丝氨酸蛋白酶抑制剂和血管内皮生长因子基因在口腔鳞癌中的表达

丝氨酸蛋白酶抑制剂 (headandneckserineproteinaseinhibitor,Headpin)是一种新发现的肿瘤抑制基因。我们应用逆转录PCR技术检测口腔鳞癌患者的癌、癌旁及相应正常口腔黏膜中Headpin和血管内皮生长因子 ( ,VEGF)mRNA的表达 ,探讨其在口腔鳞癌癌变中的意义。1.材料和方法 :( 1)研究对象 :18例口腔鳞癌患者 ,每例取癌组织、癌旁(距肿瘤临床边界 1cm)及相应正常口腔黏膜 3份标本 ,液氮保存。( 2 )实验方法 :提取总RNA ,逆转录合成cDNA ,PCR扩增Headpin、VEGF和内参照GAPDH基因。( 3)统计分析 :Bandscan凝胶图像分析系统处理 ,二基…     

口腔鳞癌中血管内皮生长因子表达和微血管密度与预后关系的研究

为研究口腔癌中血管内皮生长因子 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ)表达和微血管密度 (ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙ ,ＭＶＤ)及其与临床病理因素及预后的关系 ,我们对该肿瘤中ＶＥＧＦ表达和ＭＶＤ定量进行了研究。1 .材料和方法 :收集泰安市中心医院 56例口腔癌标本 ,均经病理证实 ,53例资料完整 ,3例失访。标本制成 5μｍ厚石蜡切片 ,采用ＳＡＢＣ免疫组化方法 ,一抗为抗ＶＥＧＦ单克隆抗体和Ⅷ因子相关抗原抗体 ,ＤＡＢ显色。ＶＥＧＦ判断标准为肿瘤细胞内出现棕黄色颗粒为阳性。微…     

口腔鳞癌中血管内皮生长因子和明胶酶-A的表达及低氧调节

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)和明胶酶 -A(matrixmetalloproteinase -2 ,MMP -2 )的表达与口腔鳞癌血管形成和临床的关系 ,以及低氧对其调节作用。方法　应用SABC免疫组化染色的方法检测 40例口腔鳞癌手术标本中VEGF、MMP -2的表达和微血管密度 (MVD) ,用酶联免疫吸附实验 (ELISA )的方法定量测定了低氧对口腔鳞癌TSCCa细胞系和颈淋巴转移癌GNM细胞系中VEGF和MMP -2活性的影响。结果　口腔鳞癌中VEGF、MMP -2的表达显著高于正常口腔黏膜组织 ,与肿瘤内MVD密切正相关 (P <0 .0 5 ) ,VEGF、MMP-2表达和口腔鳞癌中的MVD计数与口腔鳞癌病理分级和临床分期无关 ,与口腔鳞癌颈淋巴结转移密切相关 (P<0 .0 5 )。低氧可以显著增加口腔鳞癌细胞TSCCa细胞系和颈淋巴转移癌GNM系中VEGF和MMP -2的活性。结论　VEGF和MMP -2的表达可能在口腔鳞癌血管形成和转移中起重要作用 ,并受低氧调节 ,VEGF与MMP -2可能具有某种内在联系 ,有可能作为反映口腔鳞癌侵袭转移的生物学指标和抗血管治疗的靶点。     

转化生长因子β1对口腔鳞癌细胞系血管内皮生长因子的影响

目的　探讨转化生长因子 β1(TGF β1)和口腔鳞癌侵袭转移的关系。方法　采用ELISA和免疫组织化学法测量不同浓度TGF β1作用于口腔鳞癌TSCCa细胞系及颈淋巴转移癌GNM细胞系后血管内皮生长因子(VEGF)活性和阳性表达的变化。结果　不同浓度的TGF β1作用于TSCCa 12h后 ,VEGF活性和阳性表达与对照组相比 ,无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;而不同浓度的TGF β1作用于GNM细胞 12h后 ,VEGF活性和阳性表达与对照组相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,VEGF活性和阳性表达与TGF β1有剂量依赖关系。结论　TGF β1可能通过调节VEGF的活性和阳性表达的方式来参与口腔鳞癌侵袭转移。     

表皮生长因子受体在口腔鳞癌中的表达

本文采用抗表皮生长因子受体（Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ （ＥＧＦ）ｒｅｃｅｐｔｏｒ）多克隆抗体对５８例口腔鳞癌标本进行了免疫组织化学染色，结果显示：鳞癌Ｉ组ＥＧＦ受体表达阳性率为２１．４％，鳞癌Ⅱ级阳性率为２６．７％，鳞癌Ⅲ级阳性率为４０％，随着鳞癌组织学分级的升高，ＥＧＦ受体表达有增高趋势，提示：ＥＧＦ受体表达与鳞癌组织学分级有一定关系。     

口腔扁平苔藓及口腔鳞癌患者口腔黏膜组织中微小RNA-590表达研究

目的    研究口腔扁平苔藓（oral lichen planus,OLP）及口腔鳞癌（oral squamous carcinoma,OSCC）患者口腔黏膜组织中微小RNA-590（miR-590）的表达,探讨其在口腔黏膜细胞癌变中的作用及意义。方法    选择2014年3月至2015年12月间锦州市口腔医院收治且经病理学确诊的OLP患者32例（OLP组）和OSCC患者28例（OSCC组）,所有OLP患者均为初诊且经病理学确诊取材,OSCC患者均为术中病理确诊后开始取材。另选择20名健康志愿者作为对照组。采用实时荧光定量PCR技术检测3组受试者口腔黏膜组织中miR-590的表达水平并进行统计学分析。结果    OSCC组患者的miR-590相对表达水平（2.75 ± 0.78）最高,OLP组的相对表达水平（1.96 ± 0.52）次之,均显著高于对照组（0.77 ± 0.34）,差异有统计学意义（P < 0.05）。OSCC组与OLP组的miR-590表达差异有统计学意义（P < 0.05）。结论    与正常对照比较,miR-590的表达在OSCC和OLP组中显著升高,miR-590可能参与了口腔黏膜细胞癌变过程。     

表皮生长因子受体在口腔扁平苔藓组织中的表达

目的探讨口腔扁平苔藓(OLP)癌变及发病机制。方法采用免疫组化法检测10例正常口腔黏膜,16例扁平苔藓,10例扁平苔藓伴不典型增生,14例口腔鳞癌上皮组织中表皮生长因子受体(EGFR)的表达水平。结果OLP伴不典型增生组织中EGFR的表达高于正常黏膜(P<0.05)。口腔鳞癌中EGFR的表达高于正常黏膜及OLP(P<0.01)。结论EGFR的过表达在OLP的发生、发展过程中可能起着重要的作用。     

转化生长因子β1对口腔鳞癌细胞系血管内皮生长因子的影响

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和口腔鳞癌侵袭转移的关系.方法采用ELISA和免疫组织化学法测量不同浓度TGF-β1作用于口腔鳞癌TSCCa细胞系及颈淋巴转移癌GNM细胞系后血管内皮生长因子(VEGF)活性和阳性表达的变化.结果不同浓度的TGF-β1作用于TSCCa12h后,VEGF活性和阳性表达与对照组相比,无明显差异(P＞0.05);而不同浓度的TGF-β1作用于GNM细胞12h后,VEGF活性和阳性表达与对照组相比,有显著性差异(P＜0.05～0.01),VEGF活性和阳性表达与TGF-β1有剂量依赖关系.结论TGF-β1可能通过调节VEGF的活性和阳性表达的方式来参与口腔鳞癌侵袭转移.     

口腔鳞癌NOS和VEGF的表达及其与肿瘤血管形成的关系

目的　研究Ⅱ、Ⅲ型一氧化氮合酶 (iNOS、eNOS)和血管内皮生长因子 (VEGF)在口腔鳞癌中的表达及其与肿瘤血管形成的关系。方法　应用免疫组化检测 40例口腔鳞癌患者手术切除标本的iNOS、eNOS、VEGF的表达。抗CD34单克隆抗体显示血管内皮细胞。根据CD34阳性的血管内皮细胞来测定肿瘤微血管密度(MVD)。结果　iNOS、eNOS分别在 82 .9%、84.3%的口腔鳞癌中阳性表达 ,而正常口腔粘膜组织不表达。iNOS阳性的口腔鳞癌组织 33例MVD为 34 .3± 1.5 /高倍视野。iNOS阴性的组织为 30 .2± 2 .1/高倍视野 ,两者差异有显著性 (P <0 .0 1) ;VEGF阳性口腔鳞癌组织 2 4例MVD为 38.6± 2 .8/高倍视野 ,VEGF阴性组织为 2 4.2± 1.6 /高倍视野 ,两者差异有显著性 (P <0 .0 1) ,iNOS、eNOS的表达与VEGF的表达无相关性 (P >0 .0 5 )。结论　iNOS和VEGF可促进口腔鳞癌肿瘤血管形成 ,NOS和VEGF可能在口腔鳞癌的发生发展过程中起重要作用。     

VEGF-C及受体mRNA的表达与口腔鳞癌淋巴管生成的关系

目的探讨VEGF-C及受体在口腔鳞癌淋巴管生成中的作用。方法采用RT-PCR方法,检测47例口腔鳞癌组织标本、15例正常口腔黏膜VEGF-C、flt-4的表达;应用酶组织化学方法检测癌周微淋巴管密度(MLVD)。结果口腔鳞癌VEGF-C、flt-4mRNA的表达率分别为57.4%、61.7%,显著高于正常对照组的20%、20%(P<0.025);口腔鳞癌MLVD为14.04±6.92,显著高于正常对照组的5.48±2.62(P<0.001);VEGF-C、flt-4阳性组中,MLVD分别为17.38±4.90和17.34±4.69,显著高于阴性组的9.54±3.79和8.72±2.99(P<0.001),且VEGF-C、flt-4mRNA的表达具有显著相关性。结论VEGF-C、flt-4在口腔鳞癌癌周淋巴管生成中具有重要作用。     

EP—CAM在OLP和OSCC组织中的表达及意义

目的：观察上皮细胞黏附分子（Ep—CAM）在口腔正常黏膜、扁平苔癣（OLP）和鳞癌（OSCC）组织中表达的变化,分析Ep—CAM在口腔黏膜疾病及其癌变发病机制中的作用。方法：采用免疫组织化学法检测10例正常口腔黏膜、30例OLP（15例非糜烂型、15例糜烂型）及20例OSCC组织中Ep—CAM的表达变化。结果：Ep—CAM在正常黏膜组织阴性表达,而在非糜烂型OLP、糜烂型OLP及OSCC组织中表达逐渐增强。结论：Ep—CAM在口腔黏膜癌变的发展过程中可能具有一定的指示意义。     

FOXP3和GITR在口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的研究FOXP3、GITR在口腔扁平苔藓（OLP）和口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化方法检测30例OLP组织、30例OSCC组织和15例口腔正常黏膜（NOM）组织中FOXP3、GITR的表达。结果NOM组FOXP3和GITR阴性表达;OLP组和OSCC组FOXP3和GITR表达分别较NOM组显著增加（P〈0.01）;OLP组和OSCC组之间FOXP3和GITR表达无显著性差异（P〉0.05）;FOXP3和GITR在OLP组和OSCC组中的表达存在正相关关系。结论在OLP的发生及发展成OSCC过程中,FOXP3和GITR均可能起着一定的作用。     

口腔黏膜扁平苔藓癌变的诊断与综合治疗

目的:探讨口腔黏膜扁平苔藓(OLP)癌变的诊断和以手术为主的综合治疗的效果。方法:对1998—2007年间收治的经临床初诊并经病理学证实的64例OLP癌变患者,从临床角度进行回顾性分析。为便于观察,均选择位于颊黏膜的患者,在PVP诱导化疗21d后选择根治性手术。结果:术后1、3年的生存率分别为87.50%和75.00%,局部复发11例(17.18%)。结论:探讨OLP癌变的诊断标准,解决了Krutchkoff等提出的不同意OLP癌变的3点质疑;OLP癌变治疗的重点在于综合治疗。     

EMT在口腔鳞癌和扁平苔藓病理机制中的作用

上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）,是上皮细胞通过特定的程序转化为间质细胞的生物学过程,EMT在胚胎发育、创伤愈合、肿瘤的侵袭迁移等过程中起重要作用,EMT在恶性肿瘤的侵袭迁移病理过程中的分子机制成为研究热点。EMT的发生涉及多种机制,与低氧微环境、炎症因子、细胞外基质及microRNA等有关。文中综合目前研究进展,就EMT在口腔鳞癌和扁平苔藓侵袭转移中的作用及其分子机制作一综述。     

口腔鳞状细胞癌血管内皮细胞生长因子的表达

目的 :研究口腔鳞癌血管内皮细胞生长因子 (VEGF)和血管生成的关系 ,并评价VEGF、微血管密度(MVD)的临床意义。方法 :采用免疫组化SP法 ,用CD3 4 单抗标记血管内皮细胞 ,VEGF多抗标记VEGF蛋白 ,检测了 45例口腔鳞癌的VEGF表达和血管生成情况。结果 :①VEGF主要在胞浆表达 ,血管生成在癌巢周边的间质内 ;②VEGF阳性者MVD明显增高 ;③高MVD和VEGF阳性者的患者颈淋巴结转移的机率明显增高 ;④高MVD和VEGF高表达的患者 5年生存率明显降低。结论 :①口腔鳞癌组织表达VEGF ,它参与促进肿瘤的微血管形成 ;②口腔鳞癌的MVD和VEGF对颈淋巴结转移有较高的预测价值 ;③MVD和VEGF可以指示患者的预后情况     

COX-2、VEGF在口腔扁平苔藓、口腔白斑及口腔鳞状细胞癌中的表达

目的研究环氧合酶(COX)-2、血管内皮生长因子(VEGF)在口腔扁平苔藓(OLP)、口腔白斑(OLK)及口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及分布,探讨其在OLP、OLK癌变机制中的作用。方法采用免疫组化法检测33例OLP患者(单纯扁平苔藓19例,伴异常增生14例)、35例OLK患者(单纯增生14例、伴异常增生21例)、31例OSCC患者及10例正常对照者口腔黏膜组织(NOM)中COX-2、VEGF的分布和表达。应用统计分析软件SPSS 13.0对结果进行统计分析。结果COX-2、VEGF在正常口腔黏膜组织无表达或低表达;在单纯扁平苔藓组均为26.32%过表达;在扁平苔藓异常增生组分别为71.43%、64.29%过表达;在白斑单纯增生组过表达情况均为21.42%;在白斑异常增生组分别为80.95%、71.43%过表达;在口腔鳞状细胞癌组分别为93.55%、90.32%过表达;COX-2、VEGF在扁平苔藓异常增生组的表达明显高于单纯扁平苔藓组(P<0.05),低于OSCC组(P<0.05),与白斑异常增生组无明显差异(P>0.05)。COX-2的表达与VEGF表达呈明显正相关(r=0.595,P<0.01)。结论COX-2、VEGF在NOM、OLP及OLK伴异常增生、OSCC的表达逐渐增高,表明COX-2及VEGF与OLP、OLK的异常增生及癌变有关。     

口腔扁平苔藓凋亡相关基因的表达及意义

目的：探讨凋亡相关基因P53，Bcl-2,Fas,Fas-L的表达在口腔扁平苔藓（Oral Lichen Planus OLP)病变形成及发展中的作用。方法：采用免疫组化SABC法对28例OLP病损中凋亡调节蛋白P53，Bcl-2,Fas,Fas-L进行检测，并与正常口腔粘膜比较，结果：（1）P53蛋白在正常口腔粘膜中表达阴性，但可在OLP上皮基底细胞及部分棘细胞中表达。（2）Bcl-2蛋白在正常口腔粘膜及OLP病损上皮中表达很弱或阴性，但在OLP固有层浸润的淋巴细胞呈强阳性表达。（3）Fas和Fas-L在正常口腔粘膜及OLP病损上皮中表达差异不显著（P＞0．05），结论：口腔扁平苔藓病变的形成及发展部分归因于凋亡，P53和Bcl-2蛋白对OLP局部上皮病变及炎性细胞浸润的存在可能有一定作用。而Fas和Fas-L系统在OLP病变形成及发展中可能不起主要作用。     

幽门螺杆菌感染与口腔扁平苔藓和鳞状细胞癌相关性的初步探讨

目的研究正常口腔黏膜、口腔扁平苔藓（OLP）和口腔鳞状细胞癌（OSCC）中幽门螺杆菌（Hmylori）感染情况及其与p53蛋白和p16蛋白表达的关系．探讨H．pylori感染与OLP和OSCC的相关性。方法OLP标本23例、OSCC标本50例和正常口腔黏膜标本10例,采用免疫组化sP法检测其H．pylori的感染、p53蛋白、p16蛋白的表达．应用SPSS13．0软件包对结果进行卡方分析检验．单因素方差分析和线性回归检验分析。结果正常口腔黏膜组织组、0LP组及0SCC组中H．pylori阳性率分别为0、47．8％和48．0％,正常口腔黏膜组与OLP组和OSCC组间差异有统计学意义（X2=7．17．P=0.013;X^2=8．00,P=0．004）;OLP标本中H．pylor／阳性组和阴性组p53蛋白表达率分别为45．5％和16．7％,p16蛋白表达率为分别36．4％和66．7％,组间差异有统计学意义（X^2=3．86,P=0．043：X^2=3．89,P=0．048）;OSCC标本中H.pylori阳性组和阴性组p53蛋白表达率分别为91．7％和84．6％,p16蛋白表达率为分别20．8％和30．8％,组间差异无统计学意义（X^2=0．58,P=0．669;x2=0．65,P=0．526）。结论H．pylori感染与OLP和OSCC存在一定的相关性。H．pytori感染在OLP和OSCC发生、发展中的作用有待于进一步研究。     

口腔鳞癌中NOS和VEGF的表达与血管生成及临床病理因素的关系

目的 :研究血管内皮生长因子 (VEGF)、诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)和内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)在口腔鳞癌中表达的相关性 ;探讨三者与口腔鳞癌血管生成和临床病理特征的关系 ;研究一氧化氮 (NO)和VEGF的相互作用及NO在VEGF促肿瘤生长中的作用机制。方法 :应用免疫组织化学方法检测 64例口腔鳞癌手术切除标本VEGF、iNOS和eNOS的表达 ,Ⅷ因子相关抗原 (FⅧRAg)血管内皮细胞特异性染色 ,计数肿瘤微血管密度 (MVD )。结果 :( 1) 3 9例口腔鳞癌组织表达VEGF ,42例表达iNOS ,45例表达eNOS ;( 2 )VEGF与iNOS的表达正相关 ,与eNOS的表达无相关 ;( 3 )VEGF、iNOS的表达与口腔鳞癌MVD呈正相关 ,eNOS的表达与口腔鳞癌MVD的差异无显著性意义 ;( 4 )VEGF的表达与口腔鳞癌淋巴结转移和肿瘤分化程度正相关 ;与临床分期无关。iNOS表达与口腔鳞癌的分化程度及临床分期和有无淋巴结转移正相关 ;eNOS表达与口腔鳞癌临床分期和分化程度及有无淋巴结转移均无关。结论 :( 1)iNOS对VEGF的生成和发挥作用的过程有重要影响 ;( 2 )MVD随着VEGF和iNOS表达的增强而增加 ,说明两者对口腔鳞癌血管生成具有促进作用