何首乌水提物及其主要成分对人肝细胞L02中CYP1A2、CYP2C9和CYP2E1 mRNA表达的影响

目的分析何首乌水提物中主要化学成分及其量,阐明何首乌水提物及其主要成分对人正常肝实质细胞L02中CYP1A2、CYP2C9和CYP2E1 mRNA表达的影响。方法 HPLC测定何首乌水提物中主要化学成分及其质量分数;MTT法确定何首乌水提物及其主要成分对L02细胞活力的影响;实时荧光定量PCR测定L02细胞中CYP1A2、CYP2C9和CYP2E1mRNA表达量。结果何首乌水提物主要含有二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素和大黄素甲醚,各成分在何首乌水提物中的质量分数分别为(1.14±0.03)%、(0.106 9±0.001 6)%、(0.010 8±0.000 9)%、(0.003 55±0.000 19)%;何首乌水提物及其主要成分作用L02细胞24 h,何首乌水提物和大黄素对细胞活力的影响随着药物浓度的增加抑制作用增强,IC50值分别为7.290 mg/m L和0.082 mmol/L,二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚在实验浓度范围内对细胞活力的抑制作用不明显;何首乌水提物、大黄素均可明显抑制L02细胞中CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1 mRNA的表达;大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷抑制CYP1A2和CYP2C9的mRNA表达;二苯乙烯苷抑制CYP1A2 mRNA表达,但激活CYP2C9mRNA表达;大黄素甲醚浓度依赖性抑制CYP1A2、CYP2C9 mRNA表达,却表现低浓度抑制、高浓度激活CYP2E1 mRNA表达。结论何首乌水提物抑制L02细胞中CYP1A2、CYP2C9和CYP2E1 mRNA表达是其所含各种成分综合作用的结果,何首乌4种主要成分均可抑制CYP1A2 mRNA表达,蒽醌成分是抑制CYP2C9 mRNA表达的主要成分,游离蒽醌是抑制CYP2E1 mRNA表达的主要成分。     

桃红四物汤含药血清对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞TNF-α、MCP-1和IL-1β表达的影响

目的:研究桃红四物汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导刺激下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用。方法:SD大鼠灌胃给予桃红四物汤提取液(生药1.75 g·m L-1),每天2次,按10 m L·kg-1连续给药3d后,制备桃红四物汤含药血清。MTT法检测桃红四物汤含药血清(终浓度为5%、10%和15%)预处理对LPS诱导细胞生存率减少的作用;real-time RT-PCR检测TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达情况;Western Blot方法检测MCP-1和NFκB蛋白表达;检测活性氧(ROS)含量,研究桃红四物汤含药血清对HUVEC抗氧化能力的影响。结果:与空白血清对照组比较,经LPS(1μg·m L-1)刺激后细胞ROS含量明显增高而生存率显著降低,同时细胞炎性因子TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达增高;含药血清组可显著提高HUVECs活力、降低ROS含量和TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达。结论:桃红四物汤含药血清对LPS诱导的HUVECs损伤有显著地保护作用。     

黄芪失笑散对实验大鼠主动脉和OX—LDL诱导下人脐静脉内皮细胞ICAM-1 VCAM-1 mRNA基因表达的影响

目的:探讨黄芪失笑散对动脉硬化大鼠主动脉和氧化低密度脂蛋(OX-LOL)刺激下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管黏附分子-1(VCAM-1)mRNA基因表达影响.方法:采用高脂饲料喂饲和腹腔注射维生素D1建立大鼠AS模型,取48只雄性SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、氟伐他汀组、黄芪失笑散小剂量组、黄芪失笑散中剂量组、黄芪失笑散大剂量组.治疗12周后,用RT-PCR法检测大鼠主动脉ICAM-1、VCAM-1的表达;进行HUVECs原代培养,取第4～6代进行实验,随机分为6组:对照组、模型组、氟伐他汀组、黄芪失笑散小剂量组、黄芪失笑散中剂量组、黄芪失笑散大剂量组.OX-LDL刺激HUVECs6h后.大鼠药物血清与HUVECs共培养48h,用RT-PCR法检测大鼠主动脉ICAM-1、VCAM-1的表达.结果:黄芪失笑散大剂量可显著降低动脉粥样硬化大鼠主动脉、OX-LDL诱导的HUVECs的ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达(P＜0.01),且黄芪失笑散对OX-LDL诱导的HUVECs的ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达的抑制作用呈剂量依赖性.结论:黄芪失笑散的抗动脉粥样硬化的作用源于抑制ICAM-1、VCAM-1 mRNA的表达.     

三棱散对人胃癌SGC-7901细胞增殖作用的影响

目的:探讨三棱散水提物对人胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡影响及其可能机制。方法:制备三棱散水提物,培养人胃癌SGC-7901细胞,MTT法观察不同时间(24 h,72 h)不同浓度三棱散水提物对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。用流式细胞仪检测三棱散水提物对细胞周期阻滞及其凋亡的影响。RT-PCR法检测不同浓度三棱散水提物作用人胃癌SGC-7901细胞72 h后细胞NF-κBp65 mRNA、cyclin D1 mRNA及p16 mRNA表达情况。结果:随着三棱散水提物浓度增高和作用时间的延长,人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制率逐渐增高(P0.05),同一浓度不同时间的细胞增殖抑制率相比,有显著性差异(P0.05)。人胃癌SGC-7901细胞在G0/G1期表现出明显的增加,S期细胞明显的减少,各浓度组均明显诱导细胞凋亡(P0.05),其凋亡率随三棱散浓度增加而提高。RT-PCR法检测显示,随着三棱散水提物浓度的增加,NF-κBp65 mRNA、cyclin D1 mRNA表达逐渐减少,p16 mRNA表达逐渐增加。三棱散水提物浓度5.0 mg/m L,10.0 mg/m L时,NF-κBp65 mRNA、cyclin D1 mRNA及p16 mRNA表达存在显著性差异(P0.05或P0.01)。结论:三棱散水提物对人胃癌SGC-7901细胞有抑制增殖和促凋亡作用,呈时间和浓度依赖性,且G0/G1期细胞数量增多,S期细胞数量减少。RT-PCR法检测显示,NF-κBp65 mRNA、cyclin D1 mRNA呈现低表达,p16 mRNA呈现高表达,由此推测,NF-κBp65表达下调会直接影响Cyclin D1表达,发挥细胞周期的正反馈调节,p16表达上调可启动细胞周期的负反馈调节,共同作用产生细胞增殖抑制及促进凋亡的作用。     

三七总皂苷对过氧化氢损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用研究

目的:观察三七总皂苷(PNS)对过氧化氢损伤人脐静脉内皮细胞(HUVECs)LDH释放量、胞内SOD活性的影响,研究其对受损细胞粘附分子ICAM-1及MCP-1 mRNA表达的影响,探讨三七总皂苷对HUVECs的保护作用及其在动脉粥样硬化中作用的可能机制。方法:三七总皂苷预孵育细胞4h后,加入300μmol/L H2O2,继续培养24h,MTT法检测细胞活力,采用试剂盒测定LDH释放量、SOD酶活力,荧光实时定量PCR(RT-PCR)法检测三七总皂苷作用下内皮细胞ICAM-1及MCP-1 mRNA的表达。结果:三七总皂苷在25~100μg/ml浓度范围内可显著提高受损细胞活力,并能显著降低LDH漏出率,提高胞内SOD酶活力;RT-PCR结果表明H2O2组内皮细胞表达的ICAM-1和MCP-1 mRNA明显高于正常细胞组,而同时加入50及100μg/ml的三七总皂苷后两者mRNA表达明显下降。结论:三七总皂苷可保护血管内皮细胞免受H2O2的损害,改善受损细胞氧化指标,降低参与动脉粥样硬化相关细胞因子表达,从而预防和治疗动脉粥样硬化。     

青藤碱对肾小管上皮细胞MCP-1和ICAM-1基因表达的影响

目的:探讨青藤碱对体外培养的肾小管上皮细胞单核细胞趋化因子1(MCP-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)mRNA表达的干预作用。方法:体外培养小鼠肾小管上皮细胞株(MCT),分为正常对照组、模型组和干预组。模型组和干预组细胞予以IL-1β(10ng/ml)刺激,干预组细胞同时加不同浓度的青藤碱,继续培养48h,RT-PCR检测细胞MCP-1和ICAM-1 mRMA的表达,Quangtity One 1-D分析软件分析积分光密度,计算MCP-1和ICAM-1电泳条带的积分光密度和GAPDH积分光密度的比值,用SPSS统计软件进行统计分析。结果:IL-1β可显著增强肾小管上皮细胞MCP-1和ICAM-I mRNA的表达,青藤碱各个浓度均能显著下调MCP-1和ICAM-1 mRNA的表达,并呈一定的剂量依赖性。结论:青藤碱能显著下调肾小管上皮细胞MCP-1和ICAM-1的mRNA表达,提示其具有防治肾小管肾间质炎症损伤作用。     

糖肾清1号对糖尿病肾病模型大鼠肾组织MCP-1,RANTES表达的影响

目的:观察中药糖肾清1号高、中、低剂量对糖尿病肾病肾组织局部CC族细胞趋化因子表达的影响。方法:建立糖尿病肾病大鼠模型,设正常组、模型组、卡托普利组、糖肾清1号高、中、低剂量组,正常组和模型组每日予去离子水10 m L·kg~(-1)灌胃;卡托普利组每日予卡托普利2.33 mg·kg~(-1)灌胃,糖肾清1号高、中、低剂量组每日分别予糖肾清1号颗粒187,93.5,46.75 mg·kg~(-1)灌胃,连续给药12周后取材。采用时实荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和调节正常T细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)mRNA转录,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MCP-1蛋白表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定RANTES蛋白表达水平。结果:糖肾清1号可以下调肾组织的MCP-1,RANTES mRNA转录和蛋白表达(P0.05,P0.01),并且呈量效依赖性,肾组织MCP-1和RANTES的表达量为糖肾清1号高剂量组中剂量组低剂量组,中药各组以糖肾清1号高剂量组疗效明显。结论:糖肾清1号可通过抑制肾组织MCP-1,RANTES mRNA转录和蛋白表达,延缓糖尿病肾病的发生发展。     

荷叶水提物对3T3-L1前体脂肪细胞增殖、凋亡及前体脂肪细胞、成熟脂肪细胞IL-6 mRNA、TNF-α mRNA的影响

目的:研究荷叶水提物对3T3-L1前体脂肪细胞增殖、凋亡的影响,以及对3T3-L1前体脂肪细胞、成熟脂肪细胞白介素-6(IL-6)信使核糖核酸(mRNA)、肿瘤坏死因子(TNF-α)mRNA的影响。方法:体外培养3T3-L1细胞,采用MTT法检测荷叶水提物对3T3-L1前体脂肪细胞增殖的影响;采用荧光定量PCR检测其对3T3-L1前体脂肪细胞和成熟脂肪细胞IL-6 mRNA、TNF-αmRNA的表达,采用DAPI染色法检测其对3T3-L1前体脂肪细胞凋亡的影响。结果:不同质量分数的荷叶水提物均能抑制3T3-L1细胞增殖,且呈现量-效关系;1 g/L荷叶水提物可增高3T3-L1成熟脂肪细胞TNF-αmRNA和IL-6 mRNA的表达,降低3T3-L1前体脂肪细胞TNF-αmRNA的表达;还可以促进3T3-L1前体脂肪细胞的凋亡。结论:荷叶水提物可能是通过抑制细胞增殖、降低细胞炎症因子mRNA的表达、促进细胞凋亡进而影响脂肪细胞的活性。     

扶正解毒颗粒对染镍大鼠肾组织及尿单核细胞趋化蛋白-1水平的影响

目的 研究中药扶正解毒颗粒(FJG)对硫酸镍(NiSO4)暴露肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA表达的影响.方法 Wistar大鼠NiSO4(2.5 mg·kg-1·d-1)染毒造模,FJG灌胃处理,分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法和双缩脲比色法检测尿MCP-1和24 h尿蛋白含量;采用实时荧光定量RT-PCR检测肾组织MCP-1 mRNA表达的变化.结果 NiSO4组肾细胞MCP-1mRNA表达增强,尿MCP-1和24 h尿白蛋白含量增加;FJG组MCP-1 mRNA表达水平明显低于NiSO4组(RSD分别为4.3%,6.9%,7.4%),FJG组尿MCP-1和24 h尿白蛋白含量明显低于NiSO4组(P <0.05和P < 0.01).结论 MCP-1mRNA表达增强、尿MCP-1含量增加与镍性肾损伤存在一定关联,FJG干预镍肾毒性的作用可能与下调MCP-1mRNA表达及降低尿MCP-1水平有关.     

三黄泻心汤活血化瘀优势方抗动脉粥样硬化的作用机制

目的:研究三黄泻心汤活血化瘀优势方对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响并探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:采用体外培养的HUVECs,分为空白组,ox-LDL损伤组(模型组),三黄泻心汤活血化瘀优势方15.63,31.25,62.50 mg·L-1组;用200 mg·L-1ox-LDL孵育24 h,造成HUVECs损伤模型;细胞存活率采用噻唑蓝(MTT)比色法测定,放射免疫法检测细胞上清液中内皮素(ET-1),6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α),血栓烷素B2(TXB2)含量,半自动生化分析仪检测抗氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),一氧化氮(NO)水平。采用试剂盒荧光定量法检测活性氧(ROS)含量,检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1),血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)水平酶联免疫吸附测定。细胞凋亡率及线粒体膜电位变化采用流式细胞术,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax),半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine aspartate-specific protease-3,Caspase-3),Caspase-9表达。结果:与空白组比较,模型组HUVECs存活率降低;MDA,MCP-1,ICAM-1,VCAM-1的水平升高,SOD和NO含量降低,ROS的分泌增加,细胞凋亡率升高,Bax,Caspase-3和Caspase-9的表达量增加,Bcl-2的表达量减少(P0.05,P0.01)。与模型组比较,不同质量浓度的三黄泻心汤活血化瘀优势方使HUVECs存活率明显上升,显著降低MDA,MCP-1,ICAM-1,VCAM-1的水平;提高SOD和NO含量,且减少ROS的分泌,降低细胞凋亡率,降低Bax,Caspase-3和Caspase-9的表达量,增加Bcl-2的表达量(P0.05,P0.01)。结论:在ox-LDL诱导损伤的HUVECs模型上,三黄泻心汤活血化瘀优势方具有抑制细胞凋亡,减轻炎性反应和抗氧化的作用,可能与抗动脉粥样硬化有密切关系。     

Sinomenine suppresses TNF-alpha-induced VCAM-1 expression in human umbilical vein endothelial cells

Sinomenine (SN), an alkaloid prepared from the root of Sinomenium acutum Rehd. Et wils, is used to alleviate the symptoms of rheumatism in Chinese medicine. In the present study, the potential inhibition of TNF-alpha-induced VCAM-1 expression on human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) was evaluated in vitro. HUVECs were isolated from freshly collected umbilical cords. Positive controls were stimulated with TNF-alpha, omitting SN. Negative controls were cultured omitting TNF-alpha and SN. Experimental groups were co-cultured with TNF-alpha and SN at different concentrations (0.25, 0.5, and 1.0 mol/L), or TNF-alpha and Dexamethasone (Dex) at a concentration of 1.0 x 10(-6) mol/L. Cells were harvested after culturing with the above drugs for 12 h. VCAM-1 mRNA expression was detected by real-time quantitative PCR, and VCAM-1 expression was detected by flow cytometry. The experimental data indicated that VCAM-1 mRNA and VCAM-1 were induced by TNF-alpha. The relative VCAM-1 mRNA expression decreased in the experimental groups (p<0.05). Concentrations of SN at 0.5 and 1.0 mol/L inhibited expression of VCAM-1 (p<0.05). SN at concentration of 0.25 mol/L and Dex at concentration of 1.0 x 10(-6) mol/L did not show an inhibitory effect on VCAM-1 expression in TNF-alpha-induced HUVECs. Our preliminary data indicates that SN has an inhibitory effect in vitro on TNF-alpha-induced VCAM-1 expression at both mRNA level and protein level in HUVECs, and suggests that SN may be a novel method of immunotherapy for rheumatic carditis or rheumatic heart disease.     

鲜姜有效部位对单核细胞趋化蛋白和黏附分子表达的影响

目的：研究鲜姜有效部位对离体培养的血管内皮细胞与单核细胞的黏附力及对单核细胞趋化蛋白和黏附分子表达的影响,探讨其保护血管内皮细胞的作用机制。方法：采用过氧化氢建立离体培养的血管内皮细胞(ECV-304)氧化应激损伤模型,取健康大鼠每日灌服不同剂量的鲜姜有效部位(200,400,800 mg·k^g-1)或阳性对照药洛伐他汀(40 mg·kg^-1),取含药血清作为受试药物,用孟加拉玫红染色法测定单核细胞与内皮细胞的黏附力；逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定细胞内细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子(VCAM-1)以及单核细胞趋化蛋白(MCP-1)的mRNA表达水平；酶联免疫吸附法(ELISA)测定MCP-1蛋白表达水平。结果：鲜姜有效部位能够显著降低内皮细胞与单核细胞的黏附力,并减低受损的血管内皮细胞表达ICAM-1,VCAM-1及MCP-1。结论：鲜姜有效部位可以降低由氧化损伤所引起的ECV-304细胞过度表达ICAM-1,VCAM-1及MCP-1,阻止单核细胞向内皮细胞黏附,从而保护血管内皮细胞免受损伤。     

中药脑心通对血管内皮细胞一氧化氮和内皮素-1的影响

目的 观察脑心通对氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)分泌量的影响.方法 以培养HUVEC作为靶细胞,在内皮细胞培养基中加入Ox-LDL(50 mg/L)制备细胞损伤模型,并以不同浓度脑心通含药血清预先进行干预,分别采用硝酸还原酶法和放免法检测细胞上清液中的NO及ET-1的含量.结果 Ox-LDL作用HUVEC 24h后,HUVEC上清液中NO含量明显降低,而ET-1的含量明显升高,均明显高于正常对照组(P＜0.05);而预先加入脑心通含药血清或阿托伐他汀药液组NO含量明显升高,且在加入步长脑心通含药血清组,这种作用在一定剂量范围内随药物剂量的增加而增强(P＜0.05).结论 步长脑心通能够通过促进内皮细胞NO的合成与释放从而发挥对血管内皮细胞的保护作用,有利于减轻或抑制动脉粥样硬化的形成与发展.     

Effects of Wenxiao II decoction on the expression of MCP-1 and VCAM-1 in atherosclerotic rabbits

[OBJECTIVE]:To observe the effects of different doses of Wenxiao Ⅱ Decoction on the expression of monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) in an experimental model of atherosclerosis in rabbits and to explore the mechanism by which it alleviates atherosclerosis.[METHODS]:Sixty 3-4 month-old New Zealand rabbits of both sexes were randomly divided into six groups:simvastain;model;blank;and high-dose,mid-dose,and low-dose Wenxiao Ⅱ Decoction groups.Except for those in the blank group,all rabbits were fed a high-cholesterol diet.Carotid atherosclerosis was established by balloon-induced injury to the endothelium of the carotid artery in conjunction with consumption of a high-cholesterol diet.After 8 weeks,all rabbits were killed to evaluate the expression of MCP-I and VCAM-I by immunohistochemical staining.[RESULTS]:Expressions of MCP-1 and VCAM-1 were significantly decreased in all groups except the blank group compared with the model group (P＜0.05).When compared with the simvastain group only variation of MCP-1 expression in low-dose group was not appreciable,and the differences were indistinct (P＜0.05).When comparing among Wenxiao Ⅱ Decoction groups,MCP-1 expression in the mid- and high-dose groups was significantly lower than that seen in the low-dose group (P＜0.01),but there were no differences among three dosage groups with respect to VCAM-1 expression (P＞0.05).[CONCLUSION]:These data suggested that high,mid,and low doses of Wenxiao Ⅱ Decoction can inhibit the expression of MCP-1 and VCAM-1,which may prevent the formation of or stabilize atherosclerotic plaques.There may be a direct relationship between the dosage of Wenxiao Ⅱ Decoction and its therapeutic efficacy.     

土茯苓对白细胞介素-1诱导的血管细胞粘附分子-1表达的影响

目的探讨土茯苓对白介素-1(IL-1)诱导的血管内皮细胞表面的血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)表达升高的保护作用。方法以原代培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为研究对象,采用中药血清药理学方法、免疫荧光染色、流式细胞仪等技术,以平均荧光强度代表细胞VCAM-1水平。结果IL-1刺激后可升高HUVECs的平均荧光强度(P<0.001),土茯苓含药血清组的平均荧光强度明显低于空白血清组(P<0.05或P<0.01)。结论土茯苓可抑制HUVECs表达VCAM-1。     

基于抗炎和氧化应激角度研究黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠作用机制

目的：研究黄连解毒汤（HuanglianJiedu Decoction,HJD）对动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）大鼠肝匀浆中氧化低密度脂蛋白（Ox-LDL）、单核细胞趋化蛋白（MCP-1）以及血管细胞粘附分子（VCAM-1）含量及丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响。方法：雄性SD大鼠,随机分为6组（每组10只）,分别为正常对照组、模型组、阳性对照组（洛伐他汀）及低、中、高3个剂量HJD组。正常对照组喂以普通饲料,其余各组喂以高脂饲料,同时定期注射维生素D3,至第3周开始,每天灌胃给药1次,共8周,直至取材。结果：与正常对照组比较,造模后,肝匀浆MCP-1、VCAM-1、Ox-LDL含量显著升高（p<0.05）,给药后,阳性对照组和HJD低、中剂量组上述指标显著下降（p<0.05）,HJD高剂量组MCP-1和VCAM-1含量极显著下降（p<0.01）;肝匀浆MDA含量显著上升,给药后,阳性对照组和HJD低剂量组显著下降（p<0.05）;SOD含量显著下降,给药后,阳性组和高剂量组显著上升（p<0.05）。结论：黄连解毒汤对AS大鼠具有一定干预作用,其作用机制可能与抗炎和抗氧化反应有关。     

青蒿琥酯对脂多糖致血管内皮细胞活化及损伤的保护作用

目的观察中药青蒿提取物青蒿琥酯(artesunate,AR)对脂多糖(lipololysaccharide ,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)活化及损伤状态下的保护作用及相关机制．方法建立人脐静脉内皮细胞培养,细胞生长至融合状态后分别加入LPS及不同浓度的AR(0．04mg／L、0．2mg／L、1mg／L、5mg／L及20mg／L)共同孵育24h,ELISA方法检测培养上清中血管假性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)含量,Western blot法检测细胞间黏附分子(ICAM—1)蛋白表达,原位杂交方法检测肿瘤坏死因子(TNFα)mRNA表达结果暴露于1ug／ml LPS后,HUVECs的vWF及ICAM1表达较对照组明显增加,加入AR后,随AR浓度增加明显下调LPS升高的vWF及ICAM—1表达,至AR为1mg／L时,其vWF与ICAM—1表达与LPS组比较差异均有显著性(P＜0．05)。AR抑制LPS升高的vWF及ICAM-1表达呈一定的浓度依赖方式．原位杂交显示在AR0．2mg／L及1mg／L时明显下调TNFα mR—NA表达,与LPS组比较差异有显著性(P＜0．05,P＜0．01)、结论青蒿琥酯对脂多糖诱导的HUVECs的活化及损伤有保护作用,可能与AR抑制TNFα mRNA表达有关。     

皮炎消净饮Ⅱ号联合窄谱UVB照射治疗血虚风燥型特应性皮炎的临床及免疫组化研究

目的:观察皮炎消净饮Ⅱ号联合窄谱UVB照射对血虚风燥型特应性皮炎(AD)的临床疗效,及对AD患者治疗前后皮损局部ICAM-1和VCAM-1表达的调控,探讨AD的发病机理及临床意义。方法:采用皮炎消净饮Ⅱ号联合窄谱UVB照射治疗29例血虚风燥型AD患者,使用SCORAD积分系统,对治疗前后AD皮损及临床严重度进行评估,同时采用SABC免疫组化法观察治疗前后AD患者皮损局部ICAM-1和VCAM-1阳性面积、平均光密度、总光密度的表达情况。结果:29例AD患者基愈6例(20.69%),显效16例(55.17%),有效7例(24.14%),无效0例,总有效率为75.86%。AD患者治疗前后皮损中ICAM-1及VCAM-1的阳性表达均显著高于正常对照组(P0.01);治疗后AD患者皮损中ICAM-1及VCAM-1的阳性表达均明显下降(P0.05)。结论:皮炎消净饮Ⅱ号联合窄谱UVB照射治疗血虚风燥型AD,疗效确切、安全性高,其可能机制是通过抑制炎症因子的释放,调节ICAM-1、VCAM-l在局部皮损中的表达,从而抑制细胞间的黏附及炎症细胞的聚集,达到抗炎及免疫调节的目的。     

蛇葡萄素对免疫细胞的趋化作用

目的:观察蛇葡萄素在一定浓度下对中性粒细胞和单核细胞的趋化作用。方法:分别与趋化因子IL-8、MCP-1作对照,在琼脂糖中进行化学增活和化学趋化实验。结果:蛇葡萄素在25.6μg/m、l51.2μg/m l浓度下,具有显著诱导中性粒细胞和单核细胞产生趋化的作用。浓度为25.6μg/m l的蛇葡萄素与150 ng/m l IL-8或50 ng/m l的MCP-1的增活效应无显著差异(P>0.05)。浓度为12.8μg/m l的蛇葡萄素的趋化效应强于150 ng/m l的IL-8或100 ng/m l的MCP-1(P<0.05)。蛇葡萄素与IL-8及MCP-1对中性粒细胞和单核细胞的趋化作用均存在协同作用(P<0.05)。结论:蛇葡萄素对中性粒细胞和单核细胞均有化学增活和化学趋化效应,且在对免疫细胞的化学增活方面,蛇葡萄素与IL-8及MCP-1均存在协同作用。