VEGF和PCNA在慢性低氧性肺动脉及高压大鼠主动脉、肺动脉平滑肌细胞中表达

目的：研究慢性低氧性肺动脉高压（PAH）发生过程中，血管内皮生长因子（VEGF）及细胞核增殖抗原（PCNA）在体循环血管、肺循环血管平滑肌细胞中的表达。方法：利用低压缺氧舱建立大鼠缺氧性肺动脉高压模型。实验分为3组：即正常氧组、缺氧2wk组和缺氧3wk组。用免疫组化染色和图像分析，检测主动脉、肺动脉主干及肺内小动脉平滑肌细胞中VEGF及PCNA的表达量。     

增殖细胞核抗原在膀胱癌中的表达

采用免疫组化中SABC方法对55例膀胱癌PCNA单克隆抗体标记，结果显示，PCNA的表达与膀胱癌分化程度、生物学活性及临床分期相关（P＜0．05），认为PCNA的表达能客观反映膀胱肿瘤生物学活性，可作为膀胱肿瘤预后的参数之一．     

增殖细胞核抗原在膀胱癌中的表达

采用免疫组化中ＳＡＢＣ方法对５５例膀胱癌ＰＣＮＩＡ单克隆抗体标记，结果显示，ＰＣＮＡ的表达与膀胱癌分化程度、生物学活性及临床分期相关（Ｐ〈０．０５），认为ＰＣＮＡ的表达能客观反映膀胱肿瘤生物学活性，可作为膀胱肿瘤预后的参数之一。     

胰岛细胞肿瘤增殖细胞核抗原的表达

目的：探讨胰岛细胞肿瘤增殖细胞核抗原表达与形态学特征的关系。方法：回顾性复习１２例胰岛细胞瘤的病理资料,并以Ｓ－Ｐ法作了ＰＣＮＡ免疫组化标记。结果：条索状,小梁状排列的大细胞型胰岛细胞瘤ＰＣＮＡ呈强阳性,而胰岛状,玫瑰花样排列的小细胞者ＰＣＮＡ表达弱,两者差异有显著性。     

增殖细胞核抗原在鼻息肉组织中的表达

目的 :研究增殖细胞核抗原 (proliferatingcellneuclearantigen ,PCNA)在鼻息肉组织中的表达 ,探讨鼻息肉中细胞增殖的病理解剖学基础 ,以及细胞增殖与鼻息肉发病之间的关系 ,为改进鼻息肉的诊断与治疗提供理论依据。方法 :用免疫组化法测定 35例鼻息肉组织和 17例正常下鼻甲组织中PCNA的表达。对PCNA阳性细胞的类型、分布特点进行分析。以期发现鼻息肉中细胞增殖活跃与细胞类型及分布之间的关系。结果 :PCNA在鼻息肉组织中的表达明显高于正常对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。PCNA阳性细胞主要集中于鼻息肉的上皮细胞和囊性扩张的腺体细胞中。结论 :鼻息肉中细胞增殖活性较正常明显提高 ,尤其是上皮细胞、腺体细胞和组织中浸润的炎性细胞。细胞增殖活跃在鼻息肉的形成和复发中起重要作用     

增殖细胞核抗原在前列腺癌中的表达和意义

为了了解增殖细胞核抗原与前列腺癌的病理分级，临床分期及预后的关系，我们采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法对４３例前列腺癌组织中ＰＣＮＡ进行检测，并与临床随访结果进行对比。结果显示：前列腺癌ＰＣＮＡ表达与分级、分期及预后均相关（Ｐ〈０．０５），ＰＣＮＡ高表达组（３．４级）术后生存率明显低于低表达组（１，２级）。结果表明：ＰＣＮＡ是判断细胞增殖程度的重要指标，对肿瘤演变，术后随访及治疗有一定的指导意义，对估计前     

增殖细胞核抗原在脑膜瘤中的表达及其意义

细胞周期调控失常和异常增殖可能导致肿瘤的发生和发展 ,肿瘤细胞增殖水平可能反映了肿瘤的恶性程度。增殖细胞核抗原 (ＰＣＮＡ)是与细胞周期相关的抗原之一 ,常作为肿瘤细胞增殖程度的指数 ［１］。脑膜瘤多为良性 ,但亦有少数为恶性。本文用免疫组化方法测定ＰＣＮＡ在脑膜瘤中的表达 ,以探讨其临床意义。１．临床资料脑膜瘤患者７７例 ,其中男性２６例 ,女性５１例 ;年龄２２～６７岁 ,平均４７．４岁。良性脑膜瘤６２例 ,恶性脑膜瘤１５例 ,取其病理标本作ＰＣＮＡ免疫组化检测。２．方法免疫组化染色采用链菌素亲生物素—过氧化酶连接…     

乳腺癌中增殖细胞核抗原的表达及其预后意义

对各种癌细胞增殖状态的研究近年比较活跃。许多细胞增殖性免疫组织化学标志如增殖细胞核抗原（PCNA）、表皮生长因子受体（EGF－R）、DNA多聚酶、Ki－67等，已经用于肺癌、大肠癌、膀眈癌及胶质瘤、喉癌、乳腺癌等肿瘤的研究，但结果与评价尚不一致［1－4］。作者用免疫组织化学标记观察32例女性乳腺癌中PCNA的表达情况，并探讨其预后意义。材料和方法收集病理档案中随访资料齐全的女性乳腺癌32例，回顾性复习档案资料及病理切片，并参照最近美国颁布的乳腺标本检查记录实用方案［5］，重新分类分级。所有病理标本都用10％福尔马林…     

大肠癌不同部位粘膜细胞中增殖细胞核抗原表达的研究

探讨增殖细胞核抗原在大肠癌及癌周不同部位粘膜细胞中的表达及意义。方法采取正常大肠１０例,大肠癌远旁、近旁和癌粘膜各３０例。用免疫组化染色（ＳＰ法）检测增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ,ＰＣＮＡ）的表达。结果ＰＣＮＡ染色阳性物质主要定位于细胞核。ＰＣＮＡ阳性细胞在大肠癌组织中的分布呈不同程度的异质性。正常大肠和大肠癌粘膜细胞中ＰＣＮＡ阳性细胞数分别为２．     

钙敏感受体在缺氧肺动脉平滑肌细胞中的表达及意义

目的观察肺动脉平滑肌细胞缺氧时钙敏感受体（calcium sensing receptor,CaSR）的表达,探讨其与缺氧性肺动脉平滑肌细胞增殖的关系。方法Ⅱ型胶原酶消化法提取、培养大鼠肺动脉平滑肌细胞。应用western blot技术分析CaSR、cyclinD1蛋白在肺动脉平滑肌的表达;采用激光共聚焦扫描显微镜观察不同干预情况下细胞内钙离子浓度（[Ca2＋]i）的变化,应用BrdU掺入方法分析不同处理因素对细胞DNA合成的影响。结果 CaSR蛋白在肺动脉平滑肌细胞有表达。缺氧能够增加CaSR、cyclinD1的表达、BrdU掺入率及[Ca2＋]i（与对照组比较,P〈0.05）。GdCl3（CaSR激动剂）能够增强缺氧的上述作用,NPS2390（CaSR抑制剂）则能够减弱缺氧的作用。结论缺氧诱导的CaSR表达增加参与了缺氧性肺动脉平滑肌细胞增殖。     

组织块贴壁法行SD大鼠肺内动脉段平滑肌细胞的原代培养及其鉴定

目的研究采用组织块贴壁法进行SD大鼠肺内动脉段平滑肌细胞（PASMCs）原代培养的方法特点及其生物学特性。方法将SD大鼠消毒后剖开胸腹腔,无菌下取出心肺组织,然后分离出肺血管段,用组织块贴壁法培养,倒置相差显微镜观察细胞形态、普通免疫组织化学法（SP法）和免疫荧光法进行细胞鉴定。结果组织块贴壁法培养的SD大鼠PASMCs为典型的＂峰-谷＂样生长状态,细胞的胞核较大,免疫组织化学法和免疫荧光法检测α-actin均为强阳性表达,免疫荧光法检测传至三代以后的细胞纯度可达98%以上,传代细胞生长未见明显异常改变。结论在不使用显微技术情况下,用组织贴块法成功培养大鼠PASMCs,得到稳定生长、纯度高的PASMCs,且培养与纯化可以同时进行,可获得稳定传代的细胞。     

一氧化碳对缺氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉内皮素-1表达的影响

目的探讨一氧化碳对缺氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉中内皮素-1(ET-1)表达的影响。方法将大鼠随机分为3组:常氧组(n=15)、低氧组(n=15)和低氧 血红素加氧酶组(低氧 HO组)(n=15)。以光学显微镜观测3组大鼠肺中型动脉及小型动脉的相对中膜厚度(RMT)。应用ET-1的单克隆抗体经免疫组织化学技术对3组大鼠肺动脉ET-1进行定位及半定量分析。结果低氧组大鼠中型肺动脉及小型肺动脉RMT均高于常氧组和低氧 HO组(P<0.01)。3组大鼠各级肺动脉内皮细胞中均有ET-1的表达,低氧组高于常氧组和低氧 HO组(P<0.01)。中型肺动脉内皮细胞中ET-1的表达与相应中型肺动脉RMT之间呈正相关(r为0.8536,P<0.01);小型肺动脉内皮细胞中ET-1的表达与相应的小型肺动脉RMT之间呈正相关(r为0.8973,P<0.01)。结论一氧化碳对缺氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉中ET-1表达有抑制作用。     

P22phox通过调节KLF4的表达对缺氧诱导的肺动脉平滑肌细胞的作用

目的 探讨P22phox对缺氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)的作用及其可能的作用机制.方法 体外常氧或者缺氧培养HPASMCs,将HPASMCs随机分为空白对照组、si-NC+oe-NC组、si-P22phox+oe-NC组和si-P22phox+oe-KLF4组,按照分组进行细胞转染,随后进行缺氧培养.C...     

L-精氨酸调节大鼠低氧性肺血管结构重建与肺动脉平滑肌细胞凋亡

目的:探讨L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)对低氧性肺血管结构重建大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响及其机制.方法:将17只Wistar大鼠随机分为对照组(n=7)、低氧组(n=5)和低氧+L-Arg组(n=5).对大鼠肺血管进行显微形态学观测.通过末端转移酶介导的dUTP切口末端标记法(TUNEL)检测肺动脉平滑肌细胞凋亡,并以免疫组织化学方法研究肺动脉平滑肌细胞Fas表达.结果:低氧2周后出现大鼠肺血管结构重建.同时,肺中、小型动脉凋亡平滑肌细胞百分数均明显低于对照组(P均＜0.05),平滑肌细胞Fas表达明显降低.然而,L-Arg缓解了低氧性肺血管结构重建的形成.低氧+L-Arg组大鼠肺中、小型动脉凋亡平滑肌细胞百分数均明显高于低氧组(P均＜0.05).L-Arg使低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞Fas表达明显增强.结论:L-Arg通过使肺动脉平滑肌细胞Fas表达上调,促进肺动脉平滑肌细胞的凋亡,从而对低氧性肺血管结构重建有重要的调节作用.     

慢性低氧钙激活氯通道在大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

目的探讨慢性低氧时钙激活氯通道（ClCa）在大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖中的作用。方法将PASMCs分别置于常氧及慢性低氧下,采用形态学、流式细胞术、免疫细胞化学法,观察ClCa阻滞剂尼氟灭酸（NFA）和indaryloxyacetic acid（IAA-94）对PASMCs增殖的影响。结果慢性低氧：①PASMCs呈合成表型,而常氧为收缩表型,NFA和IAA-94干预后呈合成表型的PASMCs向收缩型转变;②S＋G2M期细胞所占比例增高,NFA和IAA-94干预后减低,且G0G1期细胞所占比例增加（P〈0.01）;③PCNA表达阳性率增高,NFA和IAA-94干预后降低（P〈0.01）;④c-fos和c-jun蛋白阳性染色A增高,NFA和IAA-94干预后降低（P〈0.01）。结论慢性低氧引起细胞表型改变,可促进细胞增殖,而抑制ClCa的活性可抑制细胞的增殖,提示ClCa参与了低氧PASMCs的增殖。     

不同低氧时间诱导的肺动脉平滑肌细胞m iR-214表达的动态变化

目的：观察不同低氧时间诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）微小RNAs（miRNA）‐214表达的变化。方法将原代培养的大鼠PASMCs分别于低氧下培养0、6、12、24和48 h ,采用实时荧光定量PCR（RT‐PCR）检测各组细胞miR‐214的表达情况。结果大鼠PASMCs的miR‐214表达随低氧时间的延长呈持续升高趋势,除低氧6 h组与低氧0 h组相比较,miR‐214的表达差异无统计学意义（P＞0．05）外,其余各组之间miR‐214的表达差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论低氧诱导后,miR‐214在PASMCs中的表达上调,且随着低氧时间的延长,miR‐214的表达有逐渐增加的趋势。     

低氧性肺动脉高压大鼠肺内凝血酶敏感蛋白-1的表达

目的了解低氧肺动脉高压时肺内凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)与肺血管重建的关系。方法将30只雄性Wistar大鼠分为正常对照组和低氧肺动脉高压组,肺动脉高压组以常压低氧建立大鼠肺动脉高压模型,以微导管法测定各组大鼠肺动脉压,采用免疫组化法检测各组大鼠肺内TSP-1和TGF-β1的表达,对肺组织切片进行图像分析。结果低氧3周后,低氧肺动脉高压组大鼠形成明显的肺动脉高压,管壁增厚和管腔狭窄,大鼠肺动脉压(2.86±0.39)kPa,右心室肥厚指数〔右心室(RV)/左心室+室间隔(LV+S)〕为(43.53±3.38)%,管壁厚度占外径的百分比(WT%)为(35.24±11.2)%,管壁面积占血管总面积的百分比(WA%)为(55.09±12.38)%,分别与正常对照组〔(1.35±0.28)kPa、(23.68±3.48)%、(23.63±9.74)%和(41.62±12.83)%〕相比升高(P<0.01);肺小动脉TSP-1免疫阳性染色灰度值在低氧肺动脉高压组大鼠为1.32±0.04,与正常对照组(0.96±0.03)相比增强(P<0.01),低氧肺动脉高压组大鼠TGF-β1免疫阳性染色灰度值为1.38±0.05,与正常对照组(1.04±0.04)相比增强(P<0.01)。结论低氧所致TSP-1的合成增多在低氧性肺血管重建和肺动脉高压的发病过程中起一定的作用,其作用可能与活化TGF-β1有关。     

二十二碳六烯酸对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响

目的:观察二十二碳六烯酸(DHA)在动物整体水平的抗大鼠肺动脉高压作用及其对肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为常氧组、低氧组、低氧DHA处理组,每组7只。大鼠缺氧肺动脉高压模型采用慢性间歇性低氧方法建立,通过右心导管法测定大鼠平均肺动脉压,精确称左右心室质量计算右心室指数,测定肺动脉平滑肌细胞凋亡率和Caspase3、Caspase9活性。结果:与常氧组比较,低氧组大鼠平均肺动脉压和右心室指数均明显升高(PPPP结论:DHA具有抗大鼠肺动脉高压作用,其机制与促进肺动脉平滑肌细胞凋亡有关。