负载NDV-ATV的树突状细胞诱导的抗胃癌效应研究

目的研究负载新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤细胞瘤苗(NDV-ATV)抗原的树突状细胞(DCs)诱导的抗胃癌效应。方法新城鸡瘟病毒感染MNK45细胞并灭活,GMCSF、IL-4和TNF-α体外诱导扩增DCs并负载NDV修饰后的胃癌抗原,制备胃癌抗原特异性CTL;用CytoTox96TM检测其对MNK45体外杀伤效应。并以冻融胃癌细胞抗原为对照。结果负载新城鸡瘟病毒胃癌抗原DCs诱导的特异性CTL对MNK45的杀伤率达90.15%,显著高于冻融抗原的杀伤率(P<0.05)。且其对同种不同分化类型的胃癌细胞株MGC803、SGC7901也有较高的杀伤效应,而对LOVO及HepG2肿瘤细胞无显著杀伤作用(P<0.01)。结论新城鸡瘟病毒修饰的胃癌细胞,联合树突状细胞可诱导产生高效和特异的抗胃癌效应。提示NDV-ATV联合DCs可作为胃癌免疫治疗的一种有效的新方法。     

大肠癌患者术后NDV-ATV治疗对细胞免疫功能的影响

目的　探讨大肠癌患者术后NDV -ATV治疗对细胞免疫功能的影响。方法　采用流式细胞仪分析 70例术后接受NDV -ATV治疗的大肠癌患者外周静脉血T淋巴细胞亚群及NK细胞活性的变化情况 ,并与 45例术后未接受NDV -ATV治疗的大肠癌患者作为对照。结果　NDV -ATV治疗组 ,术后外周血CD+3、CD+4、NK细胞和CD+4 CD+8均较治疗前显著增高 (P <0 0 1 ) ,且明显高于未接受NDV -ATV治疗的术后常规治疗组 (P <0 0 5 )。结论　NDV -ATV可改善大肠癌患者术后机体的免疫功能     

树突状细胞肿瘤疫苗诱导抗胃癌作用的实验研究

目的探讨树突状细胞(dendriticcells,DCs)肿瘤疫苗诱导的抗胃癌效应对荷瘤裸小鼠的作用。方法使用胃癌细胞冻融抗原,体外致敏从小鼠骨髓诱导分化来源的DCs成为肿瘤疫苗,用其来刺激脾脏淋巴细胞,得到肿瘤抗原特异的细胞毒性T淋巴细胞(CTL),观察其对荷瘤裸小鼠肿瘤生长的影响以及早期凋亡诱导作用。结果经重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4)体外诱导小鼠骨髓细胞,得到大量形态典型、具备强烈刺激增殖能力、高表达CD1a、CD11c、CD40和CD80的DCs。肿瘤抗原致敏DCs刺激脾脏淋巴细胞成为CTL后,可显著抑制裸小鼠皮下移植瘤生长并致瘤细胞早期凋亡增加。结论DCs肿瘤疫苗可通过CTL的作用,抑制荷瘤裸小鼠的胃癌细胞生长及促进胃癌细胞早期凋亡。     

树突状细胞在肿瘤免疫治疗中的作用

现代肿瘤疫苗战略是建立在由肿瘤特异抗原细胞毒T细胞(CTL)介导的免疫应答在抗肿瘤过程中起主导作用的这一原则[1]基础上的。肿瘤免疫应答并不是由肿瘤直接传递抗原给T细胞,而是要先把肿瘤抗原递呈至一种特殊的细胞——专职抗原递呈细胞(APC),如树突状细胞(DC),递呈抗原给T细胞,使其能识别肿瘤细胞,从而消灭肿瘤。     

树突状细胞与肿瘤的免疫治疗

肿瘤免疫治疗作为恶性肿瘤综合治疗的重要手段日益受到人们的重视和关注,在几种免疫治疗中,利用以细胞为基础的疫苗进行的主动免疫疗法,近年来正逐渐成为免疫学家和肿瘤学家的研究热点,细胞疫苗的高免疫原性可以诱导宿主产生特异性的抗肿瘤免疫,阻止肿瘤的形成、生长、扩散和复发,甚至消除肿瘤。     

树突状细胞肿瘤疫苗研究进展

人类肿瘤疫苗治疗的目标是诱导肿瘤特异性和长期的免疫应答,以清除体内肿瘤。树突状细胞(dendriticcells,DC)是一类专职的抗原提呈细胞,在诱导、调节、维持机体抗肿瘤免疫中起核心作用[1]。本文就DC的肿瘤疫苗研究进展作一综述。树突状细胞概述1.DC生物学特性人DC发育经历4个阶段:①骨髓干细胞;②在血液、淋巴液和淋巴样组织中循环的DC前体;③定居于组织中的未成熟DC;④次级淋巴样器官中的成熟DC。CD34+造血干细胞经粒鄄巨噬细胞集落刺激因子(GM鄄CSF)和肿瘤坏死因子(TNF)诱导可产生髓样DC、表皮朗格罕细胞和间质DC。表皮朗格罕…     

树突状细胞与胃癌细胞融合的肿瘤疫苗研究

目的以肿瘤细胞与树突状细胞(dendriticcells,DCs)相融合使融合细胞能将肿瘤抗原递呈给T细胞,并提供T细胞激活所必需的第二信号,借此激活机体的抗肿瘤免疫。方法通过PEG法将鼠源性胃癌细胞MFC与小鼠DC进行融合(T/DC),融合后经50Gy电子线照射,以1×106肿瘤疫苗于小鼠皮下注射免疫2次,间隔1周后接种,后一次免疫后1周于小鼠皮下接种5×105MFC胃癌细胞。肿瘤细胞接种3周后处死实验动物,测量肿瘤大小、外周血NK活性和脾细胞CTL活性。结果肿瘤接种后一周对照组小鼠皮下均有肿瘤生长,而T/DC免疫组均无皮下可触及的肿瘤(10/10),10天后T/DC免疫组才有4/10只鼠皮下出现可触及的肿瘤,3周后对照组肿瘤体积明显大于T/DC免疫组。经T/DC免疫后小鼠生存期明显较对照组延长,对照组于肿瘤接种后2周开始有小鼠衰竭死亡,至肿瘤接种后3周对照组仅有3只存活,T/DC免疫组有8只鼠存活,并仍有3只无肿瘤生长。经T/DC免疫后,小鼠NK活性和肿瘤特异性CTL活性均明显提高,T/DC免疫组和对照组MFC特异性CTL活性分别为30.09%和7.12%。结论肿瘤细胞鄄DC融合的肿瘤疫苗可通过加强抗原递呈激活肿瘤特异性CTL而具明显的抗肿瘤活性。     

Regression of Lymph Node Metastases by Immunotherapy Using Autologous Breast Tumor-Lysate Pulsed Dendritic Cells: Report of a Case

A 50-year-old woman was diagnosed as having stage IV breast cancer with bilateral supraclavicular lymph node metastasis resistant to CAF therapy. She received immunotherapy using autologous tumor lysate-pulsed dendritic cells (DCs). Four cycles of DC injection into the right supraclavicular lymph nodes resulted in regression of bilateral supraclavicular lymphogenous metastasis. Histological studies revealed an accumulation of CD45⁺ T lymphcytes in the regressive lymph nodes. This case suggests that immunotherapy with DCs may be a safe and promising approach for the treatment of advanced breast cancer. Received: July 27, 2000 / Accepted: January 9, 2001     

前列腺癌组织中树突状细胞的变化及以此为基础的免疫治疗

树突状细胞(DC)作为功能最为强大的抗原呈递细胞,对肿瘤免疫起着关键的启动作用。前列腺癌细胞通过一系列复杂的作用使肿瘤免疫微环境中DC的数目和功能发生变化,从而逃逸机体的免疫监视,形成了肿瘤的发生、发展。认识到这一点,人们开展以DC为基础的前列腺癌的免疫疫苗治疗,并取得了一定的效果。而前列腺癌免疫微环境中DC的变化和以此为基础的免疫治疗仍处于起步阶段。     

体外模拟气腹环境对胃癌细胞增殖凋亡的影响

目的通过体外模拟气腹环境,观察二氧化碳(CO2)和氦气(He)在不同压力下对胃癌细胞MKN-45增殖、凋亡的影响。方法实验分为对照组、CO2组和He组,其中CO2组和He组又按照压力不同分为0、5、10、15mmHg组(作用时间均为4h)。细胞在密闭培养箱内经不同压力CO2或He作用4h后用血气分析仪检测培养液pH值;MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪观察细胞凋亡指数变化;AnnexinV-FITC/PI双标染色、流式细胞仪测定凋亡细胞比例。结果处理结束后即刻检测,CO2组细胞培养液呈弱酸性,He组细胞培养液呈弱碱性。MTT法检测细胞增殖变化,CO2组0、5、10mmHg组OD值与对照组比较无明显差异(P>0.05),15mmHg组OD值与对照组比较在前3天无明显差异(P>0.05),在4~7天OD值明显低于对照组(P<0.01)。而在He组,不同压力组细胞增殖活性与对照组比较无明显差异(P>0.05)。在CO2环境下,0、5mmHg组细胞凋亡指数与对照组比较无明显差异(P>0.05),而10、15mmHg组明显大于正常对照组(P<0.01)。0、5mmHg组细胞凋亡比例与对照组比较无显著差异(P>0.05...     

Immunoregulation of Dendritic Cell Subsets by Inhibitory Receptors in Urothelial Cancer

Blockade of inhibitory receptors (IRs) overexpressed by T cells can activate antitumor immune responses, resulting in the most promising therapeutic approaches, particularly in bladder cancer, currently able to extend patient survival. Thanks to their ability to cross-present antigens to T cells, dendritic cells (DCs) are an immune cell population that plays a central role in the generation of effective antitumor T-cell responses. While IR function and expression have been investigated in T cells, very few data are available for DCs. Therefore, we analyzed whether DCs express IRs that can decrease their functions. To this end, we investigated several IRs (PD-1, CTLA-4, BTLA, TIM-3, and CD160) in circulating CD1c⁺ DCs, CD141⁺ DCs, and plasmacytoid DCs from healthy donors and patients with urothelial cancer (UCa). Different DC subsets expressed BTLA and TIM-3 but not other IRs. More importantly, BTLA and TIM-3 were significantly upregulated in DCs from blood of UCa patients. Locally, bladder tumor–infiltrating DCs also overexpressed BTLA and TIM-3 compared to DCs from paired nontumoral tissue. Finally, in vitro functional experiments showed that ligand-mediated engagement of BTLA and TIM-3 receptors significantly reduced the secretion of effector cytokines by DC subpopulations. Our findings demonstrate that UCa induces local and systemic overexpression of BTLA and TIM-3 by DCs that may result in their functional inhibition, highlighting these receptors as potential targets for UCa treatment.

奥曲肽对人胃癌细胞的凋亡诱导作用

目的 探讨生长抑素对人胃癌细胞的抑制作用及其作用机理。方法 以生长抑素类似物奥曲肽作用于人胃癌细胞株SGC-7901细胞，以人成纤维细胞株HF作为正常细胞对照，以5-FU作为阳性药物对照，通过MTT实验、荧光显微镜观察及流式细胞术分析，得出结论。结果 一定浓度范围内的奥曲肽对SGC-7901细胞产生抑制作用，其抑制作用具有量效关系和饱和性。奥曲肽对SGC-7901细胞的抑制程度接近于5-FU对他的抑制，而对HF细胞无影响。奥曲肽可诱导SGC-7901细胞凋亡。结论 奥曲肽在体外对SGC-7901细胞具有抑制作用，诱导肿瘤细胞凋亡可能是其作用机理之一。     

肿瘤浸润性树突状细胞与粘蛋白MUC1在前列腺癌与前列腺增生中的表达研究

目的 :探讨上皮特异性肿瘤蛋白 (MUC1)与肿瘤浸润性树突状细胞 (TIDC)在前列腺癌及前列腺增生组织中的表达。　方法 :采用免疫组织化学SP法检测MUC1和TIDC在 30例前列腺癌、2 0例前列腺增生组织的表达。结果 :MUC1在前列腺癌、前列腺增生组织中均表达 ,MUC1的染色分型同肿瘤的病理分级密切相关 (P <0 .0 0 1)。TIDC的数量在高分化与低分化前列腺癌间差异有显著性 (P <0 .0 0 1)。　结论 :MUC1的表达模式和TIDC数量的监测可以作为前列腺癌恶性程度和预后的判断指标。TIDC的减少可能是肿瘤免疫逃逸和耐受的重要环节 ,肿瘤细胞表面高密度的MUC1可能参与前列腺癌侵袭转移和激素耐受机制。     

乳腺癌树突状细胞瘤苗对自体CIK细胞生物活性的影响

目的探讨乳腺癌树突状细胞瘤苗（DCs）对自体CIK细胞生物活性的影响。方法取诱导7d的活化DCs瘤苗和诱导7d的自体CIK细胞混合培养（DC—CIK细胞）,同期自体CIK细胞为对照组。检测2、8、14d的DC—CIK细胞CD3与CD56表型、培养上清液IL．12的水平及测定混合培养8d时对乳腺癌细胞MCF．7的细胞毒效应。结果混合培养14d的DC-CIK细胞增殖率显著高于CIK细胞（P〈0．01）,但CD3和CD56表型无显著变化（P〉0．05）。DC—CIK细胞对MCF-7乳腺癌细胞的特异性溶解率和细胞毒活性均高于CIK细胞（P〈0．01）：CIK细胞强烈刺激DCs分泌IL-12．混合培养2d时,DCs的IL-12p40分泌水平达到高峰。结论乳腺癌DCs瘤苗与自体CIK细胞混合培养后（DC—CIK细胞）,进一步促进了DCs的成熟并增强了CIK细胞的细胞毒活性。