口腔鳞状细胞癌cyclin E及p21waf1蛋白定量检测及意义

目的：探讨口腔鳞状细胞癌（oralsquamous cell cancer，OSCC）cyclinE、p21^waf1蛋白表达与抑癌基因p53突变的关系及其临床病理学意义。方法：采用流式细胞术（FCM）对8例正常口腔粘膜及30例OSCC石蜡包埋组织中cyclinE和p21^waf1蛋白表达进行定量检测，分析其与突变型p53蛋白表达及临床病理学参数间的关系。结果：OSCC组织cyclinE蛋白平均表达量高于正常口腔粘膜t=-6．582，P〈0．01），过表达率为63.33％（19／30）；而p21^waf1蛋白平均表达量低于正常口腔粘膜（t=8．126，P〈0．01），低表达率为53-33％（16／30）；OSCC组织cycllnE／p21“比值高于正常口腔粘膜（t=-9．434，P〈0．01），异常率为100％（30／30）；p53阳性组p21“表达量低于p53阴性组（t=3．905，P〈0．01），两者间呈负相关（r=-0．491，P〈0．05）。p21^waf1表达量在OSCC有淋巴结转移组低于无淋巴结转移组（t=3.391,P〈0．01），但与OSCC分化无关（P〉0．05）；而cyclinE表达量与OSCC肿瘤分化及淋巴结转移均无关（P〉0．05）。结论：eyclinE蛋白表达上调及p21^waf1蛋白表达下调是OSCC常见异常现象，p21神蛋白表达下调可能与p53突变有关，并与OSCC淋巴结转移密切相关，G1／S期正负调控因子cyclinE／p21^waf1比例失衡在OSCC发生中可能起着重要作用。     

宫颈癌组织中癌基因c-myc与抑癌基因p16的对比分析

背景与目的：原癌基因的激活和抑癌基因的失活是许多肿瘤发生的机制;c-mvc与p16的异常表达是否共同参与宫颈癌的发生、发展,以及两种基因的表达与宫颈癌细胞对化疗药物反应的相关性均未明确。本研究旨在探讨c-myc与p16在宫颈癌发生、发展中的作用及其与化疗的关系。方法：采用原位分子杂交技术,用地高辛标记探针检测37例宫颈鳞癌组织(其中11例为化疗后组织)、21例癌前病变组织及5例正常宫颈组织中c-myc mRNA与p16mRNA的表达情况,并用图像分析仪对阳性信号的灰度值作定量分析。结果：正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤样病变(cerlvical intraepithelial neoplasia,CIN)组织、宫颈鳞癌组织中p16的表达率分别为100．0％、71．4％及21．6％(P=0．0001),c-myc的表达率分别为0％、42．9％、75．7％(P=0．0011),p16及c-myc的表达在三组问差异均有统计学意义,c-myc表达强度随恶性程度的增高而增强,且CINⅢ级比CINⅡ级和CINⅠ级表达强,化疗前c-mvc表达率比化疗后高,c-myc与p16的表达呈负相关(rs=-0．907)。对化疗敏感者与不敏感者的c-myc和p16表达均无显著性差异。结论：癌基因c-mvc的过表达与抑癌基因p16的失表达在宫颈癌的发生、发展过程中可能起着重要的作用;c-myc在不同级别CIN增生细胞中的表达变化趋势提示细胞癌变是一个渐进的过程。     

胃癌和癌旁粘膜组织中bcl—2和c—myc蛋白的表达及意义

目的：探讨bcl-2和c-myc基因蛋白在胃癌发生,发展过程中的变化。方法对80例胃癌及癌旁组织标本进行S－P免疫组织染色。结果bcl-2、c-myc及两者共同阳性表达率在胃癌组织中分别为46．3％、67．5％、37．5％,在癌旁移行粘膜中分别为68．05、84．0％、68．0％;在受侵粘膜中分别为3．6％、67．9％、3．65;在癌旁伴癌前病变粘膜中分别为57．1％、82．1％、57．1％;在癌旁不伴癌病变粘膜中分别为0、41．7％、0。其中bcl-2单独表达或与c-myc共同表达率及表达强度在胃癌、移行粘膜、伴癌前病变癌旁膜均显著高于受侵粘膜和不伴癌前病变粘膜（P＜0．01）,c-myc在癌变前即表达增高,且距越近,表达率越高。bcl-2和c-myc蛋白表达在癌旁伴癌前病变粘膜和移行粘膜呈正相关（γ=0．517,γ=0．636,P＜0．05）。结论在胃粘膜癌变过程,中bcl-2和c-myc基因蛋白具有协同作用,可能bcl-2表达增高比c-myc的意义更大。联合检测bcl-2、c-myc基因蛋白对于胃癌的早诊断具有一定的实用价值。     

垂体肿瘤转化基因PTTG在NHL中的表达及其意义

目的：探讨垂体肿瘤转化基因PTTG（pituitary tumor transforming gene）在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的表达，并研究其表达与NHL临床病理指标的关系。方法：采用原位杂交法和免疫组化法检测50例NHL患者肿瘤组织和20例良性淋巴结炎组织中PTTG mRNA及其蛋白的表达。结果：PTTG mRNA在NHL和对照组的阳性表达率分别为54．0％（27／50）和20．0％（4／20），PTTG蛋白在NHL和对照组的阳性表达率分别为50．0％（25／50）和15．0％（3／20），NHL中PTTG mRNA及其蛋白的阳性表达率及表达分级比较均高于对照组。PTTG mRNA的表达与NHL的恶性程度和临床分期呈正相关（r=0．366，P=0．009；r=0．438，P=0．001）。NHL中PTTG mRNA表达与其蛋白表达成等级正相关（r=0．831，P〈0．01）。NHL中PTTG mRNA表达与近期疗效呈负相关（r=-0．354，P〈0．05）。结论：NHL中PTTG高表达。PTTG表达水平与NHL生物学行为可能有关。     

人骨肉瘤中Rb和p~(53)基因mRNA的表达

研究Rb和p53基因与国人骨肉瘤的关系。方法：用原位杂交技术检测Rb和p53基因mR－NA在30例国人骨肉瘤标本中的表达。结果：RbmRNA阳性16例（53．3％），阴性14例（46．7％）；p53mRNA阳性15例（50％），阴性15例（50％）。此外，骨肉瘤中Rb和p53mRNA表达呈正相关（r’s=0．462，P＜0．02）。结论：Rb和p53基因异常与骨肉瘤发生有关。     

非小细胞肺癌组织中NF-kB和c-myc及p73的表达与意义

目的：探讨NF-κB（p65）、c-myc和p73蛋白在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）组织中的表达及相互关系。方法：用免疫组化二步法检测60例NSCLC组织标本中p65、c-myc和p73蛋白的表达，并进行相关分析。结果：p65、c-myc和p73蛋白在肺癌组织中的表达分别与在肺支气管上皮组织的表达比较差异有统计学意义，P〈0．05。p65和c-myc蛋白在淋巴结转移癌组织中的表达与肺支气管上皮组织中的表达差异无统计学意义，P〉0．05；p73蛋白在上述两组的表达差异有统计学意义，P〈0．05。p65、c-myc和p73蛋白在肺癌高、中与低分化阳性表达的比较，差异均无统计学意义，P〉0．05。伴有淋巴结转移的肺癌组织中蛋白阳性表达与无淋巴结转移比较：p65和c-myc差异无统计学意义，P〉0．05；p73差异有统计学意义，P〈0．05。肺癌组织中p65与c-myc具有相关性，R=0．5514，P〈0．01；c-myc与p73具有相关性，R=0．6537，P〈0．01；未发现p65与p73有明显相关性，R=0．1735，P〉0．05。结论：p65、c-myc和p73表达上调均可能是NSCLC发生的重要因素；在肺癌发生发展中p65与c-myc、c-myc和p73可能在诱导细胞增生与抑制细胞凋亡中起协同作用；p73上调可能促进肺癌的侵袭与转移，可作为肺癌恶化进展及癌转移的动态监控标志。     

p16和bcl—2基因在膀胱癌中的表达及意义

目的：探讨p16抑癌基因和 bcl-2凋亡抑制基因与膀胱癌生物学行为的关系。方法：采用免疫组化和核酸原位杂交等方法检测67例膀胱癌中p16和bcl-2基因的表达。结果：67例膀胱癌p16蛋白表达阳性率52．23％（35／67），失表达率47．76（32／67），其中Ⅰ，级，Ⅱ级，Ⅲ级的肿瘤p16蛋白失表达率各为14．55％，60．53％，71．43％（P＜0．05），p 16 mRNA失表达率分别为20％，40％，80％，40％，60％，100％（P＜0．05），免疫组化和原位杂交结果一致（P＞0．05），结论：p16基因表达与细胞分化呈负相关，bcl-2基因表达与细胞分化呈正相关，提示p16基因的缺失，突变和高甲基化，bcl-2基因的异常表达在膀胱癌的发生和发展中起重要的推动作用。两者均可作为判断膀胱癌生物学行为的参考指标。     

贲门癌mdm2 基因扩增及蛋白表达的研究

 目的 检测贲门癌组织中mdm2基因扩增及蛋白表达，探讨其在贲门癌发生发展中的作用，分析其临床病理意义。方法 用dPCR技术检测贲门癌组织mdm2基因扩增；用免疫组织化学技术及流式细胞术检测mdm2蛋白表达水平。结果 该组标本中18．42％有mdm2基因扩增，64．86％有mdm2蛋白过表达，其mdm2表达FJ值（1．45±0．34）明显高于正常黏膜组织的FJ值（1．00±0．13，P〈0．05）。高中分化的贲门癌组织，mdm2基因扩增率及蛋白表达水平均较低分化者高（33．30％Vs5．00，80．00％VS47．06％，P〈0．05）。结合该组标本此前已检测的p53基因突变和蛋白表达结果发现，两种基因及蛋白表达异常在本组标本中的分布有不重叠趋势。结论 dm2基因扩增和过表达是贲门癌较常见的分子改变，并可能通过抑制野生型p53基因功能参与贲门癌形成；有mdm2扩增及表达的贲门癌组织分化程度较高，提示预后较好。     

甲状腺癌组织端粒酶激活与p16基因失活的研究

目的：探讨甲状腺癌细胞增殖、分化与端粒酶激活及抑癌基因p16失活（缺失突变）之间可能存在的联系。方法：应用TRAP、多重PCR、免疫组化法检测42例甲状腺癌与16例癌旁组织端粒酶活性、p16基因外显子2缺失、p16蛋白表达。结果：甲状腺癌组端粒酶活性90．48％，高于癌旁组织（P（0．01）；甲状腺癌p16基因外显子2纯合缺失率28．57％。相应癌旁组未检出（P〈0．01）；甲状腺癌p16蛋白表达缺失率40．48％，高于癌旁组（P〈0．05）；甲状腺癌p16蛋白表达缺失率高于p16基因外显子2缺失率。结论：端粒酶激活与p16基因失活以及p16蛋白表达下调可能是甲状腺癌变过程中的重要分子事件．甲状腺癌中p16基因失活可能是端粒酶激活的一种途径。     

乳腺癌组织中PTEN和Survivin及p53的表达及相关性研究

目的：研究抑癌基因PTEN、凋亡抑制基因Survivin、p53蛋白在乳腺癌及乳腺增生症中的表达情况，并探讨其相关性及临床意义。方法：该实验采用SP法，对65例乳腺癌和20例良性增生症患者石蜡包埋切片中的PTEN、Survivin及p53蛋白进行检测。结果：PTEN阳性表达率在乳腺癌组为41．54％，在乳腺增生症组为90．00％，X^2=14．42，P〈0.05；在乳癌中有腋淋巴结转移组为25．71％，无腋淋巴结转移组为60．00％，X^2=7．28，P〈O．05。Survivin阳性表达率在乳腺癌组为75．38％，在乳腺增生症组为15．00％，X^2=23．48，P〈0.05。p53阳性表达率在乳腺癌组为58．46％，在乳腺增生症组为10．00％，X^2=14．42，P〈0．05；在乳癌中有腋淋巴结转移组为71.43％，无腋淋巴结转移组为43．33％，X^2=5．25，P〈0.05。在乳腺癌组织中PTEN与Survivin的表达成负相关，PTEN与p53的表达无明显相关，Survivin与p53的表达成正相关。结论：PTEN在乳腺癌中的阳性表达率明显低于乳腺增生症，Survivin和p53在乳腺癌中的阳性表达率明显高于乳腺增生症，PTEN和p53的表达与腋淋巴结转移有一定的相关性。在乳腺癌组织中PTEN、p53和Survivin的表达之间存在相关性。     

Lack of correlation between DNA copy number and mRNA expression levels ofc-myc in γ-radiation-induced mouse thymic lymphomas by using quantitative real-time PCR

Background It is well documented that over-expression of thec-myc proto-oncogene occurs in the vast majority of mouse thymic lymphomas induced by γ-irradiation, evidencing the importance of this gene in T-cell lymphomagenesis. However, it remains unknown whether elevated levels ofc-myc expression are driven by extrac-myc copy numbers. Materials and methods Here we use a quantitative test on the basis of real-time PCR to determine the cellular copy number of c-myc in a set of 14 g-radiation-induced thymic lymphomas obtained from (C57BL/6J x BALB/cJ) F1 hybrid mice with increased mRNA c-myc expression. Results Since 5 out of 14 (35.7%) cases had no extra copy numbers of c-myc, gene amplification was obviously not the cause of c-myc over-expression in these tumours. In the remaining 9 tumours, c-myc over-expression was also accompanied with extra DNA copy numbers. Therefore, c-myc amplification might be a consequence of the genomic instability subsequent to the up-regulation of c-myc. However, linear regression analysis showed a lack of correlation between increasing DNA copy numbers and mRNA over expression of c-myc in these tumours (r =0.029, p=0.94). Conclusion De-regulation of c-myc does not necessarity imply amplification of this gene in these tumours. This report is, to our knowledge, the first one comparing c-myc amplification with expression in lymphomas of the T-cell lineage.     

Use of the OM-11-906 monoclonal antibody for determining p62 c-myc expression by flow cytometry in relation to prognosis in colorectal cancer

The expression of the c-myc protein product (p62 c-myc) and deoxyribonucleic acid (DNA) ploidy status was determined by a flow cytometric technique in 83 patients with colorectal cancer followed up for a median of 30 months (range 6-60 months). The OM-11-906 antibody, used to detect p62 c-myc, revealed a 62 kDa and 45 kDa band on Western blots in tumours. Correlation of quantitative dot blotting of tumour mRNA to flow cytometric p62 c-myc expression was good (r = 0.87, P less than 0.01). Levels of p62 c-myc varied in colorectal cancer and low levels (less than 20 fluorescein units) correlated with improved survival (log rank chi 2 = 4.69, df = 1, P = 0.03), and this was a better prognostic index than DNA ploidy (log rank analysis chi 2 = 2.38, df = 1, P less than 0.1). Although expression of the c-myc gene was found, using the OM-11-906 antibody, to be a prognostic feature in colorectal cancer, these and other results need to be interpreted with caution given the presence of two protein bands by Western blotting.     

Over-expression and amplification of the c-myc gene in human urothelial carcinoma

To understand the mechanisms underlying increased expression of Myc protein in human urinary bladder cancer, expression of c-myc mRNA and the copy number of the c-myc gene were determined. Expression of mRNA was measured by quantitative RT-PCR in 40 urothelial carcinomas and in 18 histologically normal mucosae. Mean expression in tumors was significantly increased (3.23+/-2.63 AU vs. 1.90+/-0.95 AU, p < 0.023) and exceeded the highest level in normal mucosa in 15 (37.5%) tumors. The c-myc gene copy number was higher than in leukocytes and normal bladder mucosa in 14 of 40 tumors, but only 3 among these showed a more than 4-fold increase indicative of gene amplification. Most, but not all, tumors with elevated expression displayed an increased gene copy number (p < 0.0001). In line with other studies of the protein level, no significant association either of c-myc mRNA over-expression or of increased gene copy number with tumor stage or grade was observed. The data indicate that elevated mRNA expression as a consequence of increases in c-myc gene copy number often underlies Myc protein over-expression in bladder cancer. This increase may be a consequence of, most frequently, chromosome 8q gain and, occasionally, gene amplification, while in some tumors deregulation of mRNA expression occurs without evident changes in the c-myc gene copy number.     

C-MYC expression in medulloblastoma and its prognostic value

To identify prognostic factors in medulloblastoma, a common malignant brain tumor of childhood, expression of the oncogene c-myc was examined at the mRNA level by in situ hybridization. c-myc mRNA expression was observed in 30 of 72 tumors (42%). The c-myc gene copy number was determined by quantitative PCR from genomic DNA of paraffin-embedded tumors. c-myc gene amplification was present in 5 of 62 cases (8.3%). Therefore, c-myc amplification was obviously not the cause of c-myc mRNA expression in most samples. Kaplan-Meier estimation revealed a significant correlation between c-myc mRNA expression and survival (total mean follow-up 4.6 +/- 3.6 years, log-rank p = 0.02). Multivariate logistic regression analysis including sex, age, histological type, degree of surgical resection and expression of synaptophysin, GFAP and c-myc, was carried out on 54 patients who received both radiotherapy and chemotherapy. The analysis identified expression of c-myc as an independent predictive factor of death from disease.     

胆囊癌P~（53）、C－mycmRNA异常表达与TNM分期相关研究

应用地高辛标记的Ｐ￣(５３)、ｃ－ｍｙｃｃＤＮＡ探针对２１例胆囊癌石腊切片上的ｍＲＮＡ进行原泣杂交。结果表明ｃ－ｍｙｃ和Ｐ￣(５３)ｍＲＮＡ的表达均位于细胞核内。ｃ－ｍｙｃ和Ｐ￣(５３)ｍＲＮＡ在胆囊癌的表达率分别为６６．６％和５７．１％,在癌周正常组织中没有ｃ－ｍｙｃ、Ｐ￣(５３)ｍＲＮＡ的表达。ｃ－ｍｙｃ、Ｐ￣(５３)ｍＲＮＡ表达的强度和胆囊癌的原发肿瘤大小,有无淋巴结转移及远处转移有关。分期越晚,表达率越高。有淋巴结转移者高于无转移者。Ｐ￣(５３)ｍＲＮＡ表达的阳性率和胆囊癌的分化程度无关;而ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ的表达和分化程度有关,分化越差,表达率越高。     

吲哚胺2,3-双加氧酶、c-myc在膀胱尿路上皮癌中的表达及其意义

目的 探讨吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）、c-myc在膀胱尿路上皮癌中的表达及其临床意义.方法 采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测新鲜肿瘤及黏膜标本各20例IDO mRNA表达,采用SP法检测肿瘤石蜡标本84例及黏膜22例IDO、c-myc蛋白的表达,分析二者与临床病理特征的关系.结果 在膀胱尿路上皮癌组织中,IDO、c-myc蛋白表达强度与患者年龄、性别无关.在浸润型膀胱尿路上皮癌组织中IDO蛋白表达高于非浸润型（x2=5.600,P=0.018）,随着组织分级及国际抗癌联盟（UICC）分期增高,IDO蛋白阳性表达率增高（x2=20.268,P=0.000;x2=12.075,P=0.007）.c-myc蛋白在正常膀胱组织中无阳性表达,在膀胱尿路上皮癌组织中44例（52.4％）表达阳性,二者阳性表达率差异有统计学意义（x2=10.733,P=0.001）;c-myc蛋白表达强度与组织学分类、组织分级及UICC分期无关.在膀胱尿路上皮癌组织中IDO蛋白表达强度与c-myc蛋白表达强度呈正相关（r=0.205,P=0.047）,与组织学分类、组织分级及UICC分期呈正相关（r=0.258,P=0.018;r=0.491,P=0.000;r=0.365,P=0.001）.IDO mRNA在膀胱尿路上皮癌组织中的表达（7.696 1±1.745 2）明显高于正常膀胱组织（6.397 0±1.205 1）（t=2.367,P=0.023）.Ta～T1期膀胱尿路上皮癌组织中IDO mRNA的平均表达水平为6.803 4±1.567 5,明显低于T2～T4期的9.183 8±0.690 3（t=4.955,P=0.000）;IDO mRNA在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱尿路上皮癌组织中的平均表达水平分别为7.058 7±1.771 5、7.934 2±1.530 5、9.290 7±0.574 5,随着分级增高而增高,差异有统计学意义（t=2.729,P=0.011）.结论 IDO表达与膀胱尿路上皮癌预后不良相关,c-myc表达强度与膀胱尿路上皮癌病变进展无关,但可能与膀胱尿路上皮癌病变发生有关.IDO可能成为膀胱尿路上皮癌预后的预测因子,IDO、c-myc有可能成为肿瘤化疗的一个分子靶向目标.