复方丹参方及其成分配伍的体外抗凝血作用

目的系统考察复方丹参方及其成分配伍的体外抗凝血作用,发现复方丹参方活血作用的物质基础,为体内动物实验提供参考依据。方法以凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（KPTF）和凝血酶时间（TT）为检测指标,观察复方丹参方、丹参酮ⅡA、人参皂苷Rg1对这些指标的影响。结果体外凝血研究的结果表明复方丹参方、丹参酮ⅡA、人参皂苷Rg1及其成分组合能延长凝血时间,且作用呈剂量依赖性。丹参酮ⅡA、人参皂苷Rg1起主要作用,丹参酮ⅡA、人参皂苷Rgl的成分配伍与复方丹参方的抗凝血作用没有明显差别。结论丹参酮ⅡA、人参皂苷Rg1是复方丹参方活血作用的物质基础,两者配伍可以代替复方丹参方的抗凝血作用。     

基于改善微循环药效的天麻素与葛根素配伍合理性研究

目的:研究天麻素与葛根素配伍后在抗凝血及抗血小板聚集方面的作用,探讨其配伍应用的合理性.方法:以体内外活化部分凝血活酶时间(APTT)和二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集率为指标,分别评价药物及其配伍后的抗凝血和抗血小板聚集作用.结果:天麻素和葛根素在一定剂量范围内均具有抗凝血、抗血小板聚集作用,且二药作用强于单一用药.结论:一定剂量天麻素和葛根素配伍后,其抗凝血及抗血小板聚集作用均有所增加.     

桃红四物汤各分离部位对体外ADP诱导血小板聚集、凝血酶活性的影响及效应物质基础研究

评价桃红四物汤各分离部位对体外二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集及凝血酶活性的影响,探讨其效应物质基础。采用比浊法测定体外ADP诱导家兔血小板聚集率;采用改进凝血酶时间法测定抑制凝血酶活性;采用UPLC-Q-TOF-MS对各分离部位进行定性分析鉴定。桃红四物汤醇沉沉淀部位、醇沉上清液部位及20%~30%醇洗脱部位对ADP诱导的血小板聚集具有显著的抑制作用;水不溶部位、醇沉上清液部位及40%~70%醇洗脱部位具有显著的抑制凝血酶活性的作用;芳香酸类成分、苷类成分和苯酞类成分是醇沉沉淀部位、醇沉上清液部位及20%~40%醇洗脱部位的主要成分。桃红四物汤抑制ADP诱导家兔血小板聚集及抑制凝血酶活性的主要效应物质基础是芳香酸类成分、苷类成分和苯酞类成分。该实验为进一步探讨活血化瘀方桃红四物汤治疗血瘀证的物质基础及作用机制提供了科学依据。     

四物汤的现代药理作用和临床应用

四物汤最早见于晚唐蔺道人著的<理伤续断秘方>,后来被载于中国第一部国家药典——<太平惠民和剂局方>(宋代),以后在<卫生家宝产科备要·产后方>(宋代)、<医方考·调经用四物汤>(明代)、<济阴纲目·调经门>(清初)等医学书籍中均有记载和评说,被后世医家称为"妇科第一方","为血证立法","调理一切血证是其所长"及"为妇女之圣药"等美誉.方药四味,熟地黄为君,滋阴养血,填精补髓;辅以当归补血养肝,活血调经;佐以白芍和营养肝;使以川芎活血行滞.在复合配方中,每一味药均有其特殊作用,其中君药具有主要的药理学效应;臣药助君药发挥作用,起协同效应;佐药具有抵消配方毒性的效应;使药帮助传送君、臣药的活性成分至靶器官[1].也有学者利用计算机辅助分析,对四味药进行不同的排列组合,得出15种配伍,发现补血作用以全方量好,拆方所得的各种配伍组合均不及四物汤全方,当归在方中起主要作用[2].现代医学对四物汤的配方作了详细分析,其物质基础为地黄多糖、当归多糖、阿魏酸、芍药苷、川芎嗪等活性成分,这些成分各有独特的药理作用,通过多靶点、多环节的作用,体现出该方的养血、调经、增强免疫力等功效.现综述如下.     

凝血酶时间法的改进及对四物汤类方筛选研究

目的:改进凝血酶时间(TT)法,使其更适合体外凝血酶抑制剂筛选。并用此方法测定比较四物汤类方及方中代表性成分的抗凝血酶活性。方法:建立凝血酶浓度对lgTT延长率(%)的标准曲线,对影响凝血酶活性的相关因素进行考察,如血浆的储存条件;药物溶媒的选择;药物与凝血酶预温时间。并且测定比较四物汤(SW)、少腹逐瘀汤(SF)、香附四物汤(XF)、桃红四物汤(TH)、芩连四物汤(QL)的抗凝血酶活性。对方中代表性成分的抗凝血酶活性进行测定。结果:获得改进凝血酶时间法的适宜条件;筛选结果显示四物汤类方均有明显的抗凝血酶活性,抑制性的强弱顺序为QL(IC₅₀=1.30mg·mL^-1)>SF(IC₅₀=1.39mg·mL^-1)>XF(IC₅₀=3.55mg·mL^-1)>SW(IC₅₀=8.14mg·mL^-1)>TH(IC₅₀=10.94mg·mL^-1);活性成分槲皮素也具有显著抗凝血酶活性。结论该研究建立了一种凝血酶抑制剂筛选的便捷方法,证实了四物汤类方及成分具有直接抗凝血酶的活性,为深入解析活血化瘀方中靶向凝血酶的活性物质奠定了基础。     

不同配伍对川芎嗪体内药代动力学影响

目的:探讨川芎嗪单独给药、不同配伍给药在大鼠体内的代谢动力学规律。方法:32只SD大鼠,分为川芎嗪(30 mg.kg-1)组、川芎嗪+阿魏酸(30 mg.kg-1+50 mg.kg-1)组、川芎嗪+延胡索乙素(30 mg.kg-1+20 mg.kg-1)组、川芎嗪+阿魏酸+延胡索乙素(30 mg.kg-1+50 mg.kg-1+20 mg.kg-1)组,灌胃给药,采用高效液相色谱法测定各组大鼠血浆中川芎嗪的浓度,DAS 2.0程序计算药代动力学参数。结果:川芎嗪与阿魏酸配伍时,药时曲线下面积AUC0-t、达峰浓度Cmax和达峰时间Tmax与川芎嗪单独给药相比没有显著差异,但半衰期t1/2和平均驻留时间MRT0-t显著比川芎嗪单独给药时延长(P<0.05);川芎嗪与延胡索乙素配伍,及与阿魏酸、延胡索乙素同时配伍时AUC0-t,Cmax,Tmax与川芎嗪单独给药相比显著增大(P<0.05),而t1/2,MRT0-t与川芎嗪单独给药时相比无显著异。结论:阿魏酸可以延长川芎嗪在大鼠体内的作用时间,延胡索乙素能加快并增加川芎嗪在大鼠体内的吸收。     

基于谱效整合分子对接技术研究瓜蒌子及其壳、仁抗凝血的物质基础及作用机制

基于谱效整合分子对接技术研究瓜蒌子及其壳、仁抗凝血的物质基础及机制。建立瓜蒌子及其壳、仁的HPLC指纹图谱,测定瓜蒌子及其壳、仁2个剂量组(5、30 g·kg^-1)抗小鼠凝血生化指标凝血酶原时间(prothrombin time, PT)及活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time, APTT),以Matlab语言采用邓氏关联度计算法分析瓜蒌子及其壳、仁抗凝血的谱效关系和物质基础,获得共有药效成分群。利用TCMSP、SwissTargetPrediction、GenCLiP3、GeneCards、DAVID等数据库,获取共有药效成分群与疾病“coagulation”的共有靶点蛋白,进行信号通路及生物学功能注释分析并利用SYBYL-X 2.1.1软件对共有药效成分群抗凝血的主要分子机制加以验证。瓜蒌子及其壳、仁的谱-效关联度与给药剂量呈正相关,各成分抗凝血作用的贡献程度并不一致即发挥抗凝血作用的物质基础不同,但存在共有药效成分群即共同物质基础,如腺嘌呤(3号峰)、尿嘧啶(4号峰)、次黄嘌呤(6号峰)、黄嘌呤(9号...     

四物汤中阿魏酸对兔血指标的相关联系

目的:测定家兔血中来自四物汤(当归、川芎、白芍、熟地黄)的阿魏酸水平以及相应的血液指标。方法:用HPLC法测定服药后兔血中阿魏酸并测定兔血指标。结果:服药周期中,兔血中的白细胞、红细胞、血红蛋白、铁、锌和铜水平均有显著提高,降低了红细胞压积和全血低切黏度。结论:四物汤中的阿魏酸可能是四物汤补血活血的有效成分之一。     

芩连四物汤化学物质基础及其抗凝血活性研究

目的:研究芩连四物汤的化学物质基础及其抗凝血生物效应。方法:采用水煎醇沉,醇溶液减压回收乙醇,用适量水溶解后,上D101大孔树脂采用不同浓度的乙醇梯度洗脱,各不同洗脱部位采用硅胶柱层析的方法分离,所得单体通过UV,IR,NMR及MS等方法确定其化学结构;将所得成分配成水溶液(100μmol·L^-1),采用体外法测定对血浆凝血酶时间(TT)的影响。结果:从芩连四物汤中分离并鉴定了5个黄酮类成分、1个生物碱、3个芳香酸、1个倍半萜类成分及2个其它类化合物。黄酮苷元、芳香酸、生物碱及倍半萜类化合物均能显著延长血浆凝血酶时间(TT)。结论:首次对芩连四物汤整方进行化学物质分离和结构分析研究,其中9个化合物,包括千层纸素A、汉黄芩素、6-甲氧基汉黄芩素、小檗碱、黄芩素、阿魏酸、香草酸、咖啡酸、地黄苦苷元显示了一定的体外抗凝血活性。     

酒制对四物汤化学成分的影响研究

目的:探究酒制对四物汤复方中指标性成分含量变化的影响。方法:以四物汤为研究对象,其中三个有效成分(5-羟甲基糠醛、阿魏酸、芍药苷)为指标,设计正交试验,判断酒制因素对指标成分的影响。结果:白芍的酒制对复方中阿魏酸含量的影响有显著性差异,川芎和当归的酒制对于指标成分的影响差异不显著。结论:酒制白芍有利于四物汤复方中阿魏酸的含量增加,提示酒制不仅仅可能对药材本身的化学成分有影响,更有可能影响复方中其他成分的含量变化。     

阿魏酸盐的合成及药理作用研究

 目的:合成阿魏酸哌嗪盐(Ⅴ)、阿魏酸川芎嗪盐(Ⅵ)和阿魏酸川芎哚盐(Ⅶ),并进行初步药理研究。方法:以阿魏酸与相应的生物碱为原料合成Ⅴ,Ⅵ和Ⅶ,对其进行凝血功能和实验性血栓形成等方面药理实验,并与川芎嗪(TMP)进行比较。结果:合成Ⅴ,Ⅵ和Ⅶ的产率分别为92%,877%和654%。Ⅵ和Ⅶ对APTT的延长作用强于TMP;Ⅴ和Ⅵ对TT的延长作用明显强于TMP:Ⅵ和Ⅶ对PT的延长作用明显强于TMP。Ⅴ,Ⅵ,Ⅶ和TMP均有一定程度的抗血栓作用,Ⅵ抗血栓作用强度大于TMP。结论:Ⅴ,Ⅵ和Ⅶ具有较强的抗血凝功能和较强的抗血栓作用,Ⅵ的作用明显强于TMP。     

痛风急性期患者血瘀相关指标观察

目的观察痛风急性期患者的凝血功能状态，为中医活血化瘀疗法治疗痛风提供参考依据。方法检测44例痛风急性期患者的凝血四项指标（血浆凝血酶原时间（PT）、部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）和凝血酶时间（TT）），并与正常人比较。结果观察组患者APTT、PT和FIB均显著升高，TT值显著降低。结论痛风急性期患者血液处于高凝状态，与中医学“瘀血”有类通之处，中医活血化瘀疗法治疗痛风具有重要意义。     

水蛭不同提取物抗凝活性的体外实验研究

目的:研究水蛭不同提取物的抗凝活性,为水蛭的新药开发提供实验依据.方法:Wistar大鼠腹静脉取血,应用血凝仪体外测定凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和活化的部分凝血活酶时间(APTT).结果:水蛭的乙酸乙酯部分能使大鼠的PT、TT、APTT显著延长.正己烷部分、水溶液部分能使大鼠的PT显著延长,正丁醇部分能使大鼠的APTT显著延长.结论:水蛭各提取物均有抗凝活性,水蛭中存在不同于水蛭素的新的抗凝血成分.     

熟地黄炭补血止血作用的炮制机制探索

目的:筛选熟地黄炭止血的主要药效部位,探讨其补血止血作用的炮制机制。方法:以小鼠的出血时间(BT)和凝血时间(CT)为指标筛选熟地黄炭止血的有效部位;以SD大鼠为研究对象,通过腹腔注射环磷酰胺同时结合尾部放血,以8%无水乙醇代替自由饮水的方法共同建立大鼠血虚出血模型,观察其一般体征、病理组织,测定大鼠的血常规指标即红细胞总数(RBC),血红蛋白含量(HGB)和白细胞总数(WBC);检测血液流变学指标(高、中、低切下全血还原黏度及血浆黏度)和凝血4项指标[凝血酶原时间(PT),凝血酶时间(TT),活化部分凝血活酶时间(APTT)和血浆纤维蛋白原(FIB)]。结果:与空白组比较,熟地黄炭组、熟地黄炭水部位组均可缩短小鼠BT和CT。与空白组比较,血虚出血模型组大鼠的RBC,HGB和WBC均明显降低;高、低切下的全血还原黏度升高;PT,TT和APTT均延长,FIB增多。与模型组比较,熟地黄炭组大鼠的RBC,HGB和WBC均明显升高;高、中、低切下的全血还原黏度及血浆黏度均降低;PT,TT和APTT均缩短,FIB减少。与模型组比较,熟地黄炭水部位组大鼠的RBC和HGB均升高;高切下的全血还原黏度降低;PT,TT和APTT均缩短,FIB减少。结论:熟地黄炭通过升高大鼠RBC,提高HGB,改善环磷酰胺与放血所致血虚大鼠的体征,表现了其补血的作用;同时通过缩短大鼠TT,PT和APTT,降低FIB的含量,表现了其止血的作用。提示熟地黄炭针对血虚出血大鼠模型发挥了较好的补血止血作用。     

两种给药途径对低分子量肝素和肝素抗栓与抗凝作用的动物实验研究

目的：观察比较低分子量肝素（ＬＭＷＨ）、肝素ｉｖ和ｓｃ的抗栓和抗凝作用。方法：按Ｃｈａｎｄｌｅｒ氏法由兔颈总动脉取血制备混合血栓和结扎大鼠下腔静脉制备静脉血栓模型；全血凝固时间（ＣＴ）按试管法测定，凝血酶时间（ＴＴ）、凝血酶原时间（ＰＴ）、活化的部分凝血活酶时间（ＡＰＴＴ）和复钙时间（ＲＴ）均按常规方法测定。结果：ｉｖ时，ＬＭＷＨ组兔血栓重量低于等抗凝单位的肝素，对大鼠血栓重量的影响与等抗凝单位的肝素相似，对ＴＴ的延长作用弱于肝素，对ＣＴ，ＰＴ，ＡＰＴＴ和ＲＴ的延长作用与肝素相似。ｓｃ时，ＬＭＷＨ组两种血栓模型的血栓重量均低于肝素组，而且对ＣＴ，ＰＴ，ＡＰＴＴ，ＴＴ和ＲＴ的延长也明显强于肝素。结论：ｉｖＬＭＷＨ的抗栓作用强于肝素或与肝素相似，抗凝作用与肝素相似或较弱。ｓｃ时，ＬＭＷＨ的抗栓及抗凝作用均强于肝素。     

两种给药途径对低分子量肝素和肝素抗栓与抗凝作用的动物实验研究

 目的：观察比较低分子量肝素(LMWH)、肝素iv和sc的抗栓和抗凝作用。方法：按Chandler氏法由兔颈总动脉取血制备混合血栓和结扎大鼠下腔静脉制备静脉血栓模型；全血凝固时间(CT)按试管法测定，凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化的部分凝血活酶时间(APTT)和复钙时间(RT)均按常规方法测定。结果：iv时，LMWH组兔血栓重量低于等抗凝单位的肝素，对大鼠血栓重量的影响与等抗凝单位的肝素相似，对TT的延长作用弱于肝素，对CT，PT，APTT和RT的延长作用与肝素相似。sc时，LMWH组两种血栓模型的血栓重量均低于肝素组，而且对CT，PT，APTT，TT和RT的延长也明显强于肝素。结论：ivLMWH的抗栓作用强于肝素或与肝素相似，抗凝作用与肝素相似或较弱。sc时，LMWH的抗栓及抗凝作用均强于肝素。     

补阳还五汤对激素性股骨头坏死大鼠血液流变学、凝血及纤溶的影响

目的:观察补阳还五汤对激素性股骨头坏死(SANFH)大鼠血液流变学、凝血及纤溶的影响,探讨其防治SANFH的机理。方法:取30只SD大鼠随机分为3组:正常对照组、模型组、治疗组。以每周2次注射醋酸泼尼松龙24.5mg/kg进行造模,正常对照组注射等容积生理盐水。造模同时给药,治疗组予补阳还五汤水提液灌胃,模型组及正常对照组喂生理盐水。第6周取血标本检测血液流变学、凝血及纤溶指标。结果:①血液流变学测定结果:模型组全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数明显高于正常对照组(P0.05),治疗组全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数明显低于模型组(P0.05),治疗组红细胞压积与模型组比较无显著变化(P0.05)。②凝血指标测定结果:模型组凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)较正常组短(P0.05),而纤维蛋白原(FIB)升高(P0.05)。治疗组PT、APTT、TT较模型组延长(P0.05),而FIB降低(P0.05)。③纤溶指标测定结果:模型组的组织型纤溶酶原激活物(tPA)较正常组减少,而tPA抑制剂1(PAI-1)无明显差异(P0.05)。治疗组tPA较模型增加,PAI-1无明显差异(P0.05)。④治疗组血液流变学、凝血及纤溶各指标与正常对照组间比较无显著变化(P0.05)。结论:补阳还五汤能够改善因激素导致的异常血液流变状态、凝血及纤溶功能,改善高凝状态,有利于阻止或延缓SANFH的发生和发展。     

黄芩炭对血热出血大鼠止血有效部位研究

目的:比较黄芩生品、炭品止血效果,筛选黄芩炭有效止血部位,通过血热出血动物模型探讨该部位发挥止血作用的机制。方法:取SD大鼠60只,随机分为6组,空白对照组、模型对照组、云南白药组、黄芩生品组、黄芩炭品组、黄芩炭氯仿部位组。将供试品按每日20 mL.g-1的剂量灌胃(ig),1次/d,给药7 d。通过测定其凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白(FIB)4项指标及血液流变学相关指标,观察黄芩生品、炭品及各部位对模型动物血液系统的影响。结果:模型对照组较空白对照组有显著差异,显著延长PT(17.26±1.73)s,TT(23.15±1.83)s,APTT(22.43±1.93)s及高切黏度(5.72±0.55)mPa.s,中切黏度(7.44±0.78)mPa.s,低切黏度(6.59±1.10)mPa.s。黄芩炭和黄芩炭氯仿部位能显著缩短血热出血动物模型的PT,TT,APTT。黄芩炭和黄芩炭氯仿部位依次为PT(14.53±1.45)s,(13.24±1.46)s;TT(20.91±1.15)s,(18.70±1.44)s;APTT(18.07±0.75)s,(15.59±1.74)s;与模型对照组比较P<0.05或P<0.01;对FIB均没有显著影响。结论:黄芩炭氯仿部位为黄芩炭止血的有效部位,止血主要通过内源性、外源性凝血酶及内外源共同途径,与纤维蛋白系统无关。血液流变学的改善为止血效果的产生提供依据。     

水蛭乙醇提取物体外抗凝血活性研究

目的:研究水蛭不同提取物对人血浆的抗凝活性及作用环节。方法:测定水蛭乙醇提取物不同萃取部位对凝血酶原时间(PT),凝血酶时间(TT),活化的部分凝血活酶时间(APTT),纤维蛋白原凝固时间(FCT)的影响。结果:水蛭的乙酸乙酯部位显著地延长人PT,APTT,TT和FCT;石油醚部位、正丁醇部位、水部位也有较弱抗凝活性。结论:水蛭乙酸乙酯提取部分抗凝作用最强,直接抑制凝血酶催化的纤维蛋白原凝固。     

加味半夏白术天麻汤治疗急性缺血性脑卒中疗效观察

目的:观察加味半夏白术天麻汤治疗急性缺血性脑卒中的临床疗效。方法:140例风痰阻络证型急性缺血性脑卒中病例随机分为观察组和对照组各70例。对照组给予常规西医治疗,观察组在对照组的基础上给予加味半夏白术天麻汤治疗。治疗2周后,观察两组疗效及血清炎症因子(IL-6、hs-CRP、TNF-α)及凝血功能指标(PT、TT、APTT、FIB)的变化。结果:(1)临床疗效,观察组基本痊愈率42.86%、显著进步率38.51%、进步率14.29%;对照组分别为27.14%、32.86%、24.29%,两组疗效比较差异有统计学意义(P0.05);(2)血清炎症因子水平,两组IL-6、hs-CRP、TNF-α水平比较差异有统计学意义(P0.05),且两组IL-6、hs-CRP、TNF-α水平随着时间的延长逐渐降低(P0.05),观察组下降的幅度明显大于对照组(P0.05);(3)凝血功能,两组PT、APTT、TT、FIB水平比较差异有统计学意义(P0.05),两组PT、APTT、TT水平随着时间的延长逐渐升高(P0.05),而FIB逐渐降低(P0.05),观察组变化幅度大于对照组(P0.05)。结论:加味半夏白术天麻汤可显著提高急性缺血性脑卒中的临床疗效,作用机制可能与抑制炎症反应、改善凝血功能有关。