吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮类衍生物的合成及结构表征

目的：寻找新型磷酸二酯酶抑制剂,设计合成未见文献报道的吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮类衍生物。方法：以2-甲氧基桂皮酰氯与1-甲基-3-正丙基-4-氨基吡唑-5-甲酰胺反应制得化合物Ⅰ,而后闭环得化合物Ⅱ,化合物Ⅱ经2步反应得到目标化合物Ⅳ。结果：成功合成了目标化舍物以及反应过程中的两个中间体。结论：新化合物的结构经IR,1H-NMR和MS进行确证。     

2,3,6-三甲基-7-氨基吡唑并[1,5-a]嘧啶的合成

目的:研究2,3,6-三甲基-7-氨基吡唑并[1,5-a]嘧啶的合成方法。方法:α-甲基乙酰乙腈在乙醇和乙酸存在的条件下与水合肼反应约60min,经减压蒸馏后,所得产物再与2-甲基-3,3-二甲氧基丙腈反应8h,经20%的NaOH溶液、乙醇处理后,得目标产物。结果:两步反应总产率为42.2%,并对目标物质进行了分析鉴定和结构表征。结论:该合成路线简便,反应条件温和,产率适中,具有较好的应用前景。     

2,3，6-三甲基-7-氨基吡唑并[1，5-a]嘧啶的合成

目的：研究2，3，6-三甲基-7-氨基吡唑并[1，5-a]嘧啶的合成方法。方法：d-甲基乙酰乙腈在乙醇和乙酸存在的条件下与水合肼反应约60rain，经减压蒸馏后，所得产物再与2-甲基-3，3-二甲氧基丙睛反应8h，经20％的NaOH溶液、乙醇处理后，得目标产物。结果：两步反应总产率为42．2％，并对目标物质进行了分析鉴定和结构表征。结论：该合成路线简便，反应条件温和，产率适中，具有较好的应用前景。     

咪唑并[1,2-a]嘧啶类化合物的合成和抗炎活性

目的:研究具有咪唑并[1,2-a]嘧啶结构化合物的合成和抗炎活性。方法:在咪唑并[1,2-a]嘧啶的结构基础上,合成2-位和3-位上有两个芳香性取代基的咪唑并[1,2-a]嘧啶类化合物(5a～5o),并对所合成的化合物进行二甲苯诱导的小鼠耳肿胀模型抗炎活性实验。结果:合成的15个未见报道的目标化合物结构经元素分析,红外光谱、核磁共振氢谱、质谱确证;初步生物活性测试表明,多数化合物具有不同程度的抗炎活性,其中化合物5d,5f和5l的活性较好。结论:与布洛芬相比,咪唑并[1,2-a]嘧啶类化合物能保持中等的抗炎活性,2-位和3-位被两个相邻的芳基取代可以改善COX-2的抑制作用。     

3-氨基-5H-5-芳基吡唑[3,4-e]并-1,2,3,4-四嗪衍生物的合成

目的:为了寻找干扰核酸代谢的抗肿瘤新药,设计和合成嘌呤生物碱的类似物3-氨基-5H-5-芳基吡唑[3,4-e]并-1,2,3,4-四嗪衍生物是有意义的。方法:以3,5-二氨基吡唑为原料,经过重氮化、偶合和分子内关环合成目标化合物3-氨基-5H-5-芳基吡哇[3,4-e]并-1,2,3,4-四嗪衍生物。结果:合成了六个新的嘌呤类似物。结论:通过IR、~1H-NMR、质谱和元素分析证实所得化合物为目标化合物。     

噻吩骈[3,4—d]嘧啶—2,4—二酮衍生物的合成

以磷酸二酯酶(PDE)抑制剂茶碱为先导化合物,设计、合成了14个噻吩骈[3,4-d]嘧啶-2,4-二酮衍生物,经波谱分析证实其结构,并进行了生物活性测定。结果表明,其中部分化合物具有比茶碱强的PDE抑制活性。     

光谱法研究2-环己氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶-4(3H)-酮与牛血清白蛋白的相互作用

目的为新型噻吩并嘧啶的开发与应用提供重要信息。方法应用荧光光谱、紫外可见光谱方法研究了2-环己氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶-4(3H)-酮(HJA)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。结果HJA能强烈猝灭BSA的荧光强度,其荧光猝灭机理为动态猝灭。在此基础上计算了二者相互作用的结合常数、结合位点数及热力学参数等。结论HJA分子与BSA分子以摩尔比1∶1结合,其结合反应主要是熵驱动,主要作用力是疏水力。     

维生素E对苯并[a]芘诱导大鼠神经毒性的拮抗作用

【】目的：探讨维生素E(Vitamin E,VE)对苯并[a]芘(benzo(a)pryene,B[a]P)所致雄性SD大鼠神经毒性的保护作用。方法：将60只SD雄性大鼠随机分为空白、溶剂对照组、B[a]P组及VE低、中、高联合B[a]P处理组。连续灌胃30天,通过Morris水迷宫(Morris Water Maze, MWM)测试大鼠学习记忆能力;观察海马形态学改变以及海马体组织中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase,γ-GCS)活性、谷胱甘肽(Glutathione, GSH)、氧化型谷胱甘肽(Oxidized glutathione, GSSG)及丙二醛(Malonaldehyde, MDA)含量变化。结果：行为学结果显示B[a]P组较对照组平均逃避潜伏期明显升高,跨台次数和在原平台象限停留时间明显降低,差异有统计学意义(P=0.000);而VE可明显改善各指标变化。此外,海马神经形态学变化提示VE可拮抗B[a]P的损害作用;较之对照组,B[a]P组大鼠海马体组织SOD、GSH-Px、γ-GCS活性以及GSH、GSSG含量下降、MDA含量上升,差异均有统计学意义(P=0.000),且随着VE剂量增加,各指标均有明显改善。结论：VE可对B[a]P导致的神经毒性起到保护作用。     

噻吩骈[3,4—d]嘧啶—2,4—二酮类化合物对PDE的抑制作用

茶碱是一典型的磷酸二酯酶(PDE)抑制剂,结构类似核酸代谢物,易进入细胞内。口服、注射均易吸收,与腺苷酸(AMP),鸟苷酸(GMP)环化酶激动剂无交互作用,其副作用有恶心、胃肠道出血、中枢兴奋等。     

1—及3—硝基苯并[a]芘混合物在大鼠肝微粒体中代谢产物的探讨

本文分析了1—硝基苯并[a]芘和3—硝基苯并[a]芘混合物在体外有氧条件下的代谢产物及代谢速率,并同单一的1—硝基苯并[a]芘和3—硝基苯并[a]芘的代谢产物进行比较。结果表明,1—及3—硝基苯并[a]芘混合物的代谢产物与单一的1—或3—硝基苯并[a]芘的代谢产物是相同的;而且两者按摩尔比等量混合后的代谢速率也是一致的。实验还表明,需要把高压液相色谱仪的反相柱和正相柱结合起来使用,才能把1—和3—硝基苯并[a]芘混合物的代谢产物完全分开。     

[^14c]苯并[a]芘在SD大鼠纹状体的动态分布研究

目的:用r测量方法和光镜放射自显影研究[14C]苯并[a]芘([14C]Benzo(a)pyrene,[14C]BaP)在大鼠纹状体的动态分布,探讨BaP的神经毒性及其作用机制.方法:100只SD大鼠随机分为对照组和实验组,实验组尾静脉注射[14C]BaP 3.7 × 105 Bq/kg,对照组注射相同剂量的生理盐水.每组按照染毒后处死时问的不同,又分为1 h、1 d、2 d、3 d、7 d共5个时间点,观察大鼠一般情况以及测定脏器系数,采用r测最方法和光镜放射自显影法观察[14C]BaP在纹状体的分布及其银粒密度.结果:BaP急性染毒后大鼠出现了一般情况的改变和脏器系数下降.r测量结果:纹状体每克脑组织含放射性占注射剂量的百分比(%ID/g)在第1 d和第2 d明显高于海马、大脑皮层(P<0.05);放射自显影结果:纹状体银粒在第1 d达高峰,第2 d显著减少,染毒后第7 d仍可检测到银粒.结论:BaP能透过血脑屏障到达脑组织,主要分布和贮存于纹状体,具有一定的中枢神经毒性.     

噻吩骈嘧啶二酮衍生物的合成及其抑酶活性

为了寻找新的磷酸二酯酶(PDE)抑制剂,以茶碱为先导化合物,氰乙酸和氨基甲酸乙酯为原料,经中间体N-取代-5-氰基脲嘧啶,合成了12个噻吩骈[3,4-d]嘧啶-2,4-二酮类化合物。它们对PDE有不同程度的抑制活性,其中3-甲基-1-邻甲基苯基-5-氨基噻吩骈[3,4-d]嘧啶-2,4-二酮活性较强。     

3-芳基-6-三氯甲基-1,2,4-三唑并[3,4-b]-1,3,4-噻二唑的合成及其质谱研究

目的：合成连有三氯甲基的稠杂环化合物，并研究其波谱(特别是质谱)的特征。方法：3-芳基-4-氨基-5-羟基-1，2，4-三唑与三氯乙酸在三氯氧磷存在条件下关环，合成了3-芳基-6-三氯甲基-1，2，4-三唑并[3，4-b]-1，3，4-噻二唑。结果：这三个新化合物结构经元素分析、红外光谱、氢谱与质谱确证。结论：这些化合物质谱都有分子离子峰。当分子中有三个氯原子时，M 6：M 4：M 2：M=4：11：100：100。     

苯并[a]芘对神经胶质细胞中胰岛素降解酶与脑啡肽酶表达的影响

目的：探讨苯并［a］芘［benzo(a)pyrene,BaP］对神经胶质细胞中具有β-淀粉体（β-amyloid,Aβ）清除作用的胰岛素降解酶（insulin-degrading enzyme,IDE）及脑啡肽酶（neprilysin,NEP）表达的影响。方法：制备新生SD大鼠原代神经胶质细胞混合培养体系,接受不同浓度的BaP、Aβ1-42寡聚体、Aβ1-42纤维体单独或联合处理24 h后,采用细胞增殖 毒性检测试剂盒测定细胞存活率。随机分为对照组、BaP（2.00 μmol/L）组、Aβ1-42（20.00 mg/L）寡聚体组、BaP+Aβ1-42寡聚体组、Aβ1-42（20.00 mg/L）纤维体组、BaP+Aβ1-42纤维体组,其中BaP均为预处理12 h后再与不同聚集状态的Aβ1-42共同作用。进一步采用实时荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹技术检测体系中IDE、NEP的mRNA和蛋白表达水平。结果：20.00 μmol/L及以下浓度的BaP处理,20.00、40.00 mg/L的Aβ1-42寡聚体或Aβ1-42纤维体单独处理,BaP与Aβ1-42寡聚体或BaP与Aβ1-42纤维体联合处理对神经胶质细胞的存活率均无明显影响。与对照组相比,BaP单独处理组中IDE、NEP的mRNA和蛋白水平均未明显改变;而Aβ1-42寡聚体单独作用可明显上调IDE的mRNA及蛋白水平（P<0.05）,同时BaP预处理可显著抑制Aβ1-42寡聚体作用引起的IDE表达水平上调（P<0.05）;另一方面,Aβ1-42纤维体在单独处理或有BaP预处理情况下,IDE、NEP的mRNA和蛋白水平均未发生明显改变。结论：在对细胞存活率无明显影响的前提下,BaP预处理显著抑制了Aβ寡聚体作用后的IDE表达水平上调,提示苯并［a］芘可能干扰Aβ寡聚体降解途径导致Aβ增多聚集,进而可能促进认知功能降低及阿尔兹海默病的形成。     

以杯[4]芳烃衍生物为载体的钾离子选择电极的研究

目的：研制新的以杯[4]芳烃衍生物为载体的PVC膜钾离子选择电极。方法：以3种杯[4]芳烃衍生物为载体，癸二酸二辛酯或邻苯二甲酸二辛酯为增塑剂，四（4－氯）苯硼钾为离子定域体制得了PVC膜钾离子选择电极，测试了该类电极对钾离子的响应性能和对7种阳离子的选择性系数。结果：以5，11，17，23－四叔丁基－25，26，27，28－四[2-(乙氧基羰基）苄氧基]杯[4]芳烃为载体所制得的电极（电极Ⅰ）对钾离子有良好的能斯特响应，该电极的选择性系数优于电极Ⅱ和Ⅲ。分别用电极Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ对青霉素V钾中的钾含量进行了测定，其结果均与原子吸收法基本一致。结论：所制得的上述电极是一类新的钾离子选择电极，有实用价值。     

烧烤肉类食品中苯并[a]芘的HPLC测定

目的了解烧烤肉类食品中苯并[a]芘残留的含量水平,为食品卫生学研究和保护食用者安全提供实验数据。方法采用紫外可见吸收光谱确定检测波长,高效液相色谱检测,结合水浴回流、皂化去脂、有机溶剂萃取、低温浓缩等前处理方法。结果炭火烧烤的羊肉串样品中苯并[a]芘的含量均高于国家允许标准约一倍,大部分烧烤鸡肉的残留亦超过规定。结论烧烤肉类食品中苯并[a]芘残留量大部分超标,建议市民尤其是青少年不吃或少吃此类食品并加强对烧烤摊贩的监督管理。     

苯并[a]芘对脑内多巴胺能神经元和α-突触核蛋白的影响及其机制

目的 分析苯并[a]芘[benzo(a)pyrene,BaP]暴露对帕金森病病理特征多巴胺能神经元和α-突触核蛋白表达的影响,并探讨可能的机制。方法 8月龄人源SNCA转基因小鼠随机分为BaP染毒组和对照组,分别腹腔注射1.0 mg/kg体质量的BaP和玉米油溶剂,连续注射60 d。通过转轮实验观察小鼠运动功能障碍状况,通过免疫组织化学与免疫蛋白印迹实验观察BaP对多巴胺能神经元和α-突触核蛋白的影响,采用实时荧光定量PCR法检测相关mRNA的表达。研究中涉及的基因主要与神经递质转运蛋白、神经递质受体、细胞自噬和α-突触核蛋白聚集与降解相关。结果 BaP染毒后,转轮实验中小鼠运动时间显著降低(P<0.05),小鼠黑质多巴胺能神经元明显减少,为对照组的62%(P<0.05),中脑α-突触核蛋白表达增多,为对照组的1.36倍(P<0.05)。BaP染毒后,小鼠中脑14种mRNA表达显著下调(P均<0.05),主要涉及α-突触核蛋白降解与细胞自噬、神经元转运体、神经递质受体等功能;而Synphilin-1表达显著上调(P<0.01),与α-突触核蛋白合成有关。结论 BaP暴露抑制神经递质受体、多巴胺转运体蛋白功能和细胞自噬作用,阻碍α-突触核蛋白降解,从而诱导黑质多巴胺能神经元变性死亡和α-syn聚集体形成,增加帕金森病发病风险。     

苯并[a]芘对脑内多巴胺能神经元和α-突触核蛋白的影响及其机制

目的 分析苯并[a]芘[benzo(a)pyrene,BaP]暴露对帕金森病病理特征多巴胺能神经元和α-突触核蛋白表达的影响,并探讨可能的机制。方法 8月龄人源SNCA转基因小鼠随机分为BaP染毒组和对照组,分别腹腔注射1.0 mg/kg体质量的BaP和玉米油溶剂,连续注射60 d。通过转轮实验观察小鼠运动功能障碍状况,通过免疫组织化学与免疫蛋白印迹实验观察BaP对多巴胺能神经元和α-突触核蛋白的影响,采用实时荧光定量PCR法检测相关mRNA的表达。研究中涉及的基因主要与神经递质转运蛋白、神经递质受体、细胞自噬和α-突触核蛋白聚集与降解相关。结果 BaP染毒后,转轮实验中小鼠运动时间显著降低(P<0.05),小鼠黑质多巴胺能神经元明显减少,为对照组的62%(P<0.05),中脑α-突触核蛋白表达增多,为对照组的1.36倍(P<0.05)。BaP染毒后,小鼠中脑14种mRNA表达显著下调(P均<0.05),主要涉及α-突触核蛋白降解与细胞自噬、神经元转运体、神经递质受体等功能;而Synphilin-1表达显著上调(P<0.01),与α-突触核蛋白合成有关。结论 BaP暴露抑制神经递质受体、多巴胺转运体蛋白功能和细胞自噬作用,阻碍α-突触核蛋白降解,从而诱导黑质多巴胺能神经元变性死亡和α-syn聚集体形成,增加帕金森病发病风险。     

5H-茚并[1,2-b]吡啶的某些5-取代衍生物的合成

报告了文题化合物的合成方法。实验结果表明,5-溴-5H-茚并[1,2-b]吡啶(Ⅱ)的溴原子比较活泼,可被多种亲核试剂所取代。溴代物与含活泼亚甲基的丙二酸二乙酯反应,溴被(二乙氧羰基-)甲基取代,经水解,生成5-(二羧基-甲基)-5H-茚并[1,2-b]吡啶(Ⅳ),再经脱羧,即转化成5-羧甲基-5H-茚并(1,2-b)吡啶(Ⅴ)。溴代物与饱和环状仲胺哌啶反应,溴被哌啶子基取代,生成5-哌啶子基-5H茚并(1,2-b)吡啶(Ⅶ)。溴代物与芳胺类化合物邻-氨基苯甲酸酯反应,溴被N-芳胺基取代,生成5-(邻-烷氧羰基苯胺基)-5H-茚并[1,2-b]吡啶(Ⅷ)和5-(邻-烷氧羰基苯亚胺基)-5H-茚并[1,2-b]吡啶(IX)。所得各种反应产物,均经波谱分析得以证实。     

苯并[a]芘对内皮细胞Jun N端激酶活化的影响

目的探讨苯并[a]芘(BaP)对猪主动脉内皮细胞JunN端激酶(JNK)磷酸化的影响。方法培养猪主动脉血管内皮细胞,分别以不同浓度的BaP染毒(0、0.1、0.5、1、5、10μmol/L)24h,用Western-blot法检测JNK磷酸化的改变。结果无BaP作用时,磷酸化JNK1/2基本不表达;随BaP浓度的升高,JNK1/2被激活的程度升高,其中磷酸化JNK1水平升高比较明显,升高峰值为BaP浓度1μM左右,随之逐渐降低;而JNK2被激活的程度稍小,表达比较平稳。结论不同浓度的BaP作用下,内皮细胞JNK1/2分别不同程度地被激活,可能是导致HSP70基因表达改变和细胞损伤机制之一。