牛膝多肽对NMDA诱导的大鼠原代视网膜神经节细胞损伤的保护作用

目的：探讨牛膝多肽（ABPP）对N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）诱导的体外培养大鼠视网膜神经节细胞（RGCs）损伤的保护作用。方法：采用新生大鼠视网膜神经细胞体外原代培养,随机分为对照组、NMDA组、ABPP＋NMDA组[按ABPP不同药物质量浓度（0.1、0.3、1.0、3.0μg/ml）设4个亚组]和地西平（MK-801）＋NMDA组。采用倒置显微镜观察细胞形态;抗Thy-1.1细胞免疫荧光染色鉴定培养细胞中RGCs纯度;MTT比色法测定细胞存活率;Hoechst/PI双染色法定性观察细胞凋亡;流式细胞术AnnexinV/PI双染色法定量测定细胞凋亡率。结果：NMDA可诱导大鼠视网膜神经节细胞凋亡,与NMDA组比较,0.3μg/ml ABPP可提高RGCs存活率,减少细胞凋亡（P〈0.05）。结论：ABPP可抑制NMDA诱导的视网膜神经节细胞凋亡,保护视网膜神经元。     

白细胞介素-18与白细胞介素-12协同增强肿瘤浸润淋巴细胞对胃癌细胞的杀伤作用

目的:研究白细胞介素-18(IL-18)与白细胞介素-12(IL-12)对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)杀伤功能的影响.方法:IL-18与IL-12共同刺激的TIL与人的胃癌细胞系SGC-7901共孵育后接种于BALB/c SCID小鼠皮下,测定小鼠肿瘤的生长大小并观察荷瘤小鼠的生存时间,酶联免疫吸附试验(ELISA方法)检测小鼠血清中Th1型细胞因子TNF-α、IFN-γ及Th2型细胞因子IL-10、IL-4的表达水平,同时体外测定NK细胞及CD8+T细胞的肿瘤杀伤活性.结果:IL-18与IL-12共同作用于TIL后,与对照组相比,SGC-7910细胞的荷瘤小鼠皮下肿瘤生长明显减慢,小鼠生存率明显延长;同时,两种细胞因子联合处理组荷瘤小鼠血清中细胞因子TNF-α、IFN-γ的水平明显增高,而IL-10与IL-4水平明显降低;体外LDH杀伤实验证实IL-18联合IL-12处理组NK细胞及CD8+T细胞杀伤活性明显提高.结论:IL-18与IL-12协同刺激能增强TIL对胃癌胞的杀伤功能.     

白细胞介素-18抗体在急性免疫性肝损伤中的保护作用研究

目的 探讨白细胞介素-18抗体对急性免疫性肝损伤小鼠的保护作用.方法 昆明种小鼠给予不同剂量白细胞介素-18抗体.12 d后处死小鼠,测定小鼠肝脏、脾脏、胸腺系数,测定小鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-6(IL-6)、α-肿瘤坏死因子(TNF-α)含量,光镜下观察肝组织细胞结构的改变.结果 模型组肝细胞损伤明显,处理组较轻.模型组小鼠血清AST、ALT、IL-18、IL-6、TNF-α含量比对照组明显升高,P<0.05.与模型组相比,处理组小鼠血清AST、ALT、IL-18、IL-6、TNF-α含量降低,以大剂量IL-18抗体组明显,P<0.05.结论 应用IL-18抗体对小鼠急性免疫性肝损伤有保护作用,并可能是通过抑制IL-6、TNF-α的作用来实现的.     

α晶体蛋白对视网膜神经节细胞作用的初步研究

目的 探讨α晶体蛋白对体外培养视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的作用.方法 原代培养RGCs,Thy1.1免疫荧光法鉴定RGCs并进行纯度检测,10-7、10-6、10-5、10-4 g/L α晶体蛋白加入后于1、3、12 h、1、2 d和3 d在相差倒置显微镜下观察RGCs形态学变化;计数突起数目和轴突长度;应用免疫荧光及激光共聚焦扫描技术观察实验组α晶体蛋白在体外培养RGCs上的定位并进行荧光强度半定量分析.结果 Thy1.1鉴定RGCs纯度为90%～95%,RGCs 10-4、10-5 g/L组突起数目及轴突长度显著大于对照组,以10-4 g/L组变化最显著.免疫荧光结果显示10-4 g/Lα晶体蛋白组RGCs与α晶体蛋白抗体呈阳性结合,并呈先升高后降低趋势.结论 α晶体蛋白能够促进RGCs生长,最佳浓度为10-4 g/L,细胞膜上抗体结合阳性,表明α晶体蛋白可与RGCs膜结合,这在α晶体蛋白促进RGCs存活和轴突再生的反应中可能起重要作用.     

白细胞介素-15及其抗感染作用

白细胞介素-15(interleukin-15,IL-15)是1994年Grabstein等从猴肾上皮细胞系中克隆出来的,早期研究显示其与IL-2有许多相似的功能。在自然杀伤(nature killer,NK)细胞、T细胞、某些内皮细胞的发育中起重要作用,并且是记忆性CD8阳性T细胞的选择性生长因子和调节因子。高表达IL-15的转基因小鼠早期淋巴细胞、NK细胞和记忆性CD8阳性细胞增多,     

白细胞介素-4及其受体的研究现状

白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）是域型辅助T细胞（Th2细胞）分泌的细胞因子。人类白细胞介素-4受体（interleukin-4 receptor,IL-4R）属于红细胞生成素受体超家族成员,与IL-4特异性结合后发挥其生物学功能,现已发现有可溶性IL-4R（Solu-bleinterleukin-4 receptor,sIL-4R）及膜型IL-4R （murine interleukin-4 receptor,mIL-4R）,两者与IL-4的结合时的亲和力相同。其中sIL-4R可作为IL-4的保护性载体,并且具有调节IL-4生物学活性的功目前,临床上将IL-4及其受体作为免疫调节剂,在检测和防治哮喘、类风湿性关节炎和肿瘤等相关疾病的效果已经日渐显著。笔者以IL-4及IL-4R对有关文献进行查阅、整理和归纳。现将介绍IL-4及其受体研究现状如下。     

白细胞介素13抗体对支气管哮喘小鼠气道炎症的影响

 目的基于白细胞介素13（IL-13）抗原表位制备抗IL-13抗体,观察其对支气管哮喘小鼠气道炎症的影响。方法通过软件分析获得IL-13的B细胞表位LTKELIEELSNITQ,合成肽段与KLH蛋白耦联制备多克隆抗体。将支气管哮喘小鼠模型分为IL-13抗体治疗组、兔IgG治疗组和PBS组,同时设正常对照组,观察IL-13抗体对小鼠支气管哮喘的治疗作用。结果获得针对IL-13全蛋白的多克隆抗体。IL-13抗体组较兔IgG组和PBS组白细胞数量明显减少,支气管肺泡灌洗液中IL-4、IL-5和γ-IFN含量明显降低。结论IL-13中和抗体对小鼠支气管哮喘症状有明显缓解作用。     

重组人白细胞介素-13对造血细胞白细胞介素-13受体α1表达的调控

目的 探讨白细胞介素-13受体α1(interleukine-13 receptor α1,IL-13,Rα1)在造血细胞的表达及其在重组人白细胞介素-13(recombmant human ineterleukine-13,rhIL-13)作用下的表达变化.方法 细胞培养, 提取细胞总RNA, 用RT-PCR及图象分析法检测Dami细胞白细胞介素-13受体ɑ1mRNA表达的水平.结果 Dami细胞均表达白细胞介素-13受体α1;rhIL-13作用Dami细胞4h后,白细胞介素-13受体α1 mRNA表达降低12h后,IL-13Rα1 mRNA表达恢复.结论 ①Dami细胞表达IL-13Rα1.②rhIL-13短暂下调Dami细胞IL-13Rα1的表达.     

白细胞介素-7研究新进展

白细胞介素-7(interleukin-7,IL-7)最早在1988年以pre-B细胞刺激因子的角色被发现,由Namen等从一单克隆鼠骨髓基质细胞株(IXN/A6)培养液中分离提纯,并以淋巴细胞生长因子-1(lymphopoetin 1,LP-1)命名[1];后因发现其不同于其他白细胞介素,故统一更名为IL-7[2].     

白细胞介素-1受体辅助蛋白在神经精神疾病发病中作用的研究进展

白细胞介素-1受体辅助蛋白(interleukin-1 receptor accessory protein,IL1 RAP)是白细胞介素-1 (interleukin-1,IL-1)信号通路的重要组分之一,参与IL-1/IL-1R Ⅰ(白细胞介素-1受体Ⅰ型,interleukin-1 receptor Ⅰ)/IL1...     

α－CD_3单克隆抗体对肿瘤特异性T细胞的扩增和杀瘤活性的影响

为寻找更有效的肿瘤过继性免疫治疗的方案，用α－ＣＤ３单克隆抗体（单抗）激活ＦＢＬ－３红白血病肿瘤细胞免疫的小鼠脾细胞获取肿瘤特异性Ｔ细胞，并观察α－ＣＤ３单抗对肿瘤特异性Ｔ细胞的增殖、杀瘤活性及表型的影响。体外实验结果显示，免疫小鼠脾细胞经α－ＣＤ３单抗激活后，采用低剂量ＩＬ－２即可维持其长期高度的、持续的增殖；又培养过程中α－ＣＤ３单抗持续存在可大大促进其对肿瘤的特异性杀伤。细胞分型分析结果也支持了α－ＣＤ３单抗的持续存在对维持肿瘤特异性Ｔ细胞的抗瘤活性具有很重要的意义，是肿瘤过继免疫疗法中颇有前景的治疗方案。     

酒精性肝硬化病人白细胞介素6及其与白细胞介素2相关性研究

目的：研究酒精性肝硬化病人白细胞介素6及其与白细胞介素2相关性。方法：应用ELISA方法分别检测了酒精性肝硬化病人血清白细胞介素6（IL－6）及外周血单核细胞（PBMC）自然和诱导产生的IL－6和IL－2水平，同时观察了诱导产生的IL－6与免疫球蛋白IgA、IgG及IL－2的相关性。结果：血清中和PBMC自然或 产生的IL－6均明显高于健康对照组，IL－6与血清IgA水平呈正相关，与IL－2呈负相关，结论：酒精性肝硬化患者白细胞介素水平的异常可能与酒精性肝硬化病人免疫球蛋白的过度产生和免疫调节功能紊乱有关。     

Culture of rat retinal ganglion cells

This study aimed to modify the mixed and purified culture of rat retinal ganglion cells(RGCs) in vitro.The retinae of 1-3 day old Sprague-Dawley(SD) rats were separated bluntly into two layers:inner layer and outer layer,under a surgical microscope.Retinal cells isolated from different layers(inner layer,outer layer and whole retinal tissue) by using enzyme dissociation method were cultured in F12/DMEM medium containing 15% FBS.After 3-day culture,the RGCs in the retinal cells obtained from mixed culture of inner,outer,and whole retinal tissue were identified by immunocytochemical staining of Thy-1.1,and the rate of RGCs to retinal cells(RGCs%) was calculated.Two monoclonal antibodies,anti-macrophages/granulocytes(OX-41) against rat macrophage and antibody against rat Thy-1.1(OX-7),were used to purify RGCs by either a conventional or modified two-stepped immunopanning procedure(purification in situ).Purified RGCs were seeded at different cell density and cultured in F12/DMEM medium containing 15% FBS.Immunocytochemical staining for Thy-1.1,MTT,and PI-Hoechst33342 fluorescence imaging were used to identify the purity and the viability of RGCs in purified culture of RGCs.The results showed:(1) Immunocytochemistry of different retinal tissue layers culture revealed that the RGCs% was(19.9±1.2)%,(0.5±0.2)%,and(6.2±1.7)% respectively in the mixed culture of inner,outer,and whole retinal tissue,with differences being significant(P<0.05);(2) fluorescent double staining of Hoechst33342 and PI indicated that with the same RGCs%,RGCs obtained from purification in situ grew well with more neurite outgrowth than those by the conventional two-stepped immunopanning method;(3) the viability of purified RGCs seeded at high density was in-creased and the cells developed complex intercellular networks.The viability of RGCs was declined with the decreasing seeding density,and most cells presented round or oval in shape with thin neurites.It was concluded that:(1) RGCs% in the inner layer retina was higher than that in the outer layer retina;(2) RGCs obtained by in situ purification had more neurite outgrowth and lower mortality than those by conventional two-stepped immunopanning procedure;(3) the viability of purified RGCs could be increased by increasing cell seeding density to some extent.     

IL—6、IL—8与分娩发动的关系

目的　探讨白细胞介素 -6 (IL -6 )、白细胞介素 -8(IL -8)在分娩发动中的作用。　方法　随机选择孕 38～ 4 1周胎膜完整的单胎初产妇 1 5 0例 (临产前 90例 ,临产后 6 0例 )作IL -6、IL -8水平测定 ,进行对比分析。　结果　临产前血清IL -6处于低水平 ,临产后 ,血清IL -6水平升高 ,临床产前组与临床产后潜伏期 ( 30例 )和活跃期组 ( 30例 )差异显著 (F =1 5 87.6 7,P <0 .0 1 ) ;IL -8水平与宫颈Bishop评分呈直线正相关 (r =0 .883,t=1 7.6 4 8,P <0 .0 0 1 ) ,临产后组血清IL -8水平下降 ,临产前组与临产后潜伏期组、活跃期组间的差异显著 (F =2 0 7.6 8,P <0 .0 1 )。　结论　IL -6与子宫收缩相关 ,可能参与了分娩维持 ;IL -8与子宫颈成熟相关 ,可能参与了分娩发动。     

白细胞介素2—乙型肝炎病毒前S抗原融合蛋白的免疫原性研究

目的　为协同人白细胞介素（ＩＬ－２）与乙型肝炎（乙肝）病毒（ＨＢＶ）前Ｓ抗原的生物学功能，探索治疗慢性乙肝的特异性免疫药物。方法用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和基因重组技术构建了ＨＢＶ完整前Ｓ抗原和ＩＬ－２的嵌合基因，并在大肠杆菌中高效表达了ＩＬ－２－前Ｓ抗原融合蛋白。结果该融合蛋白保留了ＩＬ－２和前Ｓ抗原天然分子的生物学活性，能维持白细胞介素２依赖株细胞增殖，其比活性约１０~７Ｕ／ｍｇ蛋白。该融合蛋白能与前Ｓ１和前Ｓ２单克隆抗体结合及与多聚人血清白蛋白（ＰＨＳＡ）结合，说明其具有相应抗原表位及受体。其诱导Ｂａｌｂ／ｃ小鼠产生抗前Ｓ抗体的效价分别是单独的前５抗原、前Ｓ抗原与ＩＬ－２的混合物及ＭＳ－２－前Ｓ融合分子的１３、９和１１倍多。结论ＩＬ－２．前Ｓ抗原融合蛋白能增强前Ｓ抗原的免疫原性，促进机体的免疫应答；另外，ＩＬ－２－前Ｓ抗原融合蛋白在人体内具有双重导向作用，可能成为新一代慢性乙肝和肝癌的免疫治疗剂。     

阿芬太尼预处理对下肢缺血再灌注患者外周血白细胞介素-6、白细胞介素-10及其mRNA表达的影响

目的观察阿芬太尼预处理对下肢缺血再灌注患者外周血白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）及其mRNA表达的影响。方法选取2011年1～7月在青岛市市立医院硬膜外麻醉下使用止血带的单侧下肢择期手术患者24例,随机分为两组：阿芬太尼组（A组）和对照组（C组）,每组12例。上止血带前5 min A组患者缓慢静注阿芬太尼10μg/kg＋生理盐水5 mL;C组患者给予5 mL生理盐水。分别于上止血带前（T1）、松止血带后30 min（T2）、4 h（T3）取静脉血检测细胞因子IL-6和IL-10的mRNA表达及其血浆浓度。结果于T1时A组和C组IL-6[（21.1±3.9）ng/L比（20.8±3.6）ng/L]、IL-10[（30.9±5.3）ng/L比（31.6±4.9）ng/L]浓度、IL-6/IL-10比值[（0.67±0.16）比（0.66±0.15）]及IL-6 mRNA/IL-10 mRNA比值[（1.98±0.47）比（1.94±0.50）]相比T2～3明显升高（P〈0.05）。T2～3时,与C组比较,A组IL-6血浆浓度[（27.9±4.8）、（29.6±5.2）ng/L]、mRNA[（1.05±0.17）、（1.36±0.25）]、IL-6/IL-10[（0.71±0.12）、（0.73±0.15）]及IL-6 mRNA/IL-10 mRNA[（2.03±0.42）、（2.32±0.49）]比值明显低于C组（P〈0.05）。结论术前应用小剂量阿芬太尼预处理用于下肢缺血再灌注患者可有效抑制促炎性细胞因子生成,有益于维持促炎性细胞因子/抗炎性细胞因子相对平衡。     

白细胞介素2,4及肿瘤坏死因子对LAK细胞活性的影响

为了提高淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）对乙肝病毒感染细胞的杀伤活性，研究了白细胞介素２（ＩＬ２），白细胞介素４（ＩＬ４）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）单独及不同组合时，所诱生的ＬＡＫ细胞对ＨｅｐＧ２细胞和２２ｌ５细胞的杀伤活性，并初步研究了ＬＡＫ细胞的活化及杀伤机制。结果表明：三种细胞因子的组合诱导较两种细胞因子组合好，而两两组合又较单独诱导好；另外，ＩＬ２单独诱导时，随其剂量的增加，细胞表面ＩＬ２受体（ＩＬ—２Ｒ）表达量也增加，细胞内溶酶体含量也增加，其对靶细胞的杀伤活性也增加，均呈正相关。提示ＩＬ—２Ｒ和溶酶体可能参与ＬＡＫ细胞的活化和杀伤机制。     

小剂量肝素钠对过敏性紫癜患儿血浆IL-6、IL-8的动态影响

目的 观察过敏性紫癜(HSP)患儿血浆IL-6、IL-8的改变以及应用小剂量肝素钠后的动态变化.方法 HSP患儿56例,其中肝素治疗组(肝素组)30例,基础治疗组(基础组)26例,两组治疗前及治疗后3、7 d、停药后3 d采用酶联免疫法测定血浆IL-6、IL-8水平.结果 HSP组血浆IL-6、IL-8明显高于健康对照组,均有统计学意义(P均＜0.01);HSP基础组治疗前、后血浆IL-6、IL-8无统计学意义(P均＞0.05);HSP肝素组治疗3 d后血浆IL-6、IL-8开始下降,但与基础组比较差异无统计学意义(P＞0.05),治疗7 d及停药后3 d下降明显,与基础组比较差异有统计学意义(P均＜0.01).结论 细胞因子异常可能参与HSP及紫癜性肾炎的发病过程,早期予小剂量肝素钠治疗可以影响患儿血清中IL-6、IL-8的水平,肝素可能能减轻过敏性紫癜患儿的肾损伤.     

和痹方联合西药对类风湿关节炎患者血清和滑膜液中IL-6、IL-8及IL-17水平的影响

目的探讨和痹方联合西药对类风湿关节炎(RA)患者血清和滑膜液中白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)及白介素-17(IL-17)水平的影响。方法选取2018年3月—2019年3月收治的RA患者289例,根据其治疗方式分成对照组141例、治疗组148例。对照组给予常规西药治疗,即甲氨蝶呤联合普威片治疗,治疗组采用和痹方联合西药治疗,两组均治疗3个月。比较两组临床疗效,并分析两组治疗前、治疗3个月后的中医证候积分,包括晨僵、关节疼痛、关节压痛、屈伸不利。分别采集血液、滑膜液测定IL-6、IL-8、IL-17水平,观察两组不良反应情况。结果治疗组总有效率87.16%高于对照组总有效率78.01%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后晨僵、关节疼痛、关节压痛、屈伸不利积分及总积分均低于治疗前,且治疗组显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后血清和滑膜液内IL-6、IL-8、IL-17水平均低于治疗前,且治疗组显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组食欲下降、腹痛、腹泻、白细胞减少发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论与单用西药治疗相比,RA患者采用和痹方与西药联合治疗,能进一步下调血清和滑膜液内IL-6、IL-8、IL-17水平,从而提高临床疗效,改善中医症状,安全性较高。     

系统性尖端赛多孢子菌感染小鼠白细胞介素-4表达的研究

目的了解白细胞介素4(IL4)在系统性尖端赛多孢子菌感染中的作用。方法建立小鼠系统性尖端赛多孢子菌感染模型,包括致死量感染组、亚致死量感染组及免疫抑制组,用酶联免疫吸附试验及逆转录聚合酶链反应分别检测脾内IL4蛋白质及mRNA水平。结果致死量组小鼠脾内IL4表达明显上升(3天P<0.05,7天P<0.01),小鼠肾内大量菌生长,且7天高于3天(P<0.01);亚致死量感染组IL4表达降低(3天P>0.05,7天P<0.01),肾内菌量少,且7天低于3天(P<0.01);与正常对照组相比,免疫抑制组小鼠脾内IL4表达上升(3天P>0.05,7天P<0.01),小鼠肾内大量菌生长,且7天高于3天(P<0.01)。结论IL4在小鼠系统性尖端赛多孢子菌感染中可能起着促进疾病发展的作用。