TLR4-/- 抑制小鼠氧诱导视网膜新生血管生成的作用机制

目的通过建立氧诱导视网膜血管病变（OIR）模型,探讨Toll样受体4(TLR4)在视网膜新生血管中的作用及其机制。方法使用7日龄新生TLR4基因敲除（TLR4-/-）C57BL／6J小鼠和7日龄新生C57BL／6J小鼠建立OIR模型。分别于小鼠第12天（P12）、17天（P17）和21天（P21）时通过小鼠视网膜荧光灌注铺片观察新生血管面积,评估新生血管情况。通过免疫荧光染色,观察TLR4在小鼠视网膜中的表达情况。通过Real-Time PCR检测两组OIR小鼠P12和P17视网膜组织中核因子-κB(NF-κB)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和促炎因子白细胞介素-6(IL-6)的mRNA表达水平。结果在OIR模型中,通过视网膜荧光灌注铺片发现P12两组小鼠视网膜出现无血管区,P17均出现无血管区和新生血管簇,而且新生血管面积达到最高峰。P12、P17和P21时,TLR4-/- OIR小鼠中的视网膜新生血管面积均明显比正常OIR小鼠减少,差异有统计学意义（P<0.05)。通过免疫荧光检测发现TLR4在小鼠视网膜上广泛表达,与未建立OIR模型的正常小鼠相比,在P17时正常OIR小鼠视网膜的TLR4表达明显升高。对比正常OIR小鼠,TLR4-/- OIR小鼠视网膜组织的NF-κB、VEGF和促炎因子IL-6的表达水平明显降低,差异均有统计学意义（P<0.05)。结论TLR4在视网膜新生血管形成过程中起到重要作用,TLR4基因缺失通过抑制NF-κB信号通路,减少血管生成因子和炎性因子的释放,抑制OIR小鼠视网膜新生血管的生成。     

炎症对SRA/CD36双基因敲除小鼠肝LDL受体表达的影响

目的 探讨炎症对清道夫受体A(scavenger receptor A,SRA)和CD36双基因敲除(SRA-/-/CD36-/-)小鼠肝脏LDL受体表达的影响及其潜在机制.方法 将1～3月龄,体质量为18～23 g的SRA-/-/CD36-/-雄性小鼠随机分为对照组(n=7),炎症组(n=6),2组均喂以高脂饮食,炎症组小鼠采取皮下注射酪蛋白方法诱导产生慢性炎症模型,14周后应用实时荧光定量RT-PCR技术和免疫组化方法检测肝脏LDL受体基因及调控其转录的SREBP2、SCAP基因表达水平,并观察肝脏形态学及血生化指标的变化.结果 与正常对照相比,炎症状态时肝脏LDL受体、SREBP2、SCAP mRNA水平显著高于对照组(P<0.05),蛋白表达的水平也较对照组明显升高;肝细胞内脂质沉积加重,炎性细胞浸润;血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平均明显降低(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇、甘油二三酯降低不明显.结论 炎症通过促进肝细胞内SREBP2、SCAP的表达,进而增强细胞膜表面LDL受体的表达,最终导致肝细胞内胆固醇沉积.     

应用ERKO小鼠观察雌激素对痛觉的影响及ERs的作用特点

目的:探讨雌激素通过ERs对痛觉的影响?方法:WT?αERKO和βERKO小鼠随机分为去卵巢加17β-E2组(OVX+17β-E2)和去卵巢组(OVX+Oil),甩尾热痛仪和热痛刺激仪测痛,并应用福尔马林致痛模型评价雌激素对痛觉的影响?结果:将WT小鼠卵巢切除后给予外源性雌激素,发现17β-雌二醇(17β-E2)对甩尾痛阈和缩足痛阈没有影响,敲除ERα或ERβ后甩尾痛阈和缩足痛阈也没有变化;17β-E2能够降低福尔马林炎症性痛实验的Ⅱ相反应,但对Ⅰ相反应无影响?进一步应用ERKO小鼠模型观察ERα和ERβ的作用特点发现,较WT小鼠,βERKO雌性小鼠在福尔马林炎症性痛模型Ⅱ相疼痛反应行为的时间减少,而在Ⅰ相反应中没有差别;αERKO小鼠福尔马林炎症性痛实验与WT比较没有明显差异?结论:雌激素可以影响慢性炎性痛,可能与影响急性痛进程无关?ERβ亚型在雌激素调节痛觉传递和调制过程中发挥着重要作用?     

用Evans蓝活体灌注血管造影技术观察青蒿琥酯对糖尿病大鼠视网膜血管病变影响的结果分析

目的：利用 Evans 蓝活体灌注血管造影法检测青蒿琥酯对糖尿病大鼠视网膜血管病变是否具有治疗作用。方法将18只 SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组及糖尿病治疗组,利用链脲菌素诱导构建1型糖尿病大鼠模型3个月后,为治疗组大鼠注射青蒿琥酯10天,利用 Evans 蓝活体灌注血管造影对其进行视网膜血管形态学的观察。结果与糖尿病组大鼠相比,治疗组大鼠的视网膜血管病变有所好转。结论青蒿琥酯对糖尿病视网膜血管病变有一定的治疗作用。     

小鼠血管损伤后巨噬细胞与平滑肌细胞的相互作用

目的 研究血管损伤后病变形成过程中的巨噬细胞与平滑肌细胞的相互作用.方法 C57BL/6(6～8周龄)小鼠24只,右侧股动脉植入透明塑料微导管,制作小鼠血管损伤模型,术后给予特异性抗体AFS98及APB5,分别阻断巨噬细胞和平滑肌细胞增殖的信息传导通路.给药2周后采集股动脉组织,用免疫组织化学的方法对血管病变进行分析.结果 小鼠股动脉血管损伤2周后,病变部位聚集了大量的巨噬细胞、平滑肌细胞.给予阻断巨噬细胞增殖的信息传导通路的特异性抗体AFS98后,病变部位的巨噬细胞数量显著减少,平滑肌细胞数量反而增多.相反,给予抑制平滑肌细胞增殖的抗体APB5后,病变局部平滑肌细胞数量减少,而巨噬细胞数量急剧增加.结论 小鼠股动脉血管损伤后,构成病变的细胞主要为巨噬细胞与平滑肌细胞.这两种细胞在分化成终末成熟细胞的过程中,存在着相互拮抗的作用.     

小鼠血管损伤后再狭窄模型的造模方法比较研究

目的 应用显微外科手术，建立3种小鼠血管损伤后再狭窄模型，分别比较造模方法和血管内膜病变形成的特征。方法 16．24周的C57BL／6小鼠，分别应用塑料微导管损伤、金属丝损伤及金属直弹簧丝损伤3种方法。对小鼠的股动脉、颈动脉进行造模，研究3种方法的关键技术要点，并分别于造模后1、2、4周后观察受损动脉内膜病变形成特点。结果 3种小鼠血管损伤后再狭窄模型的造模方法中，以微导管股动脉损伤模型最易操作，金属直弹簧丝股动脉损伤模型次之，金属丝颈动脉损伤模型难度较大。C57BL／6小鼠股动脉塑料微导管损伤后内膜增生病变不明显，但apoE缺损小鼠却见非常显著的内膜肥厚病变。金属直弹簧丝股动脉损伤模型稳定性较高，而金属丝颈动脉损伤模型内膜病变的个体差异较大。结论 目前最常用的3种小鼠血管损伤后再狭窄模型在关键技术及病变形成上具有一定的共性，但病变形成的病理过程和模型的稳定性不尽一致。     

大鼠动脉内膜损伤后血管重塑相关因子的动态变化

目的:研究大鼠血管内膜损伤后血管重塑的相关因子,包括基质金属蛋白酶(MMP-1,MMP-2),金属蛋白酶组织抑制物(TIMP-2),转化生长因子-1β(TGF-1β)的变化规律。方法:建立大鼠胸主动脉球囊拉伤模型,分为对照组,术后3d、5d、8d、14d、21d和35d组。采用免疫组化方法检测各因子的表达。结果:动脉内膜损伤后3d各因子均明显表达增加,随后下降,TGF-β1至术后8d,MMP-1至术后14d,MMP-2至术后21d降低至与对照组无区别,TIMP-2至术后21d仍持续高于对照。结论:大鼠血管损伤后修复过程中各因子作用时间窗不完全相同,动脉球囊拉伤术后3周内可能是药物干预的最佳时机。     

眼底荧光血管造影术后的临床观察与处理

荧光血管造影术目前已成为诊断眼底疾病,研究某些疾病的原因、发病机制、治疗手段不可缺少的重要检查项目之一.然而,在该血管造影中可能因注射造影剂而出现一些不良反应,甚至危及生命.     

可可粉抑制雌性ApoE-/-小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块的形成

目的研究可可粉对雌性ApoE-/-小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块形成的影响。方法以雌性ApoE-/-小鼠为研究对象,按照随机对照表将小鼠（45只）随机分为3组:对照组（高脂高胆固醇饮食）、低剂量组（高脂高胆固醇+0.2%可可粉饲喂）、高剂量组（高脂高胆固醇+2%可可粉饲喂）,每组各15只。相应饮食饲喂小鼠12周,观察各组小鼠体重、肝脏重量、肝脏重量/体重;检测小鼠血浆血脂指标（TG、TC、LDL-C和HDL-C）的水平;HE和油红O染色分析小鼠主动脉的病理变化及斑块面积。结果 3组小鼠的体重、肝脏重量、肝脏重量/体重、TG、TC和主动脉根部斑块面积差异均无统计学意义（P>0.05）;与对照组比较,低、高剂量组的HDL-C水平显著升高,LDL-C水平显著降低,主动脉斑块面积显著减少。结论可可粉能够有效抑制雌性ApoE-/-小鼠主动脉动脉硬化斑块形成,这可能与其改善机体血脂水平有关。     

导管致小鼠颈总动脉血管损伤病变的实验研究

目的应用小鼠颈总动脉血管内膜损伤模型,观察并在体显示导管所致血管损伤病变情况。方法通过在小鼠左颈总动脉中插入并旋转导管导线造成血管损伤。于伤后1、3、4周行血管组织切片,HE染色对比观察损伤后血管内膜及中层等厚度及面积变化。并行免疫组化染色观察血管损伤后αVβ3分子表达及Ki67阳性细胞数的变化。最后在不同血管损伤程度动物,注射可与αVβ3分子特异性结合的^[1]In-RP478,2．5h后分离出损伤及对照血管,检测其放射自显影强度。结果颈总动脉损伤后,血管内膜增生,出现大量新生内膜。新生内膜中有大量αVβ3表达。血管中层明显变厚。在血管中层及新生内膜中有大量Ki67阳性细胞。放射自显影发现,损伤侧显影强度明显高于对照侧,对比系数与损伤程度成正比。结论以αVβ3为靶分子的同位素显影可能为检测血管病变提供帮助。     

眼底荧光血管造影诊断糖尿病性视网膜病变的应用分析

目的 分析糖尿病性视网膜病变(DR)诊断中应用眼底荧光血管造影的应用效果.方法 选取102例(204眼)检眼镜下未确诊DR患者作为研究对象,对所有患者给予眼底荧光血管造影检查,检查后,分析检查结果.结果 眼底荧光血管造影检查证实46例(92眼)为早期DR,病变主要包括微血管瘤、毛细血管荧光渗漏、毛细血管无灌注区、黄斑水肿以及毛细血管扩张.结论 对DR患者采用眼底荧光血管造影检查诊断,能提高诊断率,并及早发现早期DR.     

血管内放射抑制猪髂动脉球囊损伤后狭窄形成的动态观察及机制探讨

目的：评价血管内放射抑制猪髂动脉球囊损伤后狭窄形成的可行性、有效性及其作用机制。方法：小型家猪１３头,分为对照组7头及实验组6头 。对照组左侧髂动脉先行造影及血管内超声检查,随后行球囊扩张成形术,最后置入置源管。实验组在上述处理基础上,通过置源管送入^192Ir高剂量后装源取20Gy对受损髂动脉行放射治疗。术后第3天、第10天及第28天各处死2头,取损伤的髂动脉分别行苏木精－伊红及Masson染色,计算机图像分析系统分析形态学及组织学变化。结果：对经球囊损伤后的猪髂动脉进行血管内放射在技术上是可行的,未见并发症发生。实验组在不同时间点与对照组相比较均可见新生内膜面积及厚度减少、血管腔面积及外弹力膜包绕面积增加现象;新生内膜中胶原含量有增生受抑现象。结论：在球囊扩张成形术后即刻应用血管内^192Ir 20Gy放射治疗,第３天起明显抑制新生内膜形成,第10天时新生内膜抑制达到高峰,血管发生有意义的正性重塑,到28天时血管正性重塑更加明显,从而达到有效抑制动脉损伤后狭窄形成的效果。     

应用活体冷冻技术动态观察各种血流动力学改变时血清白蛋白在小鼠近端肾小管的分布变化

目的 应用活体冷冻技术结合免疫组织化学的方法形象化表现各种血流动力学条件下小鼠血清白蛋白经肾小球毛细血管袢滤过后,在近曲小管再吸收的病理生理过程.方法 分别在正常血流、急性高血压和心脏骤停等血流动力学条件下,对模型小鼠的左肾进行活体冷冻及冷冻置换.连续的石蜡切片后,分别进行苏木精一伊红染色和抗小鼠白蛋白抗体免疫组织化学染色.结果 正常血压和心脏骤停情况下,血清白蛋白在血管内清晰定位,少量出现在近端小管顶端的细胞质部分,但在急性高血压情况下,血清白蛋白明显地免疫定位于所有近端小管.结论 活体冷冻技术结合冷冻置换方法可以原位捕获瞬间被活体功能状态的近端肾小管上皮细胞再吸收的血清白蛋白,可视化活体组织细胞的功能形态学特征.     

眼底荧光血管造影技术在不同眼科疾病诊断的应用

目的:探讨分析眼底荧光血管造影技术在不同眼科疾病诊断中的应用价值。方法:回顾性分析采用眼底荧光血管造影技术诊断的208例眼底有病变或怀疑有病变患者的临床资料。结果:不同年龄阶段眼科疾病的眼底荧光血管造影确诊率基本相同,共有六种眼科疾病:视网膜血管病变、黄斑病变、色素上皮病变、视神经乳头病变、脉络膜病变和外伤;不良反应发生率为4.33%。结论:眼底荧光血管造影技术是一种可用于不同年龄及不同眼科疾病诊断的安全有效的检查方法。     

电脑视野及眼底荧光血管造影在前部缺血性视神经病变的临床应用

目的分析电脑视野检查和眼底荧光血管造影对诊断前部缺血性视神经病变（AION）的应用。方法对诊断为前部缺血性视神经病变的电脑视野图像及眼底荧光血管造影（FFA）的结果进行分析。结果 26例（29眼）在电脑视野中缺损的范围和部位与眼底荧光血管造影结果中视盘的缺血部分具有高度的对应关系。结论电脑视野图像和眼底荧光血管造影检查结果在对前部缺血性视经病变的临床应用分析中具有很高的诊断价值。     

氦氖激光血管内照射治疗颅脑损伤后综合征的疗效观察

对158 例颅脑损伤后综合征患者在临床综合治疗的基础上分别采用低能量氦氖激光血管内照射(ILIB组) 和直流电碘离子导入治疗( 对照组) ,结果显示两组疗效有显著性差异,故认为ILIB综合治疗颅脑损伤后综合征是一种安全、有效的辅助疗法,值得推广     

靶向干预Sestrin 1对动脉粥样硬化小鼠斑块内巨噬细胞极化和血管内皮损伤的影响

目的 分析Sestrin 1对动脉粥样硬化小鼠斑块内巨噬细胞极化的调控作用及对血管内皮炎性损伤的影响.方法 将40只ApoE-/-小鼠随机分为对照组、模型组、si-NC组和si-Sestrin 1组,对照组小鼠正常饲养,其余小鼠均采用高脂饮食法建立动脉粥样硬化模型.建模成功2周后,si-NC组和si-Sestrin 1...     

23例少年型黄斑营养不良及黄色斑点状眼底病变的眼底荧光血管造影观察

本文报告23例(46眼)Stargardt病及黄色斑点状眼底病变的眼底荧光血管造影所见。单纯黄斑变性16例,中心凹周围有斑点的黄斑变性5例,黄斑变性伴后极部弥散性黄色斑点1例。无黄斑变性的后极部弥散性黄色斑点1例,黄斑变性区表现为密集点状透见荧光,夹杂点状遮蔽荧光。大多数斑点呈透见荧光,少数呈遮蔽荧光.4例显示脉络膜湮没征象。所有病例均未见荧光素渗漏。本病具有典型的荧光征象,眼底荧光血管造影检查对于早期诊断具有十分重要的意义。