眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑皮层组织FADD表达的影响

目的观察眼针对脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型大鼠大脑皮层组织中FADD的表达,探讨眼针治疗脑损伤的作用机制。方法健康雄性SPF级Wistar雄性大鼠,随机分为正常组、假手术组、CIRI模型组和眼针组。CIRI模型组和眼针组采用改良的线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MACO)再灌注动物模型。RT-PCR、免疫组化及Western印迹方法检测大鼠缺血侧脑皮层FADD的mRNA和蛋白表达的变化。结果与正常组及假手术组比较,模型组大鼠缺血侧脑皮层FADD mRNA和蛋白水平均显示出高表达(P<0.01),眼针组同模型组相比,FADD mRNA和蛋白表达则下调(P<0.05)。结论眼针抑制脑皮层组织中FADD的表达,可能是眼针治疗CIRI的主要作用机制之一。     

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑皮层组织TLR4表达的影响

目的 探讨眼针对脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型大鼠脑组织中TLR4蛋白表达的影响及作用机制.方法 健康雄性SPF级Wistar大鼠60只,随机分为正常组、假手术组、CIRI模型组和眼针组.CIRI模型组和眼针组采用改良的线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MACO)再灌注动物模型.RT-PCR及免疫组化方法检测大鼠缺血侧脑皮层TLR4 mRNA和蛋白表达的变化.结果 与正常组及假手术组比较,模型组大鼠缺血侧脑皮层TLR4 mRNA和蛋白水平均显示出高表达(P＜0.01),眼针组与模型组相比,TLR4 mRNA和蛋白表达则下调(P＜0.05).结论 眼针抑制脑皮层组织中TLR4的表达,可能是眼针治疗CIRI的主要作用机制之一.     

瑞舒伐他汀预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤模型NF-κB表达的影响

目的探讨预防性应用瑞舒伐他汀对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织NF-κB表达的影响。方法 48只SD大鼠按随机化原理分成三组:假手术组、缺血再灌注组(简称对照组)、瑞舒伐他汀组。瑞舒伐他汀组大鼠术前10天予瑞舒伐他汀(5mg/kg)行灌胃治疗,每天一次;假手术组和对照组给予等容积0.9%氯化钠溶液,每天一次。采用改良的Longa氏法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血2h再灌注24h以后行神经功能缺损评分,HE染色法观察大鼠脑组织病理形态;免疫组织化学方法观察核转录因子NF-κB(nuclear factor-ΚB)的表达。结果瑞舒伐他汀组较对照组神经功能缺损评分降低(P0.05)。瑞舒伐他汀组与对照组比较,缺血区变性坏死的神经元数量,空泡化改变及组织间水肿均明显减轻。瑞舒伐他汀组较对照组NF-κB阳性表达细胞数明显减少(P0.01)。结论预防性应用瑞舒伐他汀对大鼠脑缺血再灌注损伤有神经保护作用,其机制可能与抑制炎症反应有关。     

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑皮层组织TLR4、MyD88表达的影响

目的探讨眼针治疗脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型大鼠脑皮层组织中Toll样受体4(TLR4)及髓样分化因子88(My D88)的作用机制。方法健康雄性SPF级Wistar雄性大鼠60只,随机分为正常组、假手术组、CIRI模型组和眼针组。CIRI模型组和眼针组采用改良的线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MACO)动物模型。酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清白细胞介素(IL)-1β水平,Western印迹检测大鼠缺血侧脑皮层TLR4、My D88蛋白表达的变化。结果与正常组及假手术组比较,模型组大鼠血清IL-1β水平明显升高(P0.01),缺血侧脑皮层组织TLR4、My D88蛋白水平均显示高表达(P0.01);眼针组同模型组相比,血清IL-1β水平显著下降(P0.01),缺血侧脑皮层组织TLR4、My D88蛋白表达明显下调(P0.01)。结论眼针抑制脑皮层组织中TLR4、My D88的表达,降低炎症反应,可能是眼针治疗CIRI的主要作用机制之一。     

NF-κB在脑缺血再灌注损伤中的作用

目的探讨NF—κB在脑缺血再灌注时的作用。方法建立大鼠脑缺血再灌注模型，分别于缺血再灌注后2、6、12、24、48h时取脑海马CA1区组织采用HE染色和免疫组化方法测定NF—κBp65、NF—κBp50，原位杂交方法测定IL-6，并进行图像分析。结果与对照组相比，脑缺血再灌注后大鼠脑海马CA1中的NF—κBp65、NF—κBp50蛋白和IL-6mRNA表达明显增强；NF—κBp65、NF—κBp50蛋白与IL-6mRNA表达呈显著正相关（P〈0．01）；与存活神经元数目呈显著负相关（P〈0．05）。结论NF—κB可能参与脑缺血再灌注损伤的病理生理过程。     

眼针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织核因子-κBp65、血管细胞黏附分子-1表达细胞黏附分子影响

目的观察眼针对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织核因子(NF)-κB p65、血管细胞黏附分子(VCAM)-1表达的影响,探讨眼针对急性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法将40只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、眼针治疗组,采用改良线栓法制备局灶性脑缺血(MCAO)再灌模型,于再灌注后24 h进行神经功能缺损评分,运用免疫组化检测法,检测海马组织NF-κB p65、VCAM-1。结果与模型组比较,眼针组大鼠神经功能缺损评分明显下降;海马组织NF-κB p65、VCAM-1蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论眼针能通过下调脑缺血再灌注损伤的NF-κB p65、VCAM-1蛋白水平,发挥神经保护作用。     

NF-κB与心肌缺血再灌注损伤

渐多的研究显示核转录因子（NF）-κB参与心肌缺血再灌注损伤复杂的病理生理过程，本文就此作一综述。     

IKKβ和NF-κB p65在食管癌及癌前病变中的表达

目的探讨IKKβ和NF-κBp65在食管癌和癌前病变组织中的表达及意义。方法采用免疫组化PV-9000法检测正常食管上皮、基底细胞增生、间变和鳞状细胞癌中IKKβ和NF—κBp65的表达情况,以及在食管癌不同分化、淋巴结转移、浸润程度中的表达情况。结果IKKβ、NF—κBp65在不同组织中阳性表达率分别为：正常上皮（19．7％／12．8％）、基底细胞增生（46．7％／43．3％）、间变（76．0％／64．0％）和鳞状细胞癌（84．8％／75．8％）,且随着食管病变进展,阳性表达率明显升高,正常上皮与鳞状细胞癌之间有明显差异（P〈0．05）;IKKβ、NF—κBp65的表达与食管癌组织的淋巴结转移和浸润程度呈正相关（P〈0．05）。结论IKKβ、NF—κBp65在食管癌和癌前病变表达激活,可能与食管癌的发生发展及转移浸润密切相关。     

肝缺血再灌注损伤与NF-κB

核转录因子-κB(Nuclear Factor-Kappa B,NF-κB)是一种重要的转录因子,近年来的研究表明,在炎症反应、免疫反应及细胞凋亡中起重要作用,在肝缺血再灌注损伤过程中亦至关重要。现就NF-κB及其在肝缺血再灌注损伤过程中的作用机制作一综述。     

眼针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织ICAM-1表达的影响

目的观察眼针对急性脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织细胞间黏附因子(ICAM-1)表达的影响。方法 64只SD大鼠随机分为4组:正常组(未处理)、假手术组(同模型组,仅鱼线插入深度1 cm)、模型组(应用线栓法复制脑缺血再灌注损伤大鼠模型,鱼线插入深度1.8～2 cm)和眼针组(模型成功后取肝区、上焦区、下焦区、肾区进行眼针治疗20 min,每日2次),每组16只。于再灌注后3 h进行神经功能缺损评分,采用免疫组化、Western印迹、实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)方法测定脑组织ICAM-1蛋白及mRNA表达的变化。结果眼针治疗后可使大鼠神经功能缺损评分明显下降,并显著降低脑组织ICAM-1蛋白及mRNA表达(P<0.01)。结论眼针具有明显地改善大鼠脑缺血再灌注损伤的作用;其机制与下调脑组织ICAM-1表达有关。     

眼针对脑缺血再灌注损伤大鼠血清ICAM含量的影响

目的观察眼针对脑缺血再灌注损伤大鼠血清细胞间黏附因子(ICAM)含量的影响,探讨眼针对脑缺血再灌注损伤治疗的作用机制。方法应用线栓法复制脑缺血再灌注大鼠模型,采用眼针治疗,于再灌注后3 h2、4 h、72 h进行神经功能缺损评分,采用ELISA方法测定大鼠血清ICAM含量的变化。结果与模型组比较,眼针组大鼠神经功能缺损程度评分明显下降,大鼠血清ICAM含量比模型组降低(P<0.01)。结论眼针具有明显改善大鼠脑缺血再灌注损伤的作用,其机制与降低机体血清ICAM含量有关。     

眼针对急性脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织脑源性神经因子表达的影响

目的 探讨眼针治疗急性脑缺血再灌注损伤的机制.方法 应用线栓法复制急性脑缺血再灌注损伤大鼠模型,采用眼针治疗,于再灌注后3h进行神经功能缺损评分,采用免疫组化、Western印迹、实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)方法测定脑组织脑源性神经因子(BDNF)蛋白及mRNA表达的变化.结果 与模型组比较,眼针组大鼠神经功能缺损评分明显下降,脑组织BDNF蛋白及mRNA表达明显上调(P＜0.05).结论 眼针具有明显改善大鼠脑缺血再灌注损伤的作用;其机制与上调脑组织BDNF表达有关.     

NF-κB和IL-6在局灶脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织中的表达

目的 探讨局灶脑缺血／再灌注损伤（I／R）时核因子-κB（NF-κB）和白介素-6（IL-6）的动态变化。方法 采用线栓法制备大鼠模型，采用免疫组织化学方法检测大鼠脑组织NF-κB和IL-6并进行图像分析。结果 6h开始，皮质区和纹状体区神经细胞NF-κB表达逐渐增强，于再灌注1d达高峰，之后逐渐下降。IL-6表达部位和变化规律与NF-κB相似，但其表达高峰在再灌注2d。大鼠脑组织NF-κB和IL-6二因子水平在缺血损伤后的变化规律具有显著相关性（P〈0．01）。结论 NF-κB和IL-6水平在脑损伤的炎性病理过程中起重要作用。     

缝隙连接阻断剂辛醇对大鼠脑缺血再灌注后核转录因子κB通路的影响

目的探讨缝隙连接阻断剂辛醇对大鼠脑缺血再灌注后NF-κB通路的影响。方法选择健康雄性SD大鼠72只随机分为假手术组、对照组、DMSO组和辛醇组,每组18只,于建立脑缺血模型前30min,辛醇组腹腔注射辛醇溶液,对照组及假手术组腹腔注射等量生理盐水,DMSO组腹腔注射等量5%DMSO溶液。采用改良的神经功能缺损评分(mNSS)进行行为学评估,检测各组脑组织含水量、脑梗死体积,Western blot检测P65、磷酸化P65、IκB-α、磷酸化IκB-α蛋白表达。结果假手术组无脑梗死灶。与假手术组比较,辛醇组、对照组及DMSO组脑组织含水量、mNSS及脑梗死体积明显增加(P0.05),且对照组和DMSO组磷酸化P65和磷酸化IκB-α蛋白表达明显增加,P65和IκB-α蛋白表达明显降低(P0.05)。辛醇组mNSS、脑组织含水量、脑梗死体积、磷酸化P65和磷酸化IκB-α蛋白表达明显低于对照组和DMSO组;辛醇组P65和IκB-α蛋白表达明显高于对照组和DMSO组(72.13±2.01 vs 50.39±1.83、49.97±1.92,68.24±2.23 vs 43.45±1.53、42.56±1.48,P0.05)。对照组与DMSO组mNSS、脑组织含水量、脑梗死体积、P65和磷酸化P65蛋白表达、IκB-α和磷酸化IκB-α蛋白表达比较,无统计学差异(P0.05)。结论缝隙连接阻断剂辛醇能减轻缺血再灌注损伤,机制可能与调节NF-κB信号通路有关。     

脂质体转染NF-κB诱捕物寡核苷酸抑制大鼠肝脏缺血再灌注损伤

目的探讨转染NF-κB诱捕物寡核苷酸(decoy ODN)对肝脏缺血再灌注损伤的影响。方法制作20只肝脏缺血再灌注SD大鼠模型,无序ODN对照组、decoy ODN实验组各10只。阻断肝脏血流后,实验组行脂质体包裹的NF-κBdecoy ODN溶液门静脉注射转染,对照组行脂质体包裹的无序ODN门静脉注射。开放肝脏血流后3h取出肝脏,应用病理学、EMSA和RT-PCR分别检测移植肝脏病理改变、肝脏组织NF-κB转录活性和TNF-αmRNA表达情况。结果实验组肝脏损伤减轻,肝细胞NF-κB转录活性、TNF-α mRNA表达较对照组明显减小或减少(均P0.01)。结论 NF-κBdecoy ODN可有效抑制肝脏细胞NF-κB的激活从而抑制肝脏缺血再灌注损伤。     

益气活血复方芪丹通脉片对缺血/再灌注大鼠心肌中NF-κB表达的影响

目的 探讨益气活血复方芪丹通脉片（QDTMT）对缺血/再灌注(I/R)大鼠心肌中核因子-κB（NF-κB）表达的影响。方法 将SD大鼠48只随机分为6组(n=8),即假手术组、模型组、QDTMT低中高剂量组（0.36、1.08、3.24 g/kg）及恬尔心组（5 mg/kg）。各组均用生理盐水配制的等体积药液灌胃7 d,每日1次。采用冠脉结扎的方法,造成大鼠心肌I/R模型后, 采用Western blot和免疫组化染色法,检测各组大鼠心肌中NF-κB蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组NF-κB的表达显著增多(P<0.01)。与模型组比较,QDTMT各剂量组和恬尔心组NF-κB的表达显著减少(P<0.01)。结论 QDTMT能抑制I/R大鼠心肌中NF-κB蛋白的表达,从而对心肌具有保护作用。     

眼针对大鼠脑缺血再灌注损伤不同时间点海马组织TNF-α表达的影响

目的 观察眼针对大鼠脑缺血再灌注后肿瘤坏死因子-α( TNF-α)蛋白表达的影响,以探讨眼针对缺血再灌注大鼠脑海马区细胞的保护作用及其作用机制.方法 健康SD大鼠,雌雄不拘,设正常对照组、假手术组、模型组、眼针组;采用改良的线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,选取眼穴肝区、肾区、上焦区、下焦区,平刺,进针3 mm,留针20 min;分别于脑缺血再灌注后3、24、72 h处死动物并取材;应用蛋白质印迹法(Western印迹)检测海马组织中TNF-α蛋白的表达.结果 眼针组海马组织TNF-α在脑缺血再灌注后3、24、72 h均较模型组明显降低,差异显著.结论 眼针疗法可以降低脑缺血再灌注模型大鼠海马组织TNF-α的表达,进而抑制由脑缺血再灌注诱导的炎症反应,发挥脑保护作用.     

参附注射液抑制兔再灌注肺组织NF-κB表达的实验研究

目的初步探讨参附注射液改善兔肺保存效果及可能的作用机制。方法16只健康家兔随机分为两组,对照组肺加入棉子糖(30mmol/L)的改良低钾右旋糖酐(LPD)液灌注及保存,实验组则将参附注射液(40mg/L)加入改良LPD液灌注及保存。在4℃保存12h后再灌注1h,测定动脉血氧分压(PaO2)、肺组织的干湿比(W/D)、肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性、NF-κB的表达并观察肺组织病理结构的变化。结果再灌注15min后,两组的PaO2逐渐降低,但实验组PaO2的降低程度明显低于对照组(P0.01);再灌注后,实验组的W/D和MPO也明显低于对照组(P0.01),肺组织NF-κB的表达也明显低于对照组(P0.01),肺组织病理变化较对照组轻。结论参附注射液可抑制再灌注肺组织中NF-κB的表达,减轻肺缺血再灌注损伤,改善肺功能,对兔肺具有保护作用。     

亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤后HSP70 、TNF-α、NF-κB表达及损伤神经细胞凋亡的影响

目的：观察亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤后HSP70（热休克蛋白70），TNF－α（肿瘤坏死因子－α），NF－κB（核蛋白因子－κB）表达及损伤神经细胞凋亡的影响，方法：采用大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，大脑中动脉阻塞2h，再灌注损伤10h，用免疫组织化学法和原位缺口末端标记（TUNEL）法分别检测假手术组，对照组和亚低温组HSP70，TNF－α，NF－κB表达水平和凋亡细胞百分率。结果：亚低温组HSP70表达水平对照组显著升高（P＜0．05），而TNF－α，NF－κB表达水平和凋亡细胞百分率明显低于对照组（P＜0．05），结论：亚低温下调大鼠脑缺血再灌注损伤后TNF－α，NF－κB表达水平和上调HSP70表达水平可能与其抗损伤神经细胞凋亡作用有关。     

头孢曲松钠对局灶性脑缺血大鼠脑组织Fas和NF-κB表达的影响

目的探讨头孢曲松钠对局灶性脑缺血大鼠脑组织Fas和NF-κB蛋白表达的影响。方法选用健康雄性Sprague-Dawley大鼠24只,体质量(280～320)g,随机分为假手术组、单纯脑缺血组和头孢曲松钠预处理组,头孢曲松钠预处理组于术前7 d腹腔注射头孢曲松钠,200 mg·kg-1·d-1。采用线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)的局灶性脑缺血大鼠模型,缺血后24 h后处死大鼠,应用免疫组化法检测大鼠脑组织Fas和NF-κB蛋白的表达。结果与假手术组比较,单纯脑缺血组大鼠脑组织的Fas和NF-κB p65免疫组化阳性细胞数显著增多(P<0.05);与单纯脑缺血组比较,头孢曲松钠预处理组大鼠脑组织的Fas和NF-κB p65免疫组化阳性细胞数明显减少(P<0.05)。结论头孢曲松钠具有抑制局灶性脑缺血大鼠脑组织Fas和NF-κB蛋白表达的作用。