增殖细胞核抗原反义寡核苷酸对裸鼠肝癌生长的影响

目的 探讨增殖细胞核抗原（PCNA）反义寡核苷酸对裸鼠人肝癌生长的抑制作用。方法 接种传代培养的人肝癌细胞于裸鼠皮下,接种后24h内局部注射PCNA反义寡核苷酸进行治疗。观察裸鼠的体重变化、瘤体大小,计算抑瘤率。HE染色观察肝癌组织结构和细胞形态改变。结果 PCNA反义寡核苷酸治疗组裸鼠肝癌的生长受到抑制,抑瘤率为72．8％。瘤重、肿瘤体积明显小于正义寡核苷酸治疗组及对照组。镜下见PCNA反义寡核苷酸治疗组肝癌细胞部分细胞形态呈梭形,核分裂相较少见,细胞的异型性较小。结论 PCNA反义寡核苷酸能显著抑制裸鼠肝癌的生长。     

增殖细胞核抗原在人肝癌组织的表达及临床意义

目的：观察增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在肝癌组织中的不同表达,探讨ＰＣＮＡ与肝癌生物学行为之间的关系,评价ＰＣＮＡ可否作为一个新的客观预测肝癌发生、发展、转移及预后的可行生物学指标。方法：采用鼠抗人ＰＣＮＡ单克隆抗体,可８３例原发性肝细胞癌,９例胆管细胞癌,１１例转移性肝癌标本进行了ＡＢＣ免疫组化染色,以Ｘ＾２检验、ｔ检验、秩和检验及ｌｏｇ ｒａｎｋ检验对结果做统计分析。结果：在原发性肝细胞癌、胆管细胞癌、转移性肝癌,ＰＣＮＡ阳性表达率分别为８７．９５％、７７．７７％、８１．８２％。ＰＣＮＡ阳性表达与原发性肝细胞癌的病理分级及血清ＡＦＰ明显相关,但与原发性肝细胞癌病人性别、年龄及ＨＢｓＡｇ是否阳性无关。结论：ＰＣＮＡ的表达与原发性肝细胞癌的临床病理生物学行为密切相关,ＰＣＮＡ有望成为预测肝癌发生、发展的生物学指标     

反义技术封闭增殖细胞核抗原对骨肉瘤细胞生物学行为的影响

为探讨用反义技术治疗骨肉瘤的可能性，将针对增殖细胞核抗原(PCNA）mRNA的不同剂量的反义寡核苷酸（ASODN）导入人骨肉瘤Saos-2细胞株，用^3H-TdR掺入法，免疫组化及双层软琼脂培养法检测其对肿瘤细胞增殖。PCNA表达及成瘤能力的影响。结果表明，ASODN能显著抑制Saos-2细胞增殖及PCNA表达，抑制作用呈剂量依赖性，30μmol/L浓度即可完全抑制PCNA表达，软琼脂培养无集落形成。表明通过反义技术抑制PCNA基因表达可对骨肉瘤细胞恶性表型产生逆转作用，开辟了骨肉瘤基因治疗的新途径。     

增殖细胞核抗原和血管内皮生长因子反义核酸基因治疗肝癌的实验研究

选择增殖细胞核抗原 (PCNA)和血管内皮生长因子(VEGF)作为靶基因 ,设计针对 PCNA m RNA和 VEGFm RNA的两种反义核酸作用于人肝癌细胞株及裸鼠肝癌模型 ,观察人肿瘤细胞增殖情况及生物学行为的变化 ,及对裸鼠致瘤的抑制效应。1.增殖细胞核抗原反义核酸抑制人肝癌细胞体外增殖的影响目的　根据 PCNA c DNA 序列设计合成与 PCNAm RNA AU G起始密码子后的 18位碱基序列互补的 PCNA反义寡核苷酸 ,作用于人肝癌细胞株 ,观察对肝癌细胞体外增殖的影响及生物学特性的改变。　方法　利用体外培养技术 ,通过细胞生长曲线测定、MTT…     

原位杂交技术检测增殖细胞核抗原反义寡脱氧核苷酸对BIU—87细胞体外增殖的影响

运用原位杂交技术检测脂质体介导增殖细胞核抗原（PCNA）反义寡脱氧苷酸抑制人膀胱癌细胞BIU－87 PCNA mRNA的表达水平。结果表明脂质体介导PCNA反义寡脱氧核苷酸处理组中BIU－87细胞PCNA mRNA的表达水平明显低于对照组。结果提示脂质体介导PCNA反义寡脱氧核苷酸可抑制人膀胱癌细胞BIU－87体外增殖活性,其抑制作用可通过阻断PCNA蛋白表达来实现。     

原位杂交技术检测增殖细胞核抗原反义寡脱氧核苷酸对BIU-87细胞体外增殖的影响

运用原位杂交技术检测脂质体介导增殖细胞核抗原(PCNA)反义寡脱氧核苷酸抑制人膀胱癌细胞BIU-87PCNA mRNA的表达水平.结果表明脂质体介导PCNA反义寡脱氧核苷酸处理组中BIU-87细胞PCNA mRNA的表达水平明显低于对照组.结果提示脂质体介导PCNA反义寡脱氧核苷酸可抑制人膀胱癌细胞BIU-87体外增殖活性,其抑制作用可通过阻断PCNA蛋白表达来实现.     

人胚胎胰腺增殖细胞核抗原的表达

探讨不同胎龄中人胚胎胰腺内、外分泌部细胞的增殖水平 ,将 3 0例 8～ 3 7周人胚胎胰腺分成四组 ,A组 8～ 14周 8例 ,B组 15～ 2 1周 8例 ,C组 2 2～ 2 8周 8例 ,D组 2 9～ 3 7组 6例 ,分析增殖细胞核抗原 (PCNA)表达水平。胚胎 8周时 ,可见由单层柱状上皮围成的原始胰管 ,并向外突出 ,PCNA阳性率达 99%。在 9～ 14周的胎胰中 ,内、外分泌部PCNA阳性率分别为 (3 1.6± 4.1) %、(90 .6± 6.9) % ;15～ 2 1周的胎胰中内、外分泌部PCNA阳性率分别 (2 0 .0± 8.6) %、(4 3 .0± 14 .0 ) % ;2 2～ 2 8周胎胰中内、外分泌部阳性率分别为 (2 9.0± 7.8) %、(60 .2± 10 .0 ) % ;胚胎 2 9～ 3 7周中内、外分泌部PCNA阳性率分别为 (3 5 .1± 15 .4) %、(5 8.5±11 1) % ;各胎龄段胰腺外分泌细胞PCNA的阳性表达均显著高于内分泌细胞 (P <0 .0 0 1) ,胚胎发育早期阶段 (9～ 14周组 )外分泌细胞PCNA的阳性表达明显高于其它胎龄 (P <0 .0 0 1)。胚胎发育晚期阶段 (2 9～ 3 7周 )内分泌部PCNA阳性率均高于其它胎龄组。结论 :在胚胎发育过程中胰腺外分泌部细胞增殖水平高于内分泌部 ,随着胎龄的变化 ,胰腺内、外分泌细胞的增殖水平也发生了变化     

反义c—myc,增殖细胞核抗原基因片断抑制血管平滑细胞相关基因表达

目的 研究有效的防治血管术后狭窄的方法,以及应用反义ｃ－ｍｙｃ,增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）基因片断来封闭其相应基因表达的可行性。方法 设计并合成ｃ－ｍｙｃ,ＰＣＮＡ正义,反义及四个碱基错配的反义寡核苷酸,经体外稳定性检测和细胞转染实验证实其有效性后,分别作用于体外培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）,应用逆转录ＰＣＲ半定量测定及计算机图像分析的方法,春对ｃ－ｍｙｃ、ＰＣＮＡ基因表达的影响。结果 设计     

Stathmin基因反义核酸对人成骨肉瘤细胞系的生长抑制作用

目的　探讨 Stathmin基因的反义核酸 (AS- ODN)对人成骨肉瘤细胞系的生长抑制作用 ,并观察与化疗药物合用后的协同作用 .方法　以高表达 Stathm in的人成骨肉瘤细胞系 SOSP- 96 0 7为靶细胞、反义 Stathmin(AS- ODN)为阻断剂 ,通过 MTT试验观察 AS- ODN对成骨肉瘤细胞的生长抑制作用及与紫杉醇 (PTX)的协同作用 ,流式细胞仪分析细胞增殖周期的影响 .结果　 AS- ODN及 AS- ODN与 PTX联合应用均明显抑制成骨肉瘤细胞的生长 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) .SOSP- 96 0 7在 AS- ODN作用下 ,细胞分裂阻滞在分裂期的中期 ,并诱导细胞发生凋亡 .结论　 Stathmin基因的反义核酸(AS- ODN)对成骨肉瘤细胞的生长可能起十分重要的作用 ,它有望成为成骨肉瘤治疗的新靶点 ,与抗癌药联合应用有协同作用     

增殖细胞核抗原与妇科肿瘤

增殖细胞核抗原在细胞增殖周期中有着重要作用，在许多肿瘤恶变中发现增殖细胞核抗原高表达，本文就增殖细胞核抗原与妇科肿瘤的临床分期、组织分级及预后等方面的关系做一综述。1增瘤细胞核抗原增殖细胞核抗原（ProliferatingCellnuclearanti－genpoNA）是一种非组核蛋白，在核内合成，其分子量33－36KD之间，人类PCNA基因定位于第20对染色体，由5个内含子与6个外显子相互分隔构成，内含子间，内含子与外显子间存在大量复序列，5’一端侧翼有促进子活性，其mRNA为1．3kb，PCNA完整的CDNA已被克隆，编码区含786个氨基酸，其中酸性…     

PCNA的反义寡聚核苷酸抑制子宫颈癌HeLa细胞的研究

目的　检测脂质体介导增殖细胞核抗原 (PCNA)反义寡聚核苷酸抑制子宫颈癌细胞体外增殖活性效果。方法　应用细胞生长曲线和MTT比色法检测细胞增殖活性 ,并采用免疫组织化学方法 (SABC法 )检测PCNA蛋白的表达。结果　反义寡聚核苷酸处理组细胞与对照组比较生长曲线差异有显著性 ,增殖显著受抑 (P <0 0 5 ) ,PCNA蛋白表达完全抑制。而正义寡聚核苷酸组则无此作用 (P >0 0 5 )。结论　提示PCNA反义寡聚核苷酸可以显著抑制子宫颈癌细胞体外增殖活性 ,其抑制作用可能通过阻断PCNA蛋白表达实现     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸体外抑制皮肤血管瘤内皮细胞的增殖

目的 观察血管内皮生长因子（VEGF）反义寡核苷酸对皮肤血管瘤内皮细胞体外增殖及生物学特性的影响,并探讨其机制。方法 体外培养皮肤血管瘤内皮细胞;脂质体介导VEGF反义寡核苷酸进行转染;MTT法观察其对内皮细胞生长的抑制;免疫细胞化学技术检测VEGF的蛋白表达;流式细胞仪分析细胞周期变化。结果 VEGF反义寡核苷酸作用后的内皮细胞生长明显受到抑制,作用后48hVEGF蛋白表达明显下降,细胞周期中S期细胞数明显减少,并于72h后抑制效应逐渐减弱。结论 VEGF反义寡核苷酸能显著抑制皮肤血管瘤内皮细胞的生长,其机制是抑制细胞的增殖,而不是促进其凋亡。     

蜂毒素对肝癌细胞BEL-7402的增殖抑制作用

[目的]观察蜂毒素对肝癌细胞BEL-7402的增殖抑制作用。[方法]肝癌细胞BEL-7402体外培养,采用MTT法检测蜂毒素对其增殖抑制作用,流式细胞术测定蜂毒素对细胞增殖核抗原表达和细胞周期的影响。[结果]蜂毒素体外能够抑制BEL-7402肝癌细胞的增殖活性;并抑制细胞增殖核抗原的表达,呈剂量依赖性;干扰细胞周期,使S期细胞增加,G2/M期细胞减少。[结论]蜂毒素具有抑制BEL-7402肝癌细胞增殖的作用,机制可能与抑制细胞增殖核抗原表达和干扰细胞周期有关。     

反义PCNA基因片断抑制胶质瘤U251细胞增殖

目的 研究反义PCNA基因片断对胶质瘤细胞株U251的细胞增殖的抑制作用。方法 用脂质体介导寡核苷酸转染培养的U251胶质瘤细胞，以MTT法检测细胞增殖活性，RT-PCR、原位杂交和免疫组织化学方法分别检测相关基因和蛋白的表达，通过流式细胞仪检测细胞周期和TUNEL法检测细胞凋亡。结果 不同浓度的反义寡核苷酸对肿瘤细胞的增殖活性均有抑制作用，且有一定的剂量依赖性。PCNA反义寡核苷酸能够诱导胶质瘤细胞凋亡，且与反义寡核苷酸浓度和作用时间有关。结论 反义PCNA寡核苷酸片断能有效地抑制胶质瘤细胞的体外增殖，且能够诱导胶质瘤细胞的凋亡。     

增殖细胞核抗原在各级胃粘膜病变中的表达

目的：探讨增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在不同胃粘膜病变中的表达状况。方法：采用免疫组化ＡＢＣ法，检测１３５例不同胃粘膜病变组织和１５例正常胃粘膜，增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，并对其进行定量分析。结果：ＰＣＮＡ免疫阳性细胞数随病变发展呈上升趋势，其定量分析数据除浅表性胃炎与正常胃粘膜无明显差异外，其余各组间差异显著（Ｐ＜００５），癌组织中，ＰＣＮＡ表达变化与胃癌生物学行为密切相关。结论：ＰＣＮＡ不仅反映细胞增生状况，而且对胃粘膜病变监测和胃癌患者预后判断具有指导意义。     

增殖核抗原和p53蛋白在大肠癌组织中的表达

目的：探讨增殖核抗原（proliferation cell nuclear antigen,PCNA)和p53蛋白表达与大肠癌组织分化的关系。方法,用免疫组织化学方法观察58例大肠癌手术标本PCNA和p53蛋白的表达情况,结果：PCNA阳性着色分布于细胞核内,癌组织PNCA阳性细胞数量明显多于正常肠组织,且分化愈差PCNA阳性的癌细胞数量愈多。P53蛋白阳性占51＝7％（30／58）,但正常大肠组织均呈阴性反应,中,低分化大肠癌P53蛋白阳性率高于高分化的大肠癌,结论：PCNA阳性细胞数和P53蛋白表达与大肠癌的分化程度有关,PCNA阳性标志指数可作为判断大肠癌细胞增殖状态和估计预后的一个可靠参数。     

hTERT反义寡核苷酸对宫颈癌Hela细胞体外增殖的影响

目的观察人类端粒酶催化亚基(hTERT)反义寡核苷酸(ASODN)对Hela细胞增殖和细胞周期的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测ASODN对Hela细胞增值能力及细胞生长的影响，用流式细胞仪检测细胞周期和细胞增殖指数。结果不同浓度的ASODN转染细胞后，均不同程度地影响细胞的生长。ASODN作用细胞后，使细胞周期发生变化，表现为G0／G1期细胞增多，S期细胞减少，细胞增殖指数下降。结论以hTERT基因为靶点的反义寡核苷酸能抑制Hela细胞的体外生长，使细胞阻滞于G0／G1期。     

增殖细胞核抗原反义寡脱氧核苷酸调节脐血CD34+造血前体细胞体外扩增和分化的时间效应

目的:探讨低浓度增殖细胞核抗原反义寡脱氧核苷酸(PCNA-ASODN)调节脐血造血前体细胞体外扩增和分化的时间效应。方法:用免疫磁珠分离技术从新鲜脐带血中分离出CD34 细胞,先后加入低浓度PCNA-ASODN作用于体外培养的CD34 细胞,用流式细胞仪检测培养后各种细胞的数量及细胞周期的变化。结果:实验组脐血CD34 造血前体细胞明显被扩增,但以第72 h组的扩增效应最为显著,其CD34 细胞比例增高[(35.6±1.8)%],而CD34 CD38-细胞数量扩增达(55.1±4.2)倍,且G0/G1期细胞占(49.8±2.5)%。结论:低浓度PCNA-ASODN对脐血CD34 造血前体细胞体外扩增的调节具有时间效应,同时能延缓扩增过程中伴随的细胞分化。