After the 5-day expansion period was completed, the OE and PRO groups underwent 12 days of mechanical retention. At the end of this period, the animals were euthanatized and their pre-maxillae were dissected and fixed. Histomorphometric examination was performed to determine the number of osteoclasts, osteoblasts, and capillaries as well as the intensity of inflammatory cells and amount of new bone formation.Results:Statistical analysis showed that the intensities of inflammatory cells, number of osteoblasts, and amount of new bone formation were greater in the PRO group than in the other groups. The PRO group also had more osteoclasts and new capillaries.Conclusion:Systemic use of propolis may hasten new bone formation at the expanded suture in rats.     

骨缝牵张成骨的比较组织学研究

目的:比较HE染色和三联染色中不截骨的缝牵张成骨组织学变化情况.方法:不截骨直接三维牵张羊颧骨缝,固定期1、3、5、8周取材,进行三联染色和HE染色,与对侧空白对照标本比较,观察缝区组织变化、新骨质形成情况.结果:骨缝被牵开后1周,成纤维细胞、成骨细胞、毛细血管增生,大量胶原纤维形成、排列有序,3周时以胶原纤维为主,形成较成熟的骨小梁,5周时编织骨形成,8周时未见网状纤维和弹力纤维,结构成熟完整.结论:三联染色显示固定早期大量胶原纤维形成,HE染色显示新骨形成速度快.     

Effect of salvianolic acid B on new bone formation in the orthopedically expanded suture:: A histological and immunohistochemical study

ObjectivesTo determine the effects of Salvianolic acid B (Sal B) on new bone formation in the orthopedically expanded premaxillary sutures in rats.Materials and MethodsThe sample consisting of Sprague Dawley rats (male, n = 14) was split in half by random selection: the experiment group (Sal B) and the control group. The premaxillary suture of each rat was expanded by bonding an open-loop spring to two maxillary incisors, each end to one tooth. A 5-day expansion period followed by a 12-day retention period was conducted. The 17-day intraperitoneal administration of Sal B was performed daily for the experiment group at a dose of 40 mg/kilo. The trial was completed after sacrificing the rats and dissection of the premaxillae for histological analysis. The amount of new bone, quantity of capillaries and intensity of inflammatory cells were histomorphometrically determined while the quantities of osteoblasts and osteoclasts were determined immunohistochemically.ResultsThe Sal B group was significantly different from the control group and had greater quantities of new bone, capillaries, inflammatory cells, osteoblasts, and osteoclasts.ConclusionsSalvianolic acid B displays a positive effect during premaxillary expansion with a greater number of capillaries potentially in association with higher bone formation and improved angiogenesis in rats.