EGb761对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

本实验用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型 ,观察银杏叶提取物的标准制剂 EGb76 1(含 2 4 %黄酮甙和 6 %萜烯 )对细胞凋亡以及脑缺血后脑组织病理变化的影响。1　材料与方法1.1　实验动物分组　健康 Wistar大鼠 2 0只 ,体重 2 5 0～ 30 0 g,随机分为假手术组 (A组 ) ,脑缺血再灌注组 (B组 ) ,生理盐水组治疗组 (C组 ) ,EGb76 1治疗组 (D组 ) ,每组 5只。1.2　实验方法　线栓法制作大鼠脑缺血再灌注损伤模型 ,假手术组仅分离血管 ,不插尼龙线。 D组于实验前 3d开始灌胃给 EGb76 1(Ginaton) ,15 0 mg/ kg,每日 2次 ,术前 1h灌…     

银杏叶提取物后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的 探讨银杏叶提取物EGb761对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 制作大鼠右侧大脑中动脉闭塞再灌注模型.将30只清洁级雄性SD大鼠随机分为3组,即假手术组（n-10）：给予5 ml生理盐水腹腔注射;对照组（n-10）：缺血90 min,再灌注24 h,5 ml生理盐水腹腔注射;实验组（n-10）：缺血90 min,再灌注24 h,在再灌注即刻20 mg/kg银杏叶提取物生理盐水稀释成5 ml腹腔注射.再灌注24 h后采用四分法测定大鼠的神经功能障碍评分（NDS）;实验结束后断头取脑采用TTC染色法测定脑梗死面积（以其同侧大脑半球体积的百分比表示）;采用western blot测定脑组织微管相关蛋白2（MAP2）的表达水平.结果 与假手术组比较,对照组、实验组小鼠NDS评分均显著升高,分别为（2.49±0.85）分和（1.58±0.62）分,3组间比较差异均明显（P＜0.05）;对照组、实验组脑梗死面积均显著增大（P＜0.05）,实验组脑梗死面积较对照组显著减小（P＜0.05）;与假手术组比较,与假手术组比较,对照组、实验组缺血侧MAP2蛋白的表达水平均显著降低（P＜0.05）,实验组缺血侧MAP2蛋白的表达水平较对照组显著升高（P＜0.05）.结论 银杏提取物EGb761对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有显著的保护效应,其效应与MAP2蛋白表达水平升高有关.     

胰岛素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :研究胰岛素对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型 ,按胰岛素不同给药时间分为 4组 ,检测各组不同时限的血糖、神经功能缺陷评分以及梗死灶体积 ,并在电镜下对缺血边缘区进行超微结构观察。结果 :在 6h内给予胰岛素治疗 ,可使神经功能缺陷评分显著降低 ,梗死灶体积明显缩小 ,缺血边缘区超微结构损伤明显减轻。结论 :在有效治疗时窗内 (6h) ,胰岛素可明显减轻脑缺血再灌注损伤     

胰岛素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察胰岛素对脑缺血再灌注损伤的治疗作用,并探讨其作用机制.方法用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,根据胰岛素的给药时间不同共分成2大组,第1大组再分为A、B、C、D4组,第2大组再分为2组.在第1大组检测各组不同时限的血糖,测量计算脑梗死灶体积,并进行神经功能缺损评分;在第2大组采用TUNEL法原位标记DNA片段,检测TUNEL阳性细胞的变化.结果在6 h内给予胰岛素治疗可使神经功能缺陷评分显著降低,脑梗死灶体积缩小,TUNEL阳性细胞也明显减少(P＜0.05).结论早期应用胰岛素能减轻脑缺血再灌注损伤,减轻再灌注后细胞损伤可能是其作用机制之一.     

雌激素对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用的研究

目的　研究外源性雌激素替代对大鼠局灶性脑缺血 再灌注损伤的神经保护作用。方法　将12 0只大鼠分为对照组、双侧卵巢切除 (OVX)组、OVX +雌二醇 (E2 )组 (E2 2 0 0 μg/kg ,皮下注射每周 1次 ,连续 4周 )。 4周后用线栓法建立脑缺血再灌注模型 ,在缺血再灌注不同时间观察大鼠脑梗死体积、病理改变、凋亡细胞数及检测血浆雌激素水平。结果　缺血再灌注不同时间均以OVX +E2 组脑梗死体积最小 ,OVX组最大 ,两组比较有显著差异 (均P <0 0 1)。凋亡细胞数OVX组明显多于OVX +E2 组 (P <0 0 5 )。结论　雌激素对缺血 再灌注后脑损伤具有明显的保护作用     

CpG-ODN对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的 探讨CpG-ODN对大鼠脑缺血/再灌注（I/R）损伤的保护作用及其机制。方法 将54只大鼠随机分为假手术组、脑I/R模型组、CpG-ODN组,每组18只。采用大脑中动脉线栓法构建大鼠脑I/R模型。CpG-ODN组造模前1 h腹腔注射CpG-ODN（10 μg/25 g）,脑I/R模型组注射等量生理盐水。再灌注12 h采用Longa 5分评分法评估神经功能。再灌注24 h采用TTC染色测定脑梗死体积,HE染色观察组织结构,TUNEL染色分析细胞凋亡,PCR检测酪氨酸激酶（JAK）、信号转导和转录激活因子（STAT）mRNA表达水平,免疫印迹法分析Caspase3、Caspase7、JAK、p-JAK、STAT和p-STAT蛋白水平。结果 与假手术组比较,脑I/R模型组神经功能障碍严重,脑梗死体积显著增大,脑组织发生水肿、坏死等病变;与脑I/R模型组比较,CpG-ODN组明显改善。与假手术组比较,脑I/R模型组脑组织细胞凋亡率和Caspase3、Caspase7蛋白水平明显升高（P<0.05）,脑I/R模型组JAK、STAT mRNA水平和蛋白磷酸化程度显著上调（P<0.05）;与脑I/R模型组比较,CpG-ODN组细胞凋亡率和Caspase3、Caspase7蛋白水平明显降低（P<0.05）,JAK、STAT mRNA和蛋白磷酸化程度均明显下降（P<0.05）。结论 CpG-ODN能有效保护大鼠脑I/R损伤,其机制可能与影响JAK、STAT蛋白磷酸化抑制细胞凋亡有关。     

银杏叶提取物对大鼠脑缺血再灌注后GFAP和细胞凋亡的影响

目的 研究银杏叶提取物(EGb761)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和星形胶质细胞表达的变化.方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组、单纯缺血组、EGb761干预组,线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型(MCAO),原位末端标记(TUNEL)法观察神经细胞的凋亡情况,免疫组化法观测星形胶质细胞的表达.结果 与单纯缺血...     

高压氧预处理可对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究短期高压氧预处理后是否可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤。方法选取成年雄性Wister大鼠,采用连续5d,每天1次,3.0ATA,100%O2高压氧(HBO)预处理,每次60min,末次预处理后24h,运用改良的经典线栓法制作MCAO模型,再灌注2h。将实验大鼠分为假手术组、MCAO组、HBO+MCAO组(n=5)。造模后24h观察各组动物的一般精神状态及体重变化情况、用Rogers DC and Hunter AJ描述的神经功能7分评分法对神经功能损伤进行评估,TTC染色测梗死面积,并对脑组织进行石蜡切片,行Nissl、TUNEL染色,利用显微镜对神经细胞进行计数。结果假手术组无神经功能缺失,TTC染色未见梗死灶,镜下观察未见坏死细胞。MCAO组和HBO+MCAO组均有不同程度的神经功能缺损,且HBO+MCAO组神经功能缺失较MCAO组轻;TTC染色MCAO组的梗死面积明显大于HBO+MCAO组;镜下观察,MCAO组梗死区内尼氏小体明显少于HBO+MCAO组。结论短期高压氧预处理后可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤。     

不同剂量硫酸镁对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤的保护作用

Mg^2 是天然的钙离子拮抗剂，同时作为一种非竞争性兴奋性氨基酸(EAA)受体拈抗剂，具有阻断NMDA受体，减轻兴奋性毒性损伤的作用。本研究以不同剂量的MgSO4，对大鼠大脑中动脉缺血再灌注后的神经功能和梗死体积的影响，探讨MgSO4的脑保护作用。     

Pentylenetetrazol-induced kindling seizure attenuated by Ginkgo biloba extract (EGb 761) in mice

Ginkgo biloba extract (EGb 761) has been used therapeutically for centuries. It has attracted great attention as agents for improving circulation, particularly cerebral circulation, which may lead to improved mental function. Many researches hypothesized on the role of the extract in the treatment of diseases involving free radicals and oxidative damage. In the present study, anticonvulsant and antioxidant effects of EGb 761 were investigated in pentylenetetrazol (PTZ)-kindled mice. Valproic acid (VA), a major antiepileptic drug, was also tested for comparison. EGb 761-treated mice displayed a significant attenuated response to PTZ on the test day (day 26) compared with saline-treated and VA-treated animals. Valproic acid significantly increased seizure latency. Pretreatments with EGb 761 significantly protected against PTZ-induced convulsive behaviors (seizure latency, seizure score).

EGb 761 and VA significantly decreased PTZ-induced oxidative injury in brain tissue. EGb 761 was found to be the most effective in preventing PTZ-induced oxidative damage among both substances studied. The data obtained support our speculation that neuroprotective action of EGb 761 may correlate with its ability to inhibit not only excessive reactive oxygen species (ROS) formation but also seizure generation. Taken together, the results of the present study show that the effect of EGb 761 on ROS production contributes to their neuroprotective action. It might be concluded that the suppression of seizure-induced ROS generation may be involved in the mechanism of action of antiepileptic drugs.     

Acute administration of Ginkgo biloba extract (EGb 761) affords neuroprotection against permanent and transient focal cerebral ischemia in Sprague-Dawley rats

We examined the neuroprotective action of a standardized extract of Ginkgo biloba leaves (EGb 761) in permanent and transient middle cerebral artery (MCA) occlusion models in Sprague-Dawley rats. Forty-four animals were given either EGb 761 (50-200 mg/kg) or vehicle intraperitoneally, 1 hr before permanent MCA occlusion, to evaluate the dose-response effects. An additional 58 animals received EGb 761 (200 mg/kg) or vehicle, 0.5- 4 hr after permanent MCA occlusion, for establishing the therapeutic window. Delayed treatment was also employed in 110 animals treated with either EGb 761 (100-200 mg/kg) or vehicle at 2-3 hr following transient focal cerebral ischemia induced by MCA occlusion for 2 hr. Neurobehavioral scores were determined 22-24 hr after permanent MCA occlusion and either 3 or 7 days after transient MCA occlusion, and brain infarction volumes were measured upon sacrifice. Local cortical blood flow (LCBF) was serially measured in a subset of animals receiving EGb 761 (100-200 mg/kg) or vehicle, 0.5 hr and 2 hr after permanent and transient MCA occlusion, respectively. Relative to vehicle-treated controls, rats pretreated with EGb761 (100 and 200 mg/kg) had significantly reduced infarct volumes, by 36% and 49%, respectively, and improved sensory behavior (P < 0.05). Delayed treatment with EGb 761 also significantly reduced brain infarction, by 20-29% and 31%, when given up to 2 and 3 hr following transient and permanent MCA occlusion, respectively, whereas improved neurobehavioral scores were noted up to 2 hr after the onset of MCA occlusion (P < 0.05). LCBF was significantly improved in the ipsilateral cortex following the EGb 761 treatment, whereas a higher dose showed a more sustained effect. In conclusion, EGb 761 protected against transient and permanent focal cerebral ischemia and was effective after a prolonged reperfusion period even when therapy is delayed up to 2 hr. This neuroprotection may be at least partially attributed to the beneficial effects of selectively improved LCBF in the area at risk of infarction.     

银杏叶提取物结合氟哌啶醇治疗慢性精神分裂症的双盲对照研究

目的探讨银杏叶提取物结合氟哌啶醇对慢性精神分裂症的治疗作用。方法采用随机、双盲、空白对照法，用银杏叶提取物３６０ｍｇ／ｄ结合氟哌啶醇（０２５ｍｇ／ｋｇ）对１１２例慢性精神分裂症患者进行治疗１２周，在治疗前后评定ＢＰＲＳ、ＳＡＰＳ、ＳＡＮＳ和ＴＥＳＳ量表。结果银杏叶提取物结合氟哌啶醇治疗慢性精神分裂症的疗效比单用氟哌啶醇要好，前者ＢＰＲＳ、ＳＡＰＳ和ＳＡＮＳ量表总分明显降低，而后者仅ＢＰＲＳ量表总分明显降低；同时前者治疗后ＳＡＰＳ量表评分显著低于后者；银杏叶提取物具有减轻氟哌啶醇锥体外系和行为毒性副反应的作用。结论银杏叶提取物可提高抗精神病药治疗慢性精神分裂症的疗效，并减轻抗精神病药副作用。     

ＥＧb７６１对星形胶质细胞抗凋亡作用的研究

研究无糖对星形胶质细胞的影响和ＥＧb７６１（Ｇinkgobiloba Extract 761)对细胞损伤后的有效保护浓度及其抗凋亡作用。实验选用２４h后分组：无糖组、ＥＧb７６１药物组和正常组,继续培养72h后,①测定LDH,药物组的LDH释放量低于无糖组和正常组,经样本均数间的两两比较q检验有显著性差异（P＜0.01)。②二倍体细胞比例测定,药物组的凋亡峰明显低于无糖组和正常组,三组间的t检验P＜0.01。③光镜下免疫学观察：体外无糖培养20d的星形胶质细胞的胸体比正常组细胞胞体明显增大,突起断裂,细胞胞浆内出现空泡状物,细胞增殖速度减慢。药物组细胞形态与正常组相比无明显变化。结果提示：一定浓度的ＥＧb７６１对无糖损伤的星形胶质细胞具有保护作用,对正常条件下体外培养的星形胶质细胞有抗凋亡作用。     

EGb761对慢性脑缺血大鼠脑组织神经胶质细胞的影响

目的 探讨EGb761(银杏叶提取物)对慢性脑缺血大鼠脑组织神经胶质细胞的影响.方法 将雄性SD大鼠随机分为假手术组、单纯缺血组、EGb761干预组.制备慢性脑缺血大鼠模型,药物干预12周后,免疫组化方法分别检测各组大鼠脑组织中星形胶质细胞和少突胶质细胞的表达.结果 EGb761干预组大鼠的海马、胼胝体、皮质CNPase阳性细胞表达明显高于单纯缺血组,而海马、胼胝体、皮质GFAP阳性细胞表达明显低于单纯缺血组(P<0.05),差异有统计学意义.结论 慢性脑缺血时,EGb761对少突胶质细胞缺血性反应有保护作用,同时减少反应性星形胶质细胞增生.     

人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血/再灌注（I/R）损伤后脑组织一氧化氮合酶（NOS）及血清一氧化氮（NO）含量的影响.方法 采用改良的Zea Longa法建立脑I/R损伤模型.66只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和人工合成E-选择素治疗组（治疗组）.治疗组大鼠采用股静脉注射人工合成E-选择素10 mg·kg-1.应用硝酸盐还原法测定血清中NO含量和免疫组化法检测缺血区脑组织神经型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）阳性细胞数.结果 ①NO：以对照组NO含量为正常生理数据,模型组脑缺血2h/再灌注2～24h NO含量呈上升趋势,24 h时达高峰,72 h有所降低但仍高于对照组,各时间点与对照组比较明显增高（P＜0.01）;治疗组NO变化趋势同模型组,NO含量较模型组减少（P＜0.05）,较对照组增多（P＜0.01）.②NOS：以对照组nNOS、iNOS阳性细胞数为正常生理数据,模型组nNOS阳性细胞在脑缺血2h/再灌注2h后开始表达,12h达高峰,至24h开始降低,各时间点与对照组比较明显增高（P＜0.01）;模型组iNOS阳性细胞在脑缺血2h/再灌注2h开始出现,并持续增多,随时间延长呈上升趋势,24h达高峰,至72 h出现下降,各时间点与对照组比较明显增多（P＜0.01）;治疗组各时间点nNOS、iNOS阳性细胞变化趋势同模型组,但较模型组减少（P＜0.05）,较对照组增多（P＜0.01）.结论 大鼠脑I/R损伤后脑组织NOS活性表达增多,NO浓度升高导致脑组织损伤;人工合成E-选择素通过降低NOS表达,减少NO释放、减轻炎症反应和脑I/R损伤,起脑保护作用.     

Ginkgo biloba Extract: Review of CNS Effects

The marketing of Ginkgo biloba extract (GBE) products is directed to the healthy, not diseased, population primarily for the promotion and maintenance of optimal brain function, not the treatment or prevention of any specific pathological state. However, recommendations are available for the use of GBE for a myriad of diseases that generally fall into one of three categories—cerebrovascular, peripheral vascular, or mitigation of tissue damage. The evidence for the pharmacological actions of GBE stem from one of three types of investigations—clinical studies in humans, pharmacological trials in animals, and in vitro studies. The purpose of this paper is to review the scientific literature on the central nervous system effects of GBE, with emphasis on the potential mechanisms of action. Limitations of the current scientific literature are highlighted and suggestions for future human and animal research directions are proposed.     

银杏叶提取物对大鼠创伤后脑细胞的保护作用

目的探讨银杏内酯对创伤性脑损伤（TBI）后神经细胞及其功能的保护作用。方法按自由落体撞击法造成TBI模型，通过木条平衡实验评价伤后大鼠的神经功能恢复情况，并在伤后不同时间点观察病理改变，同时检测脑组织中丙二醛（MDA）、NO和水含量的改变。结果与假损伤组比，伤后第一天大鼠脑组织内MDA和NO的含量显著升高（P〈0.01），不同时间点脑组织的含水量显著增加（P〈0.01），伤后1周内大鼠完成木条平衡作业的能力明显受损（P〈0.05）。经银杏内酯治疗后，TBI大鼠神经功能明显改善，病理改变减轻，脑组织含水量及MDA、NO的含量明显降低。结论银杏内酯可以促进颅脑损伤后神经功能的恢复，可能与早期抗氧化应激、降低NO的产生、减轻脑水肿、保护脑组织有关。     

银杏叶提取物对星形胶质细胞增殖周期的影响

目的:探讨银杏叶提取物(EGb)对体外培养的大鼠大脑皮质星形胶质细胞(Ast)增殖周期的影响。方法:体外培养、纯化及鉴定大鼠大脑皮质Ast;MTT比色法选择EGb作用浓度;1×10-7μL·L-1EGb50μL分别加入对照组和实验组培养液;利用流式细胞仪分析技术检测细胞周期。结果:随着Ast培养时间的延长,12h内EGb诱导Ast进入S期+G2/M期的细胞百分率有上升趋势,但24h后稍有下降。结论:EGb可通过影响Ast的细胞周期促进Ast的增殖。     

银杏叶提取物EGb761抑制脊髓损伤后的细胞凋亡

目的： 探讨银杏叶提取物EGb761对实验性大鼠脊髓损伤后神经保护的作用及其机制。方法： 成年雄性SD大鼠132 只,体重200~250g,随机分为正常对照组（N组）、损伤组（T组）、甲基强的松龙治疗组（MP组）和 EGb761 治疗组（EGb761组）,每组 33 只。T组、MP组、EGb761组用改良 Allen法以25GCF损伤力度致伤大鼠,建立 T9 脊髓中度损伤模型。术后4h、8h、24h每组随机取3只动物切取损伤区1cm脊髓节段,分别用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸（TBA）法测定脊髓组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。分别于术后24h、 3d、 5d、 7d、 14d 处死动物(n=6),快速取T9 节段脊髓,TUNEL法标记细胞凋亡,免疫组化方法检测诱生型一氧化氮合酶（iNOS）的表达。结果：术后4h、8h、24h EGb761治疗组SOD活性及MDA含量与损伤对照组比较均有显著差异（P<0.01）。术后各时相点EGb761治疗组神经细胞凋亡指数和iNOS表达阳性细胞率均低于损伤对照组（P<0.01或P<0.05）。结论：EGb761能抑制脊髓损伤后的脂质过氧化反应,减轻神经细胞的凋亡,其机制可能与抑制iNOS表达有关。