百草枯一次灌胃构建家兔肺间质纤维化模型

目的： 构建百草枯致肺间质纤维化动物模型。方法： 25只家兔随机分为实验组（20只）和对照组（5只）。实验组家兔以40 mg/kg体质量百草枯一次性灌胃,并于染毒后第3、7、14、28天处死,对照组生理盐水灌胃并于第28天处死。观察两组家兔的一般情况、肺组织大体结构和肺组织病理学改变。结果： 实验组家兔在染毒后1 h即出现中毒性改变,肺组织在第28天出现明显的纤维化改变。结论：百草枯灌胃法能可靠地构建出肺纤维化动物模型。     

百草枯致小鼠肺间质纤维化过程中Smad3蛋白的表达

目的使用免疫组织化学的方法观察百草枯(paraquat,PQ)致小鼠肺间质纤维化过程中Smad3蛋白的表达。方法58只雄性C57BL/6J小鼠随机分组。实验组48只,通过腹腔注射10 mg/kg PQ建立小鼠肺间质纤维化模型,对照组10只,腹腔注射等量生理盐水。小鼠在实验组染毒后第2、5、7、14天和对照组第7天时分别被安乐死,留取肺组织标本。标本进一步进行HE染色和Smad3蛋白的免疫组化研究。结果光镜观察小鼠染毒后第2~5天肺组织出现水肿、出血、炎症细胞浸润等改变,第7天有少量胶原沉积及斑片状的纤维化表现,第14天表现更加明显。免疫组化观察染毒小鼠肺组织Smad3蛋白表达,第2~7天肺中巨噬细胞和部分II型肺泡上皮细胞的细胞核中见到阳性表达。Smad3阳性表达和巨噬细胞数量呈正相关。第14天,在成纤维细胞灶增生的成纤维细胞核中,也可见到Smad3弱阳性表达。结论在PQ致肺间质纤维化过程中,Smad3蛋白异常表达并对肺纤维化的发生发展具有重要的作用。     

特发性肺间质纤维化动物模型制作探讨

<正>特发性肺间质纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是原因不明并以普通型间质性肺炎为特征性病理改变的一种慢性炎症性间质性肺疾病~([1])。美国大约每年新增病例5万人,有4万人死于该病,其5年生存率低于50%,10年生存率约30%~([2])。中华医学会呼吸病学分会于1990~2000年对IPF调查发现,10年间,IPF病例数有明显增加趋势。钟南山认为     

急性百草枯中毒大鼠肺间质成纤维细胞中MMP-9表达的研究

目的观察急性百草枯（PQ）中毒大鼠肺间质成纤维细胞中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达变化，探讨其在PQ中毒致肺纤维化中的意义。方法SD大鼠50只，随机分为染毒组和对照组，染毒组用PQ 50mg／kg灌胃染毒，对照组代以等剂量生理盐水灌胃，灌胃后1、3、7、14和28d分离和提取肺间质成纤维细胞，应用免疫细胞化学和逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）观察MMP-9蛋白及其mRNA的动态变化。结果PQ灌胃后1d，肺间质成纤维细胞MMP-9蛋白及其mRNA表达即增高，7d达到峰值，以后逐渐下降。MMP-9蛋白及其mRNA在PQ灌胃后1、3、7d与对照组比较升高（P〈0．05）。MMP-9蛋白在28d、MMP-9 mRNA在14d恢复到对照组水平。结论PQ灌胃后，肺间质成纤维细胞MMP-9的表达上调，损伤肺泡基底膜，启动肺纤维的发生。     

急性百草枯中毒大鼠肺间质成纤维细胞中MMP-9表达的研究

目的观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺间质成纤维细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达变化,探讨其在PQ中毒致肺纤维化中的意义。方法SD大鼠50只,随机分为染毒组和对照组,染毒组用PQ 50 mg/kg灌胃染毒,对照组代以等剂量生理盐水灌胃,灌胃后1、3、7、14和28 d分离和提取肺间质成纤维细胞,应用免疫细胞化学和逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)观察MMP-9蛋白及其mRNA的动态变化。结果PQ灌胃后1 d,肺间质成纤维细胞MMP-9蛋白及其mRNA表达即增高,7 d达到峰值,以后逐渐下降。MMP-9蛋白及其mRNA在PQ灌胃后1、3、7 d与对照组比较升高(P<0.05),MMP-9蛋白在28 d、MMP-9 mRNA在14 d恢复到对照组水平。结论PQ灌胃后,肺间质成纤维细胞MMP-9的表达上调,损伤肺泡基底膜,启动肺纤维的发生。     

小剂量盐酸胺碘酮致肺间质纤维化1例

1 临床资料。患者男，60岁，因阵发性心悸3a，气短、干咳2个月，于2003年8月4日入院。既往吸烟史30余年，10支，d，至今未戒。否认慢性肺部疾病，结缔组织疾病及遗传性疾病史。患者于2000年6月出现阵发性心悸、活动后加重，无胸闷、憋气、胸痛。平静和动态心电图检查示：频发性室性期外收缩，呈Ⅱ、Ⅲ联律，胸片：心肺无异常。曾接受美西律、盐酸普罗帕酮、阿替洛尔等抗心律失常药物长期治疗，     

急性肺间质纤维化一例

患者,女性,55岁,工人.因皮肤红斑5个月,呼吸困难1个月,加重伴咳嗽2周入院.5个月前出现颜面部及双手背皮肤红斑样改变,1个月前出现活动后气紧,并逐渐加重,2周前出现发热,以午后为主(体温38℃左右),咳嗽,咯白色泡沫痰.院外曾用较大剂量糖皮质激素治疗10 d症状无缓解.入院体检:体温37.3℃,脉搏113次/min,呼吸35次/min.     

虾青素对百草枯致大鼠肺纤维化的干预作用及机制

目的：观察虾青素（astaxanthin,AX）对百草枯（paraquat,PQ）诱导大鼠肺纤维化的影响,并进一步探讨肺纤维化可能的发病机制。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、PQ模型组及虾青素干预组。模型组及干预组大鼠腹腔注射百草枯造模后,干预组第2天起给予虾青素灌胃,对照组及模型组给予相应溶剂。分别于给药后第7、14、28 天处死大鼠,测定大鼠血清中羟脯氨酸（hydroxyproline,HYP）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）1、MMP2、MMP9和基质金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of matrix metalloproteinase1, TIMP1）的含量,取固定部位肺组织切片行HE、Masson染色进行病理学观察,免疫组化法测定转化生长因子-β1（TGF-β1）的含量,对病理图像进行形态学测量分析。结果：①HE染色及Masson染色结果显示：干预组纤维化炎症程度明显低于模型组;②模型组大鼠中毒后羟脯氨酸较正常组增高（P<0.05）,虾青素干预后,大鼠鼠肺血清羟脯氨酸水平较模型组降低（P<0.05）;③PQ模型组在肺纤维化区域TGF-β1弱阳性表达,虾青素干预后,TGF-β1表达含量下降,第28天最为明显,差异有统计学意义（P<0.05）;④模型组与干预组MMP1、MMP2、MMP9表达含量均较正常对照组升高。MMP1、MMP2、MMP9在PQ中毒后表达量逐渐升高,第14天达到高峰后下降,但第28天含量仍高于对照组。与模型组相比,干预组MMP2、MMP9含量均有下降,第14、28天显著,其差异有统计学意义（P<0.05）。TIMP1在干预期间与模型组及对照组无显著差异。结论：虾青素能够减弱肺纤维化大鼠肺组织病理的胶原沉积、减少肺组织中羟脯氨酸的含量、降低肺血清中MMP2、MMP9的含量,抑制肺组织中TGF-β1的分泌,从而减轻PQ引起的大鼠肺纤维化。     

肺间质纤维化的护理措施

目的 探讨肺问质纤维化(以下简称肺纤维化)患者的护理.方法 对19例肺纤维化患者在心理、生理、药物应用、病情观察、通气功能改善及防治呼吸道院内感染等方面采取全面系统的护理措施.结果 除1例患者住院期问死亡.其余18例患者临床症状明显缓解,无护理并发症发生.结论 加强肺纤维化患者住院期间的护理,对增强患者战胜疾病的信心,提高治疗效果,缓解临床症状能起到极其重要的作用.     

口服盐酸胺碘酮致肺间质纤维化1例护理体会

盐酸胺碘酮属Ⅲ类抗心律失常药.适用于危及生命的阵发性心动过速及室颤的预防.肺间质纤维化是一组侵犯肺泡壁及肺泡周围组织的疾病.病因是由感染、药物、化学制荆、自身免疫性疾病等造成的肺泡损伤[1].其主要病理改变为肺间质纤维化,使肺顺应性降低,肺容量减少,呈限制性通气和弥散功能障碍.患者出现慢性进行性呼吸困难,合并肺部感染,最终导致呼吸衰竭,严重者死亡.2010 年9 月我科收治1例因服用盐酸胺碘酮药物一年半致肺间质纤维化的患者.胸CT示双肺间质性病变伴感染局部间质纤维化,经积极救治,患者病情好转出院.现将护理体会汇报如下.     

博莱霉素诱导肺纤维化小鼠模型的建立及特征

目的探讨博莱霉素气管灌注诱导肺纤维化小鼠模型在不同时期分子生物学及组织病理学的改变。方法 6～8周龄C57BL/6小鼠60只,30只为正常对照组,30只以博莱霉素2.5 mg/kg单次气管灌注建立小鼠肺纤维化模型（模型组）,以肺组织病理学形态及基因表达水平为指标,判断模型小鼠肺纤维化发展阶段。结果正常对照组小鼠的肺组织无明显病理改变,模型组小鼠肺部有不同程度的肺泡结构破坏、炎性细胞浸润以及大量以胶原为主的细胞外基质沉积。基因表达检测结果显示:模型组灌注博莱霉素1～2周,小鼠肺组织白介素（IL）-4、IL-13较正常对照组升高,而3～5周模型组与正常对照组无差异（P>0.05）。模型组肺组织中胶原基因Colla2、Cola13、结缔组织生长因子（CTGF）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）均较正常对照组有不同程度的升高,与组织病理学改变一致。结论博莱霉素2.5 mg/kg单次气管灌注可成功建立肺纤维化小鼠模型;博莱霉素灌注早期以肺部炎性浸润为主,第3周时肺纤维化达到高峰,第5周开始纤维化有所缓解。     

急性百草枯中毒导致肺纤维化的发生机制及治疗进展

百草枯是一种高效触杀性除草剂。百草枯吸收入血后主要聚集在肺,造成肺损伤,尤其是中毒晚期形成不可逆的肺纤维化后引起呼吸功能衰竭,而这是导致百草枯中毒者死亡的主要原因。百草枯的中毒机制目前仍不明,现推测氧化应激和炎症损伤是其最主要的致病机制,而基因表达异常、线粒体损伤、肺泡表面活性物质缺失、细胞因子网络和酶失衡等亦在其中发挥重要作用。目前针对百草枯中毒的临床治疗除减少毒物吸收、增加毒物清除外,主要以抗氧化和抗免疫反应为主,但效果欠佳。虽然国内外已提出很多新型的治疗方法,但大部分仍处于实验阶段。因此,探讨急性百草枯中毒导致肺纤维化的发生机制及寻求安全有效的治疗方法是当今研究的热点。本文就此研究进展作一综述。     

CT引导下经皮穿刺气管内注射平阳霉素致大鼠肺纤维化模型的建立及其病理演变

目的探讨CT引导下经皮穿刺气管内注射平阳霉素诱导大鼠肺纤维化的可行性。方法 60只成年健康SD大鼠随机分为对照组和实验组（3d、7d、14d、28d、56d）,每组10只。大鼠固定、麻醉后,CT引导下用一次性无菌注射器经颈部穿刺气管,穿刺成功后,实验组向气管内注射5mg/ml平阳霉素溶液1ml/kg,对照组注入生理盐水1ml/kg。注药后3d、7d、14d、28d、及56d,对双肺标本行HE染色及Masson染色,在每张组织切片上对肺泡炎和肺纤维化进行半定量评分。结果实验组大鼠肺泡炎和肺纤维化明显较对照组严重,实验组炎症评分以7d组最高（11.53±2.81,P〈0.01）,纤维化评分以56d组最高（7.06±1.69,P〈0.01）。结论 CT引导下经皮穿刺气管内注射平阳霉素复制大鼠肺纤维化模型是切实可行的。     

急性百草枯中毒所致急性肺损伤机制研究

目的从病理学改变、酶学指标、肺组织细胞内钙离子浓度变化等方面,探讨急性百草枯中毒的损伤机制。方法取SD大鼠36只,随机分为2组,实验组大鼠腹腔内注射百草枯20mg/kg,用无菌生理盐水配成5mg/mL的溶液,一次性染毒。对照组大鼠腹腔内注入等体积无菌生理盐水。在6个不同时间点观察其肺组织病理学改变,测量肺组织匀浆内的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力及肺组织细胞内钙离子浓度变化。结果百草枯中毒可引起弥漫性毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞损害,主要表现为肺泡水肿、出血、透明膜形成和程度不等的肺泡炎,炎症细胞浸润;肺组织匀浆内MDA含量显著高于对照组(P<0·01);SOD活力下降(P<0·01);肺组织细胞浆内钙离子浓度明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0·01),以第2~4d明显,钙离子荧光强度分别为82·91±28·68和55·42±29·61。结论急性百草枯中毒的损伤机制可能与联吡啶阳离子产生反应态氧、胞内钙稳态失衡有关,最终导致不可逆的肺间质纤维化。     

大剂量氨溴索联合甲强龙早期应用对百草枯中毒肺纤维化的疗效

目的 研究大剂量氨溴索联合甲强龙早期应用对百草枯中毒患者肺纤维化的疗效。方法 选取安徽医科大学第二附属医院98例百草枯中毒患者,按入院日期随机分成甲强龙组（对照组）及氨溴索联合甲强龙组（观察组）,每组49例,观察两组患者的存活率、肺纤维化发生率和肺纤维化程度。结果 观察组和对照组在各时间点的存活率差异无统计学意义（P>0.05）,观察组与对照组在第3天的肺纤维化发生率差异无统计学意义（P>0.05）,第4周时,观察组肺纤维化发生率显著低于对照组（P<0.05）,观察组在第1周比第3天的肺纤维化程度增加（P<0.05）,而对照组各时间点比前一时间点的肺纤维化程度增加（P<0.05）,在第2周及第4周时,观察组肺纤维化程度低于对照组（P<0.05）。结论 大剂量氨溴索联合甲强龙早期应用对百草枯中毒患者的存活率不能显著提高,但使百草枯中毒导致的肺纤维化发生率及肺纤维化程度均有所下降,可用于临床。     

小鼠心肌纤维化模型的制备及其胶原沉积的机制

目的 建立缺血性心肌纤维化小鼠模型并探讨其胶原沉积机制.方法 将BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,每组10只.实验组予以腹部皮下注射异丙肾上腺素50 ms/kg,每天2次,连续10 d.对照组同法注射生理盐水.对比体表心电图,45 d后处死小鼠,天狼猩红染色观察心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维含量,荧光定量PCR检测心脏基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂一1(TIMP-1)基因表达,免疫组化染色分析心、肝、肾组织层粘连蛋白(LN)的表达.结果 实验组小鼠室性心律失常增多,心率加快(P<0.05);心脏胶原沉积较多,MMP-9、TIMP-1、LN表达上调(P<0.05),肝、肾组织LN无明显改变(P>0.05).结论 异丙肾上腺素能制备缺血性心肌纤维化小鼠模型,其机制与MMP-TIMP失衡有关.     

百草枯中毒致大鼠肺损伤病理模型的实验研究

目的:测定百草枯(Paraquat)中毒后大鼠的半数致死量(LD50),并建立一种比较可靠、稳定的肺纤维化动物病理模型。方法:SD大鼠共96只,雌雄各半。50只SD大鼠,雌雄各半,随机分为5组,每组10只,给大鼠一次性腹腔注射不同剂量的百草枯溶液,计算并确定1、2周的半数致死量;确定半数致死量后,另备46只SD大鼠,仍为雌雄各半,其中28只作为中毒组,选取18 mg/kg的剂量一次性腹腔注射给药,18只作为对照组,腹腔注射等体积的无菌等渗盐水,每天观察大鼠中毒症状,并于1、3、5、7、14、21、28、35和42 d分别处死实验组及对照组大鼠,进行肺组织的病理学观察。结果:大鼠腹腔注射百草枯溶液1和2周的半数致死量分别为18.27和17.29mg/kg;95%的可信区间分别为16.61~20.09和15.99~18.67 mg/kg。一次性腹腔注射18 mg/kg剂量的百草枯溶液后,大鼠在不同时间段出现了典型的中毒症状,肉眼及光镜下观察到百草枯中毒致大鼠急性肺损伤及纤维化病理的演变过程。结论:百草枯对大鼠具有很强的毒性,选择适当剂量的百草枯溶液染毒,不仅可减少实验用鼠量降低实验耗材,还可导致大鼠肺出现典型的纤维化。     

线粒体自噬在百草枯中毒大鼠模型肺纤维化中的作用研究

目的:建立百草枯(paraquat,PQ)中毒大鼠模型,观察不同阶段肺线粒体膜电位(JC-1染色)、调控线粒体自噬关键性蛋白PINK1、Parkin及活性氧(reactive oxygen species,ROS)的变化,探讨线粒体自噬是否参与PQ中毒肺纤维化的发生。方法:成年雄性SD大鼠42只,随机分为正常对照组(n=6)、模型组(n=36),模型组下设2 h、12 h、1 d、3 d、7 d和14 d共6个时间点,每个时间点各6只大鼠。使用20%PQ溶液50 mg/kg一次性灌胃大鼠建立PQ中毒模型。通过流式细胞仪检测血红细胞ROS浓度;HE染色和Masson染色观察PQ中毒后肺组织病理损害;JC-1染色检测肺组织线粒体膜电位变化;Western blot检测PINK1、Parkin蛋白变化。结果:与对照组相比,随着PQ中毒时间的延长,肺纤维化病理评分较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05);PQ组ROS荧光阳性强度率比值在中毒后2 h显著升高,中毒后12 h达高峰后逐渐下降(P<0.05),中毒后14 d与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);PQ组肺组织JC-1红绿荧光比均较对照组降低,Western blot提示随中毒时间延长,PINK1及Parkin蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P<0.01)。PQ组肺组织JC-1红绿荧光比与PINK1及Parkin、肺纤维化病理评分均呈负相关(r=-0.890,P<0.01;r=-0.845,P<0.01;r=-0.794,P<0.01)。在PQ中毒12 h内,血红细胞ROS荧光强度阳性率与JC-1红绿荧光比呈负相关(r=-0.712,P<0.01),与PINK1及Parkin、肺纤维化病理评分呈正相关(r=0.571,P<0.01;r=0.484,P<0.01;r=0.602,P<0.05)。结论:PQ中毒导致大鼠产生了明显氧化应激,诱发了线粒体自噬。ROS的产生与线粒体自噬的发生密切相关,共同参与了PQ大鼠肺纤维化的发生发展。     

单次趋化素样因子1导入所致小鼠肺病变的转归及其意义

目的 研究单次趋化素样因子1(CKLF1)导人所致小鼠肺病变的转归及其意义.方法 120只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,每组60只.实验组小鼠股四头肌内注入自行构建的pcDNA3.1-CKLF1-Myc-His表达质粒(CKLF1质粒)100 μg,对照组小鼠相同部位注入pcDNA3.1-Myc-His空质粒100μg,注入后均给予局部电脉冲刺激.质粒导人后第1、4、8周末每组各处死20只小鼠,观察并比较2组支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织的病理学变化.结果 导入质粒后1和4周,实验组小鼠BALF中中性粒细胞分别为(35.0±5.2)%和(22.9±2.2)%,淋巴细胞分别为(34.5±2.8)%和(22.0±2.0)%,均明显高于对照组[中性粒细胞(6.7±2.2)%、(7.0±2.4)%,淋巴细胞(5.9±1.6)%、(6.1±2.7)%,均P<0.01].肺组织病理学检查显示,CKLF1质粒导人后1周小鼠气道上皮细胞脱落,肺间质充血水肿、炎细胞渗出;4周可见肺泡间隔增厚,中性粒细胞、巨噬细胞及成纤维细胞明显增生,大量胶原纤维沉积于肺间质;8周可见肺组织病变明显减轻,肺泡结构渐趋恢复.结论 CKLF1可引起支气管肺组织的炎性损伤,单次CKLF1导入所致肺病变可自行逆转.