HIF-1α和VEGF在结肠癌组织和SW480细胞中表达的生物学意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在结肠癌组织中的表达与肿瘤组织学分级关系,以及HIF-1α和VEGF之间的相关性;缺养环境对人结肠癌SW480细胞中HIF-1α和VEGF表达的影响。方法用免疫组织化学方法染色显示结肠癌组织中HIF-1α和VEGF的表达,分析HIF-1α、VEGF表达随结肠癌组织学分级的变化及二者之间的关系;RT-PCR研究SW480细胞HIF-1α和VEGF表达在常氧与缺氧时的差异。结果HIF-1α和VEGF蛋白均在结肠癌组织中表达,且表达水平随结肠癌组织学分级提高而上升;各级结肠癌组织中HIF-1α和VEGF的表达呈正相关性;缺氧诱导SW480细胞的VEGF mRNA表达上升。结论HIF-1α和VEGF的表达随结肠癌恶性程度的增高而增强。     

HIF-1α、HIF-2α和GLUT-1在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、HIF-2α和葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义。方法：收集广西医科大学第二附属医院2017年3月至2021年3月收治的非霍奇金淋巴瘤和淋巴结增生患者的病理切片标本,其中非霍奇金淋巴瘤42例作为淋巴瘤组,淋巴结增生37例作为淋巴结增生组,用免疫组化法测定两组HIF-1α、HIF-2α和GLUT-1表达情况,并分析三者与淋巴瘤国际预后指数（IPI）评分之间的相关性。结果：HIF-1α、HIF-2α和GLUT-1在淋巴瘤组中的阳性表达率均高于淋巴结增生组（均P<0.01）。淋巴瘤组织中HIF-1α的表达与HIF-2α、GLUT-1的表达呈正相关关系（r=0.593,P<0.05;r=0.583,P<0.05）,HIF-2α的表达与GLUT-1的表达呈正相关关系（r=0.331,P<0.05）。IPI 3～5分组的HIF-1α、HIF-2α和GLUT-1阳性表达率均高于0～2分组（均P<0.05）,且HIF-1α、HIF-2α、GLUT-1的表达与IPI评分均呈正相关关系（0<...     

华蟾素调控HIF-1α/VEGF通路逆转结肠癌HCT15/5-FU细胞耐药的体外研究

目的 探讨华蟾素(CINO)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人源结肠癌(CRC)耐药细胞株HCT15/5-FU的逆转作用,明确缺氧诱导因子(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)通路在逆转结肠癌化疗耐药中的调控作用。方法 MTT法检测细胞耐药性及耐药指数的变化,流式细胞术评价细胞凋亡的情况,划痕实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力的变化。Western blot检测上皮间充质转化(EMT)相关蛋白及HIF-1α/VEGF通路相关蛋白的表达。结果 与HCT15细胞相比,HCT15/5-FU的耐药指数约为8.720。CINO联合5-FU作用后,能够明显提升HCT15/5-FU细胞的药物敏感性,降低耐药指数,剂量依赖性地上调细胞凋亡水平、抑制细胞迁移和侵袭能力;Western blot结果显示CINO联合5-FU作用后能够抑制EMT及HIF-1α/VEGF通路的活性。结论 体外研究显示,华蟾素具有逆转结肠癌5-FU耐药的作用,其机制可能与调节HIF-1α/VEGF通路抑制EMT、血管生成有关。     

胃癌细胞系幽门螺杆菌感染对HIF-1α、HIF-2α及VEGF表达的影响

目的研究幽门螺杆菌对人胃癌细胞株BGC-823中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将不同浓度的H.pylori悬液与BGC-823细胞共培养24h后收集细胞,应用MTT法检测细胞存活率,RT-PCR和Western blotting技术检测HIF-1α、HIF-2α及VEGF的表达。对照组加稀释用培养液。结果与对照组比较,H.pylori可显著促进BGC-823细胞的增殖(P<0.05)并能显著提高细胞HIF-1α、HIF-2α及VEGF mRNA和蛋白的表达(P<0.05),呈浓度依赖性。结论 H.pylori感染能够刺激BGC-823细胞VEGF的表达,其机制可能是通过HIF-1α、HIF-2α途径介导。这可能是其诱导胃癌血管生成和促进胃癌侵袭转移的机制之一。     

腹腔镜气腹环境下前列腺癌细胞HIF-1α,VEGF和Cadherin的表达变化

目的 研究模拟腹腔镜气腹环境对前列腺癌(PC-3)细胞的影响,探讨可能的分子机制及影响的时效.方法 PC-3细胞随机分为3组:常氧培养组、99% CO2培养组、氯化钴(CoCl2)预处理后常氧培养组.采用Western blot检测3组的HIF-1α,VEGF,Cadherin变化情况.结果 99% CO2培养2、4、8 h后,可检测到HIF-1α,VEGF的表达逐步上升,Cadherin逐步下降,与常氧培养组有显著差异(P<0.05),组内统计分析三指标变化具有相关性.氯化钴预处理组观察到相似变化.将99% CO2培养4 h后的细胞恢复常氧培养至16 h,所见改变基本恢复.结论 CO2模拟气腹环境可通过缺氧导致HIF-1α高表达,从而引起肿瘤转移相关因子VEGF,Cadherin蛋白表达水平升高.气腹作用4 h内所引起上述因子改变是可逆的.     

牛磺酸对模拟急性高原低氧大鼠小肠组织HIF-1α及HIF-1β表达的影响

目的 探讨牛磺酸对模拟高原缺氧大鼠小肠组织HIF-1α及HIF-1β表达的影响.方法 动物经基础饲料或添加牛磺酸饲料喂养7 d后,利用低压舱分别模拟4 500 m及5 500 m海拔高度高原缺氧,分别在高原缺氧处理后第2、6、12、24、48、72 h处死动物,剪取小肠组织,RT-PCR检测 HIF-1α、HIF-1β mRNA表达,Western blot检测HIF-1α蛋白表达.结果 缺氧条件下HIF-1α、HIF-1β表达明显增强,在缺氧12 h时达到峰值,随后逐渐减弱;添加牛磺酸组在各时相点的表达相对于未加牛磺酸组显著增强.结论 牛磺酸能够显著增强高原缺氧大鼠小肠组织HIF-1α、HIF-1β的表达.     

慢性肾脏病患者血清HIF-1α的表达及临床意义

目的 研究慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者血清中的缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factors-1α,HIF-1α)的表达情况,分析其与血清纤维化指标Ⅲ型前胶原氨基末端肽(typeⅢprocollagen amino terminal peptide,PⅢNP)、CKD患者临床指标的关系,探讨HIF-1α在CKD中的临床应用价值.方法 随机抽取63例CKD患者为研究对象,根据CKD分期对研究对象进行分组,CKD1～2期30例患者为A组,CKD3期17例患者为B组,CKD4～5期16例患者为C组,ELISA法检测入组患者血清中HIF-1α及PⅢNP的表达,同时收集入组患者的临床资料,包括姓名、性别、年龄、血常规、肝功能、肾功能、离子、24 h尿蛋白.结果 HIF-1α与PⅢNP、血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT)呈正相关(P<0.05),而与肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)、血红蛋白(hemoglobin,HB)、血钙呈负相关(P<0.05),与中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutropil-to-lymphocyte ratio,NLR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet-to-lymphocyte ratio,PLR)、白蛋白(albumin,ALB)、血磷、24 h尿蛋白无相关性(P>0.05).结论 HIF-1α与血清纤维化指标PⅢNP、肾功能、CKD并发症相关,可能参与CKD疾病的进展,可作为评价CKD的指标之一.     

慢性肾脏病患者血清HIF-1α的表达及临床意义

目的 研究慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者血清中的缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factors-1α,HIF-1α)的表达情况,分析其与血清纤维化指标Ⅲ型前胶原氨基末端肽(typeⅢprocollagen amino terminal peptide,PⅢNP)、CKD患者临床指标的关系,探讨HIF-1α在CKD中的临床应用价值.方法 随机抽取63例CKD患者为研究对象,根据CKD分期对研究对象进行分组,CKD1～2期30例患者为A组,CKD3期17例患者为B组,CKD4～5期16例患者为C组,ELISA法检测入组患者血清中HIF-1α及PⅢNP的表达,同时收集入组患者的临床资料,包括姓名、性别、年龄、血常规、肝功能、肾功能、离子、24 h尿蛋白.结果 HIF-1α与PⅢNP、血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT)呈正相关(P<0.05),而与肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)、血红蛋白(hemoglobin,HB)、血钙呈负相关(P<0.05),与中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutropil-to-lymphocyte ratio,NLR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet-to-lymphocyte ratio,PLR)、白蛋白(albumin,ALB)、血磷、24 h尿蛋白无相关性(P>0.05).结论 HIF-1α与血清纤维化指标PⅢNP、肾功能、CKD并发症相关,可能参与CKD疾病的进展,可作为评价CKD的指标之一.     

HIF-1α在高龄COPD患者发病中的研究

摘要：目的探讨COPD高龄患者（年龄>80岁）血中HIF-1α的水平及其对COPD发病的影响。方法纳入年龄>80岁且符合COPD诊断标准的稳定期患者40例及AECOPD 40例,以及健康体检高龄老人30例。抽血查HIF-1α、动脉血PaCO2、PaO2水平及肺功能。结果三组年龄、性别、体质量等指标无统计学差异。AEC0PD组、C0PD稳定期组、健康对照组三组的HIF-1α、动脉血PaCO2水平差异有统计学意义（P<0.01）,其中AEC0PD组的HIF-1α、动脉血PaCO2最高,稳定期组次之,健康对照组最低。三组间的动脉血PaO2水平、FEV1占预计值百分比差异有统计学意义（P<0.01）,其中AEC0PD组最低,稳定期组次之,健康对照组最高。结论 COPD稳定期及AECOPD的HIF-1α水平均明显升高,且与COPD肺功能损害密切相关。早期监测血HIF-1α水平有可能是观察COPD患者是否急性加重及治疗效果的的指标。     

胶质瘤中HIF-1α的表达及其与预后关系

目的 探讨HIF-1α在脑胶质瘤中表达及其与预后关系.方法 采用免疫组化方法检测胶质瘤标本中HIF-1α的表达情况,分析HIF-1α与胶质瘤临床病理特征及预后关系.结果 胶质瘤标本HIF-1α表达呈阳性反应,胶质瘤标本HIF-1α阳性表达率为71.67%(43/60),主要位于细胞质和(或)细胞核,具有明显的异质性;肿瘤边缘部份的瘤细胞表达明显增强;高级别胶质瘤(Ⅲ-Ⅳ级)中HIF-1α阳性表达率明显高于低级别者(Ⅰ～Ⅱ级)(x2=18.123,P＜0.01);表达强度与病理级别间呈正相关(rs=0.620,P＜0.01),HIF-1α阴性、弱阳性、中度阳性和强阳性表达者术后平均生存时间分别为46.11±3.54、37.99±3.72、23.27±2.76和16.96±4.32个月;组间比较有显著差异(x2=22.190,P＜0.01).结论 HIF-1α在胶质瘤组织中存在过度表达,胶质瘤HIF-1α的表达强弱与肿瘤病理分级具有关.HIF-1α表达与胶质瘤患者术后生存期呈负相关.     

结直肠癌及缺氧的结直肠癌细胞中HIF-1α与miRNA-200b表达的相关性

目的 探讨缺氧诱导因子HIF-1α与miRNA-200b在结直肠癌及缺氧的结直肠癌细胞中的表达以及两者的相关性.方法 采用实时定量PCR检测50例结直肠癌患者的结直肠癌组织及其癌旁组织中HIF-1α与miRNA-200b的表达.利用CoCl2构建结肠癌细胞系的缺氧诱导模型,通过实时定量PCR和Western blot分别测定缺氧的Caco-2细胞中HIF-1α和miRNA-200b基因表达并确立两者相关性.结果 HIF-1α在癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P＜0.O1),miRNA-200b在癌组织中的表达显著低于癌旁组织(P＜0.01),且HIF-1α和miRNA-200b在癌组织中的表达呈负相关(r=-0.324,P ＜0.05).缺氧处理2h后,HIF-1α表达升高,miRNA-200b表达降低;随着缺氧时间延长(4～12 h)HIF-1α表达逐渐降低,miRNA-200b的表达缓慢上升;缺氧16 h,HIF-1α的表达回升且达到另一个高峰,miRNA-200b的表达降至最低.Real-time PCR和Western blot联合检测发现,HIF-1α和miRNA-200b表达呈相反的趋势.结论 HIF-1α可能通过抑制miRNA-200b的表达从而参与结直肠癌上皮细胞EMT的过程.     

基于MALAT1/HIF-1α/ITGαv轴研究扶正祛邪方对结肠癌细胞增殖和侵袭的影响

目的 通过体外实验观察扶正祛邪方对结肠癌细胞增殖、侵袭的抑制作用及机制。方法 采用低、中、高浓度扶正祛邪方含药血清对结肠癌细胞SW480和LoVo进行干预,CCK-8和克隆形成检测其对结肠癌细胞增殖和克隆形成能力的影响,Transwell侵袭实验检测其对结肠癌细胞侵袭能力的影响,RT-qPCR检测其对长链非编码肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1),缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和整合素αv(ITGαv)mRNA表达的影响,Western-Blot检测其对HIF-1α和ITGαv蛋白表达的影响。结果 与对照组相比,低、中、高浓度组在48h和72h时450nm处吸光度A值较对照组显著降低（ P<0.01）;中、高浓度组结肠癌细胞的克隆形成数显著降低（ P<0.01）;低、中、高浓度组穿膜细胞数显著减少（ <0.01）。不同浓度含药血清干预结肠癌细胞,均能下调MALAT1、HIF-1α和ITGαv在RNA水平的表达;与对照组相比差异显著（均 <0.01）。Western-Blot结果显示,中、高浓度组HIF-1α和ITGαv蛋白表达显著下调（均 <0.01...     

胃黏液腺癌组织中HIF-1α的表达及临床意义

目的探讨胃黏液腺癌组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测和分析63例胃黏液腺癌癌区组织、癌旁区组织、手术切缘区正常组织各区域HIF-1α蛋白的表达。结果 HIF-1α蛋白在胃黏液腺癌组织的阳性率明显高于癌旁区组织、正常组织,差异具有显著性（P〈0.05）;在胃黏液腺癌组织中,随着组织学病理分级的增加、临床分期的进展和淋巴结的转移,HIF-1α蛋白表达阳性率逐渐上升,差异具有显著性（P〈0.05）;HIF-1α蛋白表达具有相关性。结论 HIF-1α可能调控胃癌血道转移,可为胃黏液腺癌的早期诊断、治疗、预后判断提供必要的理论依据。     

HIF-1α、VEGF在胃癌中的表达及关系

目的:探讨HIF-1α、VEGF在胃癌组织中的表达及相关性.方法:应用免疫组织化学方法检测84例胃癌组织及癌旁正常组织中HIF-1α、VEGF的表达,并分析它们与临床病理因素的关系及相互间的关系.结果:84例胃癌组织中及癌旁内对照正常胃组织HIF-1α阳性表达分别为60.7%,16.7%(P<0.05).有、无淋巴结转移的癌组织中HIF-1α的表达率分别为79.1%、41.5%(P<0.05),侵润深度分别为粘膜或粘膜下、肌层或浆膜下、穿透浆膜层的癌组织中HIF-1α的表达率分别为29.2%、62.2%、91.3%(P<0.05).未或低分化、中或高分化的癌组织中HIF-1α的表达率分别为76%、54.2%(P>0.05).肿瘤大小≤5cm、>5cm的癌组织中HIF-1α的阳性表达率分别为64.7%、58%(P>0.05).男性为63%,女性为57.9%(P>0.05),<60岁为52.3%,≥60岁为70%(P>0.05). VEGF阳性表达为73.8%(62/84).HIF-1α与VEGF的表达显出相关性,P<0.05.结论:HIF-1α与胃癌的侵润、淋巴结转移有关,并与VEGF的表达具有明显相关性,HIF-1α的作用部分通过VEGF的表达实现.因此可以将HIF-1α作为胃癌患者判断生物学行为及预后的指标之一,也为临床提供靶向治疗的方向.     

非那雄胺对前列腺癌组织HIF-1α表达的影响分析

目的：分析非那雄胺对前列腺癌组织低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法：选取2019年3月-2020年3月贵州航天医院收治的60例前列腺癌患者作为研究对象,随机分为两组,各30例。观察组应用非那雄胺治疗,对照组应用氟他胺治疗。采用免疫组织化学法检测两组患者前列腺癌组织中HIF-1α的表达情况。结果：观察组HIF-1α表达阳性率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：非那雄胺可抑制前列腺癌患者体内HIF-1α的表达,延缓疾病进展,促进患者康复,在临床治疗中具有参考价值及指导意义。     

缺氧标记物HIF-1α、GLUT-1在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的:本文主要探讨HIF-1α、GLUT-1在食管鳞癌中的表达及其临床意义,期望能为食管鳞癌的诊断和靶向治疗提供新的思路和途径。方法:采用SP免疫组织化学染色法检测55例食管鳞癌组织及癌旁不典型增生组织,20例切缘正常组织中HIF-1α、GLUT-1蛋白的表达情况。结果:HIF-1α、GLUT-1在食管鳞癌癌组织中的表达高于正常组织。其表达与患者的性别、年龄无相关性(P>0.05),与食管鳞癌组织的病理分期、分化程度、淋巴结转移有相关性(P<0.05)。HIF-1α、GLUT-1在食管鳞癌中的表达呈正相关。结论:本研究结果提示食管鳞癌组织存在HIF-1α、GLUT-1的过表达,肿瘤的发生、发展中的缺氧过程诱导了HIF-1α的形成,从而促进靶基因GLUT-1的转录,满足恶性肿瘤生长过程中能量代谢糖消耗增加的需要;HIF-1α、GLUT-1可作为判断食管鳞癌预后的参考指标。     

HIF-1α靶向RNAi慢病毒载体的构建及对Panc-1细胞HIF-1α抑制作用的研究

目的：构建针对缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因的RNA干扰（RNAi）慢病毒表达载体,并研究其对胰腺癌Panc-1细胞HIF-1α基因表达的抑制作用。方法：针对HIF-1α基因序列设计合成4条shRNA片断并构建RNAi慢病毒载体,同时构建HIF-1α基因过表达质粒。过表达质粒和RNAi质粒共转染293T细胞后应用Western blot进行外源筛靶。将外源筛靶成功的干扰质粒psc1516进行慢病毒包装,再感染Panc-1细胞,Western blot和荧光定量PCR检测沉默前后Panc-1细胞中HIF-1α的蛋白及mRNA的表达。结果：经PCR及测序证实4种干扰载体及1种过表达载体构建成功,Western blot外源筛靶显示4个靶点均能有效敲减目的基因的表达。细胞试验表明psc1516干扰载体能有效抑制Panc-1细胞中HIF-1α的mRNA及蛋白的表达,当MOI=4时,对HIF-1αmRNA的抑制率为87.4%,蛋白抑制率达90.0%以上。结论：RNAi慢病毒载体可有效地抑制胰腺癌Panc-1细胞中HIF-1α的表达。     

LASP1和HIF-1α在肺癌中的表达及临床价值

目的分析LASP1（LIM and SH3 protein 1）和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在肺癌中的表达及其与临床因素之间的相关性。方法应用qRT-PCR、Western blot分别检测肺癌细胞株和正常肺细胞株间LASP1和HIF-1αmRNA和蛋白表达差异,免疫组化分析肺癌患者LASP1和HIF-1α蛋白表达情况。结果LASP1和HIF-1αmRNA和蛋白在肺细胞株中的表达明显低于在肺癌细胞株中的表达（P<0.05）。肺癌患者中LASP1表达与N分期（P=0.033）密切相关,HIF-1α与LASP1表达与T分期（P=0.027）和N分期（P=0.015）密切相关;LASP1和HIF-1α表达呈正相关（r=0.273,P=0.025）。预后生存分析发现N分期、LASP1和HIF-1α表达为本组肺癌患者预后独立因素。结论肺癌中LASP1和HIF-1α表达升高,LASP1和HIF-1α表达可作为肺癌预后预测指标。