甘草甜素与蛋白结合的研究

本文采用超滤法研究了甘草甜素与蛋白的结合。结果表明,当甘草甜素的浓度不高于2mM时,98%的甘草甜素皆可与蛋白结合。Scatchard图指出,甘草甜素的蛋白结合具有两种类型的结合点。用MULTI程序对结合的详细情况进行了分析,结果表明,在两类结合点中,第一类结合点具有很高的结合常数。     

超临界CO2萃取甘草中甘草次酸的工艺研究

目的 探讨从甘草中提取甘草次酸的工艺。方法 采用超临界CO2萃取法，并与索氏提取法，超声法进行比较。结果 超临界CO2萃取法的最佳工艺条件为；压力30MPa，原料粒度70目，夹带剂为80%乙醇，萃取温度45℃，萃取时间2h。结论 从甘草生药中提取含量较少的甘草次酸，超临界萃取法较其他几种提取方法具有明显的优势。     

大鼠血浆中甘草次酸浓度测定方法研究

[目的]建立一个血浆中甘草次酸浓度的测定方法。[方法]采用内标定量的反相高效液相色谱法,以甲醇-乙腈-水-醋酸（42：40：17：1）为流动相,色谱柱为C18（150 mm×4.6 mm,5μm）,检测波长为254 nm。[结果]在0.25-2.5μg/ml浓度范围内,线性关系良好（r=0.9989）。日内差RSD为0.88%。日间差RSD2.33%。甘草次酸的方法回收率为93.16%。[结论]本方法具有简便、灵敏、快速而准确的特点,适用于甘草次酸的血药浓度测定。     

RP-HPLC法同时测定大鼠血中甘草甜素和甘草次酸

目的　建立一个同时测定甘草甜素、甘草次酸血浆浓度变化监测的方法 ,进一步用于“脾主药动学”假说的验证 .方法　采用内标定量的反相高效液相色谱法 ,以甲醇 -水 -醋酸 (88∶ 11∶ 1)为流动相 ,ODS- 3柱 (15 0 mm× 4.6 mm,5μm)为固定相 ,在紫外 2 5 0 nm检测 .结果　 GL,GA在此线性范围内 ,线性关系良好、精密度较高 .结论　本方法具有简便、灵敏、快速而准确的特点 ,适用于注射 GL制剂或口服中药复方前后 GL和 GA的体内、体外的药代动力学研究 ,为进一步进行中药复方的药物监测奠定了基础     

反相高效液相色谱法测定胃乐胶囊中甘草次酸的含量

胃乐胶囊是由甘草提取物、木香、白芨等成分组成。甘草提取物主要成分为甘草次酸 ,具有肾上腺皮质激素样作用 ,同时也具有抗溃疡、抗炎等作用 [1 ] 。临床上用胃乐胶囊治疗胃和十二指肠溃疡、慢性胃炎、泛酸胃痛等症。我们应用反相高效液相色谱法对胃乐胶囊中的甘草次酸进行含量测定 ,以控制胃乐胶囊的质量。1　仪器与试药　　高效液相色谱仪 :日本岛津 6 A高效液相色谱仪 (CR- 4 A数据处理仪 ,SCL- 6 B主控机 ) ;进样阀 :772 5 - 0 18,为美国Genuine Pheodyne公司的产品。试剂 :甲醇 (北京化工厂 ,批号 :96 0 32 2 ,优级纯 )。甘草次酸…     

高效液相色谱-质谱法测定人血浆中甘草次酸浓度及人体药代动力学研究

目的建立人血浆中甘草次酸的高效液相色谱-质谱(LC-MS)测定法,并用于健康志愿者的药代动力学研究。方法20例健康志愿者一次口服甘草酸二铵胶囊150mg,采集肘静脉血并分离血浆,血样经乙酸乙酯提取后,以熊果酸为内标,进行LC-MS分析。色谱柱：Venusil XBP-C18柱(5μm, ID4.6×150mm),流动相：甲醇(5mmol/L乙酸铵)-水(85∶15,V/V),梯度洗脱;流速：0.8mL/min,柱温25℃,进样10μL。甘草次酸和内标熊果酸的检测离子和裂解电压分别为m/z 469.5、m/z 455.6和200V、100V。根据不同时间甘草次酸血浓度计算其药代动力学参数。结果在0.5～200ng/mL范围内,甘草次酸与内标的峰面积比值与浓度线性关系良好,相关系数为0.9974,定量限为0.5ng/mL,提取回收率为76.0%～80.0%,日内、日间RSD均小于12%。甘草次酸口服给药Cmax为(95.57±43.06)ng/mL,Tmax为(10.95±1.32)h。结论高效液相色谱-质谱测定法灵敏、准确、简便,适用于血浆甘草次酸的浓度测定及其人体药代动力学研究。     

半仿生-酶法提取的半夏白术天麻汤中甘草次酸的含量测定

目的:为优选半夏白术天麻汤用半仿生-酶法提取的工艺条件,以甘草次酸为综合评判指标之一,探讨采用HPLC法测定的可行性.方法:按处方比例称取各中药,加入适宜的酶预处理,再按SBE法,采用正交实验L18(6×36)表,于第一煎和第三煎的溶剂中加入适宜的消化酶,在适宜的温度下提取得提取液.以该提取液为研究对象,HPLC法测定甘草次酸的含量,色谱条件:DiamonsilTM C18柱(5 μm×4.6mm×250mm),流动相为甲醇:0.1%磷酸(87:13),流速为1ml/min,柱温为25℃,检测波长为250nm.结果:甘草次酸在0.145-1.740μg范围内线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为98.14%,RSD=1.56%(n=6).结论:半夏白术天麻汤的半仿生-酶法提取液可用HPLC测定其甘草次酸的含量,该方法准确、重现性好.     

RP-HPLC内标法测定大鼠血浆中甘草次酸的浓度

目的 建立大鼠血浆中甘草次酸浓度的测定方法.方法 采用RP-HPLC内标法,色谱柱为DiamonsilC18柱(4.6mm×25cm,5μm),流动相为甲醇-水-乙酸(体积比86:13.6:0.4),流速为1.0mL·min-1,检测波长为250 nm,柱温为30℃,进样量20μL,内标为丙酸睾酮.结果 甘草次酸质量浓...     

白桦脂酸血浆蛋白结合率的测定

目的建立白桦脂酸在大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白中蛋白结合率的测定方法。方法采用平衡透析法测定白桦脂酸血浆蛋白结合率,利用HPLC测定血浆中白桦脂酸浓度,测定并比较不同血浆中白桦脂酸的血浆蛋白结合率。采用DiamonsilTMC18柱,柱温为30℃,流动相为乙腈-0.2%乙酸(75∶25),流速为1.0 mL/min,检测波长为203 nm。结果在50～100 mg/L,药物浓度对血浆蛋白结合率无显著影响,白桦脂酸与大鼠和人的血浆蛋白结合率存在显著性差异,白桦脂酸与人血浆蛋白结合率高于与大鼠血浆蛋白结合率。结论白桦脂酸与血浆蛋白具有较强的结合。HPLC法测定白桦脂酸与血浆蛋白结合率试验具有简便、快速、灵敏与选择性高的特点。     

高效液相色谱法测定减味紫雪口服液中甘草次酸含量

目的建立测定减味紫雪口服液中甘草次酸含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法色谱柱为康林C18色谱柱(250mm×4.6mm;5μm);流动相:乙腈-0.03moL/L磷酸溶液(60∶40);检测波长:250nm,流速:1.0mL/min,柱温:30℃。结果甘草次酸浓度在0.206-2.06μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9992;平均加样回收率为98.91%,RSD=0.97%。结论所建立的HPLC法准确、简单、可靠,可用于减味紫雪口服液的质量控制。     

HPCE法测定二陈汤复方醇提物中的甘草次酸含量

目的:建立二陈汤中甘草次酸的含量测定方法。方法:采用高效毛细管电泳法。缓冲溶液由30mmol／L硼砂溶液和0．1mol／L碳酸钠(Na2CO3)溶液组成(加乙腈使其浓度至10％),pH=9．6。涂层石英毛细管50μm×95cm(有效长度86．8cm),在18kV电压下运行,50mpa压力进样20s,检测波长为254nm,温度20℃。结果:甘草次酸浓度在11-880 μg/ml范围内呈良好线性关系(r=0．9998),平均回收率为101．27％,RSD为2．53％(n=6)。结论;该方法简便、灵敏、准确。     

HPLC法测定胃乐胶囊中甘草次酸含量

目的建立胃乐胶囊中甘草次酸含量测定的方法。方法正交优选法确定胃乐胶囊中甘草次酸的提取方式,并用HPLC法测定其含量。结果用30倍供试品量的氯仿,加热回流20 min可以最大限度溶出供试品中甘草次酸,用C18色谱柱(3.9×150 mm),甲醇∶水(用磷酸调pH至3.7)=85∶15,紫外检测波长250 nm,可以使甘草次酸与其它成分有效分离,含量测定回收率为95.8%(n=5,RSD=2.0%)。结论本实验确定的方法简便、准确,便于推广到实际生产中应用。     

甘草次酸脂质体的包封率测定和体外释放度考察

【目的】测定甘草次酸(GA)脂质体的包封率,并考察其体外释放规律。【方法】采用注入法制备甘草次酸脂质体,用葡聚糖凝胶G-50柱分离GA脂质体和游离GA,高效液相色谱(HPLC)法测定包封率。按照中国药典(2005年版)溶出度第3法考察甘草次酸脂质体体外释放规律。【结果】测得甘草次酸脂质体平均包封率为91.61%,甘草次酸脂质体的体外释放曲线符合Higuchi方程。【结论】甘草次酸脂质体具有较高的包封率,在体外具有良好的缓释作用。     

聚乙二醇单甲醚改性甘草次酸表观油水分配系数的测定

目的测定甘草次酸改性前后的表观油水分配系数,考察其水溶性改善情况。方法建立紫外分光光度法,采用摇瓶法(正辛醇-水体系)测定甘草次酸及聚乙二醇单甲醚改性甘草次酸在不同油水比例以及不同p H值下的表观油水分配系数(lg P)。结果甘草次酸在无水乙醇中的最大紫外吸收波长为248nm,线性回归方程为A=0.0233C-0.0008(n=6,r=0.9999),在6.0~36mg/L范围内,线性关系良好。改性后甘草次酸的表观油/水分配系数下降到-0.538~-0.767。结论难溶性中药有效成分甘草次酸经聚乙二醇单甲醚改性后在水中的溶解性显著提高。     

华蟾酥毒基血浆蛋白结合率测定

目的 :建立测定华蟾酥毒基血浆蛋白结合率的方法。方法:采用平衡透析法,测定不同浓度华蟾酥毒基与血浆的蛋白结合率。结果:华蟾酥毒基在透析内液中的线性范围为3.7~59.2μg/m L,透析外液中为0.01~1.12μg/m L。3种不同浓度的华蟾酥毒基在透析内液和透析外液中的回收率分别为81.26%、85.57%、87.99%和80.26%、87.49%、89.90%。华蟾酥毒基的平均血浆蛋白结合率为(84.56±0.539)%。结论:浓度因素对华蟾酥毒基的血浆蛋白结合率没有显著影响。     

高效液相色谱法研究蓝萼甲素与大鼠血浆蛋白的结合率

目的研究蓝萼甲素与大鼠血浆蛋白的结合。方法采用大鼠血浆平衡透析法，HPLC法测定透析袋两侧溶液中蓝萼甲素的质量浓度，计算蓝萼甲素的血浆蛋白结合率。结果蓝萼甲素在质量浓度为20、10、1μg／mL时与血浆蛋白结合率分别为74．46％、77．87％、75．29％。结论高效液相色谱法用于蓝萼甲素的生物样品测定具有简便、快速、灵敏与选择性高的特点。蓝萼甲素具有中等强度的血浆蛋白结合率。     

甘草与附子配伍后甘草黄酮含量变化的测定

目的:测定甘草与附子配伍后甘草黄酮含量的变化. 方法:采用高效液相色谱法测定甘草单煎液和甘草与附子合煎液中甘草苷的含量变化. 结果:甘草单煎液中甘草苷平均含量0.76%,甘草与附子合煎液中甘草苷平均含量0.48%. 结论:甘草与附子配伍后,甘草黄酮(甘草苷)含量明显减少,表明甘草能抑制附子的毒性.     

高效液相色谱法测定菊黄上清含片中甘草次酸的含量

菊黄上清含片是由贵阳医学院和贵州渝生制药有限公司共同开发研制的新药,用于治疗热毒内蕴、挟风上扰所致咽痛、咽干灼热、吞咽不利、舌边尖红、苔薄白或薄黄、脉浮数(急性咽喉炎等症),具有舒风清热、解毒利咽等功效.     

同时测定大鼠体内甘草次酸和丹参酮分析方法的构建

目的：建立同时测定大鼠体内的甘草次酸和丹参酮含量的RP-HPLC方法,为甘草次酸和丹参酮复方制剂的体内药动学研究提供方法学基础。方法：采用Waters Symmetry C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以甲醇-磷酸缓冲液(pH=3)(85∶15)为流动相进行等度洗脱;体积流速：1.0 mL/min;进样量：10μL;柱温：30℃;检测波长：250 nm(甘草次酸)、270 nm(丹参酮)。结果：甘草次酸和丹参酮的线性范围分别为0.312 5μg/mL～20μg/mL(线性回归方程为Y=0.430 7X-0.002 6,r² =0.999 8);0.078 125μg/mL～5μg/mL(线性回归方程为Y=2.237 7X-0.022 2,r² =0.999 6);甘草次酸和丹参酮在线性范围内线性良好。低、中、高三种浓度的提取回收率在95.20-103.43%之间,RSD值均小于4.93%,提取回收率良好。该方法在保留时间内未见其他干扰峰,其专属性及精密度均良好。结论：该方法可用于同时测定体内甘草次酸...