归圆口服液对大鼠离体子宫平滑肌收缩活力的影响

目的：观察归圆口服液对子宫收缩活力的影响。方法：以收缩频率和幅度为指标,观察归圆口服液对正常和经缩宫素诱发的大鼠离体子宫平滑肌收缩活性的影响。结果：归圆口服液能明显抑制大鼠离体子宫平滑肌自发收缩频率,能明显降低大鼠离体子宫平滑肌自发收缩幅度及最大值;归圆口服液能剂量依赖性的拮抗缩宫素所致的大鼠离体子宫收缩活性的增强,降低收缩频率。结论：归圆口服液对正常和经缩宫素诱发的大鼠离体子宫平滑肌收缩活性有明显的抑制作用。     

王不留行对大鼠子宫平滑肌的影响

目的:观察王不留行(Vaccaria segetalis Garcke,VSG)水煎剂对大鼠子宫平滑肌离体肌条的作用机制。方法:采用恒温灌流浴槽,记录子宫平滑肌离体肌条收缩波的振幅、持续时间、收缩面积和频率,给予VSG(2 mg·L-1,4 mg·L-1,8 mg·L-1,16 mg·L-1,32 mg·L-1)并观察其量效关系(r);将标本分为正常组(NS)、VSG、VSG+异搏定、VSG+酚妥拉明、VSG+苯海拉明、VSG+消炎痛和VSG+阿托品7组,探讨VSG收缩离体肌条的作用机制。结果:VSG能增强肌条收缩波的振幅、持续时间、面积和频率,并有量效依赖性(持续时间:r=0.94,t=5.41,P<0.01;收缩面积:r=0.86,t=3.41,P<0.05;频率r=0.96,t=7.18,P<0.05),而振幅的量效关系不明显(r=0.06,t=0.12,P>0.05)。异搏定和阿托品能抑制VSG收缩子宫肌条的作用,而苯海拉明、消炎痛和酚妥拉明无影响。结论:VSG可能是通过L-钙通道和M型受体,升高胞浆内Ca2+而增强子宫平滑肌的收缩作用。     

第17卷第5期 2011年3月 中国实验方剂学杂志 Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol.17,No.5 Mar.,2011 四物汤及其组方药物对小鼠离体子宫收缩的影响

目的:分析评价四物汤及其组方药物对小鼠离体子宫平滑肌收缩的影响,探讨四物汤组方配伍特点。方法:采用小鼠离体子宫收缩痛经模型,观察该方及其组方药对离体子宫痛经模型小鼠子宫平滑肌平均肌张力、收缩幅度、收缩频率的抑制作用,计算抑制率。实验分为空白对照组,四物汤及其组方药给药组,每组6只,分两次平行进行,每次3只,单味药,药对及全方分别按生药量终浓度为0.5,1,2 g·L-1给药。结果:四物汤及其组方对缩宫素诱导的小鼠离体子宫平滑肌收缩幅度、收缩频率和平均肌张力有不同程度的抑制作用,其中,当归-熟地黄药对对离体子宫的收缩幅度抑制作用最强,抑制率为23.195%;当归-白芍药对对离体子宫的收缩频率和平均肌张力的抑制作用最强,抑制率分别为47.826%和14.998%。结论:当归和白芍在抑制缩宫素诱导的小鼠离体子宫收缩效应上是有重要贡献的药味,且两药合用能增强其作用;熟地黄与当归配伍在抑制离体子宫收缩效应上也有协同增效的作用。     

人参皂苷对大鼠离体子宫平滑肌收缩影响的初步研究

目的 考察人参总皂苷及含量较高的单体人参皂苷对大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响.方法 采用己烯雌酚增加子宫平滑肌对药物的敏感性,观察加入人参皂苷前后,子宫平滑肌收缩幅度和频率的改变,判断人参皂苷对子宫收缩的影响作用.结果 人参皂苷Rb1在25～ 100μg/ml的浓度范围内,对大鼠离体子宫平滑肌收缩呈抑制作用,抑制率最高可达44.4％;人参皂苷Rg1在20 ～ 50μg/ml的浓度范围内,对大鼠离体子宫平滑肌收缩呈抑制作用,抑制率最高可达25.7％;人参皂苷Re在0.25 ～5 μg/mL的浓度范围内,对大鼠离体子宫平滑肌收缩呈增强作用,增强率最高可达23.2％;人参总皂苷在5 ～ 50μg/mL的浓度范围内,对大鼠离体子宫平滑肌收缩呈抑制作用,抑制率最高可达25.9％.结论 人参总皂苷及人参皂苷Rb1和Rg1在实验剂量范围内,对子宫平滑肌收缩呈抑制作用,人参皂苷Re对子宫平滑肌收缩呈增强作用.     

马兰对动物离体子宫的兴奋作用及促凝血的实验研究

目的 探讨马兰乙醇提取物对己烯雌酚预处理后大鼠、小鼠离体子宫的兴奋作用和对家兔体外凝血功能的影响.方法 常规方法制备动物离体子宫标本,采用BL-420生物机能实验系统记录离体子宫平滑肌的活动, 以子宫收缩的幅度、频率及收缩力作为指标, 观察马兰乙醇提取物对注射己烯雌酚后大鼠、小鼠离体子宫兴奋作用,计算兴奋子宫的IC50,以益母草为阳性对照.促凝血采用家兔体外复钙和对凝血酶原(PT)的影响.结果 马兰95%乙醇提取物和50%乙醇提取物对大鼠和小鼠离体子宫平滑肌有明显地兴奋作用,可加快收缩频率、提高收缩张力和子宫活力(P＜0.05,P＜0.01),并呈量效关系.马兰50%乙醇提取物能明显缩短复钙凝血时间(P＜0.01),对凝血酶原时间无明显影响.结论 马兰95%乙醇和50%乙醇提取物对大鼠和小鼠离体子宫平滑肌具有兴奋作用,其兴奋子宫平滑肌的作用强度较益母草稍强.并具有促凝血作用.     

当益散结胶囊对非妊娠和妊娠大鼠在体及离体子宫平滑肌的影响

目的 探讨当益散结胶囊对非妊娠及妊娠大鼠在体及离体子宫平滑肌的影响,为其临床应用提供药理学实验依据.方法 制备大鼠在体及离体子宫标本,通过BL-420型生物机能实验系统,以子宫收缩的幅度、频率及收缩力作为评价指标,观察不同剂量的当益散结胶囊对非妊娠及妊娠大鼠子宫平滑肌收缩的影响.结果 当益散结胶囊高剂量组能抑制非妊娠及妊娠大鼠子宫平滑肌的收缩幅度、频率及收缩力,与给药前比较有显著性差异(P<0.01);中、低剂量组也能不同程度抑制大鼠子宫平滑肌的收缩(P<0.01或P<0.05).结论 当益散结胶囊能显著抑制大鼠子宫平滑肌的收缩,并随剂量加大抑制作用加强,提示该药对痛经可能有一定的治疗效果.     

炙甘草汤含药血清对正常家兔离体子宫平滑肌作用的研究

目的:观察炙甘草汤含药血清对正常家兔离体子宫平滑肌环运动的影响,并初步探讨其作用机制。方法:运用Powerlab生物信号系统记录家兔离体子宫平滑肌标本的活动,观察不同浓度组炙甘草汤含药血清对子宫平滑肌收缩力的影响。结果:炙甘草汤含药血清可以不同程度降低子宫平滑肌收缩力,减少子宫收缩时间,从而降低子宫活动力(高、中浓度血清组与空白血清组比较P<0.01)。通过阻断钙通道、M、α和β受体,进一步降低小肠平滑肌标本的活动力(P<0.01)。结论:炙甘草汤含药血清可以明显降低子宫平滑肌收缩力,缩短收缩时间,抑制子宫平滑肌的活动力。该抑制作用并非通过钙通道、M、α或β受体单一途径起作用,应当是多个途径的结果。     

壮药白花九里明提取物中咖啡酸含量测定及对子宫平滑肌作用

目的:测定壮药白花九里明提取物(下称提取物A)咖啡酸的含量,并考察其对小鼠离体子宫平滑肌收缩的影响。方法:采用高效液相色谱法测定提取物A咖啡酸含量;选用健康未孕雌性成年小鼠,随机分15组,每组10只,即生理盐水组、缩宫素组、8种不同浓度九里明提取物A组、0.32 mg/ml提取物A联合用缩宫素、阿托品、心得安、乙酰胆碱组。结果:九里明提取物A中含有咖啡酸,咖啡酸在1.2μg/ml～1.95μg/ml范围内与峰面积呈良好线性关系,回归方程Y=12269X+150.99,R~2=0.9996。加样平均回收率99.75%,RSD为0.4%,提取物A测量得咖啡酸含量平均值为112.3μg/g。与生理盐水组比较,浓度在0.16 mg/ml～0.64 mg/ml九里明提取物A收缩活力、收缩频率和平均张力有明显变化,呈兴奋作用。提取物A随着浓度增大收缩活力明显增强,M受体阻断剂阿托品与0.32 mg/ml提取物A联用收缩活力和频率均明显小于单独0.32 mg/ml提取物A。β1和β2肾上腺素受体阻滞剂心得安与0.32 mg/ml提取物A联用收缩活力和频率均远小于单独0.32 mg/ml提取物A。M、N受体兴奋药乙酰胆碱与0.32 mg/ml提取物A联用收缩活力和频率均远大于单独0.32 mg/ml提取物A。结论:九里明提取物A中含具有止血作用的咖啡酸,含量平均值为112.3μg/g。提取物A能兴奋子宫平滑肌,可能是通过影响M受体或N受体,与非选择性的β受体而实现的。     

槟榔次碱对未孕大鼠离体子宫平滑肌运动的影响

目的:观察不同浓度的槟榔次碱对未孕大鼠离体子宫平滑肌运动的影响及研究其作用机理。方法:取大鼠卵巢及子宫叉处的子宫角,沿系膜纵轴剖开,置于恒温的平滑肌槽中,连接生理记录仪,观察槟榔次碱对子宫平滑肌运动的影响,以及分别加入五种阻断剂后.观察槟榔次碱对子宫作用的影响。结果:不同剂量的槟榔次碱能显著增强子宫平滑肌收缩的频率、振幅,增大收缩面积并呈正相剂量效应关系,而对收缩波的持续时间无明显影响,阻断M-受体后,槟榔次碱的增强作用即消失。而H1受体、L-型钙通道、α-受体、前列腺素合成酶分别被阻断或抑制后,槟榔次碱的增强作用未受到明显影响。结论:槟榔次碱能显著增强离体子宫平滑肌的收缩作用,并且主要是通过兴奋M-受体而发挥作用。     

黄秋葵水提液对胃肠运动功能的影响及其机制研究

目的:观察黄秋葵水提取液对小鼠胃肠运动及家兔离体十二指肠平滑肌收缩性能的影响。方法:采用小鼠在体胃肠运动实验,以小鼠胃残留率、碳末推进率为指标,观察黄秋葵提取液对正常小鼠和阿托品、肾上腺素致胃肠抑制模型小鼠的胃肠运动的影响;采用家兔离体十二指肠平滑肌运动实验,以收缩频率、幅度、张力及收缩曲线下面积为指标,观察不同浓度的黄秋葵提取液对正常家兔离体十二指肠的影响,以及高浓度的黄秋葵提取液对阿托品、肾上腺素致运动抑制模型的离体十二指肠平滑肌收缩性能的影响。结果:黄秋葵提取液高、低剂量组对正常小鼠碳末推进率均显著升高(P<0.05或P<0.01),同时能拮抗阿托品、肾上腺素对小肠的抑制作用而促进小肠的推进(P<0.05或P<0.01),而对小鼠胃残留率没有明显的影响。与正常对照组比较,黄秋葵低、高浓度均能显著提高离体十二指肠收缩幅度和收缩面积(P<0.05或P<0.01),明显降低收缩频率(P<0.05或P<0.01);高浓度的黄秋葵水提液能拮抗肾上腺素和阿托品而使平滑肌收缩幅度及收缩面积明显升高(P<0.05或P<0.01),拮抗肾上腺素使收缩频率显著增加(P<0.05)。结论:黄秋葵提取液具有促进小肠推进和平滑肌收缩的作用,其作用机制可能与胆碱能M受体和肾上腺素能受体有关。     

椪柑柠檬苦素-UDP-葡萄糖基转移酶基因的克隆、分析及表达

目的克隆中药橘核主要来源品种椪柑Citrus reticulata的柠檬苦素-UDP-葡萄糖基转移酶(limonoid-UDP-glucosyl transferase gene,LGT)基因,并进行生物信息学及表达分析为橘核有效成分合成及调控机制研究提供基础。方法克隆获得LGT序列,通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析,构建LGT与相关物种LGT的系统进化树,利用RT-PCR分析橘皮、橘肉以及橘核中LGT基因表达量,并进行分析和比较。结果测序所得椪柑LGT序列全长为1 530 bp,具有1 509 bp的完整开放阅读框,编码502个氨基酸。并对其蛋白二级、三级结构进行了分析和预测。基因表达分析结果发现椪柑LGT基因在橘核中表达量最低,其次为橘皮,表达量最高为橘肉。结论成功克隆、分析并表达了椪柑LGT基因,为橘核中柠檬苦素类物质合成及调控机制研究提供基础。     

不同比例甘草配伍祖师麻抗大鼠佐剂性关节炎的实验研究

目的 观察不同比例甘草配伍祖师麻对大鼠佐剂性关节炎（AA）模型的治疗作用,筛选两者配伍比例,探讨其配伍意义。方法 采用足跖皮内注射弗氏完全佐剂制备AA模型,将140只模型大鼠随机分成14组：模型组,雷公藤多苷片组,祖师麻低、中、高剂量组,甘草低、中、高剂量组,祖师麻-甘草（3：1）低、中、高剂量组,祖师麻-甘草（3：2）低、中、高剂量组,另取10只正常大鼠为对照组,给药组大鼠造模前2 d开始ig给药,连续给药31 d,观察各组大鼠体质量变化,计算足肿胀度、关节炎指数（AI）,采用ELISA法检测大鼠血清炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的水平,观察大鼠膝关节组织病理变化,通过免疫组化法测定大鼠膝关节滑膜组织中血管内皮生长因子（VEGF）、巨噬细胞游走抑制因子（MIF）的表达。结果 与模型组比较,祖师麻组、祖师麻甘草配伍组能够明显抑制AA大鼠体质量减轻的趋势,对抗AA大鼠足肿胀度及AI的增加,降低异常升高的血清TNF-α、IL-1β水平,改善关节病理组织变化,减少滑膜组织VEGF、MIF的表达,其中以祖师麻-甘草（3：2）配伍组效果最优。结论 祖师麻甘草配伍后,对AA大鼠各项指标改善作用显著,作用优于单用祖师麻,其最佳配伍比例为祖师麻-甘草（3：2）。调节血清炎症细胞因子TNF-α、IL-1β及滑膜组织VEGF、MIF的表达,可能是祖师麻甘草配伍治疗类风湿性关节炎机制之一。     

赶黄草的转录组测序及分析

目的获得赶黄草Penthorum chinense转录基因参考序列和表达量信息,探索赶黄草药用活性成分生物合成的遗传基础,为赶黄草的重要功能基因研究提供参考。方法采用Illumina Hi Seq 2000高通量测序技术,对赶黄草进行转录组测序,对获得的数据进行过滤组装,对得到的unigene进行比对注释,同时对本研究获得赶黄草活性成分合成相关代谢通路基因进行分析。结果共获得了40 005 442条有效的短读序,通过de novo拼接得到42 306个unigene,开放阅读框(ORF)分析共计得到518个ORF,其中75个ORF具有转录因子结构域。通过KEGG分析,检测到33、32、59、68个unigene分别参与黄酮类生物合成、固醇类生物合成、萜类骨架生物合成和羧酸代谢。结论本研究发现的这些基因对赶黄草遗传改良和药用活性物质的生物合成路径相关基因研究有着重要意义。     

内生真菌链格孢菌醋酸乙酯提取物对大肠杆菌抑菌机制的研究

目的研究分离自药用植物白毛蛇Humata tyermanni的内生真菌链格孢菌发酵产物醋酸乙酯提取物(B06e)对大肠杆菌的抑菌机制。方法采用倍比稀释法测定了B06e对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC);测定了B06e作用前后大肠杆菌培养液电导率、核酸和蛋白质的变化;结合流式细胞仪、扫描电子显微镜、凝胶阻滞实验、圆二色谱和荧光实时定量PCR的分析方法研究了B06e对大肠杆菌细胞膜结构、形态、DNA的影响。结果 B06e对大肠杆菌的MIC为25μg/m L,3×MIC处理组的电导率是对照组的1.01倍;3×MIC处理组的β-半乳糖苷酶活性是对照组的11.6倍;流式细胞仪分析表明3×MIC处理组被碘化丙啶(PI)染色的阳性细胞比是对照组的286.5倍;扫描电子显微镜结果显示,B06e处理后菌体表面变得粗糙,细胞膜大量塌陷;以上结果说明B06e能增大细胞膜的通透性,破坏细胞膜的完整性。凝胶阻滞、圆二色谱的结果表明,B06e能够以嵌插的方式与DNA结合,但不能降解DNA;实时定量PCR结果表明,经B06e处理后rec A和rec N基因的表达量分别是对照组的2.9和3.7倍,说明B06e能破坏DNA的结构,迫使大肠杆菌启动了SOS修复。结论 B06e通过破坏大肠杆菌细胞膜完整性和DNA的结构,使得细菌代谢紊乱,最终导致细菌丧失了生长繁殖的能力。     

夏天无HPLC指纹图谱及多指标含量测定研究

目的建立夏天无HPLC指纹图谱及多指标成分测定方法,为夏天无药材质量标准提升提供科学依据。方法采用HPLC法,Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.2%冰醋酸溶液(三乙胺调pH 6.0)为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;进样量10μL;检测波长280 nm;建立15批夏天无药材的指纹图谱,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012A版)进行评价,聚类分析和主成分分析将15批药材分为2类,同时测定原阿片碱、黄藤素、荷包牡丹碱和延胡索乙素4种成分的含量。结果建立了夏天无药材的HPLC指纹图谱,共标定了10个共有峰;原阿片碱、黄藤素、荷包牡丹碱和延胡索乙素线性关系良好,r均大于0.999 9,平均回收率分别为97.12%、100.09%、98.53%、99.71%。结论 HPLC指纹图谱结合多指标成分测定可为夏天无药材质量评价提供参考。     

苗药血人参提取物水凝胶的制备及促创面愈合体内外研究

目的 制备一种载苗药血人参Indigofera stachyodes提取物的聚乙烯醇（PVA）/木质素（Lig）/壳聚糖（CS）水凝胶并探究其促创面愈合机制。方法 在单因素考察的基础上,正交试验优选处方工艺并对其进行质量评价和体外生物评价,通过建立大鼠全层皮肤损伤模型,评价其促创愈合效果。结果 携载提取物的PVA/Lig/CS水凝胶的最优处方和制备工艺为PVA用量7.0 g、CS用量4.0 g、Lig用量0.5 g、冻融循环次数4次,每次冻结6 h。该凝胶具有多孔网状结构、良好的溶胀性、保湿性及一定的机械强度,同时具有良好的生物相容性、抑菌性以及有效抑制巨噬细胞细胞迁移,且抑制作用可能与时间呈正比。该水凝胶的体内药效学研究显示,其促创面愈合作用可能与减少创面组织炎性细胞浸润,促进巨噬细胞向M2型极化、增加毛血细管生成和纤维组织形成有关。结论 制备的载血人参提取物的PVA/Lig/CS水凝胶剂制备工艺简单、稳定可行、具有良好的缓释性能,且对全层皮肤损伤具较好的治疗效果。     

瓜蒌皮药材的HPLC指纹图谱

目的：建立瓜蒌皮药材的 HPLC 指纹图谱。方法：采用 Agilent TC-C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.2%冰乙酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长 260 nm,流速 0.8 mL·min^-1,柱温 25℃,进样20 μL。结果：建立了瓜蒌皮药材的HPLC指纹图谱,方法学考察结果良好,确立了13个共有峰,其中5个共有峰得到确认,10批瓜蒌皮样品指纹图谱的相似度均>0.9。结论：该方法稳定性、重复性好,建立的指纹图谱可为瓜蒌皮的质量评价提供依据。     

洋金花与木本曼陀罗叶绿体基因组特征与系统进化分析

目的 以洋金花Datura metel和木本曼陀罗Brugmansia arborea为材料,分析其叶绿体基因组结构和特征,基于叶绿体组数据探讨洋金花和木本曼陀罗及茄科其他物种的系统发育关系。方法 利用华大MGISEQ-2000PE150测序平台,双末端测序策略对基因组DNA建库测序,用NOVOPlasty组装叶绿体基因组,采用最大似然法(maximum likelihood,ML)构建系统进化树。结果 洋金花和木本曼陀罗的叶绿体基因组全长为155934bp和155939bp,分别包含131和130个基因,GC值32.3%,具有典型的四分区域结构,包括1个大单拷贝区(large single copy,LSC)、1对反向重复区(inverted repeats,IR)和1个小单拷贝区(small single copy,SSC),各区域序列长度分别为86354、86278、25609、25720、18362、18221bp。系统发育分析表明,洋金花与曼陀罗属的曼陀罗构成1单系分支,具有100%支持率,而木本曼陀罗属与曼陀罗属构成单系分支,具有100%支持率。结论 结果支持洋金花隶属于曼陀罗属,与曼陀罗亲缘关系较近,木本的木曼陀罗属从曼陀罗属分出,独立为一个属。洋金花和木本曼陀罗叶绿体基因组信息为后期分子鉴定和群体遗传研究奠定基础。     

蜘蛛香炒制过程中色泽与主要成分的相关性研究

目的 探究蜘蛛香Valerianae Jatamansi Rhizoma et Radix生品和不同炒制品的主要成分变化，并建立颜色值与主要成分的变化关系，确立蜘蛛香炒焦节点。方法 对5个产地的蜘蛛香生品以及炒制2、4、6、8、10、12、14、16 min的样品，利用色差仪对其颜色值进行测量，通过HPLC法测定其主要化学成分(缬草三酯、乙酰缬草三酯、缬草醛、橙皮素、绿原酸)的含量，并对二者进行相关性分析。结果 蜘蛛香生品中未检测出缬草醛，随着炮制时间增加，缬草醛含量先增加后降低，在6～8 min达到最高。乙酰缬草三酯和缬草三酯含量与炮制时间呈负相关，在8 min后未检测到。随着炒制时间的延长，粉末的ΔE_ab^*值总体呈减小趋势，L^*值在2 min后下降；a^*值在0～6 min时增加，6 min后下降；b^*值在0～2 min时小幅度上升，4 min后下降。结合炮制时间、颜色值和成分含量来看，在0～6 min时间段内乙酰缬草三酯含量与a^*值呈负相关；缬草三酯含...     

肉豆蔻、麸煨肉豆蔻中总木脂素的含量测定

目的:建立肉豆蔻、麸煨肉豆蔻中总木脂素的含量方法.方法:采用紫外分光光度法,以去氢二异丁香酚为对照品,测定波长275 nm.结果:去氢二异丁香酚质量浓度在1.5～9.0 mg·L-1与吸光度呈良好线性关系,r=0.999 8,平均回收率97.6％(n=6),RSD 1.2％.结论:建立的方法简便、快速、重复性好.