miRNA-21对宫颈癌Hela细胞顺铂化疗增敏作用的研究

目的探讨microRNA-21 (miRNA-21)对宫颈癌Hela/DDP耐药的影响及其相关机制。方法实时荧光定量PCR(Real-PCR)检测Hela细胞、Hela/DDP、转染后miR-21-siRNA组及miR-21-neg中miRNA-21的表达量。MTT法检测顺铂(DDP)对Hela/DDP增殖的影响;流式细胞仪分析Hela/DDP细胞周期及凋亡率;Western blot检测顺铂处理过的Hela/DDP中PTEN蛋白的表达。结果在Hela/DDP组中miRNA-21明显高于Hela组,差异具有统计学意义(P0.05);转染miRNA-21siRNA后,Hela/DDP中miRNA-21明显低于空白对照组及阴性对照组,差异具有统计学意义(P0.05);与空白对照组及阴性对照组相比,顺铂作用Hela/DDP后,转染miRNA-21 siRNA组细胞增殖抑制率、凋亡率及PTEN蛋白表达水平均升高,并呈现G0/G1期阻滞作用,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 miRNA-21可抑制Hela/DDP细胞增殖、阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡,进而提高Hela/DDP细胞对顺铂的敏感性,可能与宫颈癌Hela/DDP细胞中PTEN蛋白合成增加有关。     

载顺铂聚乳酸静电纺丝膜对口腔鳞癌细胞的杀伤作用研究

目的 探讨载顺铂聚乳酸静电纺丝膜对口腔鳞癌CAL-27细胞的杀伤作用.方法 利用静电纺丝技术将顺铂（DDP）、聚乳酸（PLA）混合溶液制成载顺铂聚乳酸静电纺丝膜（DDP/PLA膜）.通过扫描电镜（SEM）观察DDP/PLA膜表观形态,紫外分光光度分析法测定PLA膜的降解速率,MTT法观察细胞的增殖活性.实验分为空白对照组,DDP组,PLA膜组,DDP/PLA膜组.结果 SEM可以观察到纳米纤维表面光滑、直径均匀;降解速率显示聚乳酸静电纺丝膜在第一天降解50％左右,以后降解缓慢,在第13天降解趋于完毕;细胞增殖活性结果显示：不含药物的纯膜对细胞基本无影响,不具有统计学意义（P＞0.05）;DDP组、DDP/PLA组抑制细胞增殖活性,有统计学差异（P＜0.05）;实验前3天DDP组作用效果好于DDP/PLA膜组,3天后DDP/PLA膜组作用效果优于DDP组,与DDP组相比,相同剂量的DDP/PLA组对细胞的杀伤作用时间延长.结论 DDP/PLA膜可以杀伤口腔鳞癌CAL-27细胞,3天后的作用效果优于DDP组;DDP/PLA膜具有缓释作用,作用时间较DDP组长.     

长链非编码RNA MALAT1对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制

目的探究长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子1(MALAT1)对口腔鳞癌细胞(OSCC)的增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法转染小干扰MALAT1(si-MALAT1)至TSCCA细胞分为空白组、si-NC组、siMALAT1组;转染小干扰对照(si-NC)、si-MALAT1、抑制剂对照(inhibitor-NC)、miR-218inhibitor至TSCCA细胞分为空白组、si-NC+inhibitor-NC组、si-MALAT1+inhibitor-NC组、si-NC+miR-218inhibitor组、si-MALAT1+miR-218inhibitor组。qRT-PCR、WB法检测MALAT1、miR-218、Fbxw8表达; MTT法检测细胞增殖情况;平板细胞克隆形成试验检测菌落形成; Transwell检测细胞迁移、侵袭能力;荧光素酶活性检测MALAT1、miR-218、Fbxw8三者靶向调控关系。结果与正常HIOE细胞系相比,TSCCA细胞系中MALAT1、Fbxw8表达均升高,miR-218表达均降低(P 0. 05)。与空白组、si-NC组相比,si-MALAT1组MALAT1表达、细胞菌落、迁移、侵袭数量降低,miR-218表达、细胞抑制率升高,差异均有统计学意义(P 0. 05)。在MALAT1 3'UTR-Mut细胞中,miR-218 mimis组荧光素酶活性低于miR-218NC组(P 0. 05)。与空白组、si-NC+inhibitor-NC组、si-MALAT1+miR-218inhibitor组相比,si-NC+miR-218inhibitor组MALAT1表达、菌落、细胞侵袭、迁移数量、Fbxw8蛋白表达升高,miR-218表达降低; si-MALAT1+inhibitor-NC组MALAT1表达、菌落、细胞侵袭、迁移数量、Fbxw8蛋白表达降低,miR-218表达升高(P 0. 05)。在Fbxw83'UTR-Mut细胞中,miR-218 mimis组荧光素酶活性低于miR-218 NC组(P 0. 05)。结论在OSCC中MALAT1、Fbxw8表达上调,miR-218表达下调,MALAT1可能通过miR-218介导Fbxw8调控OSCC的增殖、迁移和侵袭。     

血清miR-155联合组织PTEN检测对子宫内膜癌的诊断价值

目的 探讨血清微小RNA-155(miR-155)联合组织人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)检测对子宫内膜癌的诊断价值。方法 选取2015年9月至2018年6月邯郸市第一医院妇产科收治的子宫内膜癌51例、良性病变患者52例,采用荧光实时定量聚合酶链反应(Q-PCR)法检测研究对象血清中miR-155表达,免疫组织化学法检测各组子宫内膜组织中PTEN水平,并通过受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-155、PTEN及二者联合对子宫内膜癌的诊断价值。结果 与良性病变组相比,子宫内膜癌组血清miR-155表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与良性病变组相比,子宫内膜癌组PTEN蛋白表达量显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线显示,血清miR-155水平预测患者子宫内膜癌发生的曲线下面积为0.876,灵敏度为96.3%,特异度为94.2%;子宫内组织PTEN水平预测患者子宫内膜癌发生的曲线下面积为0.952,灵敏度为94.1%,特异性度为92.3%;二者联合检测诊断子宫内膜癌曲线下面积为0.991,灵敏度为99.2%,特异度为92.5%。结论 血清miR-155联合组织PTEN检测可作为子宫内膜癌的诊断指标。     

miRNA-21在胆囊癌中的表达情况及对胆囊癌细胞增殖活性的影响

目的 研究miRNA-21在胆囊癌细胞的表达情况和下调miRNA-21对胆囊癌细胞增殖活性的影响.方法 收集50例胆囊癌患者的肿瘤组织和癌旁正常组织,利用荧光定量PCR(q-PCR)检测胆囊癌组织和正常癌旁组织中miRNA-21的表达水平,再以人胆囊癌细胞株为研究对象,转染miRNA-21 inhibitor下调miR...     

肺癌顺铂耐药的分子机制研究新进展

顺铂是肺癌治疗常用化疗药物，其抗肿瘤的毒性和有效性得到肯定。但顺铂极易形成耐药，包括先天性耐药和获得性耐药，这限制了它的应用。体内外研究发现肿瘤耐药的分子机制很复杂，包括凋亡信号传导异常、凋亡抑制因子表达异常、DNA损伤修复基因表达异常等几个方面。     

抑制葡萄糖调节蛋白78基因表达逆转卵巢癌顺铂耐药作用的实验研究

目的探讨以葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因为靶向的RNA干扰(RNAi)抑制GRP78基因的表达,对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的影响。方法以GRP78基因为靶向的pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重组质粒的构建,脂质法转染至细胞中;RT-PCR及Western blot方法检测GRP78 mRNA及蛋白表达;Western blot方法检测CHOP蛋白表达;MTT法检测不同浓度顺铂作用下细胞存活率,计算IC50及耐药指数。结果 RT-PCR及Western blot检测转染GRP78 siRNA重组质粒24 h、48 h7、2 h均能明显抑制SKOV3/DDP细胞GRP78基因表达,其中48h抑制效果最为明显;抑制SKOV3/DDP细胞GRP78基因表达能上调CHOP蛋白表达;顺铂作用24h,SKOV3/DDP细胞的IC50(26.13μg/ml)是其亲本SKOV3细胞IC50(8.25μg/ml)的3.1倍;转染pSH1Si-GRP78重组质粒后SKOV3/DDP细胞IC50(11.62μg/ml)明显降低。结论转染GRP78 siRNA重组质粒有效抑制SKOV3/DDP细胞GRP78基因表达;抑制GRP78基因表达能逆转SKOV3/DDP细胞的顺铂耐药性。     

口腔鳞癌细胞缺氧诱导因子表达水平与其对顺铂敏感性的研究

目的 检测不同口腔鳞癌细胞的缺氧诱导因子-1α的表达水平,探讨口腔鳞癌细胞对顺铂的敏感性是否与其表达水平相关.方法 将OSC2、OSC4、OSC5、OSC6口腔鳞癌细胞培养并检测其缺氧诱导因子-1α的表达水平,利用四唑蓝比色法(MTT)检测各种细胞对不同浓度顺铂的生长抑制率.结果 OSC2和OSC4的缺氧诱导因子-1α的表达水平明显低于OSC5和OSC6,OSC2和OSC4对顺铂的敏感性高于OSC5和OSC6,其生长受顺铂抑制明显.结论 缺氧诱导因子-1α的表达水平与口腔鳞癌细胞对顺铂的敏感性相关,缺氧诱导因子可能成为肿瘤化疗药物的新分子靶点.     

lncRNA PCGEM1对口腔鳞癌细胞生物学行为的调控作用

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)前列腺癌基因表达标记1(prostate cancer gene expression marker 1,PCGEM1)对调控miR-506-3p/RAB22A轴介导口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用.方法 正常人口腔角质形成细胞(nor...     

口腔鳞状细胞癌中细胞角蛋白研究进展

口腔鳞状细胞癌（OSCC）是口腔最常见的上皮源性恶性肿瘤，其中大多数是由15／腔黏膜癌前病变发展而来。细胞角蛋白（CK）是上皮细胞特征性标记物，CK19在OSCC的发生、发展和转移中出现了异常表达。本文综述OS-CC中CK19研究进展。     

EphA2、FAK在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:探讨Eph受体酪氨酸激酶A2(EphA2)和局部黏着斑激酶(FAK)在口腔鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达情况及其在口腔鳞癌发生、发展中的意义。方法:采用免疫组织化学方法检测51份口腔鳞癌组织的EphA2和FAK表达情况,并与正常口腔黏膜组织作比较,同时分析口腔鳞癌EphA2和FAK的表达和病理因素的关系。结果:EphA2和FAK在口腔鳞癌阳性率均明显低于正常口腔黏膜(P<0.05)。不同临床分期及病理分期口腔鳞癌EphA2和FAK的表达比较差异有统计学意义(P<0.05)。EphA2与FAK的阳性率呈正相关(r=0.431,P<0.05)。结论:EphA2和FAK在口腔鳞状细胞癌发生、发展中共同作用,对于两者的综合评价有望作为判断口腔癌恶性程度的指标及选择治疗新靶点的参照。     

Tumor invasion front in oral squamous cell carcinoma

Oral squamous cell carcinoma is a neoplasm that originates from the epithelial mucosa. It is usually more frequent between the fifth and sixth decades of life, and more than 90% of carcinomas of the oral cavity are squamous cell carcinoma. It is an invasive neoplasia with a significant recurrence rate; 40% of patients present with metastases in the cervical lymph nodes at the time of diagnosis. The tumor invasion front is a characteristic of tumor growth, which can be infiltrative or noninvasive. The histopathological parameters examined include the number of mitoses, depth of the tumor, invasion pattern, degree of keratinization, and nuclear pleomorphism. For the pathologist, these parameters are routinely evaluated but are not reported to the treating physician in all cases, which we consider to be useful information when determining the therapeutic route.     

蜂毒肽对口腔鳞癌细胞的增殖及迁移能力的影响

目的 探讨蜂毒肽对人口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞系Scc-15、Tca8113、Cal-27增殖性、迁移性的影响及其作用机制.方法 以用四种不同浓度梯度(2、4、8、16 μg/ml)的蜂毒肽分别处理的OSCC细胞系为蜂毒肽组,以不含药的培养液处理的细胞系为对照组.采用MTT实验检测蜂毒肽对OSCC细胞系Scc-15...     

YY1-mediated PTEN dephosphorylation antagonizes IR-induced DNA repair contributing to tongue squamous cell carcinoma radiosensitization

Ionizing radiation (IR) confers a survival advantage in tongue squamous cell carcinoma (TSCC), however, IR resistance limits its efficacy. Although Yin Yang 1 (YY1) has been reported to play a role in genotoxic drug resistance by accelerating DNA repair, its role in TSCC radioresistance remains unclear. In this study, we examined YY1 mRNA and protein expression in human tongue cancer samples using qRT-PCR and western blotting, respectively. DNA array data identified YY1 mRNA expression in IR sensitivity or resistance cell lines and tissues. Tongue carcinoma primary cells and CAL27 cells with YY1 stably overexpressed or knocked-down were exposed to IR and evaluated for cell proliferation and apoptosis by CCK8-assay and caspase-3 assay, respectively. We also examined DNA damage- or repair-related indicators, such as YY1, p-H2AX, nuclear PTEN, p-PTEN, and Rad51 through Western blot analysis. Additionally, we explored the mechanism of IR-induced PTEN nuclear translocation by introducing a series of PTEN phosphorylation site mutations and co-IP assay. We observed that YY1 mRNA and protein are highly expressed in TSCC tissues, which was correlated with worse overall survival. Moreover, higher expression of YY1 and Rad51 was observed in radioresistant cells and tissues, overexpression of YY1 led to IR resistance in TSCC cells, whereas YY1 knockdown sensitized TSCC cells to IR. The underlying mechanism showed that the overexpression of YY1 upregulated nuclear PTEN and Rad51 expression, which is essential for DNA repair. IR upregulated YY1, nuclear PTEN, and Rad51; thus, knockdown of YY1 completely blocked IR-induced upregulation of nuclear PTEN/Rad51. IR upregulated PTEN phosphorylation, and mutation of the phosphorylation site of Ser380 nearly completely blocked IR-induced PTEN nuclear translocation. Furthermore, the phosphatase PP2A negatively regulated pS380-PTEN, and knockdown of YY1 completely blocked IR-induced pS380-PTEN through PP2A. In conclusion, knockdown of YY1 enhanced TSCC radiosensitivity through PP2A-mediated dephosphorylation of PTEN Ser380; thus, antagonizing the IR-induced nuclear PTEN/Rad51 axis and targeting YY1 may reverse IR resistance in TSCC.     

microRNA-21参与调控膀胱癌细胞增殖及多柔比星敏感性的研究

目的膀胱移行细胞癌是一种常见的恶性肿瘤,且复发率很高。由于microRNA-21(miR-21)在多种类型肿瘤中参与肿瘤发生及耐药,故通过此次研究探索其在膀胱移行细胞癌中的功能。方法肿瘤组织及癌旁正常组织中的miR-21及目的蛋白PTEN表达水平分别采用实时qRT-PCR及Western blot方法进行测量。采用MTT法评估miR-21对于癌细胞增殖以及多柔比星敏感性的影响。采用流式细胞术探究T24细胞系中多柔比星引起的细胞凋亡。结果与癌旁正常膀胱组织相比,miR-21在膀胱肿瘤组织中的表达水平显著上调,而PTEN蛋白表达低水平。活体内研究发现miR-21与PTEN表达呈负相关。miR-21过表达可显著促进T24细胞系的细胞增殖与多柔比星敏感性。结论 miR-21可能是膀胱移行细胞癌的致癌因素,有望成为膀胱移行细胞癌的治疗新靶点。     

Caspase-3及P53蛋白在口腔扁平苔藓及口腔鳞癌中表达意义

目的探讨Caspase-3及P53蛋白在口腔扁平苔藓及鳞癌癌变过程中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测45例口腔扁平苔藓（扁平苔藓组）和46例口腔鳞癌（鳞癌组）和15例正常口腔黏膜组织（对照组）中Caspase-3及P53蛋白的表达情况并进行比较。结果Caspase-3蛋白表达在扁平苔藓组（71．11％）高于鳞癌组（47．83％）（P〈0．05）、但低于对照组（93．33％）（P〈0．05）;P53蛋白在鳞癌组中阳性表达率（78．26％）明显高于对照组（0）和扁平苔藓组（28．89％）（P均〈0．05）;Caspase-3蛋白与P53蛋白呈负相关（r=0．339,P=0．021）。结论Caspase-3蛋白可抑制口腔扁平苔藓和鳞癌的发展,P53蛋白则在其发展中起促进作用。     

FXYD3在宫颈鳞癌患者组织中的表达及与临床病理参数的关系

目的检测FXYD3在宫颈鳞癌患者组织中的表达,并分析其与患者临床病理参数的关系。方法分别通过GEPIA数据库及癌症基因组图谱(TCGA)门户网站UALCAN分析FXYD3在正常宫颈组织及宫颈鳞癌组织样本中的表达情况,使用cBioPortal在线软件预测分析FXYD3共表达基因,并通过ImageGP在线软件进行信号通路富集分析;STRING网站进行FXYD3蛋白互作共表达分析。收集2015年9月至2018年1月郑州市妇幼保健院就诊的65例宫颈鳞癌组织标本及50例因子宫肌瘤手术切除的正常宫颈组织标本,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组FXYD3 mRNA的表达水平;免疫组化染色法检测FXYD3蛋白的表达水平,并分析其与宫颈鳞癌患者临床病理参数及预后的关系。结果数据库、qRT-PCR及免疫组化分析结果显示,宫颈鳞癌组织中FXYD3的表达水平[8.921(8.287,9.400)、10.244(9.569,10.749)、1.68±0.32、63.08%]均显著高于正常宫颈组织[0.995(0.346,5.837)、3.269(2.720,7.820)、1.00、28.00%],差异有统计学意义(Z分别为0.205、-6.107,t=15.011,χ~2=13.935;P均0.05);FXYD3的表达与宫颈鳞癌组织类型、临床分期及淋巴结转移有关(χ~2分别为7.934,8.737,11.274,P均0.05),FXYD3蛋白阳性表达患者的平均生存时间(OS)显著低于阴性表达患者(38.12个月vs 53.56个月,χ~2=5.485,P=0.019)。通过STRING网站在线绘制FXYD3蛋白互作网络图,并根据相关性评分分析证实相关性较强的前5个蛋白质分别为ATP1B1、ATP1B2、ATP1B3、ATP1A1、ATP1A2。通过cBioPortal数据库预测与FXYD3共表达基因417个;Enrichr网站通路富集分析结果显示,FXYD3共表达基因富集到的主要通路包括T细胞受体、B细胞受体、白细胞介素-17、趋化因子信号通路,氧化应激信号通路,非小细胞肺癌、膀胱癌等癌症信号通路,蛋白质水解、核黄素代谢、核酸合成代谢等信号通路。结论宫颈鳞癌组织中FXYD3的表达升高,且与患者组织类型、临床分期、淋巴结转移及预后有关,对宫颈鳞癌发生和预后有一定的监测价值。     

口腔鳞癌中HBD-1和HBD-2的表达与临床病理学特征的关系

目的检测β-防御素1（HBD-1）和β-防御素2（HBD-2）的表达与口腔鳞癌患者的病理组织类型、年龄、性别、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期以及淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化方法检测HBD-1和HBD-2的表达与口腔鳞癌患者的病理组织类型、年龄、性别、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期以及淋巴结转移的关系。结果HBD-1在口腔鳞状细胞癌组织中的表达与病理组织类型、性别、年龄、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、淋巴结转移不相关（P〉0．05）,HBD-2在不同病理组织类型中表达有明显差异（P〈0．05）,随着细胞的恶性程度的变化,HBD-2表达逐渐加强,而且进一步分析发现其在口腔鳞状细胞癌组织中的表达与性别、年龄、肿瘤大小不相关（P〉0．05）,但其表达在组织学分级高分化肿瘤组和低分化肿瘤组组间,TNM分期中Ⅰ期与Ⅱ期、Ⅰ期与Ⅲ期、Ⅰ期与Ⅳ期组间以及淋巴结是否转移组间存在显著性差异（P〈0．05）。结论HBD-1和HBD-2分别通过固有表达和诱导表达在口腔鳞癌的发生、发展中起重要作用。