非病毒转基因载体的研究进展

高效的转基因载体是基因释放系统的核心。非病毒转基因载体具有低免疫原性和易制备等特性。本就近年来非病毒转基因载体的发展作一综述。     

非病毒转基因载体的研究进展

高效的转基因载体是基因释放系统的核心。非病毒转基因载体具有低免疫原性和易制备等特性。本文就近年来非病毒转基因载体的发展作一综述     

非病毒型纳米载体在基因治疗中的研究现状及展望

近10年来，新型非病毒载体在基因治疗中日益受到欢迎。其主要代表为纳米载体，具有无毒性及免疫原性的优势，已作为高效阳离子载体用于基因转移。体外基因转移实验表明，纳米载体的基因转移率高于普通脂质体及其它阳离子多聚体，如多聚氮丙及聚赖氨酸。本对纳米载体的结构特点，性能，基因转移机制进行综述，并将其在体内外基因转移效率与其它非病毒载体作以比较。     

非病毒型载体介导基因转染

基因载体是制约基因转移技术发展的关键。近年来,非病毒载体由于其安全、低毒、低免疫原性等特点而备受青睐。文章以脂质体和聚乙烯亚胺为代表,介绍了非病毒载体的性质、介导转染的机制。随着人们对细胞转染机制了解的深入以及生物材料科学的迅速发展,非病毒型载体将有望实现高效、低毒、靶向特异等特点,从而成为基因治疗中的理想载体。     

非病毒载体聚乙烯亚胺转基因因素的优化

聚乙烯亚胺属于阳离子多聚物,可浓缩DNA作为转基因非病毒载体。但其转染影响变量较多,如果不能充分控制将不能得到重复的、良好的结果。这里测定了聚乙烯亚胺转基因效率的影响因素,为合成更复杂的人工转基因载体创造条件。我们通过聚乙烯亚胺转染编码β-半乳糖苷酶的pSVβ质粒到CO S-7和N IH 3T 3细胞中,测定质粒因素、血清、细胞密度、操作方式以及转染复合物的保存因素对聚乙烯亚胺转基因效率的影响。结果表明:质粒中生物活性抑制剂明显降低转染效率,通过截流分子量3000或10000的超滤可以除去生活性抑制剂;断裂的质粒降低转染效率;培养液中的血清、白蛋白降低转染效率;细胞密度影响转染效率;PE I/DNA复合物与细胞作用8h后吸去,转染效果最优。冻存显著降低PE I/DNA转染复合物转染效率。聚乙烯亚胺可以作为合成新型非病毒载体的骨架,但必须控制有关因素才能发挥最佳的和可重复性的转染结果。     

非病毒型纳米载体在基因治疗中的研究现状及展望

近 10年来 ,新型非病毒载体在基因治疗中日益受到欢迎。其主要代表为纳米载体 ,具有无毒性及免疫原性的优势 ,已作为高效阳离子载体用于基因转移。体外基因转移实验表明 ,纳米载体的基因转移率高于普通脂质体及其它阳离子多聚体 ,如多聚氮丙啶及聚赖氨酸。本文对纳米载体的结构特点、性能、基因转移机制进行综述 ,并将其在体内外基因转移效率与其它非病毒载体作以比较     

基因治疗新型病毒载体研究进展

基因转移载体是基因治疗能否进入临床应用的关键之一,本文就不断出现的新型病毒载体的研究方面的最新进展包括载体的构建、改造、表达调控和应用作了综述和评价。     

基因治疗新型病毒载体研究进展

基因转移载体是基因治疗能否进入临床应用的关键之一,本文就不断出现的新型病毒载体研究方面的最新进展包括载体的构建、改造、表达调控和应用作了综述和评价。     

载体与基因转染的研究进展

基因载体是指将基因或其它核酸物质运载到细胞中的工具.其化学本质可以是蛋白质或多肽、核酸、脂类、糖类、其它有机分子或它们的复合物.基因传递系统是基因治疗的重要组成部分,也是目前基因治疗的瓶颈.现有的基因载体包括两类.即病毒载体和非病毒载体.病毒载体转染效率高,但由于其转染具有免疫原性和致突变性限制了它的应用;非病毒载体系统具有低毒、低免疫原性和相对靶向性等优点,是新兴发展起来的基因转移系统.就各种载体的最新研究进展作一综述.     

基因治疗中的腺相关病毒载体

腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）是基因治疗中最有希望的载体之一，它具有非致病性，对宿主免疫原性弱及广泛的细胞和组织亲嗜性等优点。本文综述了AAV在基因治疗中的最新研究进展，着重探讨了修饰AAv以改变它的亲嗜性及使用不同的启动子来进一步促进AAV在基因治疗中的应用。     

纳米生物技术基因治疗载体研究进展

基因治疗已在治疗多种人类重大疾病如遗传病、肿瘤等方面显示出良好的应用前景,但也面临着巨大的挑战,其中之一就是需要安全、高效、靶向的载体系统。纳米生物材料,如脂质体、聚丙交酯-乙交酯(PLGA),聚乳酸(PLA)等,由于具有良好的生物安全性、可方便有效地实现基因靶向性及高效表达和缓释,成为制备高效、靶向的基因治疗载体系统的良好介质,日益在基因治疗载体系统中受到广泛重视。本文综述了目前在基因治疗领域中常用的纳米载体的生物学特性,以及它们的最新研究进展。     

Aerosol gene delivery to the murine lung is mouse strain dependent

The cationic polymer polyethylenimine (PEI) has been previously demonstrated to efficiently deliver genes to the lungs of mice in vivo via nebulization. Although within these studies various mouse strains were used in individual experiments, no direct comparison of gene delivery to different mouse strains via aerosol application has been published to date. With respect to the widespread use of mice as animal models of inherited and acquired diseases, such data could be of relevance to select the most appropriate mouse genetic background for preclinical mouse models. We investigated PEI-based aerosol gene delivery in two commonly used mouse strains, BALB/c and NMRI, and mixed 129/Sv × C57BL/6 mice. Gene expression in BALB/c mice was significantly 3.2- and 3.8-fold higher than in NMRI and 129/Sv × C57BL/6 mice, respectively. Lung deposition rates of radioactively labeled plasmid DNA (I¹²³) complexed with PEI were not significantly different between each of the mouse strains. The kinetics of pDNA clearance from the lungs of BALB/c mice was slightly faster than from NMRI mice. Whereas gene expression increased until day 3 after treatment, the levels of pDNA decreased over the same period of time. Repeated aerosol application in a 3-day time interval could maintain gene expression at high levels compared with a single application. Furthermore, PEI–pDNA aerosol application led to reproducible gene expression in independent experiments. These data suggest that the genetic background of mice could be important for nonviral aerosol gene delivery which should be considered in transgenic animal mouse models of inherited and acquired diseases for aerosol gene delivery studies.

新型非病毒载体聚乙烯亚胺介导基因转染参数的研究

聚乙烯亚胺是一种新型阳离子多聚物基因释放载体,可结合浓缩DNA,通过粘附内吞,进入细胞,使携带的质粒表达。本研究目的通过对聚乙烯亚胺各种转染参数的测定,为合成以聚乙烯亚胺为骨架的人工载体积累数据。方法:本研究利用聚乙烯亚胺分别结合含β半乳糖甙酶报告基因的pSVβ表达质粒、含绿色荧光蛋白报告基因的pEGFP质粒转染Cos-7细胞,通过组织化学法测定细胞抽提产物中β半乳糖甙酶的表达量、流式细胞仪法测定绿色荧光蛋白阳性细胞的表达比例,来测定影响转基因效率的各种参数。结果:在培养液中,6μg/ml聚乙烯亚胺作用24h,NIH 3T3细胞生存率为64.2%,7μg/ml聚乙烯亚胺细胞生存率为54.4%。电泳阻滞试验,聚乙烯亚胺在N/P比在3.0以上方可完全结合DNA。溶酶体抑制剂氯喹可增加聚乙烯亚胺的转染效率。培养液中的白蛋白、血清可降低转染效率。作为配制聚乙烯亚胺/DNA复合物的溶媒,HEPES缓冲液优于生理盐水,生理盐水优于5%葡萄糖。配制聚乙烯亚胺/DNA复合物的溶媒中加入Mg2+降低转染效率。聚乙烯亚胺转染效率优于SuperFectTM(断裂型树突状多聚物),而毒性低于SuperFectTM。结论:本研究首次报道了聚乙烯亚胺与DNA结合配伍的N/P比计算公式,N/P=7.75×b/c,这里b是PEI的质量(μg),c是质粒的质量(μg);PEI的工作终浓度应≤6μg/ml。通过体外细胞试验证明,聚乙烯亚胺是一种有效的真核细胞转染剂和人工合成基因载体的骨架。     

非病毒型基因载体的生物安全性

近年来,基因载体的生物安全性越来越受到人们的关注,本文介绍了近年来非病毒型基因载体生物安全性的研究进展,综述了非病毒型基因载体的毒性、纳米效应、血液相容性以及免疫反应等方面的研究成果.     

基因治疗中腺相关病毒载体的研究进展

腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)作为基因治疗载体近年来备受关注,但因其特殊的生物学性状限制了AAV在基础和临床实验中的研究。通过在AAV的包装、生产和纯化中采取新的方法和解决AAV转导中的限速步骤使AAV载体的应用在基因治疗中具有更广阔的前景。     

聚乙二醇在非病毒转基因载体中的应用

非病毒转基因载体在基因治疗领域的应用日趋广泛,但目前开发的非病毒转基因载体直接体内应用由于存在诸多问题而受到限制。受药物和蛋白质聚乙二醇化后能增加目的药物和蛋白质稳定性,延长体内半衰期,降低毒副作用等效应的启发,近年有许多研究将聚乙二醇化应用于非病毒转基因载体,取得了一定的效果。     

慢病毒载体及其应用进展

慢病毒载体具有可感染分裂细胞及非分裂细胞,转移基因片段容量较大,目的基因表达时间较长,不易引发宿主免疫反应等诸多优点,因此,慢病毒载体已成为基因治疗中载体研究的热点.我们以HIV-1来源的慢病毒载体为代表综述了慢病毒载体的结构特点,发展,及其应用研究进展.     

多聚乙酸亚胺介导基因转移

目的 采用一种新的多聚阳离子化合物－多聚乙酰亚胺（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｉｍｉｎｅ,ＰＥＩ）,作为将外源性基因转入骨骼肌细胞的介导物。方法 骨骼肌细胞取生新生ＳＤ大鼠,经胰酶消化后培养,将ＬａｃＺ基因ＤＮＡ－ＰＥＩ复合物导入骨骼肌细胞内,最后用Ｘ－ｇａｌ组织化学染色法检测已转染的细胞。结果 ＰＥＩ可作为介导剂使ＬａｃＺ基因在培养的骨骼肌细胞中表达,其表达率可达到３０％。结论 ＰＥＩ在真核细胞中实施