胎儿主动脉肾神经节小强荧光(SIF)细胞超微结构研究

目的 :研究人小强荧光细胞超微结构 ;方法 :荧光组化法和透射电镜技术 ;结果 :小强荧光细胞的超微结构与主神经元有较大区别 ,其胞核可见较多异染色质团块 ,胞质中有丰富的线粒体 ,并有大量膜被致密芯小泡 ,直径约为 5 0～ 2 0 0nm。小泡为圆形椭圆形和长杆状 ;结论 :小强荧光细胞胞质中含有的致密芯小泡可能为分泌颗粒     

小强荧光细胞在大鼠耳神经节的分布特点

用醛诱发荧光法观察了不同年龄组大鼠计２４例耳神经节的小强荧光细胞，发现９例耳神经节无ＳＩＦ细胞，１５例有４－２９２个ＳＩＦ细胞。ＳＩＦ细胞的有和多少与年龄、侧别、性别无关，但与神经节主细胞数量有关。认为耳神经节ＳＩＦ细胞的分布有其特殊性，细胞的数量可能取决于神经节的发生、发育状况。     

小强荧光细胞小节与小强荧光细胞小团的观察比较

本文以荧光组化法结合ＨＥ复染对比观察小强荧光细胞小节和小强荧光细胞小团，发现小强荧光细胞小节有单独的血管，神经供应、小节内有大量窦状毛细血管、外包以完整的被膜，与周围主节神经元隔开，形成一个具有较完善结构的小器官；而小强荧光细胞小团仅是小强荧光细胞的简单聚集。结果显示小强光细胞小节并非仅是巨大的小强荧光细胞小团，而是小强荧光细胞一种的的存在形式。     

人肠系膜下神经节小强荧光细胞超微结构观察

小强荧光 (ＳＩＦ)细胞是近年来神经细胞学基础理论研究的热点问题[1] ,然而人类ＳＩＦ细胞的资料甚少[2 ] ,关于人类ＳＩＦ细胞的超微结构 ,国内尚无报道。本文旨在填补这方面的空白 ,为人类ＳＩＦ细胞的研究积累资料。1　材料和方法取 32ｗｋ胎儿新鲜尸体肠系膜下神经节 (ＩＭＧ) ,固定于 2 %戊二醛和 2 5 %多聚甲醛的二甲砷酸缓冲液 (ｐＨ7 2 )内。数小时后在ＡＯ恒冷切片机做全节连续切片。片厚 5 0 μｍ。将切片再以上液固定 ,然后于荧光显微镜下经紫外线照射激发荧光以观察定位ＳＩＦ细胞。修剪定位ＳＩＦ细胞的切片及含ＳＩＦ细胞的…     

大鼠颈上神经节胺类贮存细胞的荧光组化和超微结构细胞化学的研究

本研究用乙醛酸荧光组化方法和改良的嗜铬反应电镜细胞化学技术对大鼠颈上神经节的胺贮存细胞进行了研究。用乙醛酸处理后,在大部分主神经元和小强荧光(SIF)细胞观察到指示儿茶酚胺(CA)可能主要是肾上腺素(NA)存在的特异绿色荧光。SIF 细胞常以小群分布,并多数紧靠毛细血管。主神经元的荧光从弱到中等强度,而 SIF 细胞荧光极强,并观察到肾上腺素能细胞突起的荧光膨体网。用利血平处理动物之后,主神经元的 NA 特异荧光显著减弱,表明非颗粒的 NA 更易为利血平所消耗。由特异的嗜铬反应电镜细胞化学技术揭示了主神经元含有散在的小致密芯小泡。根据我们的荧光组化和超微结构观察,存在两种类型的 SIF 细胞,它们在形态学上与 Williams 提出的Ⅰ型 SIF 细胞相当于中间神经元和Ⅱ型 SIF 细胞是内分泌机能的细胞相一致。对它们的机能意义和所含的化学物质进行了讨论。     

丹参酮ⅡA对豚鼠交感椎前神经节细胞膜电位的影响

丹参酮ⅡＡ对豚鼠交感椎前神经节细胞膜电位的影响裴文芬孔德虎鄢顺勤黄振信马如纯（安徽中医学院合肥２３００３８）关键词：丹参酮ⅡＡ;交感椎前神经节细胞;膜电位;豚鼠中药丹参具有多种功效而被广泛应用于临床。关于其活血化瘀、扩张血管、降低血压、改善心脏...     

荧光金逆行标记乳鼠视网膜神经节细胞的实验研究

目的建立荧光金逆行标记乳鼠视网膜神经节细胞的方法。方法选取出生1 d的SD大鼠乳鼠,腹腔注射水合氯醛麻醉后,剪开头部皮肤,向双侧上丘各注射4%荧光金注射液1μl,缝合皮肤,4 d后处死,提取视网膜,胰酶消化后培养,显微镜下观察被标记的视网膜神经节细胞。结果混合培养的视网膜细胞中,可见被荧光金标记的视网膜神经节细胞,大约占细胞总数的0.34%,视网膜神经节细胞可存活3周。结论荧光金逆行标记乳鼠视网膜神经节细胞是一种可行的方法,可用于视网膜神经节细胞的鉴定。     

荧光标记法检测神经节细胞轴突再生

目的：检测神经节细胞轴突在坐骨神经移植到视网膜后的再生。方法：荧光染料粒兰施于移植坐骨神经逆行荧光标记后，在荧光显微镜下观察视网膜神经节细胞。结果：在移植坐骨神经的诱导下，视网膜神经节细胞受损的轴突可以再生长入到该移植段内。结论：荧光标记法对检测神经再生，是一种有价值的方法     

Muller细胞诱导视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化

目的研究Muller细胞在视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化中的作用。方法分离培养Muller细胞和不同时期的胚胎视网膜前体细胞,将其与Muller细胞共同培养,并进一步用Muller细胞条件培养液来诱导视网膜前体细胞的分化。倒置相差显微镜每天观察细胞的生长和分化情况,Thy1.1标记视网膜神经节细胞并计数。结果视网膜前体细胞能分化为多种视网膜细胞类型,包括视网膜神经节细胞。不同时期、不同培养条件下的视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化的百分比不同。单独培养组、共同培养组和Muller细胞条件培养液组视网膜神经节细胞的百分比,E14分别为(16.91±4.05)%,(47.25±9.67)%和(42.36±10.52)%,E18则分别为(4.65±1.88)%,(9.90±3.19)%和(8.69±3.01)%。相同时期的视网膜前体细胞,共同培养组和Muller细胞条件培养液组视网膜神经节细胞的百分比较单独培养组高,差异有统计学意义。相同培养条件下,E14视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化的百分比较E18高,差异有统计学意义。结论Muller细胞能诱导视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化,可能通过Muller细胞释放某些可溶性因子发挥作用。     

腹腔椎前神经节突触传递的研究进展

<正> 自1955年R.M.Eccles首先从离体兔颈上神经节记录细胞内电位以来,交感神经电生理研究取得引人注目的进展。近年已探明椎前神经节中存在多种突触电位成份和多种神经肽免疫反应性,有些多肽有递质样作用,椎前节既从脊髓节前神经元又从外周效应器官接受冲动传入,发挥了反射中枢和整合中枢功能。这些发现丰富了交感神经突触     

胎儿胃、小肠内分泌细胞的分布及形态学观察

目的探讨胎儿胃、小肠内分泌细胞的分布。方法采用银浸染色方法，对12例胎儿的胃、小肠内分泌细胞行光学显微镜观察。结果胃、小肠中的内分泌细胞（嗜银细胞）呈锥体形、柱形、圆形、梭形、不规则形等。在小肠固有膜结缔组织中有散在的嗜银细胞。该细胞主要分布于小肠绒毛上皮、小肠腺及十二指肠腺，胃部较少，其中以十二指肠最多，空肠、回肠顺次递减，而十二指肠乳头又明显高于十二指肠其他部位，在这些部位有时可见该细胞抵达腺腔，并有颗粒释放于腺腔内。结论胎儿胃肠道含有内分泌细胞，其形态多样，主要分布于小肠及十二指肠乳头部。     

肝细胞癌上皮细胞白蛋白和CK7的表达

目的 探讨人类肝癌肝组织是否存在小上皮细胞（small epithelial cell,SEC),这类细胞是否表达白蛋白CK7抗体,对30例人肝细胞肝癌的手术标本材料作免疫组化染色,对其中10例作超微结构观察和白蛋白及CK7的免疫电镜标记。结果 30例中有20例在肝癌肿瘤边缘和增生的小胆管发现有少量SEC。这类细胞既表达白蛋白,又表达CK7。电镜下,这类SEC体积较小,核大,胞质少胞质内主要为游离核糖体,并有胞质内张力微丝及细胞间连接结构。免疫电镜下,10例中有5例可显示在同一SEC同时表达白蛋白和CK7。结论 人肝细胞癌肝中确实存在SEC。这类SEC具有与人肝母细胞瘤和胆道闭锁肝组织中的SEC一样的形态和免疫表型特点。     

小肠俞募穴与小肠特异性联系通路的荧光双标法研究

目的：探求小肠俞募穴与小肠之间的神经联系通路。方法：应用荧光双标法进行研究。结果：小肠俞－小肠组、关元－小肠组分别在L1－L4、T13－T3脊神经节内出现双标细胞。结论：（1）脊神经节中存在可双重支配小肠和体表的神经元，不仅使牵涉痛的机制得到进一步的解释，而且揭示了针刺穴位的感觉冲动是通过分支的传入轴突影响到内脏的功能和感觉或对某些脏器的活动产生影响。（2）为临床应用小肠俞募穴治疗肠病提供了形态学理论根据。（3）进而揭示中医经络学中气街可能的现代生物学本质。     

携绿色荧光蛋白和调控元件的人胰岛素原基因在HepG2细胞的表达

目的 研究含绿色荧光蛋白(GFP)和人胰岛素原基因的逆转录病毒表达载体在HepG2细胞中的表达. 方法 将IRES-EGFP片段克隆到含调控元件的人胰岛素原基因逆转录病毒表达载体(pLXSN-GI-Ins)中,构建得到表达质粒pLXSN-GI-Ins-EGFP,经脂质体介导转染HepG2细胞后,各孔分别加入含有不同浓度葡萄糖的培养液继续培养24 h,在荧光显微镜下观察GFP基因的表达,检测细胞上清液中的胰岛素值及考察细胞中胰岛素mRNA的表达量. 结果 成功构建逆转录病毒表达质粒pLXSN-GI-Ins-EGFP.转染HepG2细胞后48 h,葡萄糖浓度为4.0,12.0,24.0 mmol/L,表达GFP基因的细胞数目占总细胞数目的 比值分别为(4.00±0.15)%,(10.00±0.07)%,(25.00±0.10)%;胰岛素分泌量分别为(4.05±0.82),(8.67±0.62),(30.70±1.55)mU/L,不同葡萄糖浓度诱导的胰岛素mRNA表达量明显不同. 结论 含GFP和调控元件的人胰岛素原基因逆转录病毒表达载体能够在HepG2细胞中成功表达,并且GFP基因的表达量反映了人胰岛素的分泌量.     

生物荧光探剂对人食管癌细胞(ECa109)杀伤作用的观察

本文采用 ECal09细胞体外培养微孔板法,观察了廿余种生物荧光探剂对细胞的瞬时杀伤作用,结果表明其中21、22、23、24、25号药物在浓度100μg/ml 作用时间4h 时,杀伤率在88.4±10.0～99.0±1.0%之间。观察对细胞增殖的抑制作用,结果显示药物浓度100μg/ml作用时间3h 时,7、9、15号药物可使细胞数明显减少,形态改变,停止分裂。21、22、23、24、25号药物当浓度50μg/ml 时仍具抑制作用,尤以23、24号作用最强。对药物作用后的 ECa109细胞又进行了荧光显微镜观察,发现其中酯化衍生物能进入活细胞内,在荧光显微镜下显示强绿荧光,而部分损伤细胞,荧光强度明显减弱,死细胞则无荧光。     

腺病毒介导的人内皮型一氧化氮合酶基因和增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达

目的:研究腺病毒载体介导人内皮型一氧化氮合酶(human endothelial nitric oxide synthase,heNOS)和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)在体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)的表达。方法:体外培养、扩增大鼠骨髓间充质干细胞,并对培养的细胞进行成骨、成脂肪诱导分化和细胞免疫表型鉴定;用Pme I线性化后去磷酸化的pShuttle-heNOS-EGFP转化含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态BJ 5183,使其在细菌内发生同源重组,获得阳性重组质粒pAdEasy-heNOS-EGFP。重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定正确后经PacⅠ酶切,转入AD 293细胞,包装成重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP。用重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP对MSCs进行转染,并用荧光显微镜及免疫荧光染色法观察转染细胞内EGFP和heNOS蛋白质的表达。结果:pShuttle-heNOS-EGFP与pAdeasy-1在BJ 5183中成功地发生了同源重组,得到了重组腺病毒质粒pAdEasy-heNOS-EGFP。重组质粒在AD 293细胞中包装成重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP。经基因转染的MSCs中高表达heNOS和EGFP。结论:采用腺病毒载体可以将外源性的heNOS基因转染至MSCs中,并得到有效表达,且携带的EGFP标记可以直观地检测靶细胞感染和外源基因的表达情况,这将为勃起功能障碍的细胞治疗提供一条新的途径。     

大鼠交感神经节生长抑素样免疫反应的光镜和电镜研究

本文借助免疫细胞化学,用光镜和电镜观察了生长抑素样免疫反应在大白鼠交感神经节的分布。结果证明:生长抑素样免疫反应产物在光镜下定位于颈上神经节和腹腔神经节主细胞核周质,前者阳性细胞占主细胞总数的23.3％,后者占37.5％。电镜下定位于颈上神经节主细胞核周质粗面内质网、线粒体外膜、突触囊泡周围和毛细血管内皮细胞浆内。     

极小胚胎样干细胞在再生医学中的研究进展

再生医学的发展为治疗受损或衰竭的实质器官提供了一种新的治疗方法,在临床上具有广阔的应用前景。近年来,有研究者从成体组织中分离得到一些数量稀少的极小胚胎样干细胞(VSEL-SCs),VSEL-SCs具有独特的生物学特性,能够表达多能干细胞及原始生殖细胞的标志物,且具有向三胚层分化的潜能。目前,研究者认为VSEL-SCs在受损组织的再生修复和成体组织的更新过程中发挥着重要作用。