广东省人群中人嗜T细胞病毒I型感染的血清流行病学…

收集广东省各类人群血清标本２２２４例，用间接免疫荧光法检测人类嗜Ｔ细胞病毒Ｉ型抗体，结果：ＨＴＬＶ－１抗体阳性３５份，总阳性率为１．５７％，其中健康人群血清１８１０份，抗体阳性２３份，阳性率为１．２７％，献血员血清２４８份，抗体阳性１份，阳性率０．４０％，白血病患者血清１０９份，阳性８份，阳性率７．３４％，与健康人群非常显著性差异（Ｐ〈０．０５）；神经系统疾病患者血清５７份，阳性３份，阳性率５．２     

亲和层析纯化精子膜抗原的方法及精子抗体的检测

采用超声波粉碎、NP 40提取与两种互补式免疫亲和层析柱相结合的新提纯方案。结果获得了高纯度精子膜抗原 ,对经两种市售试剂盒检测的阳性标本 36份、阴性标本 2 4份进行检测 ,结果一致 ,正常人血清标本A值≤ 0 0 8。初步临床应用显示不孕症患者中 ,血清阳性率 2 3 5 2 % ,精浆阳性率 7 5 7% ,与郑州华美公司试剂盒的阳性符合率达 10 0 %。     

广东省人群中人嗜T细胞病毒Ⅰ型感染的血清流行病学调查及其与人类疾病的关系

收集广东省各类人群血清标本２２２４份，用间接免疫荧光法检测人类嗜Ｔ细胞病毒Ⅰ型（ＨＴＬＶ－１）抗体，结果：ＨＴＬＶ－１抗体阳性３５份，总阳性率为１．５７％；其中健康人群血清１８１０份，抗体阳性２３份，阳性率为１２７％；献血员血清２４８份，抗体阳性１份，阳性率０４０％；白血病患者血清１０９份，阳性８份，阳性率７３４％，与健康人群比较，有非常显著性差异（Ｐ＜０００５）；神经系统疾病患者血清５７份，阳性３份，阳性率５２６％。     

2005年湛江市、韶关市、汕头市人兽弓形虫感染状况调查

目的了解广东省湛江市、韶关市、汕头市的人兽弓形虫感染情况。方法收集3个地区人、猪、鼠血清，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）间接法检测弓形虫IgG抗体。结果湛江市检测猪血清279份，阳性13份，阳性率为4．66％，检测鼠血清93份，阳性7份，阳性率7．53％；韶关市检测人血清42份，阳性0份，检测鼠血清95份，阳性3份，阳性率3．16％；汕头市检测人血清50份，阳性6份，阳性率为12．00％，检测鼠血清100份，阳性3份，阳性率为4．00％。结论汕头市人群存在弓形虫感染，湛江市、韶关市、汕头市兽类存在弓形虫感染，3个地区的鼠类弓形虫感染率无统计学意义，家鼠、野鼠的弓形虫感染率也无统计学意义。     

解脲脲原体套式（Nested）PCR检测研究

本文报告解脲脲原体（ＵＵ）的套式（ＮＥＳＴＥＤ）ＰＣＲ检测方法。经方法学考核表明，本法的特异性、灵敏度以及试剂的稳定性和对临检标本的顺应性均较好。９３份各种生殖道炎症患者之宫颈拭子标本套式ＰＣＲ检出２１份阳性（阳性率２２．６％），而市售ＰＣＲ试剂盒仅检出１份阳性（阳性率１．１％）。前者阳性检出率明显高于后者（Ｐ＜０．０１）。     

用聚合酶链反应和放射免疫法检测肾移植术后人巨细胞病毒感染

将５０例肾移植术后发热病人的尿标本接种细胞，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测第１代细胞培养上清中的人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ。结果１９例为ＨＣＭＶＤＮＡ阳性，阳性率为３８．００％，用固相放射免疫法（ＲＩＡ）检测ＨＣＭＶ抗原，阳性的有１５例，阳性率为２７．７７％。将５４倒尿标本接种人胎肺二倍体单层细胞，分离到６株ＨＣＭＶ。用ＥＬＩＳＡ检测６５例病人单份血清的ＨＣＭＶ－ＩｇＭ抗体，阳性的有１７例，检测４５例病人双份血清ＩｇＧ抗体，１１例的第２份血清的ＨＣＭＶ－ＩｇＧ抗体滴度比第１份有４倍以上升高。上述结果表明，ＰＣＲ检测结果与ＲＩＡ的检测结果基本符合；病人血清抗体的阳性率与ＰＣＲ检测的阳性率基本符合。     

抗体捕获ELISA法检测特异性抗HBcIgA的实验研究

本文报道了用抗体捕获ELISA检测抗HBcIgA临床应用的初步结果。在检测抗HBcIgA的148份临床血清标本中,58份急性乙肝、32份慢性活肝、9份肝硬化和8份重肝、亚重肝及肝癌的抗HBcIgA阳性率分别为62.1％、63.6％、66.0％和100.0％;9例慢迁肝和32例无症状携带者的阳性率分别为22.2％和0.0％;正常对照组(98例健康献血员)无一例阳性。结果提示:抗HBcIgA与肝细胞损伤程度相关,是临床诊疗和预后判断的有价值的指标。表明本试剂盒具有良好的适用性和可用性。     

6种虫媒病毒蛋白芯片检测方法的建立

目的 建立针对6种虫媒病毒的蛋白芯片检测方法,用以检测流行性乙型脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、登革病毒(1～4型)、西尼罗病毒、西部马脑炎病毒和东部马脑炎病毒的特异性抗体.方法 将病毒特异性抗原作为捕获抗原点样制备蛋白芯片,利用双抗夹心ELISA原理检测血清中的病毒特异性抗体.首先利用免疫兔血清进行特异性诊断抗原的筛选,并对抗体芯片检测条件进行优化,然后采用56份临床疑似的阳性血清标本及阴性对照标本对该方法进行验证,并与常规ELISA方法进行比对.结果 共筛选出11个特异性较好的重组诊断抗原.抗原点样浓度在0.125 ～0.900mg/ml时可获得良好的检测效果,血清检测范围为1:100～1:1000.对26份临床疑似的蜱传脑炎病毒血清标本,22份登革病毒血清标本及8份流行性乙型脑炎病毒临床血清标本的检测结果为:共检测出蜱传脑炎病毒IgG阳性血清标本20份,阳性检出率为76.9％,IgM阳性血清标本17份,阳性检出率65.3％,与ELISA检测符合率分别为96.1％和84.6％.乙型脑炎病毒IgG阳性血清4份,阳性检出率50.0％,IgM阳性血清5份,阳性检测率62.0％,与ELISA检测符合率分别为87.5％和100％.登革病毒IgG阳性血清标本13份,阳性检出率63.6％,IgM阳性血清标本14份,阳性检测率68.1％,与ELISA检测符合率分别为86.3％和90.1％,结果经一致性Kappa检验后,与ELISA检测结果一致性良好.阴性对照血清结果显示检测特异性为100％.结论 本研究建立的虫媒病毒抗体芯片检测方法具有较高的特异性和可靠性,可用于6种虫媒病毒抗体的临床检测.     

猪、羊、鸡抗-HEV抗体流行率调查

目的 探讨猪、羊、鸡群中抗-HEV抗体流行率。方法从新疆、广西、广东、北京和河北收集猪、羊、鸡的血清标本498份，应用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)检测抗-HEV抗体。结果 猪抗-HEV阳性率为67．53％(104／154)，其中新疆4～5个月龄猪血清抗-HEV阳性率为100．00％，广西3个月龄以下仔猪抗-HEV阳性率为36．00％(9／25)，6月龄以上猪阳性率为71．67％(86／120)；新疆108份绵羊血清抗-HEV抗体全部阴性；236份鸡血清标本的抗-HEV阳性率仅为1．27％(3／236)。广东罗定、深圳和广西柳州郊区鸡血清标本中各检测出一份抗-HEV阳性，阳性率分别为4．00％(1／25)、1．49％(1／67)、1．49％(1／67)。北京郊区25份和河北52份鸡血清抗-HEV检测全部阴性。结论 猪、鸡群中存在HEV感染，猪抗-HEV抗体流行率最高。猪和鸡在传播人HEV中的作用值得进一步研究。     

2009年徐州地区疑似肠道病毒感染病例病原学研究

目的了解2009年徐州地区肠道病毒感染引起手足口病情况,为手足口病防控工作提供科学依据。方法采用荧光RT-PCR方法对240例临床诊断为肠道病毒感染的手足口病例中的222例肛拭子和咽拭子标本同时进行EV和EV71、CAl6特异性RNA检测,用ELA方法对其中的114例急性期血清标本进行EV71．IgM抗体检测。同时检测健康儿童254份咽拭子和258份血清标本以及密切接触者咽拭子54份标本。结果240例疑似肠道病毒感染者,总EV感染率为72．50％（174／240）,其中EV71感染率为57．92％（139／240）,CoxAl6感染率为9．17％（22／240）,其他EV感染率为5．42％（13／240）。240例疑似肠道病毒感染者中的222份肛拭子标本EV7l-RNA阳性率为45．94％（102／222）、咽拭子EV71-RNA阳性率为25．68％（57／222）,114份急性期血清中EV71．IgM抗体阳性率为86．84％（99／114）。254份健康儿童咽拭子EV7l-RNA阳性率为1．57％（4／254）,未检出CoxAl6-RNA;258份健康儿童血清标本EV71-IgM抗体阳性率是2．71％（7／258）。密接（医护人员）咽拭子54份,EV-RNA检测均为阴性。结论徐州地区手足口病流行主要由EV71型引起。3岁以下儿童流行期间存在被EV71型隐性感染,并产生IgM抗体。成人即使密切接触传染源也不易被感染EV71。疑似病例急性期血清中EV71-IgM抗体检测阳性率最高（86．84％）,其次为肛拭子EV71（45．94％）和咽拭子EV71（25．68％）的RNA检测阳性率。ELA试剂盒用于EV71型感染的早期诊断,具有操作简单快速经济,值得在基层推广。     

孕产妇和新生儿血清乙肝免疫标志物与HBV-DNA检测结果的比较分析

利用HBV－DNA出现先于血清其它血清学指标理论依据。采用聚合酶链式反应（PCR）对乙肝免疫标志物至少一项改变的200例孕产妇、新生儿血清进行PCR扩增，结果有108份标本HBVDNA阳性，总阳性率为54％。其中HBeAg阳性率83．3％（70／84），HBsAg阳性率48％（24／50），HBeAb阳性率10．5％（2／19），HBsAb9．8％（2／22），可见PCR早期诊断．判断其传染性，有十分重要临床意义。     

两种巨细胞病毒IgG抗体ELISA诊断试剂性能评价

目的对国内两种巨细胞病毒IgG抗体ELISA诊断试剂进行评价。方法用两种试剂对BBI公司的质控盘QTC711,血清转化盘PTC901,BIOMEX公司血清转化盘SCP—CMV-001（RP-003）、SCP—CMV-002（RP-019）,儿童、孕妇和门诊患者2163份标本进行检测,对不一致的样本用DiasorinELISA试剂盒和Mikrogen重组免疫印迹试剂盒进行复测,比较两种试剂的灵敏度、特异性和对不同人群的检测差异。结果A试剂对3个血清转化盘的检出时间均早于B试剂,平均提前25d,与AbbottImxCMVIgG检测灵敏度一致。两种试剂检测孕妇样本607份,8份不一致,总符合率98．68％;门诊样本512份,7份不一致,总符合率98．63％;儿童样本1044份,74份不一致,总符合率92．91％,两试剂对儿童人群的符合率低于孕妇和门诊人群。两试剂对三个人群检测均为阴性的161份样本,和A试剂检测为阳性B试剂检测为阴性的89份样本,用意大利Diasorin公司CMV—IgGELISA试剂复测,A试剂与Diasorin的阳性符合率为100％,阴性符合率为93．06％,总符合率为95．22％;B试剂与Diasorin的阴性符合率为100％,78份阳性未检出,总符合率为68．92％。选择A试剂与Diasorin结果不一致的样本12份,一致的样本6份,用重组免疫印迹复测,其中14份阳性,4份阴性。结论国内A试剂对血清转化盘的检测窗口期较B试剂显著提前。两试剂对孕妇和门诊人群的符合率高于儿童人群。两试剂不符合的样本用进口试剂盒复测,A试剂与进口试剂盒的符合率高于B试剂,显示了较高的灵敏度。     

自制RV－McAb－ELISA试剂盒与进口及国产RV－ELISA试剂盒的比较

将自制的肠道病毒单克隆抗体ＥＬＩＳＡ（ＲＶ－ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ）试剂盒与丹麦Ｄａｋｏ公司生产的及上海市卫生防疫站生产的ＲＶ－ＥＬＩＳＡ试剂盒对８８份粪样中ＲＶ的检测结果进行了比较。以ＰＡＧＥ结果为比较标准，自制试剂盒的灵敏度、特异度及Ｙｏｕｄｅｎ指数分别为９８．３％、９０％、及０．８８，明显高于丹麦Ｄａｋｏ及上海生产试剂盒；对ＲＶ核酸含量较低粪样的阳性检出率（９５．７％）也明显高于后二者；此外，自制试剂盒的阳性标本与阴性标本吸光度（Ａ，曾称光密度ＯＤ）均值之比值约是另二种试剂盒的２．２倍。结果提示，自制ＲＶ－ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ试剂盒检测ＲＶ的灵敏性和特异性优于国内外同类产品，并具有操作省时，易于目测判断结果等特点，有利于基层单位推广使用。     

溶血标本对酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎表面抗原影响的分析

目的：探讨溶血标本对酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎表面抗原结果的影响。方法对400份不同的血清标本采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的测定，其中阴性标本217份，强阳性标本95份，弱阳性标本88份；用人为方法造成溶血，对溶血标本重新测定，对2次检测结果进行比较。结果217例HBsAg阴性标本和95例HBsAg强阳性标本，非溶血标本和溶血标本血清检测结果(阴性或强阳性)全部一致，非溶血标本和溶血标本血清的HBsAg的OD值无统计学意义；88例HBsAg弱阳性标本，溶血标本血清检测出现假阳性率为7.95%(7/88)，非溶血标本和溶血标本血清的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的OD值具有统计学意义。结论溶血对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性及乙型肝炎表面抗原(HBsAg)强阳性的标本影响不大，而对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)弱阳性标本的检验结果具有一定影响，甚至可能造成假阴性。     

小儿肺炎支原体感染与年龄、性别的关系探讨

目的通过对呼吸道感染患儿血清中肺炎支原体抗体的检测，调查小儿肺炎支原体抗体感染的状况及与患儿性别、年龄的关系。方法采集患儿静脉血、血清做倍比稀释，用日本富士肺炎支原体诊断试剂盒SERODIA-MYCOⅡ做颗粒凝集实验。结果在5155例呼吸道感染患儿中共检出肺炎支原体抗体阳性病例2831例，阳性率为54．9％，男、女患儿阳性率分别为49．6％和63．3％，男女差别具有统计学意义。1岁以内患儿阳性率明显低于其他年龄段，其他年龄段之间阳性率无明显差异；门诊与住院患儿阳性率分别为65．5％和43．2％。结论肺炎支原体感染好发于1岁以上儿童，女童感染机会高于男童，门诊患儿阳性率高于住院患儿。肺炎支原体抗体检测可作为小儿呼吸道感染的常规检测项目。     

弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫免疫检测中的应用

目的评价弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫感染诊断中的效果，探索多表位抗原在弓形虫免疫检测中的应用前景。方法以Ni—NTAAgarose和割胶电渗两步纯化法。获取弓形虫多表位基因的原核表达纯化产物rMAG，以适宜浓度的rMAG包被ELISA微孔板，分别检测弓形虫急性和慢性感染血清，评价试剂盒检测的敏感性和特异性。结果经Ni—NTAAgarose和割胶纯化，得到了纯度为95．86％的弓形虫多表位重组可溶性抗原。以3μg／ml的抗原浓度包被ELISA微孔板，对兔和小鼠的急慢性弓形虫感染血清进行了检测。结果检测小鼠血清141份，其中慢性感染弓形虫小鼠血清117份、正常小鼠血清24份，检测体系的敏感性为88．88％，特异性为91．67％，一致性为89．36％。检测兔血清24份，其中急性感染弓形虫兔血清18份，正常兔血清6份，阳性血清检出率为94．4％，总一致性为91．5％。结论以弓形虫多表位重组抗原构建的ELISA试剂盒既可以检测弓形虫急性感染血清．又可以检测弓形虫慢性感染血清．具有一定的应用前景。     

广西HCV高危人群庚型肝炎病毒的新基因型核苷酸序列分析

目的 探讨广西HCv高危人群庚型肝炎病毒(HGv)的感染情况及其新基因型的核苷酸序列。方法 静脉药瘾者(IVDAs)85份、肝病患者(PLDs)80份和献血员(BDs)50份血清标本．用PCR法检测庚型肝炎病毒RNA，EIA法检测HBsAg、抗-HCV和抗-HIV；随机选出62份庚型肝炎病毒RNA阳性标本进行核苷酸序列分析，构建种系发生树作基因分型。结果 215份血清中HGv阳性者85份(39.53％)，HBsAg、抗-HGV和抗-HIV的阳性率分别为39.07％、42．79％和0；11份HGV RNA的测序结果证实其有3种基因型，其中5株为新基因型(亚洲型)，51份补测序，其中GBV—C型占3．23％，HGV型占30.65％，亚洲型占64．51％。结论 HGV的3种基因型中存在不同的基因亚型；广西IVDAs、PLDs和BDs中感染庚型肝炎病毒以亚洲型和HGV型为主。     

阜阳市职业暴露人群高致病性禽流感H5N1血清流行病学研究

目的对阜阳市职业暴露人群开展高致病性禽流感H5N1抗体调查,明确是否存在隐性感染,了解该病的流行病学规律。方法于2009年5月、12月,分别采集颖上县城乡活禽市场、家禽规模养殖场、家禽散养户集中的地区、家禽屠宰加工厂等地职业暴露人群血清100份和93份,利用单放射免疫扩散溶血技术检测H5N1抗体。结果5月份采集的100份标本中,H5N1抗体阳性3份,阳性率为3．00％;12月份采集的93份标本中,H5N1抗体阳性7份,阳性率为7．53％;两次调查总阳性率为5．18％,两个月份比较差异无统计学意义（χ^2=1．16,P〉0．1）。结论在禽流感职业暴露人群中,存在H5N1隐性感染,感染与季节分布无关。     

Colti病毒抗原制备、保存及其在检测患者血清Colti病毒抗体中的应用

目的 获得较高滴度和稳定的Colti病毒抗原，进一步开展Colti病毒感染的血清学诊断。方法 用C6／36细胞培养Colti病毒，于不同时间收获后进行病毒滴度测定。病毒经聚乙二醇(PEG)纯化浓缩后抗原分别保存于-20℃和4℃备用。利用该抗原采用ELISA法检测患者血清标本的Colti病毒抗体。结果 在制备Colti病毒抗原时，以细胞培养3—4周的病毒滴度最高，经PEG纯化浓缩的抗原于-20℃和4℃条件下，保存6个月，其抗原滴度仍保持在较高水平。特别是加入甘油的抗原无论在-30℃，还是在4℃下，甚至可保存2年。用这些抗原，检测疑似乙型脑炎或病毒性脑炎患者标本1141份，Colti病毒IgM抗体阳性130例，阳性率为11．4％(130／1141)，特别是检测广州市儿童医院患者标本41份，9份Colti病毒抗体阳性，阳性率为22．0％，其中5例临床诊断为病毒性脑炎。结论 为建立检测Colti病毒抗体及诊断试剂盒提供了较稳定的抗原，Colti病毒可能是引起我国夏、秋季脑炎的又一重要病原。     

婴儿持续性黄疸与巨细胞病毒PCR检测研究

本文应用ＰＣＲ技术对持续性黄疸婴儿进行巨细胞病毒检测，结果６８例患儿血清中巨细胞病毒（ＣＭＶ）３８例阳性，阳性率为５５．９％；尿中ＣＭＶ４５例阳性，阳性率为６６．２％。ＰＣＲ与病毒分离及其它血清学方法相比，既快速又敏感，尿标本用于ＰＣＲ检测ＣＭＶ－ＤＮＡ取材及处理简便，且较血标本检出率为高［１］。