天麻酚类成分对脑缺血模型大鼠海马一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的探讨天麻酚类成分对脑缺血大鼠海马NO和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法采用双侧颈总动脉永久性结扎法,造成大鼠脑缺血模型。造模6周后,SD大鼠40只随机分为5组,假手术组、模型组、尼莫地平组、天麻酚类成分高剂量组(高剂量组)和天麻酚类成分低剂量组(低剂量组),每组8只。给药3周后,比色法检测海马NO含量和NOS活性,免疫印记法检测大鼠海马NOS 3种亚型(nNOS,iNOS,eNOS)的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠海马NO含量、NOS活性及nNOS和iNOS表达明显升高,eNOS表达明显降低;与模型组比较,尼莫地平组和高剂量组大鼠海马NO含量、NOS活性及nNOS和iNOS表达明显降低,eNOS表达明显升高;低剂量组大鼠NOS活性和iNOS表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论天麻酚类成分对脑缺血大鼠海马NO损伤有保护作用。     

五鹤续断对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤各脑区一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性的影响

目的探讨五鹤续断醇提液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中各脑区一氧化氮(NO)浓度及一氧化氮合酶(NOS)活性的影响。方法用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注动物模型,用比色法测定再灌注后不同时间点脑组织中NO含量和NOS活性。结果模型组大脑皮质和海马中NO含量和NOS活性明显增高,五鹤续断醇提液可降低大脑皮质和海马中NO含量和NOS活性,各时点NO含量与NOS活性成显著正相关。结论五鹤续断醇提液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有明显保护作用,其机制可能与降低NO和NOS表达水平有关。     

氢气对脑缺血再灌注大鼠海马一氧化氮及其合酶的影响

目的探讨氢气治疗对急性脑缺血再灌注损伤大鼠海马NO和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法选择SD大鼠72只,随机分为3组:假手术组、模型组和治疗组(腹腔注射2%氢气饱和生理盐水),每组24只,每组又分为6、24h2个时间点。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。免疫组织化学方法测定海马NOS的表达;硝酸还原酶法测定海马组织匀浆中NO含量;NOS检测试剂盒检测海马组织提取液中NOS的活性。结果模型组治疗6h海马NOS阳性细胞、NO含量及NOS活性明显高于假手术组,而治疗组上述指标较模型组明显下降(P<0.05);模型组治疗24h海马NOS阳性细胞、NO含量及NOS活性明显高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05),但治疗组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论氢气治疗可减少缺血后海马组织中NO含量及NOS活性,对海马缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。     

老年大鼠大脑组织一氧化氮、一氧化氮合酶的变化及神经细胞凋亡研究

目的研究一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)在老年大鼠大脑中的变化及其与神经细胞凋亡的关系. 方法选用5月龄大鼠和30月龄大鼠,利用Griess反应和高压液相技术间接测量大脑NO水平和NOS活性;免疫组化和原位杂交技术分别检测神经元NOS(nNOS)蛋白质水平和nNOS、bcl-2基因水平;末端转移酶标记法原位检测大脑神经细胞凋亡状况. 结果老年大鼠大脑组织NO水平和nNOS活性分别是(2.61±0.10)μmol*L-1和(398.22±21.62)fmol*mg-1*min-1,显著高于青年大鼠的(1.54±0.15)μmol*L-1和(234.38±16.24)fmol*mg-1*min-1.老年大鼠大脑nNOS的基因水平和蛋白表达水平均升高,抗凋亡基因bcl-2水平降低.在老年大鼠大脑质皮检测到散在的凋亡细胞. 结论老年大鼠大脑组织NO水平升高是由于nNOS活性升高所致.nNOS活性的增高部分是由其基因和蛋白水平来决定的.老年大鼠大脑组织NO异常升高可能是导致神经组织损伤进而凋亡的原因之一.     

高碘对大鼠海马一氧化氮合酶蛋白表达的影响

目的：探讨高碘对大鼠学习记忆功能的影响和海马一氧化氮合酶（NOS）活性变化的关系。方法：采用Y－迷宫试验和免疫组化ABC方法对高碘大鼠海马内神经型一氧化氮合酶（nNOS)的变化进行研究。结果：高碘大鼠学习能力比对照组明显降低（P＜0．05），高碘大鼠海马nmNOS阳性神经细胞数目较对照组明显减少（P＜0．05），结论：高碘对大鼠学习记忆能力的影响与其海马nNOS阳性神经细胞数目减少有关。     

硫化氢减轻吗啡依赖大鼠戒断症状的机制

目的观察硫化氢(H2S)对吗啡依赖大鼠戒断症状、体质量、一氧化氮(NO)含量以及一氧化氮合酶(NOS)活性的影响,探讨H2S减轻吗啡依赖大鼠戒断症状的机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、吗啡依赖组、硫氢化钠(Na HS)组和羟胺(HA)组。吗啡依赖组按剂量递增原则皮下注射吗啡,Na HS组和HA组分别于注射吗啡前30 min腹腔注射Na HS和HA,对照组注射等量生理盐水。纳洛酮诱发戒断症状确定模型成功建立,然后观察四组大鼠戒断症状和体质量变化,比色法测定大鼠血浆及海马组织NO含量,Real time PCR测定海马组织n NOS m RNA表达量。结果吗啡依赖组和HA组与对照组比较,戒断症状积分升高(P0.05),体质量下降(P0.05),血浆和海马组织NO含量以及NOS活性升高(P0.05);Na HS组与依赖组相比,戒断症状积分降低(P0.05),体质量增加(P0.05),NO含量以及NOS活性下降(P0.05)而Na HS组与对照组比较,戒断症状、体质量、NO含量以及NOS活性均无显著差异(P0.05)。结论外源性H2S可减轻吗啡依赖大鼠戒断症状,控制吗啡依赖大鼠体质量的下降,其作用机制可能与外源性H2S抑制NO的产生、下调n NOS m RNA表达有关。     

丝胶对糖尿病大鼠海马一氧化氮含量及一氧化氮合酶表达的影响

目的 观察彩色蚕茧提取物.丝胶对糖尿病大鼠海马一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)表达的影响.方法 48只雄性SD大鼠随机分为4组,正常对照组、糖尿病模型组、丝胶组和二甲双胍组,每组12只.模型组、丝胶组和二甲双胍组大鼠均采用2%链脲佐菌素连续腹腔注射建立糖尿病动物模型,以血糖≥16.7 mmol/L作为成模标准.待模型成功建立后,丝胶组和二甲双胍组大鼠分别给予丝胶(2.4 g·kg-1·d-1)和二甲双胍(55.33 mg·kg-1·d-1)灌胃,连续35 d.采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠的空间学习记忆能力,免疫组化染色观察海马神经元神经型一氧化氮合酶(nNOS)的表达,硝酸还原酶法检测海马NO的含量.结果 与正常大鼠比较:糖尿病模型大鼠的空间学习记忆能力明显下降.海马神经元nNOS的表达以及海马NO的含量明显升高(P<0.05,P<0.01).与糖尿病模型大鼠比较:丝胶组和二甲双胍组大鼠的空间学习记忆能力明显提高,海马神经元nNOS的表达以及海马NO的含量明显降低(P<0.05,P<0.01);且丝胶组与二甲双胍组比较无明显差异(P>0.05).结论 丝胶可通过减轻糖尿病时过量NO对海马神经元的毒性提高糖尿病大鼠的学习记忆能力,从而改善糖尿病时的认知功能障碍.     

卡托普利和氯沙坦对血管性痴呆模型大鼠氧自由基及一氧化氮的影响

目的 观察卡托普利和氯沙坦对血管性痴呆(VD)模型大鼠超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)的影响,分析卡托普利和氯沙坦抗脑缺血损伤的作用机制.方法 采用不同时间点分别结扎左、右颈总动脉建立大鼠血管性痴呆模型,用卡托普利和氯沙坦灌胃给药4 w观察学习记忆能力后,测定脑组织SOD活性、MDA、NO含量及NOS活力的变化.结果 卡托普利组和氯沙坦组均可拮抗脑缺血引起的脑组织SOD活性的下降及MDA含量的升高,能明显抑制脑组织NOS活性及NO的含量.结论 卡托普利及氯沙坦均可通过增加氧自由基的清除,影响NOS的活性及NO的含量改善VD模型大鼠学习记忆能力.     

肝硬化大鼠全胃肠外营养时一氧化氮和一氧化氮合酶活性的变化及意义

目的 观察一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）活性在肝硬化大鼠全胃肠外营养（TPN）时的变化,并探讨其意义。方法 Wistar大鼠分为3组：正常组8只,肝硬化对照组6只,肝硬化TPN组7只。测定血清NO浓度、肝脏NO含量和肝脏NOS比活性,观察肝脏β－BADPH黄递酶组化染色。结果 除TPN组一只大鼠因输液过快,肺水肿死亡外,其余大鼠均成活。血清NO浓度、肝脏NOS比活性,肝硬化对照组比正常组升高明显（P＜0．05）,肝硬化TPN级比肝硬化对照组升高明显（P＜0．05）。肝脏NO含量,肝硬化对照组比对照组升高明显（P＜0．05）,但肝硬化TPN组比肝硬化对照组降低明显（P＜0．05）。肝脏β－NADPH黄递酶组化染色,正常组为－,肝硬化对照组为＋,肝硬化TPN组为＋＋。结论 NO可能是一种抗肝损伤因子,损伤因子存在时,表现为肝脏NOS活性增强,当肝脏NO含量减少时,表现为肝脏损害的加重。     

丹参酮治疗阿尔茨海默病样大鼠的作用机制

目的　探讨丹参酮治疗阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease ,AD)样大鼠的作用机制。方法　应用凝聚态 β 淀粉样肽 1～ 4 0片段 (Aβ1 4 0 )注入大鼠海马内建立AD样病变的动物模型 ;用乙酰胆碱酯酶 (AChE)组织化学方法观察大鼠海马内胆碱能纤维的变化 ;用免疫组织化学和Westernblot检测海马内神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)、诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的表达。结果　造模型 14d后 ,海马内AChE阳性纤维面积百分比显著低于对照组 ;海马内iNOS的表达上调 ,而nNOS的表达降低。此外 ,各亚区内AChE阳性纤维面积百分比与iNOS细胞数存负性相关。而经丹参酮灌胃处理后 ,对上述变化有不同程度的改善。结论　丹参酮能明显地保护AD样大鼠脑内胆碱能系统 ,并能调节一氧化氮合酶的表达 ,这可能为其治疗AD样大鼠的作用机制之一     

甲状腺激素对仔鼠大脑皮质中NO/cGMP信号转导通路的作用

目的研究甲状腺激素对大鼠仔鼠大脑皮质中一氧化氮(NO)水平、一氧化氮合酶(NOS)活性和环鸟苷酸(cGMP)水平的影响,为探讨甲状腺激素对神经系统发育的作用机制提供实验资料。方法取怀孕3d的SD大鼠10只,随机分为实验组与对照组。实验组饮含1%高氯酸钠的自来水,对照组饮自来水,直至仔鼠产下15d(其产下的仔鼠分别为甲状腺功能低下仔鼠及正常仔鼠)。采用放射免疫法测定仔鼠血清中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)和仔鼠大脑皮质cGMP水平,采用硝酸还原酶法测仔鼠大脑皮质中NO水平,采用分光光度计法测NOS活性。结果实验组仔鼠血清FT3、FT4明显低于对照组(P<0.01)。实验组仔鼠大脑皮质中NO水平、NOS活性及cGMP水平也较对照组显著降低(P<0.01)。相关分析表明:血清FT3与大脑皮质中NO、cGMP水平呈显著正相关,r值分别为0.91、0.97,P<0.01;血清FT4与大脑皮质中NO、cGMP水平也呈显著正相关,r值分别为0.90、0.96,P<0.01;大脑皮质中NO与cGMP水平呈显著正相关,r值为0.90,P<0.01。结论甲状腺激素的缺乏可降低仔鼠大脑皮质中NO、cGMP水平,NO/cGMP信号转导系统在甲状腺功能低下导致脑发育障碍中发挥重要作用。     

Reactive oxygen and nitrogen species balance in the determination of thyroid hormones-induced cardiac hypertrophy mediated by renin-angiotensin system

Role of reactive oxygen species (ROS)/nitric oxide (NO) balance and renin-angiotensin system in mediating cardiac hypertrophy in hyperthyroidism was evaluated in an in vivo and in vitro experimental model. Male Wistar rats were divided into four groups: control, thyroid hormone, vitamin E (or Trolox, its hydrosoluble analogue), thyroid hormone+vitamin E. Angiotensin II receptor (AT1/AT2) gene expression, immunocontent of AT1/AT2 receptors, angiotensinogen, NADPH oxidase (Nox2), and nitric oxide synthase isoforms, as well as ROS concentration (hydrogen peroxide and superoxide anion) were quantified in myocardium. Thyroid hormone increased ROS and NO metabolites, iNOS, nNOS and eNOS isoforms and it was accompanied by cardiac hypertrophy. AT1/AT2 expression and the immunocontent of angiotensinogen and Nox2 were enhanced by thyroid hormone. Antioxidants reduced ROS levels, Nox2, AT1/AT2, NOS isoforms and cardiac hypertrophy. In conclusion, ROS/NO balance may play a role in the control of thyroid hormone-induced cardiac hypertrophy mediated by renin-angiotensin system.     

乙醇诱导脂肪肝过程中肝组织一氧化氮合酶的表达及作用

目的　观察乙醇诱导脂肪肝过程中肝组织一氧化氮合酶 (NOS)的表达 ,探讨不同亚型NOS表达与脂质过氧化的关系。方法　在大鼠饮水中加入乙醇建立乙醇性脂肪肝模型 ,采用免疫组化和逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)的方法动态观察肝组织中NOS的蛋白及基因表达 ,同时检测肝组织中一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)含量。结果　成功建立乙醇性脂肪肝大鼠模型。与正常对照组相比 ,造模大鼠肝组织在第 4周时诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)表达已显著增加 (P <0 .0 5 ) ,第 12周达高峰 ,而后有所下降 ,第 2 0周时又明显上升 (P <0 .0 1)。内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)在第 4周时表达无明显改变 (P >0 .0 5 ) ,随造模时间延长而逐渐降低 (P <0 .0 5 )。肝组织中NO水平在第 4周时无明显升高 (P>0 .0 5 ) ,以后显著增加 ,第 12周达高峰 ,而后有所下降 ,第 2 0周时又明显上升 (P <0 .0 1)。肝组织中MDA含量在第 4周已显著升高 (P <0 .0 5 ) ,随饮用乙醇时间延长进行性增加。肝组织中NO、MDA含量与iNOS表达成正相关 (P <0 .0 1) ,与eNOS表达成负相关 (P <0 .0 1)。结论　乙醇诱导脂肪肝过程中肝组织NO水平升高主要与iNOS的活化有关 ,iNOS产生的NO可能与脂质过氧化损伤有关 ,而eNOS产生的NO可能起抗脂质过氧化损伤的保护作用。     

糖尿病大鼠肾脏一氧化氮系统基因表达的研究

目的 研究糖尿病大鼠肾脏一氧化氮系统基因的表达。方法 观察了１２周ＳＴＺ－糖尿病大鼠肾脏皮质一氧化氮（ＮＯ）含量及一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）活力,并应用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测了肾脏皮质诱生型一氧化氮合成酶ｍＲＮＡ水平的改变。结果 糖尿病大鼠肾脏皮质ＮＯＳ活性及ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ水平明显高于正常对照组（Ｐ〈０．０５）,然而ＮＯ含量却反而下降（Ｐ〈０．０５）。结论 糖尿病大鼠肾脏一氧化氮合成障碍,灭活加速     

一氧化氮能神经调节异常在腹泻型肠易激综合征患者中的作用

目的　探讨一氧化氮 (NO)在肠易激综合征 (IBS)发病机制中的作用 ,并从基因水平揭示NO含量改变的原因。方法　 (1)应用电子气压泵及灌注导管测压仪研究 2 5例腹泻型IBS患者及 15例正常志愿者的肛门、直肠压力、直肠顺应性、乙状结肠和直肠运动指数以及直肠对容量刺激的感觉阈值 ;(2 )应用硝酸还原酶法测定两组肠黏膜NO的含量 ;(3)NADPH黄递酶组化法和计算机图像分析系统对两组肠黏膜肌层一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经纤维作定量分析 ;(4)采用荧光定量PCR(FQ PCR)方法对神经型一氧化氮合酶 (nNOS)的基因表达进行定量分析。结果　 (1)肠道测压 :IBS患者的直肠静息压、肛管上部静息压、收缩压、松弛压、肛管下部静息压、收缩压、松弛压和直肠顺应性与正常人比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;患者乙状结肠和直肠运动指数明显高于正常人 (P <0 .0 5 ) ;(2 )直肠内脏感觉阈值 :最低感觉阈值、排便阈值和疼痛阈值明显低于正常人 (P <0 .0 5 ) ;(3)肠黏膜NO含量 :患者结肠黏膜NO含量显著低于正常人 ,并且患者的NO含量与运动指数成负相关 ,与感觉阈值、排便阈值、疼痛阈值呈正相关 (P <0 .0 5 ) ;(4)NADPH组化染色 :IBS患者黏膜肌层NOS阳性神经纤维的面积和平均吸光度较正常人显著减少 (P <0 .0 5 ) ;(5 )NOS mRNA     

功能性便秘患者乙状结肠黏膜内胃肠激素及一氧化氮的变化

目的探讨功能性便秘患者胃肠激素及一氧化氮(NO)的变化,以及它们可能的作用和临床意义。方法采用放免等方法测定了35例符合罗马Ⅱ便秘诊断标准的慢性便秘患者和11例正常对照者乙状结肠黏膜内血管活性肠肽(VIP)、生长抑素(SS)、P物质(SP)、胃动素(MTL)及一氧化氮合成酶(NOS)的含量。结果VIP、SS和NOS在便秘组显著高于正常人(P<0.01);MTL在便秘组显著低于正常人(P<0.01);SP在正常人和便秘组之间无差别(P>0.05)。结论功能性便秘患者存在着VIP、SS和MTL的含量和NOS的活性异常,并且这些异常在其发病中起着重要作用。     

肝硬化大鼠食管一氧化氮合酶分布定位研究

目的探讨一氧化氮（ＮＯ）在肝硬化食管静脉曲张及血流动力学改变中的作用。方法应用还原型辅酶Ⅱ－黄递酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组化染色观察ＣＣＩ４所致肝硬化大鼠食管下段一氧化氮合酶（ＮＯＳ）分布；应用荧光法检测大鼠食管组织匀浆及血清中ＮＯ含量；应用５７Ｃｏ标记微球测定大鼠血流动力学指标。结果肝硬化鼠食管粘膜及粘膜下血管内皮ＮＯＳ呈强阳性反应，而正常鼠则呈弱阳性或阴性反应；肝硬化大鼠食管及血清中ＮＯ含量显著升高。且全部出现门脉高压和高动力循环状态。结论ＮＯ在肝硬化大鼠食管静脉曲张及血流动力学改变中可能起重要作用。     

硝酸甘油治疗大鼠骨质疏松症血清NO、NOS的变化

目的初步探讨用硝酸甘油治疗骨质疏松症(OP)及其与一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的关系。方法将40只6月龄雌性大鼠随机分成假手术组(15只)和OP模型组(25只),其中OP模型组去卵巢造成骨质疏松模型,从其中随机选5只大鼠测定血清NO、NOS的变化,并与5只假手术组大鼠比较。剩余OP模型组大鼠随机分为OP对照组(10只)与硝酸甘油治疗组(10只),硝酸甘油治疗组经硝酸甘油治疗骨密度升高后,测其血清NO、NOS的变化,并与OP对照组及假手术组比较。结果OP模型组血清NO、NOS低于假手术组(P<0.01,P<0.05)。硝酸甘油治疗组大鼠骨密度升高后,其血清NO、NOS高于OP对照组(P<0.01,P<0.05),而与假手术组差异无显著意义(P>0.05)。结论NO、NOS参与了骨质疏松症的病理生理过程,硝酸甘油治疗骨质疏松症可能与NO、NOS有关。     

Growth hormone-releasing hormone and gonadotropin-releasing hormone stimulate nitric oxide production in 17beta-estradiol-primed rat anterior pituitary cells

It was reported that neuronal nitric oxide synthase (nNOS) was expressed only in gonadotrophs and folliculo-stellate cells in the anterior lobe of the pituitary gland. However, recent studies have demonstrated the occurrence of nNOS in the somatotrophs and lactotrophs. In the present study, we investigated effects of growth hormone-releasing hormone (GHRH), gonadotropin-releasing hormone (GnRH), and 17β-estradiol on nitric oxide (NO) release in cultured rat anterior pituitary cells in vitro. The NO ₂ ⁻ level in the incubation medium of the rat anterior pituitary cells was dependent on the cell density. Pretreatment with 10 μM 17β-estradiol resulted in an increase in medium NO ₂ ⁻ level. GHRH and GnRH failed to change medium NO ₂ ⁻ levels, but they elicited increases in medium NO ₂ ⁻ levels in estrogen-treated cells. The GHRH-induced increase in NO ₂ ⁻ level was inhibited by Nχ-nitro-l-arginine methyl ester, a NOS inhibitor. These findings suggest that GnRH and GHRH could activate nNOS in the gonadotrophs and the somatotrophs, respectively.     

肝硬化大鼠内脏血管一氧化氮合酶基因表达及活性的动静脉差异

目的观察肝硬化内脏血管一氧化氮合酶(NOS)表达及活性的动静脉差异在门静脉高压形成机制中的意义.方法以四氯化碳皮下注射制备大鼠门静脉高压模型,应用免疫组织化学、化学发光以及RT-PCR分别检测大鼠门静脉(PV)和肠系膜动脉(MA)组织NOS的分布、活性及基因表达.结果肝硬化组大鼠PV和MA血管各层均有iNOS分布,而eNOS则局限于内皮层.肝硬化大鼠内脏血管NOS活性[pmol.min-1.mg-1.蛋白(PV 23.82±2.48,MA 43.46±4.93)]及mRNA表达均较对照组(PV 16.48±1.54,MA 16 95±2.34)显著升高(P＜0.05与0.01);同时肝硬化大鼠MA的总NOS活性和eNOS活性及eNOS mRNA表达均显著高于PV(P＜0.01).结论内脏血管eNOS亚型活性及表达增加可能在肝硬化时NO产生增多中起主要作用,而NOS活性及表达在MA与PV之间的动静脉差异,可能是NO参与门脉高压形成的重要机制之一.