经颅磁刺激对局灶性脑梗死大鼠梗死周边区BDNF表达及神经功能的影响

目的观察经颅磁刺激(transcranial magnetic stimulation,TMS)对局灶性脑梗死大鼠脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)及梗死后神经功能的影响。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型。在不同缺血时间点观察大鼠神经行为评分和脑梗死体积,用免疫组化法检测BDNF阳性细胞数。结果在经颅磁刺激1 d,7 d,14 d,21 d组神经行为评分和脑梗死体积均低于对应时程的MCAO组(P<0.05),二者的2 h组之间的神经行为评分及脑梗死体积无统计学差异(P>0.05);各组缺血半暗带BDNF阳性细胞数均增高,经颅磁刺激组的BDNF阳性细胞数高于对应时程的MCAO组(P<0.05)。结论经颅磁刺激能提高大鼠局灶脑缺血半暗带BDNF的表达水平,促进神经元的修复和神经功能的恢复。     

经颅磁刺激对脑梗死大鼠神经功能恢复及神经微丝蛋白表达的影响

目的研究经颅磁刺激(TMS)对脑梗死大鼠神经功能恢复和神经微丝蛋白(NFP)-200表达的影响。方法SD大鼠60只,采用线栓法制作脑缺血模型,随机分为TMS组与假刺激组(各30只),两组又分为1d、3d、7d、14d和21d组(每组6只)。TMS组大鼠给予TMS共200个脉冲,每天2次,按不同时间组持续相应天数。治疗后给两组大鼠进行神经功能缺损评分,采用免疫组化法检测梗死灶周围区域NFP-200的光密度值。结果治疗14d和21d时,TMS组的神经功能缺损评分(2.67±0.82,1.50±0.55)显著低于假刺激组(3.67±0.52,3.17±0.75)(P<0.05,P<0.01);TMS组大鼠脑梗死灶周围NFP-200的光密度值(1.363±0.045,1.581±0.037)显著高于假刺激组(1.290±0.026,1.473±0.037)(均P<0.01)。结论TMS可以促进脑梗死大鼠神经功能的恢复及脑梗死周围区域NFP-200表达上调。     

行为学训练对海马损伤梗死大鼠齿状回区BrdU和Nestin表达的影响

目的 探讨行为学训练对海马损伤梗死大鼠齿状回区神经干细胞增殖的影响。方法 采用光化学法制成单侧海马损伤梗死模型大鼠72只,随机分为训练组（n=36）和自由活动组（n=36）,每个组设1、7、14、21、28及35d 6个亚组。另设正常对照组36只,与模型组对应分为1、7、14、21、28及35d 6个亚组。训练组大鼠于造模1d后给予水迷宫训练,自由活动组大鼠自由活动,不予水迷宫训练。免疫荧光双标记法观察各不同时间点大鼠海马齿状回区溴脱氧尿嘧啶核苷（Bromodeoxyuridine,BrdU）与巢蛋白（Nestin）的双标记表达情况。结果 正常对照组大鼠海马齿状回区有少量BrdU/Nestin双标记阳性细胞,训练组及自由活动组大鼠在7、14、21及28d海马损伤梗死侧齿状回区BrdU/Nestin双标记阳性细胞数量均有显著增多（P <0.01）;训练组大鼠7、14、21、28d时海马损伤梗死侧齿状回区的BrdU/Nestin双标记阳性细胞数量显著高于自由活动组（P <0.01）;至35d时,训练组及自由活动组大鼠海马损伤梗死侧齿状回区BrdU/Nestin双标记阳性细胞数量与正常对照组无明显差异（P >0.05）。结论 行为学训练能显著增强海马损伤梗死大鼠齿状回区神经干细胞的增殖,促进神经功能恢复。     

MCAO大鼠梗死灶对侧皮层Nogo-A的动态变化及电针干预

目的观察脑缺血再灌注大鼠梗死灶对侧皮层不同时期轴突生长抑制因子Nogo-A的动态变化,并探讨电针对梗死灶对侧皮层Nogo-A的调节作用。方法采用改良Zea Longa法制备左侧大脑中动脉闭塞再灌注模型。采用免疫组织化学染色法及透射电镜技术观察电针对IR后1、7、28d各组大鼠脑梗死对侧皮层轴突再生抑制因子Nogo-A表达及神经元细胞形态、超微结构的影响。结果 (1)电针、假穴位、模型3组大鼠与假手术组大鼠相比,在IR后1d、7d梗死对侧皮层Nogo-A的表达均升高(P<0.05),7d最明显,第28天下降至基础水平(P>0.05);电针组大鼠IR后1d、7d脑梗死对侧皮层Nogo-A的表达均低于同期模型组和假穴位组,差异有统计学意义(P<0.05),但假穴位组与模型组同期对比差异无统计学意义(P>0.05)。(2)电针、假穴位、模型3组各时间点大鼠脑梗死对侧皮层出现神经元细胞胞体肿胀、细胞器水肿、核染色质轻度溶解、毛细血管内皮细胞肿胀、管腔狭窄等轻度病理改变,以缺血再灌注后第7天最明显,28d明显减轻。上述病理改变均较同期脑缺血区病变程度明显减轻,且不足以引起支配侧肢体神经功能缺失。电针组大鼠脑梗死对侧皮层神经元细胞、超微结构的改变均较同期模型组、假穴位组减轻。结论电针治疗脑梗死的有效机制可能与其减轻脑细胞超微结构的损害、下调中枢神经轴突生长抑制因子Nogo-A的表达、诱导神经轴突再生、减轻脑梗死后的远隔损害等密切相关。     

缺氧预处理后骨髓源神经干细胞联合脑源性神经生长因子移植治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的研究

目的 研究缺氧预处理后骨髓源性神经干细胞（source n eural s tem c ells o f b one m arrow,BMSCs- NSCs）联合脑源性神经生长因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）立体定向移植治疗大鼠脑缺 血再灌注损伤的疗效,为高原地区脑梗死的细胞移植治疗提供动物实验基础。 方法 72只SD大鼠随机分为缺氧预处理组和常氧组,每组各36只,缺氧预处理组造模前3 d进行低 氧预处理（hypoxic preconditioning,HPC）。两组均制作大脑中动脉阻塞再灌注（middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R）模型。每组分为3个亚组（BMSCs-NSCs+BDNF组、BMSCs-NSCs组和对 照组,每组各12只）,分别梗死灶同侧尾状核内立体定向移植BMSCs-NSCs+BDNF、BMSCs-NSCs和 DMEM/F12培养基。移植后3 d、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d进行神经功能缺损评分,每个时间点每组 取2只大鼠,断头取脑后行免疫组织化学染色,观察5-溴脱氧尿嘧啶（5-Bromo-deoxyuridine,Brdu）阳 性细胞的迁移路径,行CD133、Nestin、微管相关蛋白2（microtubule-associated protein 2,MAP-2）、兔 抗微管蛋白（β-tubulin）、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）、半乳糖神经酰胺 （Galactosylceramidase,Galc）免疫荧光染色,了解骨髓源性神经球分化情况。 结果 常氧BMSCs-NSCs+BDNF组、常氧BMSCs-NSCs组、缺氧预处理BMSCs-NSCs+BDNF组、缺氧预处 理BMSCs-NSCs组7 d、14 d、21 d、28 d和35 d的神经功能评分均显著低于同组3 d时的神经功能评分。移 植3 d时缺氧预处理对照组神经功能学评分显著低于常氧对照组（P =0.040）;移植7 d时缺氧预处理 BMSCs-NSCs+BDNF组神经功能评分显著低于常氧BMSCs-NSCs+BDNF组（P =0.031）。无论缺氧预处 理组还是常氧组,BMSCs-NSCs+BDNF组CD133、Nestin、MAP-2、β-tubulli n、GFAP、Gal c免疫荧光染色光 密度值（integral optical density,IOD）均显著高于BMSCs-NSCs组（均P＜0.001）;BMSCs-NSCs+BDNF组、 BMSCs-NSCs移植组各检测指标IOD均高于对照组（均P＜0.001）。 结论 大鼠缺氧预处理后BMSCs-NSCs联合BDNF立体定向移植可显著提高BMSCs-NSCs的效果。缺氧 预处理并不能促进外源性BMSCs-NSCs分化,但却能明显改善大鼠神经功能。     

经颅磁刺激对短暂性大脑中动脉闭塞大鼠突触素表达和超微结构改变的影响

目的：研究经颅磁刺激（TMS）对短暂性大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠突触素表达和超微结构改变的影响。方法：TMS组与假刺激组成年大鼠各32只，于MCAO／再灌注（MCAO／R）120min后3周内接受TMS与假刺激处理。在处理不同时间段榆测梗死灶周围突触素（SY38）免疫阳性产物表达，透射电镜下观察刺激21d后缺血侧脑皮质缺血半暗带血管、神经细胞和突触变化。另设正常组6只，假手术组6只，检测脑内SY38免疫阳性产物表达。结果：在刺激1d和3d后，两组SY38免疫阳性物质表达均持续降低，刺激7d后逐渐恢复升高。与假刺激组各对应点相比，TMS组在刺激7d、14d和21d后梗死灶周围SY38免疫阳性物质表达显著增高（P〈0．05）。透射电子显微镜观察提示，刺激21d后TMS组的神经元整体细胞超微结构缺血性损伤好于假刺激组，线粒体肿胀程度较轻，血管周围结构紧密完整，突触界面曲率相对更大，突触间隙变窄，突触后致密物质增厚。结论：长程TMS可以上调脑梗死周围区SY38的表达，减轻缺血周围区毛细血管和神经组织损伤，促进突触超微结构的重建和功能增强，提示TMS有助于促进缺血脑损伤的恢复，促进脑组织神经网络重建和脑可塑性增加是其可能的机制之一。     

早期强制性使用运动疗法对局灶性脑梗死大鼠行为学评分及神经生长因子表达的影响

目的探讨卒中后早期强制性使用单侧肢体对局灶性脑梗死大鼠行为学评分及大脑皮层梗死周围神经生长因子(NGF)表达的影响。方法健康雄性Sprague-Dawley大鼠,用线栓法建立大脑中动脉永久性缺血(MCAO)模型,按照Zea-Longa方法对动物的行为缺陷进行评分,选取1～3分鼠60只,将60只大鼠随机分为2组,健侧前肢固定组30只,未固定组30只,7 d时解除固定,再采用随机区组法分为14 d时处死组和21 d处死组,各组动物在7 d时和处死前行神经功能评分(longa评分);采用免疫组织化学方法观察NGF蛋白的表达,采用原位杂交方法检测NGFmRNA表达。结果固定组与未固定组相比,早期强制性使用运动疗法可以改善患侧肢体14 d及21 d的行为学评分:在梗死周围皮质NGF蛋白和NGF mRNA的表达,固定组14 d时表达均明显高于非固定组．而在21 d时无统计学意义。结论早期强制性使用运动疗法可以改善神经功能的恢复,从基因水平来提高NGF的表达可能为其发挥作用的机制之一。     

重复经颅磁刺激对脑梗死大鼠梗死侧皮质内源性神经干细胞激活、增殖的影响

目的研究重复经颅磁刺激(rTMS)对脑梗死大鼠神经功能恢复及梗死侧皮质内源性神经干细胞激活、增殖的影响。方法将72只雄性SD大鼠随机分为模型组、假刺激组、rTMS组,每组24只,各组根据脑梗死后不同时间点再分为1、7、14、21 d四个亚组,每个亚组6只。采用线栓法制作左侧大脑中动脉闭塞脑梗死模型。rTMS组于动物清醒后当天即给予每天2次、每次30个脉冲的rTMS治疗(频率为0.5 Hz,场强为1.33 T);假刺激组模拟rTMS固定大鼠头部放置线圈但不给予脉冲磁刺激;模型组不给任何治疗。各组在规定的时间点应用改良的神经功能缺损评分(mNSS)进行神经功能评定,治疗结束前24 h腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),应用免疫组织化学技术检测梗死侧皮质巢蛋白(nestin)及BrdU表达阳性细胞的数量。结果 rTMS组脑梗死后7、14、21 d mNSS评分明显低于假刺激组及模型组同时间点大鼠(P<0.05),假刺激组及模型组大鼠脑梗死后不同时间点mNSS评分差异不明显(P>0.05)。脑梗死后1d模型组、假刺激组和rTMS组梗死灶周围皮质均可见nestin及BrdU阳性细胞,7 d达高峰。和假刺激组及模型组同时间点相比,rTMS组7、14、21 d nestin及BrdU阳性细胞数量明显增多,两者比较差异明显(P<0.05)。结论 rTMS能促进脑梗死大鼠神经功能恢复,机制可能与rTMS治疗能促进脑梗死周围内源性神经干细胞的激活及增殖有关。     

人脐血细胞静脉移植对自发性高血压大鼠缺血再灌注脑损伤疗效及其机制探讨

目的探讨人脐血细胞(HUCBCs)静脉移植治疗自发性高血压(SHR)大鼠缺血再灌注脑损伤疗效及其相关机制。方法人脐血细胞体外分离、扩增并以4,6-2胺-2苯基吲哚(DAPi)标记。68只雄性SHR大鼠经线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,并随机分为2组:治疗组和对照组。术后48h后经尾静脉治疗组注射1×106HUCBCs,对照组注射HUCBCs细胞培养基。于移植后3、14、28d,Bederson评分观察大鼠神经功能状况;图像分析法检测计算各组TTC染色脑梗死面积;荧光显微镜对治疗组脑组织DAPi染色阳性细胞计数;免疫组化法检测脑组织内脑源性神经营养因子(BDNF)染色阳性细胞数以及逆转录聚合链式反应(RT-PCR)检测移植后14、28d缺血侧脑组织BDNFmRNA表达水平。结果(1)移植后3d2组Bederson评分无显著差别,移植后14、28d治疗组显著低于对照组(P<0.05)。(2)移植后3d两组脑梗死面积无显著差别,移植后14、28d治疗组显著低于对照组(P<0.05)。(3)治疗组移植后3d梗死侧见少量DAPi阳性染色细胞,移植后14、28d梗死侧DAPi阳性染色细胞增加(P<0.05)...     

脂肪组织源性基质细胞经侧脑室立体定向移植治疗大鼠局灶性脑缺血的实验研究

目的探讨脂肪组织源性基质细胞(ADSCs)经侧脑室立体定向移植治疗大鼠局灶性脑缺血的机制。方法体外培养、扩增ADSCs,常规细胞免疫化学染色鉴定其种类；细胞移植前3d,加入含BrdU的培养液培养3d。缺血再灌注大鼠模型第4天经侧脑室移植ADSCs,于移植前、移植后第1、7、14、21、28天进行评分。移植后28 d,断头取脑,各组一部分脑片经红四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死体积,另一部分切片用原位TUNEL法检测细胞凋亡；用免疫荧光双标法检测脑源性神经营养因子(BDNF)在有BrdU活性的ADSCs的表达。结果大多数ADSCs呈CD44(间质干细胞特征性标志物)阳性,CD114抗体(单核巨嗜细胞标志物)及CD34抗体(造血干细胞标志物)呈阴性。ADSCs组和对照组神经功能损害评分于脑缺血后21d、28d呈显著性差异(P＜0．01),脑梗死体积无显著性差异(P＜0．05)：免疫荧光双标法检测显示大部分BrdU标记的ADSCs迁移到梗死周边区,ADSCs组细胞凋亡数明显低于对照组(P＜0．01)。结论经侧脑室立体定向移植的ADSCs可能是通过减少梗死周边区细胞的凋亡促进大鼠局灶性脑缺血的神经功能恢复。     

Quantitative measurement of cerebral blood flow and cerebral blood volume after cerebral ischaemia

CBF obtained by the hydrogen clearance technique and cerebral blood volume (CBV) calculated from the [14C]dextran space were measured in three groups of rats subjected to temporary four-vessel occlusion to produce 15 min of ischaemia, followed by 60 min of reperfusion. In the control animals, mean CBF was 93 +/- 6 ml 100 g-1 min-1, which fell to 5.5 +/- 0.5 ml 100 g-1 min-1 during ischaemia. There was a marked early postischaemic hyperaemia (262 +/- 18 ml 100 g-1 min-1), but 1 h after the onset of ischaemia, there was a significant hypoperfusion (51 +/- 3 ml 100 g-1 min-1). Mean cortical dextran space was 1.58 +/- 0.09 ml 100 g-1 prior to ischaemia. Early in reperfusion there was a significant increase in CBV (1.85 +/- 0.24 ml 100 g-1) with a decrease during the period of hypoperfusion (1.33 +/- 0.03 ml 100 g-1). Therefore, following a period of temporary ischaemia, there are commensurate changes in CBF and CBV, and alterations in the permeability-surface area product at this time may be due to variations in surface area and not necessarily permeability.     

Effects of ATP on cerebral circulation--morphological observation of cerebral circulation and cerebral vasculature]

Review was made on the effect of adenosine triphosphate, 1.0-3.0 mg/kg intravenously, on the cerebral circulation and the presence of the dilating action on the cerebral blood-vessels in cats. 1. The group of the normal intra-cranial pressure showed, as reported previously, the transient hypotension and its complicated decrease of cerebral blood-circulation at the initial period for 30-100 check, then demonstrating the increase of cerebral blood-flow for 200-1000 check. Its increased volume and duration were dose-dependent. 2. The group of the loaded intracranial pressure of 20-30 mmHg (slightly elevated group) showed the increase of cerebral blood-flow, like the group of the normal intracranial pressure. However, the effect of ATP showed the decrease or disappearance in accordance with the elevation of the loaded pressure. 3. Cerebral vasodilating effect of ATP was promptly observed after the administration, and its degree was 30-50% in photographical observation. 4. Increasing effect on cerebral blood-flow and cerebral vasodilating action of ATP were similar in the pattern to that of vasodilators such as papaverine hydrochloride.     

貌似脑瘤的脑型血吸虫病15例临床分析

目的 探讨脑瘤型脑血吸虫病的临床及MRI的特点.方法 对收治的15例脑瘤型脑血吸虫病的临床资料、实验室检查及MRI资料进行回顾性分析.结果 均为慢性脑型血吸虫病肉芽肿型,表现为脑瘤型.脑瘤型脑血吸虫病的MRI表现具有特征性.结论 脑瘤型脑血吸虫病的MRI易误诊为肿瘤,应结合实验室及影像学检查综合分析.     

Regional cerebral blood flow correlates of aphasia outcome in cerebral hemorrhage and cerebral infarction

The relationship between recovery from aphasia and regional cerebral blood flow (CBF) was compared in 87 patients, 44 with cerebral hemorrhage and 43 with non-embolic cerebral infarction. CBF values correlated poorly with aphasia outcome in patients with cerebral hemorrhage whereas a tight correlation was demonstrated in patients with non-embolic cerebral infarction. A marked variability of CBF values in the acute and subacute stage might account for the poor correlation between CBF and aphasia outcome in patients with cerebral hemorrhage. On the other hand, a sharp discrimination was achieved between those with a good recovery from aphasia and those with a poor recovery by the dimensions of the hematoma on CT. In non-embolic cerebral infarction, a relative frontal ischemia was associated with motor aphasia while a relative temporal ischemia was associated with sensory aphasia. This dichotomy was not demonstrated in the regional CBF values in patients with cerebral hemorrhage.     

重症脑梗死脑血流动力学的动态观察

目的:动态观察重症脑梗死脑血流动力学变化的特征和规律。方法:对42例急性重症脑梗死患者进行连续7天的TCD检测,20例正常人TCD检测数据作为正常组。结果:急性重症脑梗死患者脑血流速度减慢。血管阻力参数值(Pl、Rl)增大,病程的3～5天各指标变化达高峰。结论:根据脑血流动力学的特征性改变,表明重症脑梗死在病程早期就有不同程度的缺血性脑水肿发生,进展迅速,多在病程的3—5天达高峰:TCD用于床旁连续监测,可通过动态观察TCD参数变化,评价颅内压变化、判断预后。