枸杞多糖对淋巴细胞功能的影响

目的研究枸杞多糖(LBP)对正常人外周血淋巴细胞免疫调节功能的影响。方法无菌分离人外周血淋巴细胞,加入植物凝集素(PHA)和不同质量浓度的LBP,MTT法检测其对淋巴细胞增殖的影响;ELISA法检测LBP作用后淋巴细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况。结果 50~100 mg/L LBP能明显增强PHA活化的人外周血淋巴细胞的增殖;LBP能促进淋巴细胞产生TNF-α,并呈现浓度依赖性。结论 LBP能增强人外周血淋巴细胞的免疫功能,发挥抗肿瘤作用。     

外周血淋巴细胞免疫表型检验对恶性肿瘤患者细胞免疫功能的价值

目的：探究外周血淋巴细胞免疫表型检验对恶性肿瘤患者细胞免疫功能的评估价值。方法：选取2019年1月至2022年1月郑州市中医院收治的40例恶性肿瘤患者，将其作为观察组，另选取同期40例健康体检者作为对照组。采集两组研究对象的空腹静脉血，应用流式细胞仪检验外周血淋巴细胞免疫表型(CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺、CD3⁺CD56⁺、CD3-CD56⁺)，比较两组研究对象外周血淋巴细胞免疫表型检验结果以及观察组不同化疗周期、有无转移患者的外周血淋巴细胞免疫表型指标差异性。结果：观察组CD3⁺CD8⁺、CD3⁺CD56⁺、CD3-CD56⁺高于对照组，CD3⁺CD4⁺低于对照组，差异均具有统计学意义(P <0.05)；不同化疗周期患者相比，化疗周期> 6周期患者的CD3     

枸杞多糖对人外周血巨噬细胞抗肿瘤作用的影响

目的研究枸杞多糖(LBP)对正常人外周血巨噬细胞免疫调节功能的影响。方法无菌分离人外周单核细胞,加入PHA和不同质量浓度的LBP,MTT法检测巨噬细胞对肝癌细胞株Bel-7402生长的影响;ELISA法检测LBP作用后巨噬细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果用LBP处理后的巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤功能增强,80 mg/L1、00 mg/L LBP刺激后,巨噬细胞的吞噬作用明显增强(P均<0.01)。80 mg/L、100 mg/L LBP组肿瘤细胞与巨噬细胞培养上清液中TNF-α的量明显增高(P均<0.01),并证实了该作用可能与LBP促进巨噬细胞分泌TNF-α有关。结论LBP能增强人外周血巨噬细胞的免疫功能,发挥抗肿瘤作用。     

反复呼吸道感染患儿外周血淋巴细胞凋亡及其与免疫功能的相关性探讨

从工作中及国内外报导资料上看，病毒性感染是一种相当普通的疾病，而病毒性上呼吸道感染又是小儿科最常见最多发的疾病，约占小儿上呼吸道感染发病的90％以上，西医西药除对症治疗外，无特异的治疗方法。往往导致高热惊厥，支气管炎、肺炎、心肌炎等恶性后果，寻找一种行之有效的治疗方法和药物势在必行，因此几年来，本科研小组，研究开发了纯中药制剂的青蚤颗粒治疗病毒性上呼吸道感棠临床收到较为理想的效果，现报告如下。     

莪术对硫酸镍诱导的人外周血淋巴细胞非程序脱氧核糖核酸合成的影响

以人外周血淋巴细胞非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）为观察指标，研究了莪术和硫酸镍的遗传毒性效应及莪术对硫酸镍诱导的人外周血淋巴细胞ＵＤＳ的影响。结果表明，莪术对人外周血淋巴细胞ＵＤＳ无诱导效应，但当剂量达到１ｇ／ｍｌ时，可显著阻抑３Ｈ－ＴｄＲ向细胞ＤＮＡ的掺入。硫酸镍可大量诱发人外周血淋巴细胞ＵＤＳ，莪术对硫酸镍和紫外线诱导的人外周血淋巴细胞ＵＤＳ有明显抑制，且存在剂量效应关系。提示莪术在一定剂量时可明显减轻硫酸镍对人外周血淋巴细胞ＤＮＡ的损伤，而其本身无致突变作用。但当莪术剂量达到１ｇ／ｍｌ时，对ＤＮＡ的修复合成可造成抑制。     

云芝糖肽对健康人外周血淋巴细胞的体外免疫调节作用

目的探讨云芝糖肽在体外对细胞免疫和体液免疫功能调节的可能机制。方法分离健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),分为PBMCs空白组、云芝糖肽20μL与PBMCs共培养组和云芝糖肽40μL与PBMCs共培养组,3组分别于培养24 h、48 h、72 h采用流式细胞仪检测淋巴细胞亚群的比例变化及T淋巴细胞表面CD3+/HLA-DR+、B淋巴细胞表面CD19+/CD69+表达情况,ELISA方法检测上清液中Ig G水平。结果云芝糖肽与PBMCs共培养组CD4+T细胞比例明显上升(P0.05),CD4+/CD8+细胞比值明显增高(P0.05);云芝糖肽20μL与PBMCs共培养组T细胞表面CD3+/HLA-DR+,72 h时表达水平高于24 h(P0.05);B细胞表面CD19+/CD69+的表达显示从培养24 h到48 h表达升高而在72 h表达减少的趋势;PBMCs与云芝糖肽共培养2组上清Ig G水平均明显高于PBMCs空白组(P均0.05)。结论云芝糖肽在体外能促进CD4+T细胞比例上升及CD8+T细胞比例下降,提高CD4+/CD8+比值,并增加Ig G分泌,具有一定的免疫调节作用。     

莪术四君子汤对硫酸镍诱导的人外周血淋巴细胞非程序脱氧核糖核酸合成的影响

目的:探讨莪术四君子汤对硫酸镍诱导的人外周血淋巴细胞非程序性DNA合成的影响.方法:用3H-TdR掺入法测定了人外周血淋巴细胞非程序性DNA合成(UDS).结果:莪术四君子汤实验剂量浓度达到1.0g/ml时,由硫酸镍或硫酸镍与紫外线共同诱导的人外周血淋巴细胞UDS基本恢复到阴性对照水平;莪术四君子汤实验剂量浓度达到1.5g/ml时未见其抑制3H-TdR向人外周血淋巴细胞DNA的掺入.结论:莪术四君子汤对人外周血淋巴细胞非程序DNA合成无诱导效应,但对硫酸镍及硫酸镍与紫外线共同诱导的人外周血淋巴细胞非程序DNA合成有明显抑制作用,且呈剂量效应关系.提示莪术四君子汤能有效减轻镍和紫外线对人外周血淋巴细胞DNA的损伤.     

冠心康对高脂血症大鼠外周血淋巴细胞低密度脂蛋白受体活性的影响

中药冠心康可能通过抑制HMG－CoA还原酶活性、降低内源性TC的合成，从而增加LDLR数量、增强了LDLR与LDL－C的亲和力，即增强了受体本身的活性，调控了血脂水平。目的：观察中药冠心对高脂血症大鼠外周血淋巴细胞低密度脂蛋白受体活性的影响。方法：将高脂血症大鼠随机分为模型组、冠心康组、西药氟伐他汀对照组，每组10只。另取10只喂饲正常饲料大鼠为正常对照组。连续灌胃30天后，采用ELISA法测定血淋巴细胞低密度脂蛋白受体（LDLR）活性。结果：模型组大鼠外周血淋巴细胞LDLR的最大结合力Bmax明显小于常组，kd值较正常组明显增高。而冠心康组与西药组大鼠血淋巴细胞LDLR的最大结合力明显高于模型组，kd值较模型组明显降低。结论：冠心康能增加LDLR数量，增强LDLR与LDL－C的亲和力，即增强了受体本身的活性，调控了血脂水平。中药冠心康组大鼠淋巴细胞LDLR的最大结合亦明显高于模型组，与西药氟伐他汀比较无显著性差异（P＞0．05），提示两者LDLR最大结合的作用相近。     

氟伐他汀对人外周血T淋巴细胞活性的影响

 目的　研究氟伐他汀对人外周血T淋巴细胞活性的影响。方法　采用流式细胞术分析T细胞活化和增殖情况,ELISA法检测细胞因子分泌量,TransAM^TMELISA法测定活化T细胞核因子 (NFAT)的活化状态。结果　氟伐他汀能抑制T细胞表面CD69的表达,显著抑制T细胞增殖,对CD25的表达无影响。能抑制NFAT的活化,显著降低IL-2的产生,对IFN-γ和IL-10的分泌几无影响,但明显诱导IL-4的分泌。结论　氟伐他汀具有免疫抑制作用。     

灵芝提取物对人外周血细胞免疫调节作用的研究

 目的 研究灵芝子实体的水提取物、醇提取物单独及与诱导物一起使用对人外周血吞噬细胞和淋巴细胞的免疫调解作用。方法 以吞噬细胞化学发光、淋巴细胞化学发光和淋巴细胞增殖的方法,观察灵芝提取物的免疫调节作用。结果 单独灵芝提取物不能引起细胞免疫反应,与诱导物一起使用后,低浓度的灵芝提取物对细胞免疫功能有激活作用,高浓度则有免疫抑制作用。结论 与诱导物一起使用后,灵芝水提取物和醇提取物对人外周血吞噬细胞和淋巴细胞均具有双向调节作用。     

香加皮水提取物诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡及其作用机制

目的研究香加皮水提取物(CPE)诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡及其作用机制。方法采用G iem sa染色观察细胞凋亡形态学变化;电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构变化;流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳方法检测BGC-823细胞凋亡率、细胞周期和细胞凋亡的DNA水平变化;RT-PCR方法检测细胞凋亡相关基因bcl-2、bax和surv iv in mRNA表达水平变化;免疫细胞化学方法检测bcl-2、bax和surv iv in蛋白表达的变化。结果经CPE作用后,人胃癌细胞BGC-823出现明显的细胞凋亡形态学变化及超微结构改变,细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈现梯形图。经250μg/mL CPE处理48 h后,多数BGC-823细胞被阻滞在G2/M期,而且细胞发生明显的凋亡变化,BGC-823细胞凋亡率可达18.9%。CPE可抑制BGC-823细胞bcl和surv iv in mRNA及蛋白的表达,促进baxmRNA及蛋白的表达。CPE可明显延长S180荷瘤小鼠生存期,且具有剂量依赖性。结论CPE通过阻滞BGC-823细胞于G2/M期及诱导BGC-823细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,其作用机制与抑制细胞的bcl-2和surv iv in基因mRNA及蛋白表达、促进bax基因和蛋白的表达有关。     

香加皮配方颗粒在小鼠体内的毒代动力学研究

目的:研究香加皮配方颗粒毒性成分在小鼠体内的代谢。方法:Bliss测定小鼠灌胃和腹腔注射给药的LD50。另取小鼠预先腹腔注射预负荷7.00g生药/kg,分别于药后1、2、4、6、8、12、16、24h补予7.00g生药/kg,用死亡率法计算体内残存量和表观代谢参数。结果:香加皮配方颗粒小鼠灌胃的LD50(95%可信限)为89.11(85.44~92.44)g生药/kg,小鼠腹腔注射的LD50(95%可信限)为10.35(9.66~11.10)g生药/kg,口服生物利用度F=11.61%。香加皮配方颗粒体内残存量并不是随着时间而一直降低,在6、12h出现了两个高峰点,其后呈一级动力学消除,12h以后消除相的消除半衰期t1/2=7.55h,消除速度常数K=0.0918/h。结论:香加皮配方颗粒的毒性成分代谢过程较复杂,可能存在肠肝循环或毒性代谢产物生成。     

香加皮中强心苷类对大鼠离体心脏的强心作用比较

目的:比较香加皮中4种强心苷类成分的强心作用并确定其时效和量效关系。方法:采用Langendor-ff离体心脏灌流法,待实验心脏稳定后给予受试药,记录并比较心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、dp/dtmax、dp/dtmin、等心功能指标。结果:香加皮中4种强心苷类成分均能提高大鼠离体心脏的心肌收缩力和左心室收缩压,随着各自剂量的逐渐增大,强心作用逐渐增强,到达某一剂量后,强心作用开始降低。与给药前相比,4种强心苷成分在给药后HR、LVSP、dp/dtmax均有显著性的改变(P<0.05)。在时效关系研究中达峰顺序依次为xysmalogenin、杠柳毒苷苷元、杠柳毒苷、强心苷G1。在量效关系研究中杠柳毒苷的最大作用浓度为0.15mg/只,而杠柳毒苷苷元的最大作用浓度为0.30mg/只。结论:4种强心苷类成分都能增强大鼠离体心脏功能,均兼备正性肌力作用和负性频率作用。     

建立评价香加皮质量的RP-HPLC色谱指纹图谱分析方法

目的:建立评价香加皮质量优劣的指纹图谱分析方法。方法:以香加皮药材为研究对象,应用RP-HPLC法,色谱柱为Krom asil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.025%磷酸水二元梯度洗脱模式,流速为1.0 m l/m in,检测波长为220 nm,建立了15批不同产地香加皮样品的RP-HPLC色谱指纹图谱。结果:对各产地药材指纹图谱进行聚类分析,根据聚类分析相似度分析结果,将香加皮药材分为4类,选定其中6批优质样品建立共有模式,并应用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004版”对各产地药材进行了质量评价。结论:该方法简便、可靠,为有效控制香加皮药材质量提供依据。     

UPLC同时测定香加皮中六种成分

目的:了解不同产地、不同批次香加皮药材中6种成分的含量差异,评价不同产地、不同批次香加皮的质量。方法:采用超高效液相色谱法(UPLC)对香加皮中6种成分进行含量测定,比较不同产地间6种化合物的含量差异。结果:经方法学验证,6种化合物在线性范围内线性关系良好(r0.999 6),平均回收率在99.0%～104%(RSD4.47%)。发现香加皮中4-甲氧基水杨醛的含量均符合《中华人民共和国药典》规定要求,其中不同批次香加皮药材中杠柳毒苷、杠柳苷元和杠柳次苷含量差异较大。结论:所建立的超高效液相色谱法能够同时准确测定香加皮药材中的6种化学成分,并对香加皮中多种成分进行定量,为其质量评价提供了新方法。     

香加皮有效部位滴丸的质量标准研究

[目的]建立香加皮有效部位滴丸的质量标准。[方法]建立了高效液相色谱(HPLC)法进行杠柳毒苷含量测定和杠柳毒苷的均匀度检查;对滴丸剂进行了常温下的初步稳定性考察。[结果]香加皮有效部位滴丸含量测定方法学考察的指标均符合有关规定;滴丸均匀度符合要求。[结论]建立了有效部位及滴丸的质量标准,方法简便、可靠。滴丸剂质量基本稳定。     

The effect of liu-wei-di-huang wan on cytokine gene expression from human peripheral blood lymphocytes

Liu-Wei-Di-Huang Wan (LWDHW) has been used by traditional Chinese doctors to treat asthma patients. This study was to examine the potential effect of this decoction on the regulation of T helper (Th)1- and Th2-type cytokine gene expression in vitro. Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were activated with mitogen for 24 hours in the presence or absence of LWDHW extracts. Concentrations of different cytokines in the culture supernatants were determined with ELISA. RNA isolated from cultured cells was subjected to RT-PCR analysis. The results showed that the expression of all cytokines (Th2-type: IL-4, IL-5, IL-10, or IL-13 and Th1-type: IL-2 and IFN-gamma) examined was inhibited at both RNA and protein levels by LWDHW. Since the cell viability was similar in all cultures, the reduction of cytokine production was not due to the toxicity of LWDHW. Moreover, the cells either retained or increased their capacity to respond to mitogen stimulation after incubation with the LWDHW decoction. Therefore, the data suggest that LWDHW functioned directly on cytokine gene expression from activated PBMC.