UPLC-MS/MS法鉴定五味子酯甲在大鼠体内的代谢产物

目的:鉴定大鼠给予五味子酯甲后尿样中的代谢产物,阐明五味子酯甲在大鼠体内的代谢途径。方法:采用超高效液相色谱-串联四极杆质谱(UPLC-MS/MS)法与Metabolite Pilot 1.5代谢物分析软件进行分析鉴定。色谱柱为Phenomenex Kinetex C18,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),柱温为50℃,流速为0.4 ml/min,进样体积为5μl。一级全扫描范围100~1 000 amu,累积时间200 ms;子离子扫描范围50~1 000 amu,累积时间80 ms。大鼠ig给予五味子酯甲(15 mg/kg),收集并分析给药前后的尿样。结果:共鉴定代谢产物7种(M1~M7),即五味子醇乙、14-OH-五味子醇乙、1-OH-五味子醇乙或3-OH-五味子醇乙、2-OH-五味子醇乙、7-脱羟基-五味子醇乙、7-甲氧基-五味子醇乙。结论:该研究首次报道了五味子酯甲在大鼠体内的代谢物质,均为Ⅰ相代谢产物;其在大鼠体内的主要代谢途径是脱去苯甲酸,发生氧化反应和还原反应。     

盐酸丁咯地尔在人血浆和肝微粒体中代谢产物鉴定

目的研究盐酸丁咯地尔在人体的代谢情况。方法采用UPLC-QTOF/MS法发现并鉴定盐酸丁咯地尔在人血浆和肝微粒体孵化体系中的代谢产物。采用HSS T3 C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以5 mmol·L~(-1)醋酸铵水溶液(含体积分数0.05%的甲酸)(A)-甲醇(B)为流动相梯度洗脱,流速为0.4 m L·min~(-1),采用ESI离子源,正离子模式下检测。结果通过与空白生物样品进行比较,在人血浆和肝微粒体中共发现了丁咯地尔及其24种代谢产物,其中18种为首次发现的代谢产物。根据代谢产物的色谱保留时间、准分子离子及碎片离子等信息,确定并推断了丁咯地尔及其代谢产物的结构,阐明了丁咯地尔在人体的代谢途径,包括去甲基化、氧化、羟基化、硫酸和葡萄糖醛酸结合途径。结论建立了UPLC-QTOF/MS方法研究了丁咯地尔在人体的代谢情况,为其化学结构类似药物和候选化合物的代谢研究提供依据。     

去氢毛钩藤碱在大鼠体外肠道菌群中代谢产物的鉴定

目的研究去氢毛钩藤碱在大鼠体外肠道菌群中的代谢途径,阐明肠道菌群对去氢毛钩藤碱吸收和代谢的影响。方法采用UPLC/Q-TOF MS技术,鉴定并推测了去氢毛钩藤碱在大鼠体外肠道菌群培养液中的代谢产物。采用HSS C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以乙腈(A)-体积分数0.2%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速为0.5 m L·min-1,采用ESI离子源,正离子模式下检测。结果通过色谱保留时间及质谱碎片等信息,在大鼠肠道菌群中鉴定了原型化合物去氢毛钩藤碱,以及经还原、氮氧化和羟基化反应后得到的3个微量代谢产物。结论建立了采用UPLC/Q-TOF MS技术鉴定去氢毛钩藤碱在大鼠体外肠道菌群中代谢产物的方法,为吲哚类生物碱在体内吸收和代谢机制的研究提供试验依据。     

基于UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定防风在大鼠体内的入血成分及代谢产物

目的 研究防风Saposhnikovia divaricata（Turcz.）Schischk.水煎液在大鼠体内的入血成分及代谢产物。方法 应用超高效液相色谱串联飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术鉴定防风入血成分及代谢产物。采用Eclipse Plus C₁₈色谱柱（150mm×2.1mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸乙腈（B）,梯度洗脱,流速0.3 ml/min,进样量3 μl。结果 建立了大鼠给药后血浆样品的分析测定方法,并且与空白血浆、防风水煎液和对照品的保留时间及质谱碎片离子信息对比,共鉴定了大鼠血浆中21个来源于防风的化合物,包括10个入血原型成分和11个代谢产物。结论 防风主要成分在大鼠体内的代谢途径主要包括羟化、去甲基化、葡萄糖醛酸化等。所建立的方法简单可靠,为揭示防风的药效物质基础提供研究依据。     

UPLC-Q-TOF/MS法分析岩大戟内酯B在大鼠体内的代谢产物

目的:分析岩大戟内酯B在大鼠体内的代谢产物,预测其代谢途径。方法:将大鼠随机分为空白组(灌胃0.5%羧甲基纤维素钠溶液)和给药组(灌胃岩大戟内酯B,100 mg/kg),每组8只。分别收集给药后0~12、>12~24、>24~36 h的粪便,给药后0~2、>2~8、>8~12、>12~24、>24~36、>36~48 h的尿液以及给药后1、2、8、12、24、36 h的血液样品,分别以超声提取法、固相萃取法、蛋白沉淀法处理后,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)联用技术和Analyst?TF 1.7.1、PeakView?2.2等软件联合分析、鉴定各样品中的代谢产物。结果与结论:从大鼠粪便中共检测到原型药物和7个代谢产物,从尿液和血液样品中分别检测到1、2个代谢产物。岩大戟内酯B灌胃后在大鼠体内经Ⅰ相的开环、脱水、氧化、脱氧、加氢反应等途径代谢;未检测到Ⅱ相代谢产物。     

雷公藤甲素和雷公藤红素在大鼠体内的代谢产物分析

大鼠灌胃给予雷公藤甲素与雷公藤红素混合液.采用液相色谱-串联质谱法,在负离子模式下,以一级、二级全扫描方式检测大鼠血清、尿与粪中的代谢产物.在大鼠血清中仅发现原形药物.在尿样中检测到了雷公藤甲素的3种代谢产物,推测分别为其单羟基化代谢产物、环氧化物水解开环代谢产物及谷胱甘肽结合物.在粪中则检测到1种代谢产物,推测为雷公藤甲素的另一单羟基化代谢产物.在尿样中检测到雷公藤红素的1种代谢产物,推测为葡萄糖醛酸结合物;在粪中检测到硫酸结合物.     

UPLC-Q/TOF-MS/MS法分析鉴定夏佛塔苷在小鼠体内的代谢产物

采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography coupled with quadrupole/time-of-flight tandem mass spectrometry, UPLC-Q/TOF-MS/MS)技术,对夏佛塔苷口服给药后在小鼠体内的原形成分及其代谢产物进行定性分析。动物福利和实验过程获得徐州医科大学伦理委员会的批准(批准号:XZMULL201612024)。通过分析各成分的精确分子质量、一级、二级质谱信息,并与相应的对照品及文献比对,从小鼠血浆、胆汁、尿液和粪便中共鉴定出1个原形成分和29个代谢产物。这些成分在小鼠体内代谢的主要途径有去羟基化、羟基化、脱糖化、糖化、氢化、甲基化、乙酰化、硫酸化、葡糖醛酸化等。研究结果可为进一步阐明夏佛塔苷的药效物质基础提供有价值的依据。     

芹菜素在大鼠体内代谢产物的鉴定与分析

目的:阐明芹菜素在大鼠体内的生物转化形式,推测其可能的代谢途径。方法:取大鼠分为空白组和给药组(灌胃给予芹菜素,200 mg/kg),每组6只。给药24 h内分别收集两组的尿液和粪便,进行相应处理后同时在正离子模式和负离子模式下采用高效液相串联离子阱飞行时间多级质谱法进行分析检测。结果:从给药组的大鼠尿液中鉴定出9个代谢产物,分别为芹菜素发生2,3位双键还原(U1、U7、U8、U9)、与葡萄糖醛酸结合(U2、U3、U4)、与硫酸酯结合(U5、U6、U7、U8、U9)、与葡萄糖结合的产物(U2);从给药组的大鼠粪便样品中鉴定出4个代谢产物,分别为芹菜素发生2,3位双键还原(代谢产物F3)、与葡萄糖醛酸结合(F2)、与葡萄糖结合的产物(F1)。结论:芹菜素在大鼠体内主要仍以原型药物存在,推测在肠道细菌的作用下可发生2,3位双键的还原,在肠道与体内排泄时均可形成葡萄糖醛酸或葡萄糖结合产物,而形成硫酸酯结合产物则仅在体内排泄时发生。     

X射线辐射对阿帕替尼在大鼠体内代谢的影响

目的 用超高压液相色谱串联四级杆飞行时间质谱技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析方法鉴定辐射组和正常组大鼠体内阿帕替尼的代谢产物,探究X射线辐射对阿帕替尼体内代谢的影响。方法 将大鼠随机分成4组,辐射1组、辐射2组大鼠进行X射线腹腔照射,照射剂量为2 Gy,正常1组和正常2组大鼠不照射,照射完成后24 h, 4组大鼠均灌胃给予45 mg·kg^-1阿帕替尼。采集大鼠给药前和给药后的血浆、尿样和粪样。生物样品经固相萃取法处理后进行UPLC-Q-TOF-MS/MS分析,用Peakview和Metabolitepilot软件鉴定阿帕替尼的代谢产物。结果 在正常组大鼠体内检测到53个代谢产物,包括46个Ⅰ相代谢产物和7个Ⅱ相代谢产物。在辐射组大鼠体内发现64个代谢产物,包括54个Ⅰ相代谢产物和10个Ⅱ相代谢产物。在正常1组和辐射1组大鼠血浆中代谢产物无差异;与正常2组相比,辐射2组大鼠尿中增加了5个代谢产物,粪中增加了9个代谢产物。阿帕替尼在正常组大鼠体内的主要代谢途径包括氧化、N-脱烷基化、水解、脱氢化、氢化、硫酸酯化、葡萄糖醛酸化。与正常组相比,X射线辐射增加了...     

HPLC测定南五味子中的五味子酯甲和五味子甲素

目的 采用HPLC法测定南五味子中的五味子酯甲和五味子甲素.方法 采用Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);乙腈-四氢呋喃-水(12∶17∶51)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长220 nm,柱温35 ℃.结果 五味子酯甲和五味子甲素的线性范围分别为0.047～0.282、0.049～0.291μg(r=0.9999);平均加样回收率分别为103.0%、103.5%,RSD分别为1.0%、1.2%.结论 所建方法简便、重复性好,可用于测定南五味子中的五味子酯甲和五味子甲素.     

UPLC-Q-TOF-MS法鉴定五酯胶囊中化学成分和大鼠入血成分

目的 基于血清药物化学技术对五酯胶囊中成分和大鼠入血成分进行鉴定。方法 采用UPLC-Q-TOF-MS法对五酯胶囊成分组、给药组和空白组样品进行分析,通过MassLynx V4.1软件对所得图谱进行数据解析,对五酯胶囊中成分及其入血成分进行鉴定。结果 鉴定出五酯胶囊中15个化合物,其中五味子甲素含量最高。大鼠血清中含有五酯胶囊2个原型成分五味子酯丁、长南酸,筛选得到代谢物8个,主要以Ⅰ相代谢反应中的水解、氧化、去甲氧基化反应和Ⅱ相代谢反应中的葡萄糖醛酸化结合为主。结论 建立了五酯胶囊中活性成分和代谢产物的鉴定方法,为五酯胶囊的临床应用提供依据。     

鉴定大鼠注射绿原酸后体内的代谢产物

绿原酸为多种中药注射液的主要成分, 本文采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法 (UPLC/Q- TOF MS) 鉴定大鼠注射给予绿原酸后胆汁、尿、粪和血浆中的代谢产物。利用碰撞能量梯度 (MS^E) 和质量亏损过滤 (MDF) 技术, 在大鼠胆汁、尿、粪和血浆中共检测到35种代谢产物。胆汁中主要代谢产物为O-甲基绿原酸谷胱甘肽结合物, 其排泄量超过胆汁中全部代谢物的80%, 尿中主要为原形、O-甲基结合物、水解代谢产物及葡糖醛酸结合物, 粪中主要为O-甲基结合物及其半胱氨酸结合物, 血浆中主要为原形化合物。绿原酸及其代谢产物经尿和粪便排泄比例相近。实验结果表明, 绿原酸在大鼠体内代谢广泛, 主要途径之一是与谷胱甘肽结合, 提示绿原酸的烯酮双键具有亲电性, 可能与蛋白的巯基共价结合, 导致过敏性不良反应, 应予以关注。     

丹酚酸B在大鼠体内的代谢产物及代谢途径研究

目的 建立大鼠血浆、胆汁、尿液与粪便中丹酚酸B代谢产物的测定方法,并考察其代谢途径。方法 取SD大鼠18只,平分为灌胃和静注2组,每组再分成3个小组,分别采集血浆、胆汁、尿液及粪便,每小组2只大鼠分别单剂量灌胃（500 mg·kg^-1）和尾静脉注射（16.5 mg·kg^-1）给予丹酚酸B,另一只分别灌胃水和尾静脉注射生理盐水作为空白对照。采用高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（HPLC-Q-TOF-MS/MS）联用法测定血浆、胆汁、尿液与粪便中的丹酚酸B代谢产物,同时推断代谢途径。结果 根据一级质谱分子离子信息和二级质谱碎裂离子信息,在大鼠体内共发现8个丹酚酸B的代谢产物,其中胆汁、粪便中均含有这8个代谢产物,尿液中发现3个代谢产物,血浆中发现2个代谢产物。由丹酚酸B及其代谢产物结构推断丹酚酸B体内主要通过甲基化反应、酯键水解反应代谢。结论 建立的分析方法准确、灵敏、快速,符合生物样品分析要求,适用于大鼠血浆、胆汁、尿液与粪便中丹酚酸B代谢产物的分析,并分析鉴定了8个代谢产物。代谢实验结果表明,胆汁排泄是丹酚酸B最主要的排泄方式。     

清肝利胆口服液化学成分的鉴定及网络药理学法探讨其作用机制

目的：对清肝利胆口服液中的化学成分进行鉴定,探索其保肝利胆的作用机制。方法：采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS/MS）法鉴定清肝利胆口服液中所含的化学成分;利用TCMSP、TTD等数据库获得所得成分和疾病分别相对应的靶点信息;通过生物信息学技术富集涉及的相关通路及生物过程,并运用Cytoscape软件进行构图。结果：鉴定出清肝利胆口服液成分22种,成分作用靶点548个,疾病靶点454个,主要作用通路5条。结论：清肝利胆口服液中化学成分可以通过UPLC-Q-TOF-MS/MS法进行简便、快速定性分析,而其发挥保肝利胆的作用可能与抗炎、免疫调节、细胞色素P450代谢和血糖调节相关。     

液相色谱-质谱联用法同时测定生脉注射液中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1和五味子醇甲在健康人血浆的浓度

目的建立液相色谱-质谱联用法测定生脉注射液(心血管系统药)中人参皂苷Rg1、Re、Rb1和五味子醇甲在健康人血浆的浓度。方法血浆样品用乙腈沉淀法处理,用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测方法,检测人参皂苷Rg1、Re、Rb1和五味子醇甲。结果 Rg1、Re、Rb1和五味子醇甲的线性范围分别为0.64～509.000,.62～501.00,1.180～4725.00,0.10～153.00μg.L-1;定量下线分别为0.64,0.62,1.18,0.10μg.L-1;方法回收率分别为78.55%～91.65%7,8.57%～104.98%,79.62%～93.17%,82.50%～104.80%;日内、日间RSD值均小于15%。结论该法准确、灵敏、特异,适用于血浆中生脉注射液中4种成分浓度的同时测定。     

分散液相微萃取-HPLC测定五味子中五味子甲素和五味子酯甲

目的 采用有机液体分散液相微萃取对五味子药材提取液进行纯化富集,建立分散液相微萃取结合HPLC测定五味子甲素和五味子酯甲的含量。方法 分散液相微萃取以60 μL四氯化碳为萃取剂,供相pH为1,萃取4 min,以转速1500 r.min^-1离心2 min。在上述优化条件下,对五味子药材提取液进行萃取后,以C₁₈柱为固定相、甲醇-0.6%磷酸溶液（69：31）为流动相、检测波长254 nm进行色谱分析。结果 分散液相微萃取对五味子甲素和五味子酯甲的富集倍数分别为5112和1118,线性范围在0.10~19 μg·mL^-1之间,回收率分别为100.1%和94.4%。结论 本法灵敏度高、重现性好,简便、快速、环保,可用于五味子药材中五味子甲素和五味子酯甲的含量测定。     

Metabolites of isocorynoxeine in rats after its oral administration

This work presents the metabolites of isocorynoxeine (ICOR), which is one of four bioactive tetracyclic oxindole alkaloids isolated from Uncaria hooks used commonly in the traditional Chinese medicines and Kampo medicines. After oral administration of 40 mg kg^? 1 ICOR to rats, bile was drained and analyzed by LC-MS. Two phase I metabolites, namely 11-hydroxyisocorynoxeine (M1) and 10-hydroxyisocorynoxeine (M2), and two phase II metabolites, namely 11-hydroxyisocorynoxeine 11-O-β-d-glucuronide (M3) and 10-hydroxyisocorynoxeine 10-O-β-d-glucuronide (M4), were isolated from rat excreta and bile, respectively, whose structures were elucidated on the basis of CD, NMR, and MS.     

通过式固相萃取结合UPLC-MS/MS同时检测水产品中麻醉剂及其代谢物残留

目的 建立通过式固相萃取净化-超高效液相色谱串联质谱技术同时检测水产品中多种麻醉剂及其代谢物的方法。方法 样品均质后,使用80%乙腈水溶液提取,使用ProElt PLS-A通过式固相萃取柱进行通过式净化。以0.1%甲酸水和0.1%甲酸乙腈为流动相按比例进行梯度洗脱,使用正离子模式。采用质谱多重反应监测模式,空白基质绘制标准曲线定量。结果 14种麻醉剂及其代谢物中,麻醉剂在1~50 µg·L^-1内呈现良好的线性关系,代谢物在10~500 µg·L^-1内均呈现良好的线性关系,相关系数均>0.99,其中麻醉剂药物检出限为0.5 µg·kg^-1,代谢物检出限为5 μg·kg^-1,麻醉剂药物定量下限为1 µg·kg^-1,代谢物定量下限为10 µg·kg^-1。方法高、中、低浓度加样回收率为62.48%~116.5%,RSDs均<10%。结论 该方法操作流程简便,结果准确可靠,可用于水产品中麻醉剂及其代谢物的检测。     

异欧前胡素在大鼠体内代谢产物的UHPLC-HRMS鉴定分析

目的 分析鉴定异欧前胡素在正常大鼠体内的代谢产物。方法 大鼠灌胃给药后,收集正常组和给药组大鼠的血浆、尿液和粪便样本,并以固相萃取柱提纯生物样品。采用UHPLC-HRMS(Q-Exactive Orbitrap MS)高分辨质谱对生物样品进行分析,并对代谢产物筛选鉴定。结果 在正、负离子模式下,根据所获得的精确分子质量、色谱保留行为、质谱裂解规律、特征碎片离子、对照品比对以及文献报道,最终分析鉴定了32个代谢产物。其代谢途径主要包括呋喃环开环、内酯水解、氧化、甲基化、葡萄糖醛酸化、硫酸酯化以及它们的复合反应。其中,葡萄糖醛酸化产物为首次发现。结论 本研究较为全面地阐明了异欧前胡素在正常大鼠体内的代谢转化情况,可为其进一步的药效学研究提供依据,并为呋喃香豆素类物质的代谢产物分析提供借鉴。