用胆红素氧化酶两点法测定血清直接胆红素

用胆红素氧化酶两点法测定血清直接胆红素瞿卫（南京市第一医院检验科，南京２１０００６）张瑞生，任宏英（南京市临床检验中心）在不同ｐＨ条件下，胆红素氧化酶（Ｂｉｌｉｒｕｂｉｎｏｘｉ－ｄａｓｅ，ＢＯＤ）催化各种胆红素的氧化反应不同。在ｐＨ８．０～８．２时，...     

胆红素氧化酶消除血清肌酐测定中胆红素的干扰

为消除肌酐测定中血清胆红素干扰，采用由卫生部临床检验中心提供的高纯度胆红素氧化酶（ＢＯＸ）和苦味酸试剂，设计了在ＣＯＢＡＳＦＡＲＡ－ＩＩ型全自动生化分析上检测肌酐的新方法，仅需样品８μｌ，ＢＯＳ８μｌ，苦味酸剂８０μｌ，在１９０秒钟就可完成反应。本法操作简单，标本也不需要作人工预处理，是肌酐测定消除胆红素干扰比较理想的方法。     

胆红素氧化酶消除血清肌酐测定中胆红素的干扰

为消除肌酐测定中血清胆红素干扰，采用由卫生部临床检验中心提供的高纯度胆红素氧化酶（ＢＯＸ）和苦味酸试剂，设计了在ＣＯＢＡＳＦＡＲＡ－Ⅱ型全自动生化分析上检测肌酐的新方法，仅需样品８μｌ，ＢＯＸ８μｌ，苦味酸试剂８０μｌ，在１９０秒钟就可完成反应，所得结果表明，用该法对７５份总胆红素在０～６１６μｍｏｌ／Ｌ的标本进行检测，可以有效的消除胆红素对肌酐测定时的干扰。而且结果准确可靠，回收试验，黄疸血清标本用原法回收率仅为４９％～７１％，而用本法回收率可达９４％～１０５％。本法的重复性也较好，批内变异系数（ＣＶ）为２．８％～１２．７％，批间ＣＶ为１４．０％。本法操作简单，标本也不需要作人工预处理，是肌酐测定消除胆红素干扰比较理想的方法。     

除蛋白速率法测定高胆红素血浆中肌酐

苦味酸速率法测定肌酐时，高胆红素血浆使结果明显偏低，现用的消除干扰的方法只能减弱干抗。为此，我们建立了一种既能有效地消除干扰又经济方便的方法。即取100g／L磺基水杨酸0．1ml，加高胆红素血浆0．5ml，混匀，离心沉淀，取上清液用速率法测定肌酐，有效地去除负干扰．批内CV=3．6％、n=20，批间CV=5．9％，n=15；平均回收率为98．2％。本法（105±61．1μmol／L），与除蛋白手工法（106．6±62．1μmol／L）呈高度相关（r=0．970），且两法差异无显著意义（P＞0．05）．而速率法仅77．6±47．6μmol／L。本法尤其可保证黄疸病人内生肌酐清除率的准确性。     

用胆红素氧化酶消除碱性苦味酸法测定血清肌酐的胆红素干扰

目前测定肌研多使用苦味酸法，血清胆红素对测定有明显干扰，造成黄疸病人的肌研测定结果偏低甚至出现负值，如何消除胆红素对肌酐测定中的干扰已有一些报道。我们将胆红素氧化酶（BOX）与苦味酸试剂结合使用，对血清肌研测定的方法作了改进，实验结果表明，该方法能有效地消除胆红素对肌醉测定的干扰，测定结果准确可靠，操作简单，标本无需预处理，即适合手工测定．又可应用于自动化分析仪。1试剂及仪器1．1胆红素氧化酶（BOX）30U／ml，北京市发酵工业研究所提供。1．2肌醉测定试剂盒（苦味酸法）澳斯部生物工程有限公司生产，批号：3…     

双试剂自动分析法测定血清胆红素

双试剂自动分析法测定血清胆红素黄维嘉阳萍陈宏础幸贵邦邓小玲（重庆医科大学附属第一医院检验科，重庆６３００４２）关键词胆红素双试剂自动分析目前自动生化分析仪测定血清胆红素所采用的试剂，除酶法外多为单试剂法。使用这类方法，因未做样品空白，样本的色泽及脂浊...     

钒酸盐氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的方法评价

目的 对钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素进行方法学评价。方法 采用钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素，与重氮法测定血清总、直接胆红素进行了比较。结果 钒酸盐氧化法（Y）与重氮法（X）相关性良好，相关方程：YTBIL=1.184XTBIL-1.29(r=0.9954),YDBIL=0.982XDBIL 1.43(r=0.9947)；总胆红素批内、批间平均变异系数分别为1.67%、3．02%,平均回收率达98．3％，在0－628μmol/L范围内线性良好。直接胆红素批内、批间平均变异系数分别为1．72％、3．28％，平均回收率达97．6％，在0．229μmol/L范围内线性良好。标本中甘油三酯含量≤5mmol/L、维生素C含量≤0.5g/L时，对钒酸盐氧化法测定总、直接胆红素均无干扰，但对重氮法有明显干扰；血红蛋白对钒酸盐氧化法和重氮法测定总、直接胆红素均产生正干扰。结论 钒酸盐氧化法是一种准确、灵敏、特异性较重氮法高的方法，适用于常规自动化测定血清总、直接胆红素，但在抗血红蛋白干扰方面有待改进。     

用BOX消除胆红素对酶法测定甘油三酯的干扰

用ＢＯＸ消除胆红素对酶法测定甘油三酯的干扰浙江湖州菱湖医院（３１３０１８）邱烨酶法测定甘油三酯（ＴＧ）是常规测定的方法，但胆红素能导致测定结果偏低。笔者参考有关文献［１－３］，利用胆红素氧化酶（ＢＯＸ）消除高胆红素对甘油磷酸氧化酶法测定ＴＧ的干扰。本...     

胆红素氧化酶法测定血清结合胆红素

介绍使用国产胆红素氧化酶和二牛磺酸胆红素校准物建立血清结合胆红素测定方法。测定缓冲液为０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲液（ｐＨ＝５．０），胆红素氧化酶浓度５００Ｕ／Ｌ，反应（终点）时间１５分钟。本法线性范围可达２４０μｍｏｌ／Ｌ，批内不精密度＜１０％，回收率为９８．３％～１０７．１％，与重氮方法比较，回归方程为Ｙ（酶法）＝０．９５６Ｘ（重氮法）－０．５１３。本法测定人血清结合胆红素参考值２．５７±２．５６μｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝９５）。     

动力学Jaffe’S法测定肌酐时改变苦味酸加入时间消除胆红素的干扰

动力学Jaffe’8法测定血清肌酐(Cr)时，主要干扰是血清中高胆红素会导致结果不准确，明显偏低甚至出现负值。关于如何消除血清肌酐测定中胆红素(BiL)的干扰，国内外已有不少报道。多采用加入各种物质以消除胆红素的干扰。本文根据氢氧化钠对胆红索的转化作用原理为依据．在日立7060型全自动生化仪上设计新程序，改变肌酐测定中苦昧酸加入的时间，所得结果表明，本法可较好地消除胆红索对测定肌酐时的干扰。结果准确，标本无需预处理。     

选择Jaffe法消除胆红素对肌酐测定的干扰

目的通过调整全自动生化仪测试参数,合理选择比色时间,以消除高胆红素对Jaffe法测定肌酐的干扰。方法使用Jaffe速率法测定血清肌酐,不加入任何化学物品,只通过调整迈瑞BS400全自动生化分析仪的比色周期来消除高胆红素对肌酐测定的干扰。结果试验组(高胆红素组)和对照组(低胆红素组)在44～49比色周期之间读取吸光度变化,可消除高胆红素对肌酐测定的干扰(0.01P0.05)。结论根据仪器特点,合理调整参数可有效排除高胆红素对肌酐测定的干扰,取得与低胆红素含量条件下相同的结果。     

KHC3法测定血清总胆红素的方法评价

[目的] 应用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的标准化评价方案对KHC3法测定血清总胆红素（TBIL）进行初步评价。[方法] 系统研究KHC3法测定血清总胆红素的精密度、准确度、线性范围及干扰因素，并比较其与重氮法结果的相关性。[结果] KHC，法测定血清总胆红素具有良好的精度（批内，批间，日间及总变异系数均小于5％）和准确度（回收率95．7％～102．2％，平均回收率98．7％）。线性范围：0～513μmol／L．维生素C（VitC）≤0.5g／L、甘油三酯（TG）≤5．0mmoL／L和血红蛋白（Hb）≤1．5g/L时对KHC，法无干扰与重氮法相关性好。[结论]KHC3法测定总胆红素具有准确度高、重复性好，线性范围宽，有较强的抗干扰能力，适用于实验室常规自动化分析。     

结合胆红素和非结合胆红素的直接测定在高胆红素血症中的应用

目的评价结合胆红素（CBil）和非结合胆红素（UBil）的直接测定在胆汁瘀积性黄疸（CJ）、肝细胞性黄疸（HJ）和新生儿溶血性黄疽（NHJ）中的价值以及δ胆红素／总胆红素（δBil／TBil）比值对CJ患者手术疗效判断的意义。方法用Vitros 250型干式生化仪及配套干片测定18例CJ患者和20例HJ患者血浆TBil、CBil和UBil，计算δBil；13例CJ患者在行胆总管切开引流术后3d、5d、7d复测。同法测定22例NHJ患儿血浆CBil和UBil，计算新生儿总胆红素（NBil）。结果CJ组CBil／TBil比值与HJ组比较差异有统计学意义（P=0．000），而UBil／TBil比值、δBil和δBil／TBil比值2组间差异均无统计学意义（P=0．241、0．067、0．090）。6例经胆总管切开引流术治疗后排泄良好的CJ患者的TBil、CBil和UBil在术后第3d起逐渐下降，δBil缓慢下降，δBil／TBil比值由术前的0．16～0．44升至0．52～0．78。7例治疗后排泄不良的CJ患者其TBil、CBil和UBil在术后5d～7d缓慢减低，δBil变化甚微，δBil／TBil在0．20～0．46范围内波动。NHJ患儿血浆NBil、UBil及UBil／NBil比值均明显增高。结论CBil和UBil的直接测定及δBil／TBil比值对CJ、HJ和NHJ的诊断和／或鉴别诊断以及CJ患者手术疗效的判断均有很好的应用价值。     

利福平对血清胆红素测定的干扰探讨

目的 探讨利福平对血清胆红素测定的干扰。方法 用亚硝酸钠氧化法测定血清总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）浓度。结果 利福平对TBIL、DBIL测定有正相干扰作用，干扰的程度与加入血清中的利福平的浓度呈线性关系。结论 利福平对亚硝酸钠氧化法测定TBIL、DBIL可产生光学干扰。     

钒酸盐氧化法消除胆红素对Jaffe法测定肌酐的干扰

目的消除胆红素对碱性苦味酸法测定肌酐的干扰。方法用钒酸盐氧化法对标本进行预处理,使胆红素氧化成胆绿素,再行Jaffe法测肌酐浓度。结果钒酸盐氧化法能有效消除胆红素(0~342μm ol/L)对肌酐测定的干扰。结论此方法操作简单,结果可靠,经济实用,适合一般医院采用。     

酶法测定结合胆红素的方法学评价

目的评价胆红素酶法测定血清结合胆红素（CBil），并与干化学法作比较。方法在pH值5．5、120mmoL／L苯二甲酸氧钾缓冲液中，胆红索氧化酶（BOD）选择性地氧化CBil，引起450nm处吸光度（A）值下降，求得CBil浓度。加入氟化钠（NaF）和N-乙酰半胱氨酸（NAC），抑制BOD对未结合胆红素（UBil）和δ-胆红素（δBil）的氧化，消除其干扰。结果BOD法测定的线性范同达230μmol／L，批内变异系数（CV）为4．1％（低值）、1．4％（高值），批问CV为11．65％（低值）、10．26％（商值），平均回收率为97．8％。BOD法与干化学法比较，Y干化学法=1．0160X酶法＋1．6031，r=0．9907。结论该法能有效地抑制BOD对UBil和δBil的氧化，特异性的检测CBil，并可用于自动牛化分析仪。     

碱性铁氰化钾消除胆红素对Jaffe动力学法测肌酐的负干扰

为消除胆红素对Ｊａｆｆｅ动力学测肌酐的负干扰。临用前将０．０４ｍｏｌ／Ｌ苦味酸与０．３ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠等量混合,再加入铁氰化钾,使其终浓度为１００μｍｏｌ／Ｌ,然后再生Ｊａｆｆｅ动力学法测肌酐对３６例总胆红素浓度在０－４８３μｍｏｌ／Ｌ的标本进行检测,可以有效地消除胆红素对肌酐测定的干扰。     

胆红素浓度对干化学法和湿化学法测定肌酐的影响

目的 研究不同浓度胆红素下干化学法和湿化学法对肌酐测定的影响，探讨两者检测结果的差别与胆红素浓度的线性关系及相关程度。方法 于2007年1～4月取临床标本51例，分别采用干化学法和湿化学法（碱性苦昧酸法）测定每例标本肌酐，对结果进行统计学分析。结果 胆红素浓度低于104．8μmol／L时，干化学法和湿化学法对测量肌酐的差异无显著性。胆红素浓度〉111．2μmol／L时，干化学法和湿化学法测量肌酐的差异有显著性（P〈O．01）。两种方法测得结果差值与胆红素浓度有较好的相关性，相关系数r=0．8728，回归方程Y=-1．906＋0．1329X。结论 低胆红素浓度下，干化学法与湿化学法均可作为肌酐测定的常用方法。高胆红素浓度下，两种方法偏差较大，可考虑用酶法测定肌酐或先消除胆红素再行测定。     

胆红素氧化酶法测定血清结合胆红素

介绍使用国产胆红素氧化酶和二牛磺酸胆红素校准物建立血清结合胆红素测定方法。测定缓冲液为０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲液（ｐＨ＝５．０），胆红素氧化酶浓度５００Ｕ／Ｌ，反应（终点）时间１５分钟。本法线性范围可达２４０μｍｏｌ／Ｌ，批向不精密度＜１０％，回收率为９８．３％～１０７．１％，与重氮方法比较，回归方程为Ｙ（酶法）＝０９５６Ｘ（重氮法）－０．５１３。本法测定人血清结合胆红素参考值２．５７±２．５     

胆红素测定校准物二牛磺酸胆红素的研究

对合成的二牛磺酸胆红素的部分理化性质、吸收光谱及与重氮试剂反应的特点做了探讨。结果表明，二牛磺酸胆红素作为总胆红素测定时的校准物，效果与用非结合胆红素（Ｂｕ）作校准物一致；而作为直接胆红素（ＤＢＩＬ）测定时的校准物则优于Ｂｕ；当前在没有葡萄糖醛酸胆红素商品的情况下，二牛磺酸胆红素是胆红素测定时，尤其是ＤＢＩＬ测定的理想校准物。