蛋白激酶C在热休克基因表达中的作用

热休克（４２℃,２ｈ）或Ｈ２Ｏ２预处理,均能在蛋白翻译合成水平使牛肺动脉内皮细胞（ＢＰＡＥＣｓ）中的ＨＳＰ７０增多;在基因围录水平使ＢＰＡＥＣｓ中ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ含量增加。蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂－－Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴＰ）能显著减少热休克和Ｈ２Ｏ２诱导的ＨＳＰ７０合成及ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ转录的增加。提示ＰＫＣ在热休克和Ｈ２ＯＳ诱导的热休克基因表达的信息传递中具有重要作用。     

热休克基因表达对过氧化氢所致肺泡巨噬细胞损伤的保护作用

经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析发现热休克预处理（４２℃，２ｈ）使肺泡巨噬细胞（ＰＡＭｓ）中热休克蛋白（ＨＳＰ）７０ｍＲＮＡ增多，ＨＳＰ７０合成增加，且获得抵抗Ｈ２Ｏ２损伤的能力。用放线菌酮和放线菌素Ｄ分别从蛋白合成及基因转录水平阻断热休克蛋白基因的表达，能取消热休克对Ｈ２Ｏ２所致ＰＡＭｓ损伤的保护效应。提示热休克系通过使热休克蛋白基因表达增强，ＨＳＰ７０合成增多，从而保护Ｈ２Ｏ２所致的ＰＡＭｓ损伤。     

热休克基因表达对过氧化氢所致肺泡巨噬细胞损伤的保护作用

经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析发现热休克预处理使肺泡巨噬细胞中热休克蛋白（ＨＳＰ）７０ｍＲＮＡ增多，ＨＳＰ７０合成增加，且获得抵抗Ｈ２Ｏ２损伤的能力，用效放线菌酮和放线菌素Ｄ分别从蛋白合成及基因转录水平阻断热休克蛋白基因的表达，能取消热休克对Ｈ２Ｏ２所致ＰＡＭｓ损伤的保护效应。提示热休克系通过使热休克蛋白基因表达增强，ＨＳＰ７０合成增多，从而保护Ｈ２Ｏ２所致的ＰＡＭｓ损伤 。     

大鼠自发性高血压和心肌肥厚时热休克蛋白70基因表达的研究

本工作采用热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）核酸分子杂交方法，检测了自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）与其正常对照（ＷＫＹ）大鼠离体培养的主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）受热刺激后以及大鼠腹主动脉缩窄后心肌肥厚时左心室ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ的水平，并对ＳＨＲ和ＷＫＹ肝组织基因组ＤＮＡ进行了限制性酶切片断长度多态性（ＲＦＬＰ）分析。结果表明：ａ．３７℃培养的ＳＨＲＡＳＭＣ及整体ＳＨＲ肝组织ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ的基础表达水平均低于ＷＫＹ大鼠，ＳＨＲＡＳＭＣ受热刺激（４２℃１５ｍｉｎ）后２ｈ，ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达增加的程度明显大于ＷＫＹ大鼠。ｂ．大鼠腹主动脉缩后造成左室压力超负荷，左心室ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ在压力超负荷４ｈ时已明显升高，１ｄ、２ｄ、１ｗ均维持在高水平，１ｗ后逐渐降低。ｃ．ＳＨＲ和ＷＫＹ鼠肝组织基因组ＤＮＡ经ＢａｍＨＩ酶切后，ＳＨＲＨＳＰ７０基因缺失一条约５．６ｋｂ的片段。提示：ＳＨＲＡＳＭＣ对热敏感性增加；压力负荷增加早期，左心室ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达明显增加；ＨＳＰ７０基因结构异常可能与高血压发生有关。     

热休克蛋白对H_2O_2损伤BPAECs的保护作用及其机制探讨

从牛肺动脉内皮细胞（ＢＰＡＥＣｓ）探讨热休克蛋白对肺损伤的保护作用。热处理可减轻过氧化氢所致ＢＰＡＥＣｓ存活率的下降、过氧化氢酶和起氧化物歧化酶活性的降低及脂质过氧化物的增加，增强ＢＰＡＥＣｓ的抗氧化能力。放线菌酮可阻断热处理诱导的ＰＢＡＥＣｓ７０－ＫＤ热休克蛋白的合成，消除其保护作用。     

热休克蛋白对H2O2损伤BPAECs的保护作用及其机制探讨

从牛肺动脉内皮细胞（ＢＰＡＥＣｓ）探讨热休克蛋白对肺损伤的保护作用。热处理可减轻过氧化氢所致ＢＰＡＥＣｓ存活率的下降，过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性的降低及脂质过氧化物的增加，增强ＢＰＡＥＣｓ的抗氧化能力，放线菌酮可阻断热处理诱导的ＰＢＡＥＣｓ７０－ＫＤ热休克蛋白的合成，消除其保护作用。     

热应激对热休克蛋白70mRNA的诱导

用＾３２Ｐ标记的热休克蛋白７０（ｈｓｐ７０）ｃＤＮＡ为探针，检测了热应激时完整及人骨肉瘤细胞（ＨＯＳ－８６０３）的ｈｓｐ７０ ｍＲＮＡ。结果表明，大鼠体温在４２℃３０ｍｉｎ后，脑、肝、肺、脾中ｈｓｐ７０ｍＲＮＡ的表达明显增加，以脑最为显著。ＨＯＳ－８６０３细胞经４２℃热处理３０ｍｉｎ，置３７℃培养２～４ｈ后，ｈｓｐ７０ｍＲＮＡ的表达，且在整体动物上有组织特异性。     

热休克反应对大鼠油酸肺保护作用的机制研究

未研究发现，经热休克处理的大鼠注油酸后，肺组织损伤明显减轻，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析显示热休克使大鼠肺组织中ＨＳＰ７０含量明显增多；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析证实此乃由于ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ转录增加所致。说明热休克处理使肺组织ＨＳＰ７０基因表达增强；提示热休克反应对大鼠油酸肺的保护作用与肺组织细胞中ＨＳＰ７０基因表达增强及与ＨＳＰ７０增多有关。     

Study of Heat Shock Protein HSP90α，HSP70，HSP27 mRNA Expression in Human Acute Leukemia Cells

ＳｔｕｄｙｏｆＨｅａｔＳｈｏｃｋＰｒｏｔｅｉｎＨＳＰ９０α，ＨＳＰ７０，ＨＳＰ２７ｍＲＮＡＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＨｕｍａｎＡｃｕｔｅＬｅｕｋｅｍｉａＣｅｌｌｓＸＩＡＯＫａｎｙａｎ（肖侃艳）；ＬＩＵＷｅｎｌｉ（刘文励）；ＱｕＳｈｅｎ（屈伸）；ＳＵＮＨ...     

热休克反应对大鼠油酸肺保护作用的机制研究

本研究发现，经热休克处理的大鼠注油酸后，肺组织损伤明显减轻。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析显示热休克使大鼠肺组织中ＨＳＰ７０含量明显增多；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析产此乃由于ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ转录增加所致。说明热休克处理使肺组织ＨＳＰ７０基因表达增强；提示热休克反应对大鼠油酸肺的保护作用与肺组织细胞中ＨＳＰ７０基因表达增强及与ＨＳＰ７０增多有关。     

一个遗传性耳聋伴前庭功能障碍家系的分子病因学研究

目的:对1个遗传性耳聋伴前庭功能障碍家系进行遗传方式?表型特征及致病基因的分析,以研究其分子病因?方法:对门诊1例遗传性聋伴眩晕患者进行家系调查?病史收集及相应的听力学和前庭功能检查?利用目标基因捕获和大规模平行测序技术,对家系先证者进行可能致病突变筛查,包括靶向104种与遗传性听力损失相关的基因和3个microRNA分子?进一步对获得的候选突变基因进行编码区序列验证分析?结果:目标基因捕获测序结果发现先证者COCH基因第11外显子上存在c.1458C>G(p.T352S)的杂合突变?进一步对家系中所有患者和有血缘关系的正常个体进行了遗传共分离分析,发现该杂合突变在该家系中仅有Ⅰ2?Ⅱ1?Ⅱ5?Ⅱ9?Ⅱ13和Ⅳ1存在相同的杂合突变,而Ⅱ11和Ⅲ1表现为该突变的纯合子,表明该杂合突变不存在共分离现象,因此可以排除其为该家系致病突变的可能性?对先证者Ⅲ14 COCH基因全部12个外显子的序列测定结果未发现其他突变?结论:此家系为常染色体显性遗传性非综合征型耳聋伴前庭功能障碍,但初步筛查结果未发现已知耳聋相关基因,包括COCH基因的可疑致病突变?因此,该家系的分子病因可能存在一新基因的突变?     

视路诱发电位联合检测及临床应用

采用南京医科大学开发的视诱发电位检测系统，联合检测模式翻转机诱发电位、模式翻转视网膜电图和闪光视网膜电图。建立了本室选定的物理参数下的正常值，并对眼科常见疾病青光眼、白内障、黄斑区病变等进行检测，结果证明本检测法对上述疾病的诊断具有重要参考作用。     

pEGFP-N1-Fcy::Fur重组质粒的构建及其在卵巢癌细胞中的表达

目的:构建携带融合型自杀基因Fcy::Fur的荧光真核表达质粒pEGFP-N1-Fcy::Fur,并观察其在卵巢癌细胞中的表达.方法:应用基因重组技术,将pORF-Fcy::Fur中的Fcy::Fur目的基因亚克隆到荧光真核表达载体pEGFP-N1,以酶切1和测序鉴定重组质粒的正确性.应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入SKOV3细胞,24 h后观察绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)瞬时表达情况,用Western blot方法检测Fcy::Fur表达.结果:酶切和测序鉴定证实插入片段正确.细胞转染24 h后,荧光显微镜下观察到GFP表达.60%转染细胞发出绿色荧光.Western-blot检测到Fcy::Fur表达.结论:成功构建pEGFP-N1-Fcy::Fur荧光真核表达质粒,并可在卵巢癌细胞中有效表达,为卵巢癌基因治疗提供实验基础.     

逆转录病毒介导Fcy::Fur融合基因联合5-FC治疗裸鼠体内胶质瘤实验研究

目的:构建含融合自杀基因Fcy::Fur重组逆转录病毒,用自杀基因治疗系统Fcy::Fur/5-氟胞嘧啶(5-FC)对裸鼠胶质瘤进行体内抑瘤作用的实验研究.方法:扩增Fcy::Fur基因并构建Fcy::Fur基因重组逆转录病毒载体:载体转染包装细胞获得高滴度病毒并转染鼠胶质瘤细胞C6,筛选并鉴定阳性转基因克隆;构建稞鼠荷胶质瘤动物模型,腹腔注射5-FC,观察裸鼠肿瘤重量变化及电镜、流式细胞仪(FCM)检测肿瘤的凋亡.结果:PCR法扩增出全长Fcy::Pur基因,经测序证实序列正确;构建了PLXSN-Fcy::Fur逆转录病毒载体,裁体转染包装细胞PT67,获得滴度为3.5×106 CFU/ml的逆转录病毒:转染C6获转基因阳性克隆C6-Fcy::Fur,检测C6-Fcy::Fur有Fcy::Fur基因的mRNA表达;裸鼠前肢背部接种转基因细胞,成瘤后腹腔注射5-FC,转基因肿瘤的生长较对照组明显抑制.FCM法检测到凋亡峰,电镜观察到转基因肿瘤细胞有凋亡小体.结论:AdE1CMVCD与5-FC联合在体内对胶质瘤有明显的抑制作用,为临床胶质瘤基因治疗提供了可靠的理论及应用依据.     

铂掺杂对氧化锡超微粒子薄膜表面结构及气敏特性的影响

用直流气体放电活化反应蒸发法制备了氧化锡超微粒子薄膜（Ｉ），再用直流平面磁控溅射法掺杂Ｐｔ。Ｐｔ的掺入使Ｉ的晶粒增多，电导下降，还使薄膜的气敏特性到显著改善，讨论了Ｐｔ掺杂对薄膜灵敏度影响的机理。     

舒巴哌酮钠与头孢噻肟钠随机对照治疗细菌性感染的临床评价

舒巴哌酮钠为头孢哌酮与舒巴坦以１：１配制的联合制剂。我们以头孢噻肟钠作为对照药,进行随机对照及开放临床试验,共治疗细菌性感染４３例,以评价其安全性及有效性。实验结果表明：试验药与对照药总的痊愈率、有效率及细菌清除率分别为８０％．９６％．１００％,５５．６％．８８．９％．９３．５％,两组对比无显著差异（Ｐ＞０．０５）。临床分离３５株致病菌药敏试验结果表明：１００％对试验药高度敏感,７１．４％对对照药高度敏感,有统计学显著差异（Ｐ＜０．０１）。试验药与对照药不良反应发生率分别为４％和５．６％,无统计学显著差异（Ｐ＞０．０５）。     

介入栓塞治疗难治性头颈部出血的疗效研究

目的:分析难治性头颈部出血的造影特征并评价介入栓塞治疗的安全性及有效性?方法:2009年1月—2015年3月,48例难治性头颈部出血患者在本院接受介入栓塞治疗?回顾性分析其临床资料,根据良恶性病因?造影的阳性和阴性结果等指标,分类评价介入栓塞治疗难治性头颈部出血的有效性及并发症情况?结果:48例患者中恶性病变15例,良性病变33例;造影阳性36例,造影阴性12例,恶性病变与良性病变造影阳性率无统计学差异(P=0.106)?12例造影阴性患者中特发性鼻出血占8例,其余病因者4例,特发性鼻出血造影阴性率高于其余病因(P=0.001)?46例患者成功止血,1例术后出现视野缺损并发症,5例复发,恶性病变组与良性病变组或造影阳性组与阴性组之间出血复发率无统计学差异(P=0.339和P=0.785)?结论:介入栓塞治疗难治性头颈部出血安全有效;特发性鼻出血患者造影阴性率高,进行双侧蝶腭动脉经验性栓塞同样有较好的止血效果?     

鼻腔胚胎型横纹肌肉瘤6例并文献复习

<正>横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)是最常见的软组织恶性肿瘤之一,好发于儿童和青少年,主要发生于头颈部、腹膜后和泌尿生殖系统。成人横纹肌肉瘤很少见[1],而胚胎型横纹肌肉瘤(embryonalrhab-domyosarcoma,ERMS)是最常见的亚型,占横纹肌肉瘤的50豫~60豫,而成人鼻腔ERMS临床上更为罕     

Diagnosis and treatment of pancreatic somatostatinoma:a case report

Pancreatic somatostatinoma represents a rare group of neuroendocrine tumors,which was first reported by Ganda and Larsson in 1977.Less than 50 cases have been reported to the present.We treated a case of pancreatic somatostatinoma at our hospital.     

福寿威片对肾虚衰老患者血脂的影响

课题组对７２例肾虚衰老高脂血症患者，采用纯中药复方制剂福寿威片治疗，疗程二月。治疗期间停服其它对评价本品可能产生影响的一切中西药物。治疗结果表明，ＨＤＬ－Ｃ水平明显增高，ＴＣ、ＴＧ及ＬＤＬ－Ｃ水平显著下降，提示本品对肾虚衰老高脂血症患者有治疗作用。