丹参对肝脏保存再灌注中肝窦内皮细胞损伤的影响

我们采用离体大鼠肝脏保存再灌注模型 ,观察肝脏保存再灌注中肝窦内皮细胞结构和功能的改变 ,并探讨丹参的保护作用。一、材料与方法1.肝脏保存液及灌注液成分 :ＢｅｌｚｅｒＵＷ保存液购自美国Ｄｕｐｏｎｔ ｐｈａｒｍａ公司。自制ＫＨ平衡灌注液 :含氯化钠 118ｍｍｏｌ/Ｌ、氯化钾 4.74ｍｍｏｌ/Ｌ、氯化钙 1.2 4ｍｍｏｌ/Ｌ、硫酸镁1.18ｍｍｏｌ/Ｌ、硫酸钾 1.19ｍｍｏｌ/Ｌ、碳酸氢钠 2 4.9ｍｍｏｌ/Ｌ、葡萄糖 5ｍｍｏｌ/Ｌ ,加蒸馏水至 10 0 0ｍｌ,ｐＨ调为 7.4。2 .动物模型及分组 :健康Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠 5 4只 ,体重 2 0 0～ 2 …     

肝脏保存再灌注损伤与粘附分子

自 196 3年 3月 1日 ,Thomas starzl在美国丹佛、科罗拉多大学 ,实施了世界首例临床肝移植手术以来 ,随着手术技能的提高 ,新型免疫抑制剂 (Cs A、FK5 0 6、MMF)和 UW保存液的相继问世 ,肝移植得到迅速发展 ,并成为当今临床上治疗终末期肝病唯一有效的手段。在肝移植过程中 ,肝     

兔肝脏保存——再灌注损伤模型的建立及评价

作者应用导管将受体腹主动脉血液分流至供肝，建立了兔肝脏保存－再灌注损伤模型。并对再灌注前、后供肝及受体肝脏的组织结构及功能、再灌注后供肝血流量及受体血流动力学变化进行了动态观察，结果表明，该模型具有良好的稳定性及重复性，且能准确地反映肝移植时供肝保存－再灌注损伤的病理生理过程。     

再灌注损伤和氧自由基

缺血组织再灌注时产生的氧自由基是缺血性损伤和组织坏死的重要原因。本文综述再灌注时氧自由基产生的各种学说以及为消除其有害作用进行的实验研究,阐述了再灌注损伤的机理、氧自由基的来源及自由基清除剂的作用。对断肢再植后的“无回流现象”作出了可能的解释。     

FK506对肝脏保存再灌注中肝窦内皮细胞损伤的保护作用

目的 探讨他克莫司（FK506）对肝脏低温保存再灌注中肝窦内皮细胞损伤的保护作用。方法 应用离体鼠肝脏保存再灌注模型,测定保存不同的时间后肝脏灌注流出液中内皮素（ET）及丙氨酸转氨酶（ALT）的含量以及透明质酸（HA）的摄取量,光镜及电镜下观察肝窦内皮细胞的形态学改变,比较分析FK506对上述指标的影响。结果 对照组随肝脏保存再灌注时间延长,灌注流出液中ET含量明显升高（P＜0．05）,HA摄取明显降低（P＜0．05）,并伴随ALT活性显著增高（P＜0．05）和肝窦内皮细胞形态学的异常改变;保存液和灌注液中均加入FK506后,上述指标异常变化均明显减轻,其差异有显著性（P＜0．05）。结论 FK506对离体大鼠肝脏肝窦内皮细胞的再灌注损伤有保护作用。     

兔肝脏保存─再灌注损伤模型的建立及评价

作者应用导管将受体腹主动脉血液分流至供肝，建立了兔肝脏保存一再灌注损伤模型。并对再灌注前、后供肝及受体肝脏的组织结构及功能、再灌注后供肝血流量及受体血流动力学变化进行了动态观察。结果表明，该模型具有良好的稳定性及重复性，且能准确地反映肝移植时供肝保存一再灌注损伤的病理生理过程。     

大鼠肝脏缺血再灌注及低温保存过程中氧自由基变化的实 …

目的 观察大鼠肝脏缺血再灌注及低温保存过程中氧自由基的变化。方法 建立大鼠肝脏假手术、热缺血再灌注和原位肝移植模型,分别测定再灌注１ｈ和移植术后２ｈ下腔静脉血中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和血清中指质过氧化物（ＬＰＯ）的变化,并进行组织学观察。结果 术前３０ｍｉｎ静脉注射别嘌呤或灌洗液及保存液中加别嘌呤的实验组大鼠,其全血中ＳＯＤ的活力高于条件相同、但不给予别嘌醇的对照组,ＬＰＯ     

丹参注射液在大鼠肝脏热缺血再灌注损伤中的保护作用

目的：对中成药丹参（RSM）注射液在大鼠肝缺血再灌注损伤（WI/RI）的保护作用机制作了初步研究。方法：采用二次阻断法建立热缺血再灌注损伤的动物模型,观察对照组与丹参组,手术后24小时内各时点的肝功能生化指标ALT、AST的变化情况并应用内参照定量逆转录聚合酶链反应技术（Q-RT-PCR）分析两组间肝脏组织中TNF-α在不同时点的表达变化情况。结果：丹参组和对照组各时点在肝脏生化指标均存在显著差异。丹参组肝脏组织内TNF-α表达明显降低且早于肝功能生化指标的变化。结论：丹参具有防治缺血再灌注损伤的作用,其机制之一是通过降低TNF-α表达并阻断由此引发的一系列级联反应的机理来实现的。     

The role oxygen free radicals and prostaglandins in reperfusion injury to warm ischemic kidneys

Summary The present study was designed to determine whether the administration of superoxide dismutase (SOD) can alleviate ischemic kidney damage and whether there is a relationship between oxygen free radicals and thromboxane (Tx). In 17 dogs, the right kidney was removed and the vascular pedicle of the left kidney was clamped for 75 min. Prior to reperfusion, the ischemic kidney was rinsed with 5 mg SOD and an additional 20 mg SOD was infused systemically. Blood samples were drawn from the renal vein before ischemia and after reperfusion to determine serum levels of thromboxane B₂ (TxB₂). All eight untreated dogs died within 1 week of renal failure, and the nine treated dogs demonstrated transient renal failure, with a significant difference (P<0.001) being found between the two groups. A significant difference (P<0.001) in TxB₂ levels was found in the untreated dogs before and after ischemia and beween the two groups following reperfusion. Animals that are treated with SOD after the ischemic event has occured but before reperfusion exhibit a favorable clinical course in terms of survival and renal function. Tx synthesis in the kidney can be blocked by the administration of SOD.     

大鼠肝脏缺血再灌注及低温保存过程中氧自由基变化的实验研究

目的　观察大鼠肝脏缺血再灌注及低温保存过程中氧自由基的变化。方法　建立大鼠肝脏假手术、热缺血再灌注和原位肝移植模型 ,分别测定再灌注 1h和移植术后 2h下腔静脉血中超氧化物歧化酶 (SOD)、乳酸脱氢酶 (LDH)和血清中脂质过氧化物酶 (LPO)的变化 ,并进行组织学观察。结果　术前 30min静脉注射别嘌醇或灌洗液及保存液中加别嘌醇的实验组大鼠 ,其全血中SOD的活力高于条件相同、但不给予别嘌醇的对照组 ,LPO及LDH的含量低于对照组 ,其各项测定值与假手术组比较 ,差异不显著 ;实验组和假手术组的大鼠肝组织病理改变均轻于对照组。结论　大鼠肝脏缺血再灌注及低温保存过程中氧自由基明显增加 ,并且造成肝脏的损害     

丹参对大鼠离体保存再灌注肝脏IL-10 mRNA的影响

目的：探讨丹参对大鼠离体保存后再灌注肝脏IL-10 mRNA的影响.方法：建立离体大鼠肝脏保存再灌注模型,.应用RT-PCR方法检测UV液、UV液＋丹参保存并再灌注的离体肝脏的IL-10 mRNA表达.结果：丹参保存1 6、24、32 h再灌注的大鼠离体肝脏IL-10 mRNA表达分别为68.55±5.37、49.73±3.74、32.65±2.39;明显高于对照组（37.62±3.3723.70±2.35、1371±1.28）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：丹参能够增加肝脏保存后再灌注IL-10 mRNA表达,对肝脏保存再灌注损伤可能具有防治作用.     

大鼠肝脏缺血-再灌注损伤时齐墩果酸对氧自由基的影响

目的 探讨齐墩果酸(OA)对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤时氧自由基的影响.方法 128只雄性SD大鼠随机分为假手术组(SH组)、缺血-再灌注组(IR组)、羧甲基纤维素钠(CMC-Na组)和OA组.建立70%肝脏缺血-再灌注模型,测定肝脏缺血60 min再灌注0、3、6、12 h后血清ALT活性和肝组织丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)水平.结果 再灌注3、6、12 h,IR组、CMC-Na组、OA组血清ALT活性、肝组织MDA水平分别显著高于SH组(P<0.05),肝组织SOD活性、GSH水平分别明显低于SH组(P<0.05);OA组ALT活性、MDA水平分别较IR组和CMC-Na组明显降低(P<0.05),SOD活性和GSH水平分别较IR组和CMC-Na组显著升高(P<0.05).结论 OA对肝脏缺血-再灌注损伤具有一定保护作用,其抗肝脏缺血-再灌注损伤作用与抑制自由基的生成和释放有关.     

严重烫伤大鼠延迟复苏后多器官损伤机制中的氧自由基作用

将６６只悉生大鼠分为伤前对照组、早期复苏组、延迟复苏组和治疗组，采用ＥＳＲ技术结合传统间接检测手段，观察了伤后８、２４、４８及７２ｈ心、肝、肾及肺组织中的氧自由基（ＯＦＲ）含量变化，同时还对脏器病理形态、动脉血气和血清肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）、乳酸脱氧酶（ＬＤＨ）、ＡＬＴ（曾用ＧＰＴ）、ＡＳＴ（曾用ＧＯＴ）、ＢＵＮ和肌酐（Ｃｒ）含量进行了观察。结果表明，早期复苏组和延迟复苏组各脏器均有ＯＦＲ含量增加，同时均发生了病理形态学改变和动脉血气、血清学指标的异常，且延迟组的上述改变明显重于早期组，经抗氧化剂治疗后改善。提示延迟复苏是脏器ＯＦＲ产生的重要促进因素。     

严重烫伤大鼠延迟复苏后多器官损伤机制中的氧自由基作用

将66只悉生大鼠分为伤前对照组、早期复苏组、延迟复苏组和治疗组,采用ESR技术结合传统间接检测手段,观察了伤后8、24、48及72 h心、肝、肾及肺组织中的氧自由基(OFR)含量变化,同时还对脏器病理形态、动脉血气和血清肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氧酶(LDH)、ALT(曾用GPT)、AST(曾用GOT)、BUN和肌酐(Cr)含量进行了观察。结果表明,早期复苏组和延迟复苏组各脏器均有OFR含量增加,同时均发生了病理形态学改变和动脉血气、血清学指标的异常,且延迟组的上述改变明显重于早期组,经抗氧化剂治疗后改善。提示延迟复苏是脏器OFR产生的重要促进因素。     

The role of oxygen-derived free radicals and the effect of free radical scavengers on skeletal muscle ischemia/reperfusion injury

The aim of this study was to clarify the role of oxygen-derived free radicals and the effect of free radical scavengers on skeletal muscle ischemia/reperfusion injury. Male Wistar rats were divided into a complete ischemia group (C-group) and an incomplete ischemia group (IC-group) and each animal was subjected to 2h of ischemia and 1h of reperfusion. In an attempt to decrease reperfusion injury, the rats were given free radical scavengers either as allopurinol 50 mg/kg for 2 days or as superoxide dismutase 60,000 units/kg plus catalase 500,000 units/kg. Tissue malondialdehyde, a product of lipid peroxidation, was measured as an indicator of free radicals, with higher levels indicating higher concentrations of free radicals. The malondialdehyde level in the gastrocnemius muscle after 1h of reperfusion increased significantly in both groups when compared to the levels before and 2h after ischemia, although there was no significant difference between the two groups. The water content of the gastrocnemius muscle and serum creatinine phosphokinase MM isoenzyme (CPK-MM) in both groups, and GOT in the C-group, increased significantly after 1h of reperfusion when compared the values before and 2h after ischemia. In the C-group, these values were significantly higher than in the IC-group. The administration of free radical scavengers suppressed the increase in malondialdehyde in the gastrocnemius muscle after reperfusion in both groups. The increase in water content and CPK-MM after reperfusion was also suppressed by free radical scavengers in the IC-group, but not in the C-group. These findings suggest that ischemic damage predominates in complete severe ischemia/reperfusion injury, whereas reperfusion injury predominates in incomplete mild ischemia/reperfusion injury.     

乌司他丁对原位肝移植术患者围术期促炎性细胞因子和氧自由基代谢的影响

目的 观察持续输注乌司他丁对原位肝移植术(OLT)患者围术期血浆促炎性细胞因子和氧自由基代谢水平的影响并探讨其作用机制。方法 将18例晚期肝病患者,ASAⅢ-Ⅳ级,择期行OLT手术,随机分为2组。乌司他丁组(U组,n=9):切皮后将乌司他丁20万单位加入100 ml生理盐水,持续静脉输注,之后每4小时重复使用。对照组(c组,n=9):以等容量生理盐水代替。分别于麻醉后切皮前、无肝前期120min、无肝期30min、新肝期5min、新肝期60min和术毕抽取静脉血测定血浆IL-6、IL-8、TNF-α和丙二醛(MDA)浓度。无肝期使用静脉-静脉转流(VVB)。术中吸入氧浓度(FiO2)为100％。连续测定心输出量、混合静脉血氧饱和度及中心静脉血温,监测ECG、CVP、PETCO2、SpO2、桡动脉压、肺动脉压。维持血温不低于35.5℃。结果 C组IL-6和IL-8浓度从无肝前期120 min开始至术毕显著高于切皮前(P<0.05);无肝前期和无肝期TNF-α和MDA水平与切皮前相比差异无显著性(P>0.05),新肝期5 min开始明显高于切皮前水平(P<0.01)。U组各项参数除新肝期5 min IL-6和IL-8水平高于切皮前外,其余时间点与切皮前差异均无显著性(P>0.05),且明显低于C组各相应时间点水平(P<0.05)。结论肝移植围术期持续输注乌司他丁可以抑制IL-6、IL-8和TNF-α等促炎性细胞因子的生成和释放,     

瘦素在肝缺血/再灌注致肾损伤中作用的研究

目的：研究瘦素（Leptin）在肝缺血/再灌注（I/R）后肾组织中的表达变化,探讨其与肝I/R介导的肾损伤的关系。方法：建立大鼠70%肝I/R模型,设立假手术和缺血60min后再灌注60、150、240、360min组,观察肾脏的病理学变化,检测各组血清尿酸、总抗氧化能力,肾Leptin蛋白及其mRNA表达的变化。结果：与假手术组比较,缺血60min/再灌注150min及再灌注240min组血清尿酸显著升高,以再灌注240min升高最为显著;再灌注240min和360min组血清总抗氧化能力显著升高,以再灌注240min升高最为显著;再灌注150、240和360min组肾Leptin蛋白表达显著升高,再灌注60、240、360min组肾LeptinmRNA表达显著升高,而再灌注150min组LeptinmRNA显著降低。病理学观察提示肝I/R早期的肾损伤较重而后期显著减轻。结论：Leptin在肝I/R后肾组织内的表达变化与肾损伤密切相关,提示它可能作为一种保护因子对抗肝I/R介导的肾损伤。     

Direct detection of oxygen free radicals produced in the viscera of burned rats using electron paramagnetic resonance spectroscopy

OBJECTIVE: To detect superoxide anion (O(-)(2)) signals in the heart, liver, lung and kidney tissues after burns. METHODS: Twenty-four male rats were randomized into 4 groups. The rats of experimental groups were immersed in 100 degrees C water for 15 seconds and 25% third-degree burn was created. Thoracotomy or laparotomy was performed at 5, 10, 15, 20 and 30 minutes after burn, and specimens of the heart, lung, liver kidney were obtained for burned rats. The specimens were then preserved in liquid nitrogen for cryo-preservation and detected immediately using EPR. RESULTS: The signals of superoxide O radical appeared in the heart, lung, 1iver and kidney specimens 10-15 minutes after burn. CONCLUSIONS: There is a direct evidence of oxygen free radicals (OFRs) injury to viscera of burned rats between 10-15 minutes after burn.