Effect of growth hormone on features of IGF-Ⅰ-Ⅱ-IGFBP3 pathway in pancreatic cancer

Objective To investigate the effect of GH on proliferation of pancreatic cancer cells and observe the features of IGF-IGFBP3 pathway in the host after GH administration. Methods Pancreatic cancer cells (SW-1990,PANC-1 and P3) during exponential growth stage were harvested and cultured in medium containing growth hormone (50 ng/ml). After 24, 48 and 72 hours, cells were counted using a Coulter Counter. Thirty-five Athymic nude Balb/c mice were inoculated with SW-1990cells. When tumors became palpable after inoculation, animals were randomized to receive GH points (1 h, 2 h, 6 h, 24 after the last injection), plasma samples were gathered for subsequent ELISA determination and liver was rapidly incised for immune blotting analysis. Results The results revealed that GH stimulated cell growth in vitro. GH elevated levels of IGF-Ⅰ , Ⅱ at the 1st , 2nd , 6th hour after the last injection. GH augmented the expression of IGFBP3 in the liver of the host in vivo (1 h, 2 h, 6 h, 24 h, respectively). Conclusion Such proteins as IGF- Ⅰ and Ⅱ might be associated with mechanism of last effect of GH on tumor host. The up-regulation of IGFBP3 by GH administration in the host may help to explain the phenomena that GH doesn't accelerate growth of pancreatic tumor in vivo.     

生长激素对胰腺癌IGF-Ⅰ,Ⅱ-IGFBP3通路动态影响的实验研究

目的 观察生长激素(GH)对胰腺癌细胞增殖及对肿瘤宿主胰岛素样生长因子Ⅰ,Ⅱ(IGF-Ⅰ,Ⅱ)-胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)通路的影响,初步探讨体内外实验差异的原因.方法 体外应用GH(50 ng/ml)24 h,48 h,72 h后计数胰腺癌细胞SW-1990,PANC-1及P3;选用BALB/C雌性裸小鼠35只,以SW-1990成瘤,测量瘤体积,成瘤裸鼠随机分为注射GH的实验组(GH组)及对照组(NS组),荷瘤裸鼠在最后依次注射GH后第1小时、2小时、6小时及24小时处死动物,心室穿刺抽血,切除肝脏,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IGF-Ⅰ,-Ⅱ水平(P＜0.05),蛋白印记(Western Blot)方法观察肝脏IGFBP3的相对光密度(ROD)变化.结果 GH在体外可加速胰腺癌细胞增殖但在体内不促进肿瘤生长;GH上调荷瘤宿主血清IGF-Ⅰ、Ⅱ水平;与GH刺激前(NS)相比,肝脏IGFBP3表达在GH刺激后1 h、2 h、6 h有显著提高(P＜0.05),24 h有所减弱.结论 GH对胰腺癌细胞的作用存在一定的体内外差异;GH在体内通过提高IGF-Ⅰ、Ⅱ水平发挥效应,GH不刺激在体肿瘤生长可能与IGFBP3上调有关.     

IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR及IGFBP-3在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 :检测IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR、IGFBP-3在结直肠癌中的表达,探讨其表达在结直肠癌的早期诊断中的价值。方法:应用免疫组织化学SP法分别检测结直肠癌、结直肠腺瘤、炎性息肉及正常结肠黏膜组织中IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR、IGFBP3的表达情况。结果:1)IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR、IGFBP-3在结直肠癌组织中表达的阳性率均高于结直肠腺瘤、炎性息肉和正常组织,且具有统计学意义(P<0.05);2)IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR、IGFBP-3在炎性息肉和管状腺瘤、混合型腺瘤及绒毛状腺瘤中表达阳性率依次增高,但差异无统计学意义(P>0.05);3)IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR、IGFBP-3与患者的年龄、性别、吸烟情况、有无饮酒史及肿瘤家族史等指标之间均无统计学意义(P>0.05);4)IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR、IGFBP-3间的表达呈正相关。结论:结直肠癌患者血清IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR、IGFBP-3水平明显升高可能与结直肠癌的发生相关。     

IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ及IGF-ⅠR在前列腺癌中的表达和意义

目的 研究Ⅰ型胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)、Ⅱ型胰岛素样生长因子(IGF-Ⅱ)和胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-IR)在中国患者前列腺癌组织中的表达情况及其与前列腺癌生物学行为的关系.方法 应用免疫组织化学法检测IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ和IGF-1R在良性前列腺增生及前列腺癌组织中的表达情况,实验所得数据用SPSS 12.0统计软件处理.计数资料采用直接概率法和四格表x2检验,当n＞40 fH有1≤T＜5时,用校正的卡方检验,P＜0.05为差异有显著性的标准.Spearman等级相关方法分析免疫组化结果与临床病理因素的关系.结果 IGF-Ⅰ在良性前列腺增生和前列腺癌组织中的阳性表达率分别为26.67%(8/30)、65.12%(28/43)(P＜0.05);IGF-Ⅱ在良性前列腺增生和前列腺癌组织中的表达率分别为36.67%(11/30)、72.09%(31/43)(P＜0.05);IGF-IR在良性前列腺增生和前列腺癌组织中的表达率分别为:43.33%(13/30)、79.07%(34/43)(P＜0.05).结论 IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR与前列腺癌的发生相关,IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ与前列腺癌的发展呈正相关,IGF-ⅠR与前列腺癌的发展不相关.     

非糖尿病肾病病人肾小球性蛋白尿与血清及尿液IGF-Ⅰ之间关系的研究

目的:检测非糖尿病肾病(NDN)病人血清和尿液中胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的浓度,探讨IGF-Ⅰ与肾小球性蛋白尿定量之间的关系.方法:将24例肾小球性蛋白尿的NIDN病人分为两组:尿蛋白定量3.5～6.5 g/24 h 12例为实验1组,尿蛋白定量2.0～3.4 g/24 h 12例为实验2组;同时选12例年龄和性别相同的健康人作为对照组.两实验组和对照组行血清和尿液IGF-Ⅰ、血清胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)的检测,并测定肾小球滤过率(GFR)、双肾彩色B型超声检查;两对照组病人做肾活检.结果:24例病人血清IGF-Ⅰ降低,尿液IGF-Ⅰ升高,分别与24 h尿蛋白定量呈负相关(r=-0.876,P＜0.001)和正相关(r=0.897,P＜0.001),与对照组比较均具有显著性差异(P均＜0.001);实验1组与实验2组比较尿蛋白定量和尿液IGF-Ⅰ含量明显增加(t=7.09,P＜0.001),而血液中IGF-Ⅰ/d的含量明显降低(t=3.71,P＜0.001).结论:如同糖尿病性肾病,NDN病人血清IGF-Ⅰ水平随蛋白自尿中排泄量增加而降低,尿液中IGF-Ⅰ的含量随蛋白自尿中排泄增加而增加,是NDN病人低IGF-Ⅰ血症的原因之一.     

生长激素促进烫伤鼠肝、创面组织胰岛素样生长因子-Ⅰ及其结合蛋白-3 mRNA的表达

目的　研究重组生长激素 (rhGH)在促进创面愈合过程中对烫伤大鼠肝、创面组织胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ ) /胰岛素样生长因子结合蛋白 3(IGFBP 3)mRNA表达的影响。方法制作大鼠深Ⅱ度烫伤模型 ,每日早上 9点皮下注射rhGH 0 .3IU/d ,疗程 1 0d。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测肝、创面组织IGF Ⅰ /IGFBP 3mRNA表达 ;酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测血IGF Ⅰ /IGFBP 3浓度 ;免疫组织化学检测Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。结果　用rhGH治疗 1 0d ,烫伤大鼠肝、创面组织IGF Ⅰ /IGFBP 3mRNA的表达、血IGF Ⅰ的水平较对照组明显升高 (P <0 .0 1 ) ;Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量较对照组明显增多 (P <0 .0 1 ) ;而创面愈合时间平均提前 3d。结论　rhGH可通过增加肝、创面组织IGF Ⅰ /IGFBP 3mRNA的表达 ,促进创面愈合。     

血清IGF-1和IGFBP-3检测在前列腺癌和前列腺增生诊断中的临床意义

目的 :探讨胰岛素样生长因子 1(IGF 1)、胰岛素样生长因子结合蛋白 3(IGFBP 3)对前列腺癌 (PCa)早期诊断的临床意义。方法 :采用免疫放射分析法 (IRMA)检测 32例PCa、33例良性前列腺增生 (BPH)患者和 18例健康人血清IGF 1、IGFBP 3水平。结果 :PCa组血清IGF 1为 (4 89.9± 171.9) μg/L ,明显高于BPH组 (2 81.2±70 .4 ) μg/L和健康组 (2 5 9.6± 6 4 .8) μg/L ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ,BPH组与健康组比较差异无统计学意义(P >0 .0 5 )。PCa组血清IGFBP 3为 (6 8.1± 12 .6 ) μg/L ,明显高于BPH组 (5 1.1± 8.8) μg/L和健康组 (4 8.9± 8.1)μg/L ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ,BPH组与健康组比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :IGF 1、IGFBP 3有可能成为临床上检测PCa的新的瘤标。     

IGF-Ⅰ受体反义寡核苷酸对胰腺癌生长的抑制作用

目的　观察 Ｉ Ｇ ＦⅠ受体反义寡核苷酸对胰腺癌细胞生长的抑制作用,为反义核酸疗法在胰腺癌外科综合治疗提供依据。 方法　以免疫组织化学 Ｓ Ｐ法检测 Ｉ Ｇ Ｆ１ 受体在体外培养的胰腺癌细胞系 Ｓ Ｗ１９９０ 的表达;用脂质体包裹合成的 Ｉ Ｇ ＦⅠ受体反义寡核苷酸（ Ａ Ｓ Ｏ Ｎ） 与 Ｓ Ｗ１９９０ 细胞共培养,并接种于裸鼠体内,观察细胞增殖情况。 结果　 Ｓ Ｗ１９９０ 细胞高表达 Ｉ Ｇ ＦⅠ受体,经上述处理细胞增殖抑制率达到８００ ％ ; Ｉ Ｇ ＦⅠ受体表达抑制率为８３９ ％ 。对照组裸鼠体内全部出瘤（１０／１０ ,１００ ％ ） ,处理组出瘤率为２０ ％ （２／１０） ,二者差异有显著意义（ Ｐ＜ ００１） 。 结论　 Ｉ Ｇ ＦⅠ受体反义寡核苷酸可显著抑制胰腺癌细胞系 Ｓ Ｗ１９９０ 在体外及体内的生长,其作用是经抑制受体表达所介导。     

血清IGF-1、IGFBP-3在规律血液透析患者中的表达水平及其与骨骼肌萎缩的关系

目的:研究血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在规律血液透析患者中的表达水平,并分析其与骨骼肌萎缩的关系。方法:将眉山市彭山区人民医院2017年6月至2019年6月收治的113例慢性肾脏病(CKD)5期规律透析患者纳为研究对象,根据英国医学研究委员会肌力评定法评分(MR...     

胰岛素样生长因子mRNA结合蛋白3在胰腺癌中的表达 及意义

目的:探讨胰岛素样生长因子m RNA结合蛋白3(IMP3)在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:用免疫组化法检测126例胰腺癌组织以及12例正常胰腺组织中的IMP3表达,分析IMP3表达与胰腺癌患者临床病理因素及预后的关系。结果:胰腺癌组织中IMP3的阳性表达率明显高于正常胰腺组织(93.65%vs.0.00%,P0.000)。IMP3的表达水平与胰腺癌患者的肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤侵袭深度、TNM分级有关(均P0.05);IMP3高表达患者的中位生存时间明显低于IMP3低表达患者(9.5个月vs.17.8个月,P=0.000)。结论:IMP3在胰腺癌组织中表达率增高,且其表达水平与胰腺肿瘤的发生、发展密切相关,IMP3高表达患者预后不良。     

胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3对胆囊癌迁移侵袭的影响

目的探究胰岛素样生长因子Ⅱ(insulin-like growth factorⅡ,IGF-Ⅱ)mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)对胆囊癌迁移侵袭的作用。方法应用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测23份胆囊癌组织和23份癌旁组织中IGF2BP3的表达水平;在胆囊癌细胞中利用小干扰RNA(siRNA)敲减目的基因IGF2BP3;Transwell迁移实验与带胶Transwell侵袭实验检测敲减IGF2BP3后对胆囊癌细胞迁移侵袭能力的影响;细胞免疫荧光法检测敲减IGF2BP3后上皮细胞间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达水平变化。结果 IGF2BP3在胆囊癌组织中高表达(P0.05);与正常胆管上皮细胞比较,5株胆囊癌细胞系中IGF2BP3高表达;敲减IGF2BP3后,胆囊癌细胞系的迁移侵袭能力明显降低(P0.0001);敲减IGF2BP3后EMT相关蛋白表达水平下调。结论 IGF2BP3通过促进EMT,从而促进胆囊癌侵袭转移。     

IGF-2、IGFBP-3在胎儿生长受限患者胎盘组织中的表达及其临床意义

目的 分析胎儿生长受限(FGR)患者胎盘组织中胰岛素样生长因子-2(1GF-2)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)表达情况,并探讨其临床意义.方法 回顾性分析2017年12月至2019年12月本院经超声确诊FGR并住院分娩的110例患者(FGR组)的临床资料,另选择同期正常单胎足月分娩的孕妇110例为对照组...     

IGF-1、IGF-bp-3在去势大鼠阴茎海绵体中的表达及其意义

目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGF-BP-3)在去势大鼠阴茎海绵体中的表达及其意义。方法取16只成年雄性大鼠随机分为去势组、对照组。1周后取阴茎海绵体, 比色法测定阴茎海绵体一氧化氮(NO)含量(ΜG／G);原位细胞凋亡标记检测细胞凋亡数;逆转录多聚酶链聚合反应检测IGF-1、IGF-BP-3MRNA表达。结果 IGF-1MRNA在对照组中表达(1．44±0．29)而在去势组未检测到表达。IGF-BP-3MRNA在去势组表达量(3．52±1．4)较对照组(1．10±0．51)升高(P<0．01)。去势组阴茎海绵体细胞凋亡数(26．02±5．25)较对照组(12．51±1．81)高(P<0．05);凋亡细胞积分光密度去势组(33931．54±2459．36)较对照组(18766．37±3040．42)高(P<0．05)。去势组阴茎海绵体 NO浓度(14．45±2．38)较对照组(39．8±3．28)显著降低(P<0．01)。结论去势1周后阴茎海绵体细胞发生凋亡。去势后阴茎海绵体细胞凋亡可能与IGF-1MRNA表达降低及IGF-BP-3MRNA表达增高有关。     

不同配方肠外营养对肝硬化大鼠生长激素/胰岛素样生长因子-1轴的影响

目的探讨不同配方肠外营养对肝硬化大鼠肝部分切除术后生长激素/胰岛素样生长因子-1轴的影响。方法正常大鼠作为对照组,肝硬化大鼠随机分为肝硬化术前组,肝硬化肝部分切除术后1 d组,术后行Novamin肠外营养5 d组,术后行Hepa肠外营养5 d组,各组n=6。测大鼠肝功能、血糖及血清GHI、GF-1I、GFBP-3水平,用RT-PCR法检测肝ALBmRNAI、GF-1 mRNA、IG-FBP-3mRNA的表达,肝组织行Ki67免疫组化染色。结果Hepa组肠外营养5 d后血清ALT、ALP、GH分别为(103±23)IU/L(、571±92)IU/L、(1.55±0.12)ng/ml,均比Novamin组明显降低,而血清IGF-1I、GFPB-3分别为(966.4±54.7)ng/ml(、6.9±0.2)ng/ml,均明显升高,肝ALBmRNA、IGF-1mRNAI、GFBP-3mRNA表达水平分别为(1.24±0.06)、(0.85±0.00)、(0.69±0.02),也明显升高,但肝Ki67指数(4.8%±0.3%vs 4.4%±0.4%)却无显著性差异。血清IGF-1I、GFPB-3与血清AST、ALT、ALP水平呈负相关,与血清ALB呈正相关。结论肝硬化大鼠不同配方肠外营养均可反映在生长激素/胰岛素样生长因子-1轴的变化,检测血清IGF-1,IGFBP-3水平有助于营养素的选择。     

miR-4783-3p在肝癌组织中的表达及对肝癌细胞增殖和迁移的影响

目的研究miR-4783-3p在肝癌组织中的表达及对肝癌Huh-7细胞增殖及迁移产生的影响。方法采用cBioPortal数据库分析肝癌组织和癌旁组织中miR-4783-3p的表达, 严格按照Lipofectamine? 2000转染试剂盒说明书, 分别将miR-4783-3p过表达模拟物或过表达对照模拟物转染至Huh-7细胞, 即过表达组和对照组。通过CCK-8实验分析Huh-7细胞增殖情况, 细胞划痕法分析Huh-7细胞迁移情况。双荧光素酶报告基因法检测miR-4783-3p与胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)mRNA的靶向关系。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测IGFBP2mRNA的表达。Western-blotting检测IGFBP2蛋白和EGFR-STAT3分子通路蛋白的表达。正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示, 组间比较采用t检验或单因素方差分析。结果肝癌组织中miR-4783-3p的表达明显低于癌旁组织(P<0.01)。与对照组比较, 过表达组Huh-7细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。对照组和过表达组中Huh-7细胞划痕愈合率...     

小鼠围术期神经认知障碍时海马miR-3065-5p与IGF-1/PI3K/Akt信号通路的关系

目的评价小鼠围术期神经认知障碍(PND)时海马miR-3065-5p与胰岛素样生长因子-1/磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(IGF-1/PI3K/Akt)信号通路的关系。方法清洁级健康雄性C75BL/6小鼠80只, 12～14周龄, 体质量20～30 g, 采用随机数字表法分为4组(n=20):对照组(C组)、PND组、miR-3065-5p激动剂组(Ag组)和miR-3065-5p激动剂阴性对照组(Ag-NC组)。采用吸入1.5%异氟烷麻醉下胫骨骨折髓内固定术制备小鼠PND模型。于术前2 d, Ag组侧脑室注射miR-3065-5p agomir 2 μl, Ag-NC组注射miR-3065-5p agomir阴性对照2 μl。于术后7 d时行Morris水迷宫实验和旷场实验, 测试结束后麻醉处死取海马组织, 采用qRT-PCR法检测miR-3065-5p、IGF-1 mRNA和Bcl-2 mRNA的表达水平, 采用Western blot法检测IGF-1、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)和Bcl-2的表达水平。结果 4组旷场实验各指...